全 文 :作用的机制 o本实验采用
≤ 增敏 o其作用机制通
过刺激 × 细胞后活化巨噬细胞 o激活的巨噬细胞的
有丝分裂和代谢能力大大增强 o对 °≥的识别应激
能力进一步提高≈y ∀
≤增敏小鼠受 °≥刺激后
机体能产生较高的 × ƒ2Α水平 ∀过高的 × ƒ2Α是
引起小鼠死亡的重要因素 ∀本实验证明 ƒsuu能显著
延长
≤ 增敏小鼠受 °≥攻击后的生存时间 o且呈
剂量依赖性 ∀
综上所述 o ƒsuu对内毒素拮抗作用发生在 °≥
激活机体免疫系统之前 o该过程 ƒsuu可能竞争性阻
断 °≥与其受体的结合 ∀有关其抗内毒素机理还
需进一步研究 ∀
≈参考文献
≈t 刘云海 q板蓝根抗内毒素作用研究 q中国药科大学学报 ot||x o
uykxl }u|z q
≈u 刘云海 o刘军民 o申正义 o等 q显色基质法检测板蓝根氯仿提取
物的抗内毒素作用 q同济医科大学学报 ot||x ouwktl }y| q
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≈w 中国药典 qusss q附录 ÷⁄q
≈x 刘云海 o林爱华 o丁水平 o等 q板蓝根对内毒素致炎性因子的影
响 q中国药科大学学报 ousst ovukul }tw| q
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¶·∏§¼·«¨ ¤±·¬2 ±¨§²·²¬¬± ¤¦·¬√¬·¼ ¤±§ ° ¦¨«¤±¬¶° ²© ƒsuu ©µ²° ¤§¬¬¶¤·¬§¬¶q Μετηοδ : × «¨ ³µ²§∏¦2
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¯¨·«¤¯¬·¼¬©ª¬√ ±¨ ¥¨©²µ¨ ¤§°¬±¬¶·µ¤·¬²± ²©°≥ qΧονχλυσιον : × «¨ ¤±·¬2 ±¨§²·²¬¬± ©¨©¨ ¦·²©ƒsuu °¤¼¬±«¬¥¬·°≥ ¥¬±§¬±ª·²¬·¶µ¨¦¨³·²µo
¤±§¬·°¤¼ ¥¨ ¤ °≥ µ¨¦¨³·²µ¤±·¤ª²±¬¶·q
[ Κεψ ωορδσ] ¤§¬¶¶¤·¬§¬¶~ƒsuu ~¤±·¬2 ±¨§²·²¬¬± ¤¦·¬√¬·¼ ~ × ƒ2Α~2y ≈责任编辑 方文贤
无毒棉籽水提物对皮质酮诱导的
°≤tu细胞损伤的对抗作用
李云峰 o杨 明 o赵毅民 o栾新慧 o罗质璞
k军事医学科学院 毒物药物研究所 o北京 tss{xsl
≈摘要 目的 }探讨无毒棉籽水提物k≤ × 2 • l抗抑郁 !抗焦虑作用的可能机理 ∀方法与结果 }提取大鼠大脑皮
层突触膜并与 ≤ × 2 • s qst os qsv os qts os qvs °ª#°p t直接孵育 o放免法测定腺苷酸环化酶k≤l活性的改变 o发
现 ≤ × 2 • 可剂量依赖地激活 ≤ ~ × × 比色法研究表明 o≤ × 2 • s qs{ os qws ou qss °ª#°p t与皮质酮 u ≅ ts p w °²¯
#p t共孵 °≤tu细胞 w{ «后可防止皮质酮所致的 °≤tu神经细胞损伤 ∀结论 }≤ × 2 • 的作用可能与信号转导系统
≤2¦ °通路的激活 o从而对损伤神经元产生保护作用有关 o此二者共同组成了 ≤ × 2 • 的部分作用机制 ∀
≈收稿日期 usst2sv2t|
≈通讯作者 电话 }kstslyy{zwysy
#uww#
第 uz卷第 y期
ussu年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qy
∏±¨ qoussu
≈关键词 无毒棉籽水提物 ~腺苷酸环化酶 ~皮质酮 ~°≤tu细胞
≈中图分类号 u{x qx ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussulsy2swwu2sx
从植物中开发新型 !高效 !低毒副作用的抗抑郁
剂 !抗焦虑剂始终是精神药理学的重要方向 ∀无毒
棉籽水提物k¤´ ∏¨ ²∏¶ ¬¨·µ¤¦·²©§¨·²¬¬©¬¨§¦²··²±¶¨ §¨¶
≤ × 2 • l是从无毒棉花籽中提取的一种全新的黄酮
苷类化合物 ∀受体结合实验表明 o≤ × 2 • 与 x2
×t受体有特异性结合 o此性质与非典型抗抑郁
剂 !抗焦虑剂丁螺环酮k¥∏¶³¬µ²±¨ o
∏¶³l相似 ∀ x2
×t受体部分激动剂丁螺环酮被临床用于抗抑郁 !
