全 文 ：肝得宁片中五味子 !女贞子提取工艺研究
潘五九t 3 o肖小河t o肖 雪u o袁海龙t o赵艳玲t
kt q中国人民解放军 第 vsu医院 药学部 o北京 tsssv| ~
u q哈尔滨市第一医院 o黑龙江 哈尔滨 txssts l
≈摘要  目的 }为肝得宁片优化五味子 !女贞子提取工艺条件 ∀方法 }以五味子甲素转移率和得膏率为主要指
标 o结合工业化生产的可行性 o对超临界 ≤’u萃取法 !醇提法 !水煮法等提取方法进行了比较研究 o并采用正交设计
法优选醇提工艺条件 ∀结果 }v种提取方法以醇提法为佳 o醇提工艺正交设计优化结果为 }乙醇浓度 |s h o回流次数
u次 o时间为 t «o溶媒用量为 y倍 ∀结论 }本工艺稳定可行 o可为提取五味子 !女贞子生产工艺作参考 ∀
≈关键词  肝得宁片 ~五味子 ~女贞子 ~正交设计 ~工艺优化
≈中图分类号  • u{v qy ~• u{w qu ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswls{2szwv2sv
肝得宁片为本院研制出的现代中药复方制剂 o
vs多年来一直是我院临床上保肝降酶的首选中药
制剂 o由五味子 !女贞子 !连翘 !莪术 !败酱草组成 o
鉴于五味子和女贞子的主要化学成分较为明确 o药
效成分的理化性质较为一致 o故拟将此两味合并提
取 ∀本实验以五味子甲素转移率和得膏率为主要指
标 o并结合工业化生产的可行性 o对合提工艺进行了
考察 o并用正交设计优化其醇提工艺条件 ∀
1 仪器与材料
• ¤·¨µ¶yss液相色谱仪 o• ¤·¨µ¶w{w紫外检测仪
k美国 • ¤·¨µ¶公司l ~Œ≥≤’ tss注射泵 o超临界流体萃
取仪k中国南通l ~五味子甲素对照品k中国药品生
物制品检定所 o批号 szyw2usstszl ~五味子 !女贞子
药材由肖小河研究员鉴定 o五味子为木兰科植物五
味子 Σχηισανδρα χηινενσισ k×∏µ¦½ql …¤¬¯¯ q的干燥成熟
果实 o女贞子为木犀科植物女贞 Λιγυστρυµ λυχιδυµ
„¬·q的干燥成熟果实 ∀甲醇为色谱纯 o其余试剂均
为分析纯 ∀
2 方法与结果
2 q1 五味子 !女贞子提取工艺路线的初筛
2 q1 q1 考察指标的确定 五味子为方中君药 o保
肝降酶主要药效成分为五味子甲素 !五味子乙素 !五
味子素等木脂素类成分≈t  ∀实验研究表明五味子甲
≈收稿日期  ussv2s|2us
≈通讯作者  3 潘五九 oר¯ }kstslyy|vvvuw o∞2°¤¬¯}³¤±º∏­¬∏ƒ
«²·°¤¬¯q¦²°
素高效液相色谱测定法简单 !快捷 o重现性好 o且含
量比较稳定 o故以五味子甲素为考察指标 ∀
2 q1 q2 提取工艺路线备选 超临界 ≤’u 萃取法
k≥ƒ∞l 称取五味子 ut ª!女贞子 tx ªo置于超临界
萃取釜中 o按下述条件提取 o收集萃取物 o浓缩干燥 o
备用 ∀萃取参数 }萃取压力 ux °¤o萃取温度 ws ε o
分离温度 vs ε o≤’u流量 us #«pt o萃取时间 u «∀
乙醇提取法 称取五味子 ut ª!女贞子 tx ªo加
|s h乙醇 y倍量提取 u次 o每次 t «o提取液浓缩并
真空干燥成浸膏 o备用 ∀
水煎煮法 称取五味子 ut ª!女贞子 tx ªoy倍
量去离子水煮 u次 o每次 t «o趁热过滤 o浓缩并真空
干燥成浸膏 o备用 ∀
2 q1 q3 五味子甲素的含量测定≈u 与结果分析k表
