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Influence of Rehmannia glutinosa polyses on model mice of deficiency of blood

熟地黄多糖对血虚模型小鼠的影响



全 文 :熟地黄多糖对血虚模型小鼠的影响
黄 霞 3 o刘 杰 o刘惠霞
k河南省中医药研究院 o河南 郑州 wxssswl
≈摘要  目的 }观察熟地黄多糖k• Š°l对模型小鼠外周血象 !骨髓造血干细胞 !骨髓有核细胞的影响 ∀方法 }各
组小鼠连续灌胃 { ∗ | §o腹腔注射环磷酰胺k≤≠l致化学损伤血虚模型 o取全血测外周血象 !骨髓有核细胞计数 ~各
组小鼠尾静脉注射同种供体小鼠骨髓细胞悬液 o取脾脏固定 o观察外源性脾结节形成 o各组小鼠以ys≤² Χ全身照射
z1ux Š¼o取脾脏观察内源性脾结节形成 ~各组小鼠ys≤² Χ全身照射 z1x Š¼o复制出放射性损伤模型 o测外周血象和骨
髓有核细胞数量 ∀结果 }• Š°各组对 ≤≠ 血虚模型小鼠外周血象 !骨髓有核细胞下降均有拮抗作用 o与模型组比较 o
有显著差异 ∀对小鼠脾结节的形成有明显的促进作用k Π s1sx oΠ s1stl o对于小鼠外周血象的放射性损伤 o• Š°
高剂量组可明显抑制小鼠全血细胞减少k Π s1sxl o• Š°低剂量组虽可提高损伤小鼠血细胞数量 o但无统计学意
义 ∀结论 }熟地黄多糖对于不同血虚模型小鼠外周血象 !骨髓有核细胞下降均有拮抗作用 o对小鼠造血干细胞具有
促进增殖 !分化作用 ∀
≈关键词  熟地多糖 ~血虚模型 ~药效学
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswltu2tty{2sv
≈收稿日期  ussw2sw2u|
≈基金项目  河南省中医管理局资助项目k|xvsutsvl
≈通讯作者  3黄霞 oר¯ }ksvztlyvwzywz o∞2°¤¬¯}‹∏¤±ª¼¤¯t|xy ƒ
¶¬±¤1¦²°
熟地黄为玄参科多年生草本植物地黄 Ρεηµαν2
νια γλυτινοσα ¬¥²¶¦«1 的根 o经加工炮制而成 ∀通常
经反复蒸晒 o至内外色黑 !油润 o质地柔软黏腻 ∀性
微温 o味甘 ∀具有滋阴补血 o益精填髓之功能 ∀为了
探讨熟地黄补血作用的有效部位 o作者将其不同的
提取组分 o分别进行药效学实验和临床观察 o现将熟
地多糖对血虚模型小鼠的影响报告如下 ∀
1 实验材料
111 药物
熟地 o选用河南武陟县产道地怀生地 Ρεηµαννια
γλυτινοσα ¬¥²¶¦«1经炮制加工而成k河南省中医药研
究院中药室都恒青教授鉴定l∀熟地多糖k• Š°l o由
河南省中医药研究院中药室提供 o每毫升含原生药 t
ªo• Š°含量为 tv1{w h o批号 |{svsy∀环磷酰胺k≤≠l
注射液 o上海华联制药有限公司 o批号 ||sts{∀再障
生血片 o由黄芪 !阿胶 !红参 !鹿茸 !菟丝子 !鸡血藤 !制
何首乌 !当归 !熟地黄等组成 o具有滋阴补肾 o补气生
血 o活血止血之功能 ∀吉林省辽源市中药厂生产 o批
号 |{stst o实验时制成 z h的药液供灌胃用 ∀
112 试剂
• °Œtyws培养液 o美国 ŠŒ…≤ 产品 o取 tyws培
养粉加双蒸水至 t sss °o充分溶解 o微乳滤膜过滤
后分装备用 ∀
113 动物
昆明小鼠 ot{ ∗ us ªo‘Œ‹小鼠 t{ ∗ us ªo由河南
省实验动物中心提供 ∀
2 方法与结果
211 • Š°对 ≤≠ 所致血虚模型小鼠外周血象的影
响≈t 
昆明小鼠随机分为 w组 o于给药第 x天腹腔注