抗焦虑已多年 o疗效令人满意 o但作用机制不明 ∀前
期研究发现 o≤ × 2 • 在多种行为药理学模型上也表
现出显著的抗抑郁 !抗焦虑双重作用k待发表l ∀
临床研究表明 o焦虑和抑郁症病人的下丘脑2垂
体2肾上腺轴 k«¼³²·«¤¯¤°¬¦³¬·∏¬·¤µ¼ ¤§µ¨±¤¯ ¤¬¬¶o
°l功能亢进 o血中糖皮质激素kª¯∏¦²¦²µ·¬¦²¬§¶o
≤l水平显著升高≈t o人的脑神经细胞上存在介导
≤ 作用的受体 o其中海马上表达水平最高≈u 抑郁病
人海马 ≤ 受体由于血中 ≤ 水平持续升高而下调 o
从而使海马对 °轴负反馈障碍 o血中 ≤ 水平得
到维持≈v ∀抑郁等精神疾患的发生可能与 ≤ 对海
马的选择性损伤有关≈w o而抗抑郁剂可以通过提高
神经营养因子的表达对抗神经元损伤≈v ox ∀°≤tu细
胞株为大鼠肾上腺嗜铬细胞克隆化细胞株 o分化的
°≤tu细胞有典型的神经细胞特征 o其胞膜上 ≤ 受
体表达丰富≈y ∀本文根据文献方法≈z 以高浓度皮质
酮k≤²µ·¬¦²¶·¨µ²±¨ o≤²µ·l模拟抑郁及焦虑症神经细胞
损伤状态 o观察了 ≤ × 2 • 对皮质酮损伤的 °≤tu细
胞的保护作用 ∀
另外 o抑郁症等精神疾患的发生与脑神经元突
触后 x2 ×t受体功能受损也密切相关 ∀其实人的
抑郁症就是高皮质酮血症及 x2 × 能传导活性低下
的统一体≈{ o| ∀大量研究表明 ox2 ×t受体后的
蛋白及腺苷酸环化酶k¤§¨ ±¼¯ ¼¯ ¦¼¦¯¤¶¨ o ≤l可能是
抗抑郁剂作用的结构基础 o慢性给予抗抑郁剂可以
引起大鼠大脑皮层 !下丘脑内 ³³kl³诱导的
≤活性升高 o且起效时程 u ∗ v周 o与临床上抗抑郁
剂起效时程一致≈ts ∀磷酸二脂酶k¦ °降解酶l
的抑制剂也已被用作抗抑郁剂 ∀故本文用大鼠大脑
皮层突触膜直接与 ≤ × 2 • 反应 o观察了 ≤ 活性的
改变 ∀
1 材料与方法
1 q1 药品与试剂 ≤ × 2 • 粉剂由本所植物化学室
提供 ~丁螺环酮由本所药物化学室合成 o纯度在
|z h以上 ~¦ °测定试剂盒购自中国原子能科学
研究院 ~皮质酮及多聚赖氨酸为 ≥¬ª°¤公司产品 ~溴
化2kw oxl2二甲基2u2噻唑基2u ox 二苯基四氮唑
k × ×l为 µ¨¦®公司产品 ~⁄ ∞ 培养基为 ¬¥¦²
产品 ∀
1 q2 大脑皮层突触膜的提取 成年 • ¬¶·¤µ大鼠 x
只 o断头处死并分离大脑皮层 o按文献≈tt 方法 w ε
提取突触膜 ∀将分离出的大鼠大脑皮层放入 x °
匀浆器中并加u qx °标准液 o匀浆后倒出 o再用
u qx °标准液清洗匀浆器 o洗液倒入匀浆液中 ∀
将 x只大鼠脑皮层匀浆液混合 o共 ux °ou xss µ#
°¬±p t离心 x °¬±o取上清 ots wss µ# °¬±p t离心 us
°¬± ∀经数次离心 o最后提取突触膜并用缓冲液kus
°°²¯ #pt ∞°∞≥ o³z qx ot °°²¯ #pt ª≤ u¯ ot
°°²¯#pt⁄× × os qv °°²¯ qp t° ≥ƒl重新悬浮 o使
蛋白浓度达 v ∗ x °ªq°p t o分装后置液氮中待用 ∀
1 q3 腺苷酸环化酶活性测定
1 q3 q1 样品制备≈ts 含相应药物浓度的总体积
tss Λ的反应液中各成分终浓度为 }tx °°²¯ #p t
∞°∞≥ o³z qx os qsx °°²¯#pt ×° ox °°²¯#p t
ª≤ u¯ ot °°²¯ # pt ∞× ot °°²¯ # pt ⁄× × oys