tl
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基键合
硅胶为填充剂 ~甲醇2水kzxΒuxl为流动相 ~检测波长
为 uxs ±°∀理论板数按五味子甲素峰计算 o应不低
于 v sss ∀
对照品溶液的制备 取五味子甲素对照品适
量 o精密称定 o加甲醇制成每 t °含 s qsx °ª的溶
液 o即得 ∀
供试品溶液的制备 取上述提取物 t qs ªo精密
称定 o置具塞锥形瓶中 o精密加入甲醇 ux °o密塞 o
称重 o超声处理 us °¬±o放冷 o再次称重 o用甲醇补足
减失的重量 o摇匀 o滤过 o取续滤液作为供试品溶液 ∀
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶
#vwz#
第 u|卷第 {期
ussw年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ {
„∏ª∏¶·oussw
液各 ts ˏo注入液相色谱仪 o测定 o即得 ∀
表 t 不同提取工艺比较试验结果
方法
五味子甲素
浸膏含量
r°ª#ªptk生药l
转移率
r h
出膏率
r h
超临界 ≤’u法 s q{t xs qyv x qsv
醇提法 t qv| {y q{{ tx qvw
水煮法 s qw| vs qyv uz qxy
注 }五味子甲素含量 t qys °ª#ªptk生药l
由表可知 o以醇提法提取后五味子甲素的含量
是其它方法的 t ∗ v倍 o而且出膏率在 v种方法中适
中 o结合目前工业生产的实际 o综合比较 o五味子 !女
贞子的合提工艺以醇提法较好 ∀
2 q2 五味子 !女贞子醇提工艺条件的优化
根据预试验的结果 o确定五味子 !女贞子的合提
工艺为乙醇回流提取法 o因此采用正交设计法进一
步对五味子 !女贞子醇提工艺条件进行了考察 ∀
2 q2 q1 正交试验设计 回流提取条件包括乙醇浓
度 !提取时间 !溶媒用量 !提取次数 ∀首先考察前 v
个条件 ∀拟采用 v因素 v水平正交设计试验k表 ul ∀
表 u 醇回流因素水平表
水平 Α
乙醇浓度r h
Β
回流时间r«
Χ
溶媒用量r倍数
t ys t y
u zx u {
v |s v ts
称取五味子 ut ª!女贞子 tx ªo共 |份 o每份粉
碎成粗粉 o按下表设计条件安排实验 ∀提取后 o减压
回收乙醇 o浓缩 !真空干燥 o分别测定五味子甲素含
量和醇浸膏得率k表 vl ∀
表 v 正交实验结果
实验号 五味子甲素含量r°ª#ªptk生药l 醇浸膏得率r h
t s q|v tw qv{
u t qs| tx qzt
v t qts ty qzy
w t qtx tw qss
x t qtz tw qzy
y t qtx tw q|s
z t quu tt qxu
{ t quv tu qss
| t quz tu qyz
五味子甲素含量为考察指标 o影响五味子甲素
提取因素大小依次为 }Α Β  Χo方差分析k表 w o表
xl结果表明 o以组合 Αv Βv Χu为佳 ~以醇浸膏得率为
考察指标 o各因素作用主次为 }Α Β  Χo方差分析
结果表明 o以 Αt Βv Χv组合为佳 ~结合工业生产省时
节能的需要 o并考虑到五味子甲素含量这一指标的
重要性 o故确定 Αv Βv Χu 为备选最佳工艺条件之一
k方案一l ∀
表 w 五味子甲素含量的方差分析
方差来源 离差平方和 自由度 均方 Φ Π
