全 文 ：状 ,有利于缺血脑组织的恢复。
2. 2　七十味珍珠丸对大鼠脑梗塞面积的影响 ,见表 2。
表 2　 RNSP对缺血性脑梗塞大鼠梗塞面积的影响 ( X-± S)
组　别 剂量
( g /kg )
动物数
(只 ) 梗塞面积 (% )
模型组 — 8 12. 6± 2. 4
RNSP组 0. 5 8 7. 9± 1. 2* * △△
RNSP组 1. 0 8 5. 7± 1. 0* *
Asp组 0. 1 6 8. 0± 1. 8* * △
注: * * 表示与模型组相比 P < 0. 01
△、△△表示与 RN SP 1g /kg组相比 P < 0. 05、 P < 0. 01
由表 2看出 ,模型组梗塞面积较大 ,占脑总面积的 12. 6
± 1. 2% ,七十味珍珠丸不论是 0. 5g /kg组或 1g /kg组与模
型组比较 ,均非常显著的减轻了大鼠的脑梗塞面积 (P < 0.
01)。 1g /kg组的作用强于 0. 5g /kg组 (P < 0. 05) , 0. 5g /kg
组为作用与阿斯匹林组的作用相似。 从表 2可看出:七十味
珍珠丸减少梗塞面积的作用和行为障碍的程度是一致的。
2. 3　七十味珍珠丸对大鼠脑梗塞后 ,组织形态学的改变。
模型组大脑中动脉内有血栓形成 ,缺血区脑组织呈大小
不等软化灶 ,坏死灶中央神经胶质细胞高度肿胀 ,细胞染色
较淡或丧失染色能力 ,仅辨认其细胞轮廓 ,神经纤维网疏松
及髓鞘脱失 ,皮质表层脑组织相对完好。 七十味珍珠丸组镜
下改变呈现大小不等脑软化灶 ,但缺血软化灶的范围及深度
较模型组轻。 1g /kg组只有小片软化灶 ,个别仅有轻度神经
细胞的缺血性改变 ,尚未发展为明显的梗死灶 ,血栓形成明
显减轻 ,个别甚至溶解。 阿斯匹林组镜下改变介于模型组与
七十味珍珠丸组之间。
3　讨　论
脑梗塞多发生在大脑动脉的某一支 ,尤以大脑中动脉最
为常见 ,阻断大鼠大脑中动脉形成局灶性脑缺血模型 ,比较
接近于临床 ,便于观察〔6- 8〕。本试验表明 ,七十味珍珠丸对脑
缺血性疾病有类似阿斯匹林的作用 ,但效果强于阿斯匹林。
七十味珍珠丸 0. 5g /kg组及 1g /kg组均能改善阻断大脑中
动脉引起局部缺血有保护作用 ,能减轻症状 ,有利于缺血性
脑组织的恢复。七十味珍珠丸有清热解毒 ,畅通气血之功能 ,
其作用与现代医学中的扩张血管 ,防止血小板聚集 ,改善脑
循环一致。 这或许是其改善脑缺血性行为障碍减少梗塞面
积 ,减轻脑组织病理损伤的理论基础。 但其作用机理还有待
进一步探讨。
参考文献
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研究〔 J〕.中国民族医药杂志 , 1998, 4( 2): 45— 46.
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的保护作用〔 J〕.辽宁中医杂志 , 1999, 26( 2): 328.