°°²¯# pt ¤≤¯o t °°²¯ # pt氨茶碱 os qx °ª#
°p t磷酸肌酸 os qtw °ª#°p t磷酸肌酸激酶 o其中
磷酸肌酸激酶应配成贮存液 p us ε 保存 o反应开始
前加入 ∀各反应管分别加入 us Λª的突触膜 o立即
置 vs ε 水浴中反应 ts °¬±o此反应 us °¬±内是线
性的 o然后立即将反应管置于沸水中煮 v °¬±o终止
反应 ∀
1 q3 q2 放免分析 利用 ¦ °试剂盒测量各反应
管中 ¦ °产生量 o测定过程全部在冰浴中进行 o反
应总体积 tvs Λo按试剂盒说明加入各种试剂 o反
应结束后 ow sss µ# °¬±p t离心 z °¬±o吸取上清 tus
Λ置测量杯中 o加 t qx °无水乙醇 o摇匀后再加闪
烁液 v qx °o盖严 !摇匀 o过夜后在 • ¤¯ ¤¯¦tws|k荷
兰l液闪仪上测定样品 ¦³° 值 o根据标准曲线及
¦³°值推算¦ °产生量 ∀
#vww#
第 uz卷第 y期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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∏±¨ qoussu
1 q4 °≤tu细胞培养及药物实验 嗜铬细胞瘤株
°≤tu细胞由北京医科大学万有博士惠赠 ∀用含
x h胎牛血清及 x h马血清的 ⁄ ∞ 培养液k含青
霉素钠 uss ®#p t o链霉素 tss °ª#pt o³z qwl将
细胞稀释为约每毫升 u ≅ tsx 个接种于预先用多聚
赖氨酸ks qt ª#ptl处理过的 |y孔培养板 o每孔 tss
Λo放入 ≤ u 孵箱k美国 ¤³¦²公司l ovz ε ox h
≤ u条件下培养 v ∗ w §o待细胞长满孔底后即可用
于实验 ∀参照文献≈z 方法 o稍加改进 o吸去细胞液 o
换上含有相应浓度药物及 u ≅ tsp w °²¯ #pt皮质酮
的 ⁄ ∞ k对照组不含任何药品l ovz ε x h ≤ u培
养 w{ «∀吸去培养液 o用 ⁄2¤±®¶液洗 u遍 o每孔
加入含 s qx ª#p t × × 的无血清 ⁄ ∞ 培养 w «
后吸去培养液 o每孔加入 ts h 十二烷基硫酸钠 tss
Λo待蓝色颗粒完全溶解k约 tu ∗ ty «l o用多孔扫
描分光光度计k ≤≤rvws型 o美国 ƒ ²¯º 公司l测定
标本在 xzs ±°波长处的吸光度值kxzs ±°l o用于定
量反映活细胞数 ∀
1 q5 统计方法 结果以 ξ ? σ表示 o组间行单因素
方差分析和 θ.检验 ∀
2 结果
2 q1 ≤ × 2 • 对大鼠大脑皮层 ≤ 活性的影响 大
鼠大脑皮层突触膜含有丰富的 ≤ o药物与之孵育
ts °¬±后观察 ≤ 活性反映的是药物的急性作用 ∀
表 t显示
∏¶³y qux oux Λ°²¯#p t对大鼠大脑皮层
有显著 ≤ 激活作用 o表现在提高¦ °的产生量 ∀
同样 o≤ × 2 • 也可剂量依赖地激活 ≤ ∀单胺重摄
取抑制剂但非抗抑郁剂的苯丙胺对 ≤ 活性没有影
响 ∀
表 t ≤ × 2 • 及丁螺环酮对
大鼠大脑皮层 ≤ 活性的影响k ξ ? σ , ν yl
组别
剂量
r°ª#°p t
¦ °产生量
r³°²¯#°ªp t#°¬±p t
水对照 p tv qws ? t q|u
∏¶³ y qux ut qss ? y qwxtl