射环磷酰胺 uss °ª#®ªpt o造成血虚模型 o于实验第
|天断尾取血测定外周血象指标 o结果k表 tl模型对
照组与空白对照组比较各项指标均大幅下降k Π
s1stl ∀ • Š°高 !低剂量组外周血象平均值均高于模
型对照组 o并有显著意义 o提示 • Š°对 ≤≠ 所致小鼠
外周血象的化学性损伤有较好的拮抗作用 ∀
212 • Š°对 ≤≠ 所致血虚模型小鼠骨髓有核细胞
计数k…‘≤l的影响≈u 
动物分组见表 u o各组小鼠连续给药 { §o模型
对照组及 • Š°组于实验第 v天腹腔注射环磷酰胺
uss °ª#®ªpt o于注射后第 w天脱臼处死小鼠 o分离
取出左侧完整股骨 o以 ts °v h醋酸溶液通过 x tu
针头冲出全部骨髓 o充分吹打后 o进行骨髓有核细胞
#{ytt#
第 u|卷第 tu期
ussw年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1u| oŒ¶¶∏¨ tu
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussw
计数 ∀结果显示经 ≤≠ 注射后 o模型对照组小鼠骨
髓有核细胞数大幅度下降 o与空白对照组比较具有
显著性差异 o• Š°低 !高剂量组小鼠骨髓有核细胞数
明显高于模型对照组 o并具有统计学意义 o再障生血
组也有此作用 ∀提示 • Š°对 ≤≠ 所致小鼠 …‘≤ 数
下降有拮抗作用 ∀
表 t 熟地多糖对血虚小鼠外周血象的影响kcξ ? σ, ν € tsl
组别 剂量rª#®ªpt#§pt • …≤r ≅ ts|#pt • …≤r ≅ tstu#pt ‹¥rª#pt °×r ≅ ts|#pt
空白对照组 z1tw ? t1wu |1u{ ? t1xv tvv1t ? tt1yz t ttx1x ? v|s1w
模型对照组 t1z{ ? s1|stl w1sy ? s1wxtl yw1x ? x1ystl y|y1y ? wst1utl
• Š°组 t{ v1xx ? t1zzul w1|x ? s1{yul zy1x ? tx1{sul {|z1| ? t|{1s
• Š°组 vy v1uw ? t1tyvl x1t{ ? t1tuul {s1w ? us1uul t sss1w ? uzw1tul
注 }与空白对照组比较tl Π s1st ~与模型对照组比较ul Π s1sx ovl Π s1st
表 u • Š°对骨髓有核细胞数的影响kcξ ? σ, ν € tsl
组别
剂量
rª#®ªpt#§pt
每根股骨 …‘≤
r ≅ tsy
空白对照组 uxtl wyy1{ ? txw1t
模型对照组 uxtl uwz1v ? xz1ytl
再障生血组 t1zx v|{1z ? ys1uul
• Š°组 t1zv wvw1v ? {y1yul
• Š°组 v1wy ww|1y ? y|1zul
注 }tl剂量单位为 °#®ªpt#§pt ~与空白对照组比tl Π s1st ~与
模型对照组相比ul Π s1st
213 • Š°对小鼠骨髓造血干细胞k≤ƒ˜2≥l生成的影
响≈v 
21311 • Š°对小鼠外源性脾结节形成的影响 ‘Œ‹
供体小鼠 v只 o连续灌服 • Š° ts §o于实验第 { o| ots
天腹腔注射 ≤≠ txs °ª#®ªpt o脱臼法处死小鼠 o剥离
股骨 o用 • °Œtyws培养液冲出全部骨髓细胞 o通过
y tu和 w
t
u针头制成细胞悬液 o调细胞浓度为每 s1u
°u1x ≅ tsw ∀ ‘Œ‹受体小鼠 ws只 o接受ys ≤²Χ射线
z1ux Š¼照射后 o随机分为空白对照组 !再障生血组 !