2000年 5月 10日收稿
广枣总黄酮对离体大鼠心脏 cAM P含量和
腺苷酸环化酶活性的影响△
内蒙古包头医学院 ( 014010)　杨玉梅　许翠英　徐继辉　覃建民　李增
内蒙古中蒙医研究所 ( 010020)　周长凤　冯国庆　王月梅　党晓菊　白音夫　宋一亭　顾　凯
提　要:为探讨广枣总黄酮 ( T FC)抗心律失常的作用机制 ,采用竞争性蛋白结合分析法 ,测定心肌组织 cAM P含量和腺苷酸
环化酶 ( AC)活性。 结果表明 , TFC50、 100、 200μg /ml均可明显抑制离体大鼠心肌组织中的 AC活性 , TFC100mg /L可使
cAM P含量明显下降。
关键词: 广枣总黄酮 ;离体心脏 ; cAM P;腺苷酸环化酶
中图分类号: R291. 2　文献标识码: B　文章编号: 1006- 6810( 2001) 01- 0034- 02
　　广枣总黄酮 ( to tal flav ones o f choero spondias axilla ris
fr utu,简称 TFC) ,是从蒙药广枣中提取的有效成分。 实验证
明它对大鼠急性心肌缺血和心律失常具有明显的保护和对
△国家自然科学基金资助项目 39760083
抗作用〔1〕。本文报告 TFC对离体大鼠心肌 cAMP含量和 AC
活性的影响。
1　材料与方法
1. 1　动物: Wista r大鼠 ,由内蒙古大学实验动物中心提供 ,
合格证号〈京动字〉8806R011。
34 中国民族医药杂志　　　　　　　　　 2001年 1月 (第 7卷 )第 1期DOI : 10. 16041 /j . cnki . cn15 -1175. 2001. 01. 027
1. 2　药品和试剂: T FC注射液 ,由内蒙古中蒙医研究所提
供 ,批号 981203。 cAM P定量测定药盒 ,中国科学院原子能研
究所提供。 2, 5—二苯基戊唑 ( PPO)和 1, 4-双一 ( 5—苯基戊
唑 - 2)苯 ( PPO P) ,北京生化技术公司产品。三羟甲基氨基甲
烷 ( T ris) ,上海化学试剂采购供应站提供。其它试剂均为国产
分析纯产品。
1. 3　主要仪器: 离体心肌灌流装量 (自制 ) ; LS- 8000液体
闪烁计数仪 ,美国 Beckman公司。
1. 4　实验方法
1. 4. 1　 cAM P含量的测定: 取健康大鼠 20只 ,体重 270±
25g , ♀兼用。 随机分为对照组和给药组 ( TFC100mg / L)。
腹腔注射 3%戊巴比妥钠 1ml /kg麻醉后 ,采用 Langendo rff
法制备离体心脏 ,灌流压为 70cmH2O。 于冠状动脉左前降支
穿线 ,稳定 15分钟。对照组和给药组分别以单纯氧平衡的 K
- H液和含药的氧平衡 K- H液灌流 5分钟后结扎冠状动
脉 ,继续灌流 15分钟 ,然后取下心脏 ,从主动脉推注 1%苔盼
兰 0. 8ml,置冰箱中冷冻备用。 取出冷冻的心脏 ,分别取缺血
和未缺血的心室肌组织各 100mg ,加入 5%三氯醋酸溶液
1ml,制备匀浆 ,再用 5%三氯醋酸液清洗 ,离心后弃去沉淀 ,
上清液用乙醚提取 3次 ,取水相在 70～ 75℃水浴蒸干 ,加入
50μlT E 缓 冲液 , 然 后参 照 文 献〔2〕依 次 加 入 [3H ] -
cAM P50μ1,蛋白激酶 100μl,在 0℃～ 4℃反应 2小时 ,加吸附
剂 100μl,使总反应体积为 300μl。 摇匀后在 3～ 10分钟内
3000rpm离心 6分钟 ,取上清液 200μl置于同位素测量瓶中 ,
加闪烁液 5ml,在液闪仪上测定 [3 H]的放射强度 ( cpm) ,并在
标准曲线上查出相应的 cAM P含量。
1. 4. 2　 AC活性的测定: 取健康雄性 ,体重约 370g大鼠 1
只 ,断头取出心脏 ,用冷 50mmol /L, T ris- HCl缓冲液洗净
心脏内残余血液 ,称取心室组织 500mg ,加入 5m l50mmo l /L ,
T ris- HCl缓冲液 ,将心室组织剪碎匀浆。整个操作必须在冰
浴上进行。将提取出的心肌细胞膜 (心室匀浆 ) 50μl分别加入
到试管中 ,其中取出两管煮沸灭活 ,其余各管分别加入肾上
腺素及不同浓度的 TFC各 50μl,以上各管均加入反应液
( 50mmol /L　 T ris - HCl,内含 2mmo l / L　 MgSO2 , 12.