ux qss t| qxu ? x qwytl
≤ × p • s qst t{ qvx ? v qzxtl
s qsv uz qxu ? v qwxul
s qts w| qyt ? x qtzul
s qvs x{ q|s ? tt qu{ul
注 } ≠
∏¶³剂量单位为 Λ°²¯ #p tk表 u同l 与水对照组比
较 tl Π s .sx u) Π s qsst
2 q2 ≤ × 2 • 及丁螺环酮对皮质酮损伤的 °≤tu细
胞的保护作用 活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能
使外源性 × × 还原为蓝紫色结晶物并沉积在细胞
中 o而死细胞无此功能 o≥⁄≥ 使结晶物溶解 o在 xzs
±°波长处测定其光吸收值kxzs ±°l o可间接反映活
细胞数量 ∀ °≤tu细胞经 u ≅ tsp w °²¯#p t皮质酮处
理 w{ «后 o对 × × 摄取能力下降 oxzs ±°显著低于
正常对照组 o表明细胞受到损伤或部分细胞已死亡 ∀
当 ƒ存在时 °≤tu细胞对 × × 摄取能力明显增
强 o表明 °≤tu细胞损伤减少 o存活细胞增多 o甚至
恢复至正常水平≈tu ∀
∏¶³及 ≤ × 2 • 表现出类似
的效应 o
∏¶³在 t qux ou qx Λ°²¯# p t浓度时可显著
缓解细胞受损伤程度 ∀同样 o≤ × 2 • s qs{ os qw ou
°ª#°p t也可显著对抗皮质酮诱导的细胞损伤k表
ul ∀
表 u ≤ × 2 • 及丁螺环酮对皮质酮k≤²µ·l损伤的 °≤tu
细胞的保护作用k ξ ? σ, ν yl
组别 剂量r°ª#°p t xzs ±° xzs ±°变化百分率
正常对照 p t q|z ? s qtuul tss qs
≤²µ· p t qsy ? s qz{ xv q{
≤²µ·n
∏¶³ t qux t qz{ ? s quutl |s qw
u qxs t qy| ? s qszul {x q{
正常对照 p t qyt ? s qtsul tss qs
≤²µ· p s qz{ ? s qtx w{ qw
≤²µ·n ≤ × 2 • s qs{ s q|v ? s qsytl xz q{
s qws t qtw ? s qttul zs q{
u qss t qsv ? s qtvul yw qs
注 }与相应的皮质酮处理组比较 tl Π s .sx u) Π s qsst
3 讨论
前期工作表明 o三环类及选择性 x2 × 重吸收
抑制剂两类经典抗抑郁剂均可剂量依赖地激活大鼠
大脑皮层 ≤ 活性 o强化 ≤2¦ °通路 o本实验为
≤ × 2 • 的抗抑郁作用提供了理论上的支持 o因为上
述药物作用的受体不同 o但在受体后对 ≤ 的激活
效应是一致的 ∀
研究发现 o抑郁病人不仅有情绪紊乱 o而且有神
经精神系统的器质性损伤≈{ ∀最近研究还证实 o抑
郁病人普遍出现边缘系统2下丘脑2垂体2肾上腺轴及
x2 × 系统的功能紊乱 o且二者相互关联 !相互强
化≈tv o抑郁病人 ° 轴亢进 o导致高皮质酮血症 o
抗糖皮质激素治疗对重症抑郁效果很好≈tw o提示
≤ 在抑郁的发生中作用很关键 ∀一方面 o高浓度皮
质酮使海马盐皮质激素受体k ¬±¨ µ¤¯²¦²µ·¬¦²¬§µ¨¦2
¦³·²µ¶o l与糖皮质激素受体kª¯∏¦²¦²µ·¬¦²¬§ µ¨¦2
¦³µ²µ¶o l的表达比例k r l异常 o使皮质酮高
浓度得到维持并损伤海马 ∀另一方面皮质酮可以导