Α ys qxx u vs qu{ uy qvy s qsx
Β | qw{ u w qzw w qtv s qsx
Χ { qs{ u w qsw v qxu s qsx
误差 u qvs u t qtx
表 x 醇浸膏得率的方差分析
方差来源 离差平方和 自由度 均方 Φ Π
Α t| q|y u | q|{ tu{ qtv s qst
Β v qvs u t qyx ut qt{ s qsx
Χ s qxv u s quy v qv{ s qsx
误差 s qty u s qs{
2 q2 q2 醇提工艺条件的优化分析与验证 鉴于因
素 Β 和因素 Χ的影响均无显著性意义 o故亦将
Αv Βt Χtk方案二l作为备选提取工艺之一 ∀
由于优选的工艺未包括在正交设计表的 |次实
验中 o故对其进行了验证实验 ∀称取五味子 ut ª!女
贞子 tx ªo共 u份 o每份粉碎成粗粉 o分别按以上 u
种方案进行提取 ∀
由验证结果k表 yl表明 u种方案并无显著性差
异 o综合考虑方案 Αv Βt Χt大生产省时节能的优点 o
拟确定 Αv Βt Χt 为醇回流最佳工艺 o即乙醇浓度
|s h o回流时间为 t «o溶媒用量为 y倍 ∀
表 y 醇回流最佳工艺条件的验证试验结果
方案 五味子甲素含量r°ª#ªp tk生药l 醇浸膏得率r h
Αv Βv Χu t quy tt qxu
Αv Βt Χt t qut tt qv{
2 q2 q3 回流提取次数考察 称取称取五味子 ut ª!
女贞子 tx ªo每份粉碎成粗粉 oo按上述最佳提取条
件提取 v次 o每次单独取样测定k表 zl ∀
表 z 醇回流次数的考察结果
回流次数
五味子甲素
含量r°ª#ªpt 提取率r h
醇浸膏
得膏率r h 提取率r h
t t qus y| qvz tt qwv ys qss
u s qwx uy qst x qyu u| qxs
v s qs{ w qyu u qss ts qxs
合计 t qzv tss qss t| qsx tss qss
由表 z可见 o|s h乙醇回流提取 u次后 o五味
子甲素得率和得膏率均在 |s h以上 ∀因此 o回流提
取 u次即可 ∀
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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3 讨论
3 q1 五味子 !女贞子合提工艺以乙醇回流提取为
佳 o采用正交设计优选乙醇回流提取工艺条件 o结果
乙醇浓度为 |s h o回流提取 u次 o每次 t «o溶媒用量
为 y倍 ∀药效学试验表明≈v  o根据该优化工艺制得
的肝得宁片具有一定的抗乙肝病毒作用 o其保肝降
酶作用优于肝得宁丸 o说明该工艺改革是可行的 ∀
3 q2 采用高效液相法对女贞子中所含齐墩果酸进
行过测定 o结果发现齐墩果酸的转移率与五味子甲
素的转移率有很显著的相关性 o进一步说明了用五
味子中所含五味子甲素作为考察指标是合理 !可行
的 ∀
3 q3 超临界 ≤’u萃取法为降低出膏率的较好方法 o
而且 u味药保肝药效成分均为脂溶性成分 o采用超
临界 ≤’u萃取法提取是比较合适的 o因此有待进一
步优化萃取参数 o提高药效成分的转移率 o为超临界
提取的工业化应用做更深入的研究 ∀
≈参考文献 
≈t  阴 健 o郭力弓 q中药现代研究与临床应用 q北京 }学苑出版
社 ot||x qtxs q