5mmol /L茶碱 , PH7. 5)至 450μl,然后再加 50μl100mmol /L
的 ATP, 30℃水浴温育 5分钟后立即煮沸 5分钟 ,冰浴冷却 ,
3000rpm离心 10分钟 ,取上清液 5ml,按文献〔2〕测定 cAMP
含量。用反应管的 cAM P量减去灭活管的 cAM P量即为 AC
催化生成的 cAM P量。 酶活力以 pmol　 cAM P /( mg湿重 .
5min)表示。
2　结　果
2. 1　对离体大鼠心室肌 cAM P含量的影响: 结扎冠状动脉
可使离体大鼠心 脏缺血组织 cAM P含量明显 增高 ,
TFC100mg /L可使缺血区和未缺血区的 cAMP都明显降低。
见表 1。
表 1　 TFC对离体大鼠心室肌 cAM P含量的影响 (X-± S)
组别 n cAMP( pmol /g湿重 )缺血区 非缺血区
对照组 10 535± 78△△ 430± 67
TFC组 10 331± 43* * * 300± 40* * *
与非缺血区比△△ P < 0. 01与对照组比* * * P < 0. 001
2. 2　对大鼠心室肌组织 AC活性的影响: AC诱导剂肾上腺素
( Adr)可使酶活力明显增高 , TFC50μg /ml、 100μg /ml、 200μg /
ml均可使 AC活性降低 ,并呈良好的量效关系。 见表 2。
表 2　 TFC对大鼠心室肌 AC活性的影响 (X-± S)
组别 剂量
(μg /ml) 酶活力 ( pmol　 cAM P/mg湿重 . 5min)
对照组 —— 5. 42± 0. 48
Ad r 0. 25 21. 87± 0. 92* *
TFC 50 4. 34± 0. 31* *
100 3. 16± 0. 32* *
200 2. 61± 0. 25* *
与对照组比 ,* * P < 0. 01
3　讨　论
缺血损伤可使心肌细胞外 K+ 浓度增高 ,使钠通道失活 ,
随 Ca2+ 内流 ,从而形成慢反应活动 ,引起冲动传导折返而导
致心律失常〔3〕。 cAM P通过依赖 cAM P的蛋白激酶 ,对细胞
内某些功能性蛋白质或酶进行磷酸化 ,控制着细胞内钙的转
运 ,是导致缺血性心律失常的主要因素。 TFC通过抑制 AC
而使 cAM P含量降低 ,这可能是其抗心律失常的机制之一。
我们在培养大鼠心肌细胞实验中发现 , T FC可使 CaCl2
和异丙肾上腺素的累积量效曲线明显右移 ,最大反应降
低〔4〕。 提示 TFC通过抑制 AC降低 cAMP水平 ,进而可能影
响心肌细胞膜慢通道和 β受体的功能状态 ,而产生抗心律失
常作用 ,这些均有待进一步研究证实。
参考文献
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〔 4〕覃建民 ,等 .蒙药广枣总黄酮对培养大鼠心肌细胞的作
用 .中国民族医药 (待发表 )
2000年 6月 10日收稿
Effect of total flav ones from fructus of Choerospondias Axillaris on the lev el
o f cAM P and adenylate cyclase in the iso lated rat heart
Baotou M edical Co lleg e ( 014010) Yang Yumei, Xu Cuiying ,Xu Jihui , Qin Jianmin, Li Zengxi
Academy of Traditiona l Zhongmeng M edicine Inner Mongolia Autonomous Region( 010020)
Zhou Chang feng , Feng Guoqing , Wang Yuemei , Dang Xiaoju, Bai Yinfu, Song Yi ting, Gu Kai
Abstract: To approach Mechanism of action of to tal f lav ones f rom fructus o f Choerospondias Ax illaris
( TFC) on antia rrhy thmias, W e determined cAM P and adenylate cyclase of isolated rat myocardium by
competi tiv e protein- binding assay. The results suggest that T FC 50, 100, 200ug /m l inhibi ted significantly
adenyla te cyclase of the rat v ent ricular myocardium and TFC 100mg /L reduced the lev el of cAMP in both
ischemic and nonischemic myocardium.
Key words: to tal f lav ones f rom fructus o f Choerospondias Axilla ris; i so la ted heart; cAMP; adeny late cyclase
352001年 1月 (第 7卷 )第 1期　　　　　　　　　中国民族医药杂志