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致 x2 × 传导系统k尤其是 x2 ×t受体传导系统l功
能低下 !受损≈tv otx ∀抗抑郁剂丙咪嗪及去甲丙咪嗪
可使 x ×t受体 ° 水平及 r 比例恢复
正常≈tv ∀ r 比例失衡很关键 o正是这种失衡
导致皮质酮对缝2海马系统 x2 × 能传导产生抑制 o
引发抑郁等情绪紊乱≈tx ∀本研究首次发现 o≤ × 2
• 不仅可以激活 !强化 x2 ×t受体介导的 ≤2
¦ °通路 o而且可以对皮质酮损伤的神经细胞产
生保护作用 o这就在此两个密切相关的层次和侧面
解释了 ≤ × 2 • 效应的部分机理 ∀
关于皮质酮对神经元的损伤有一个流行的假
说 o认为它抑制了神经营养因子的表达≈x ∀x2 ×t
受体后的 ≤2¦ °通路的激活则介导着神经营养
因子 o如 ƒ 及脑源性神经生长因子k
µ¤¬±2§¨µ¬√ §¨
±¨ ∏µ²·µ²³«¬¦©¤¦·²µo
⁄ƒl等表达水平的提高≈ty o
≤ × 2 • 激活此通路并诱导神经营养因子表达增加
也为其神经元保护作用提供了有力的证据 ∀ ≤ × 2
• 是从无毒棉花籽中提取的一种全新的黄酮苷类
化合物 o目前国内外尚无此类化合物抗抑郁 !抗焦虑
作用的报道 o已申报国家发明专利 ∀本研究结果也
为发展新结构及新作用类型的高效低毒抗抑郁剂提
供了新的思路 ∀
≈参考文献
≈t
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¶¬²± ¥¼ ±·¬§¨ ³µ¨¶¶¤±·⁄µ∏ª¶q °«¤µ°¤¦²³¶¼¦«¬¤·ot||y ou|ktl }
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细胞缺血性损伤的保护作用 q药学学报 ot||{ ovvkvl }tyx q
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第 uz卷第 y期
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中 国 中 药 杂 志
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≈责任编辑 方文贤
冰糖醋醒酒作用的实验研究
徐 庆 o韦玉先 o唐祖年 o干丽琼 o黄卓云
k桂林医学院 药理学教研室 o广西 桂林 xwtsstl
≈摘要 目的 }研究冰糖醋的醒酒作用 ∀方法 }以小鼠和家兔为动物模型 o观察冰糖醋对灌胃小鼠的行为和生
存情况及对灌酒家兔血中乙醇含量的影响 ∀结果 }冰糖醋可明显延长模型小鼠翻正反射消失潜伏期k Π s .sx)和
降低模型小鼠的死亡率( Π s qstl o亦可降低模型家兔血中乙醇含量 o于给酒后 vs °¬± k Π s qstl和 t{s °¬±k Π
s qstl效果最明显 ∀结论 }冰糖醋有明显的醒酒作用 ∀
≈关键词 冰糖 ~食醋 ~醒酒
≈中图分类号 u{x qx ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussulsy2swwy2sv
长期以来 o国内外酗酒和酒精中毒者众多 o严重
影响着人类的身体健康 o甚至引起系列社会问题 ∀
急性大量饮酒可引起恶心 !呕吐 !注意力不集中 !精
细运动能力受损 !情绪不稳定 o严重时可引起昏睡 !