≈u  刘峰群 o贺承山 o李正明 o等 q高效液相色谱法测定肝得宁丸中
五味子甲素和五味子乙素的含量 q中国中药杂志 ousss ouxkvl }
txz q
≈v  赵艳玲 o袁海龙 o孙艳玲 o等 q中药复方肝得宁体内对鸭乙型肝
炎病毒的影响 q中国实验方剂学杂志 oussu o{kul }yw q
Στυδιεσ ον εξτραχτιον προχεσσ οφ Φρυχτυσ Σχηισανδραε Χηινενσισ
ανδ Φρυχτυσ Λιγυστρι Λυχιδι ιν Γανδενινγ ταβλετ
°„‘ • ∏2­¬∏t o ÷Œ„’ ÷¬¤²2«¨ t o ÷Œ„’ ¬∏¨u o ≠˜„‘‹¤¬2¯ ²±ªt o‹„’ ≠¤±2¯¬±ªt
(t . ∆επαρτµεντ οφ Πηαρµαχψ,vsu Ηοσπιταλ οφ Πεοπλε. σ Λιβερατιον Αρµψ, Βειϕινγ tsssv| , Χηινα ;
u . Νο .t Ηοσπιταλ οφ Ηαρβιν , Ηαρβιν txssts , Χηινα )
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ²³·¬°¬½¨ ·«¨ ¦²°¥¬±¨ § ¬¨·µ¤¦·¬²± ° ·¨«²§¶²© ƒµ∏¦·∏¶≥¦«¬¶¤±§µ¤¨ ≤«¬±¨ ±¶¬¶¤±§ ƒµ∏¦·∏¶¬ª∏¶·µ¬∏¦¬§¬q
Μετηοδ : ׫¨ ¬¨·µ¤¦·¬²± ©¨©¨¦·¶²©·«µ¨¨ ³µ²¦¨¶¶¨¶k≥ƒ∞ ≤’u o ¤¯¦²«²¯2 ¬¨·µ¤¦·¬²±o º¤·¨µ2 ¬¨·µ¤¦·¬²±l º µ¨¨ ¦²°³¤µ¨§ ¥¼ ·«¨ ¦²±·¨±·¶²© §¨2
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²§¶o¤±§·«¨ ¬¨·µ¤¦·¬²± ¦²±§¬·¬²±¶º µ¨¨ ²³·¬°¬½¨ §¥¼ ²µ·«²ª²±¤¯ §¨¶¬ª± ¤¶©²¯ ²¯º¶}¶¬¬©²¯§|s h ¤¯¦²«²¯ ©²µ·º²·¬° ¶¨¤±§ ¤¨¦«©²µ²±¨ «²∏µq
Χονχλυσιον : ׫¨ ¬¨·µ¤¦·¬²± ° ·¨«²§¬¶¶·¨¤§¼ ¤±§©¨¤¶¬¥¯¨o º«¬¦«¦¤± ¥¨ ∏¶¨§©²µµ¨©¨µ¨±¦¨ ©²µ·«¨ ¬¨·µ¤¦·¬²± ³µ²¦¨¶¶²© ƒµ∏¦·∏¶≥¦«¬¶¤±§µ¤¨
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[ Κεψ ωορδσ] Š¤±§¨ ±¬±ª·¤¥¯ ·¨~ƒµ∏¦·∏¶≥¦«¬¶¤±§µ¤¨ ≤«¬±¨ ±¶¬¶~ƒµ∏¦·∏¶¬ª∏¶·µ¬∏¦¬§¬~²µ·«²ª²±¤¯ §¨¶¬ª± ~²³·¬°¬½¤·¬²± ²© ¬¨·µ¤¦·¬²±
¦²±§¬·¬²±¶
≈责任编辑 袁桂京 
本刊重要启事
ussx年 o中国中药杂志将迎来创刊 xs周年 o与此同时 o本刊将由月刊改为半月刊 o自此 o出版速度将提高
t倍 o稿件刊出周期将大大缩短 o期刊篇幅和信息量将大幅度增加 o中国中药杂志将迎来发展进程中的新起
点 ∀
衷心期望广大的读作者 !各界朋友一如既往地继续关注和支持本刊的发展 o并肩携手 o为宣传和交流祖
国中医药研究成果再创佳绩 ∀
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