昏迷 !呼吸 !循环功能衰竭而死亡 ∀长期饮酒可引起
精神障碍 !胃炎 !胃溃疡 !脂肪肝 !肝硬化等疾病 ∀因
此开发有效的解酒 !醒酒药物成为国内外医药学者
探讨和研究的重要课题≈t ∀国外开发的醒酒药以合
成药为主 ∀我国中医药研究发现不少方药对醒酒有
较好的作用 ∀如 }枳 !葛根 !人参 !三七 !葛花解酲
汤 !五苓散 !小柴胡汤 !石膏汤与千钟酒 !新型解酒糖
等≈t ou ∀冰糖醋醒酒方主要由冰糖与食醋组成 o为
民间惯用的醒酒方 o但并未见其有关醒酒作用的实
验报道 ∀我们用小鼠和家兔为动物模型 o对冰糖醋
的醒酒作用进行了研究 o结果发现冰糖醋有明显减
少醉酒动物死亡率和降低家兔血乙醇含量的作用 ∀
1 实验材料
1 q1 动物 昆明种小白鼠 o体重kuu ? ul ªo雌雄兼
用 ~家兔 o体重ku qx ? s qul ®ªo雌雄兼用 o桂林医学
≈收稿日期 usst2s{2s{
≈通讯作者 电话 }kszzvlx{|tw|{ ~ ∞2°¤¬¯}÷∏±¬±ª§¨ ªªsuwz
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院动物室提供 ∀实验前均空腹 uw «∀
1 q2 试剂 食醋k桂林市酱料厂产品 o批号 usss q
sv qtul o冰糖k市售产品l o冰糖醋稀释液≈含冰糖
us h k Ω/ ςl o食醋 ux h k ς/ ςl k桂林医学院药理
教研室课题组配制l ~醒酒灵k荔浦制药厂产品 o批号
usss qst quul ~枳 子k Ηοϖενια δυλχισ ∏±¥ql用水
提取 o浓缩成 t ª# °p t溶液 ∀标准乙醇 }分析纯 o
|| qz h无水乙醇k广西师范大学化学试剂厂产品l ∀
实验用酒 }桂林三花酒k标示乙醇含量为 xv h o桂林
三花股份有限公司产品 o批号 usss qsu qt{l ∀
2 方法与结果
2 q1 冰糖醋对小鼠醉酒率和死亡率的影响
方法 }取小鼠 vs 只 o随机分为给 ws h 冰糖醋
组 !us h冰糖醋组 !对照组 o每组 ts 只 ∀给药组先灌
服冰糖醋液 s qv °#tsªp t o对照组给等量的蒸馏
水 ovs °¬± 后各组小鼠给实验用酒 s quu °#ts
ªp t ∀记录其翻正反射消失时间k大于 ys °¬±按 ys
°¬±计算l和死亡数 ∀结果见表 t ∀
2 q2 冰糖醋的组方分析
方法 }取小鼠 vs 只 o随机分为给冰糖组 !给食醋
组 !给冰糖醋组 ∀每组分别灌胃给冰糖醋 !冰糖 !食
醋液 s qv °#tsªp t ovs °¬±后 v 组小鼠灌酒 s quu
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第 uz卷第 y期
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中 国 中 药 杂 志
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