• Š°低剂量组 !• Š°高剂量组 o每组小鼠尾静脉分别
注入同种供体小鼠的骨髓细胞悬液 s1u °o| §后 o
取出脾脏 o苦味酸甲醛固定液中固定 uw «后 o解剖
显微镜下计数每个脾脏上k正反两面l生成的脾结节
数 o结果见表 v ∀
21312 • Š°对小鼠内源性脾结节形成的影响 ‘Œ‹
小鼠随机分组同上 o连续灌服 • Š° ts §后 oys≤²Χ射
线 z1ux Š¼全身照射 o| §后脱颈椎处死小鼠 o分离
脾脏 o苦味酸甲醛固定液中固定 o计数脾结节数 ∀结
果由表 v可见 o• Š°可促进小鼠脾结节的形成 o与空
白对照组相比有显著性差异 o再障生血组亦有此作
用 ∀提示 Š°对小鼠造血干细胞k≤ƒ∏2≥l具有促进增
殖 !分化作用 ∀
表 v • Š°对小鼠 ≤ƒ∏2≥生成的影响kcξ ? σl
组别
剂量
rª#®ªpt#§pt
内源性脾结节r个 外源性脾结节r个
空白对照组 y1uv ? t1u{ktsl {1{s ? v1sk{l
再障生血组 t1zx z1v{ ? t1tstlktsl tu1zw ? w1utlktsl
• Š°组 t1zv z1ux ? t1txtlk|l tu1{u ? x1wtlktsl
• Š°组 v1wy {1su ? t1xvulktsl tu1|u ? v1tulktsl
注 }括号内为动物数 ~与空白对照组比 otl Π s1sx oul Π s1st
214 • Š°对小鼠放射性损伤的保护作用≈t 
各组小鼠连续灌胃给药 ts §o于实验第 v天模
型对照组 !再障生血组 !• Š°低 !高剂量组进行ys≤² Χ
射线kz1x Š¼l照射 o于照射后第 {天小鼠摘眼球取
血us ˏr只 o测定外周血象 ∀另取右侧股骨以 ts
°• °Œtyws培养液冲出全部骨髓 o进行有核细胞
计数 ∀结果表明 o模型组小鼠经ys≤² Χ照射后 • …≤ o
• …≤ o‹¥o…‘≤均大幅度降低 o与空白对照组相比差
异十分显著k Π s1stl ∀各实验组对小鼠 • …≤ 数均
有升高趋势 o无统计意义 ∀ • Š°高剂量组对放射损
伤小鼠 • …≤ o‹¥o…‘≤测定值高于模型对照组 o并差
异显著k Π s1sxl ~• Š°低剂量组可提高小鼠 …‘≤
的数量k Π s1sxl o而对于 • …≤ o‹¥的数量虽有增
高趋势 o但无统计意义 ∀再障生血片可提高小鼠
• …≤的数量k Π s1sxl o而对于 ‹¥o…‘≤ 的数目虽
可增加但无统计意义 o结果见表 w ∀
表 w • Š°对小鼠ys≤² Χ放射性损伤的保护作用kcξ ? σl
组别 剂量rª#®ªpt#§pt ν • …≤r ≅ ts|#pt • …≤r ≅ tstu#pt ‹¥rª#pt 每根股骨 …‘≤r ≅ tsy
空白对照组 uxtl tt z1vs ? t1x| w1zu ? s1xs tws1xx ? ts1wu wz|1s| ? w|1u|
模型对照组 uxtl ts t1zz ? t1sxul w1sx ? s1xwul tuw1xs ? tv1svul vt{1ts ? zu1zwul
再障生血组 t1zx ts u1zt ? t1suvl w1tv ? s1y{ tvs1vv ? ty1tx vwy1ss ? xy1wx
• Š°低剂 t1zv ts u1ys ? t1y| w1us ? s1xv tvy1|s ? us1yz v|{1us ? tsv1xsvl
• Š°高剂 v1wy ts u1|s ? t1yzvl w1vu ? s1wy tvz1|s ? z1vtvl v|x1us ? |s1yxvl
注 }tl剂量单位为 °#®ªpt#§pt ~与空白对照组比ul Π s1st ~与模型对照组比vl Π s1sx
#|ytt#
第 u|卷第 tu期
ussw年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1u| oŒ¶¶∏¨ tu
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3 讨论
熟地黄具有滋阴补血 o填精生髓之功用 o为临床
补血之要药 ∀现代药理已表明地黄在造血系统 !内
分泌系统 !免疫 !抗肿瘤及心血管系统等有着广泛的
生物活性≈w  ∀作者前期的实验结果已显示≈x  o熟地
多糖对血虚模型小鼠 • …≤ o• …≤ o‹…o°×的保护作
用优于熟地非多糖部分和熟地水煎液 ~对于临床再
生障碍性贫血患者 o熟地多糖的疗效也是肯定的≈y  ∀
在此基础上 o本研究观察了熟地多糖对不同血虚模
型小鼠的影响 o结果表明熟地多糖对小鼠化学性损
伤 !放射性损伤均有明显的保护作用 o并可促进小鼠
造血干细胞增殖 !分化 o从而显示其补血功效 ∀
≈参考文献 
≈t  陈 奇 1 中药药理研究方法学 1 北京 }人民卫生出版社 o
t||v1tsts1
≈u  唐佩弦 1 造血细胞培养技术 1 西安 }陕西科学技术出版社 o
t|{x1 x{1
≈v  徐淑云 o卞如濂 o陈 修 1 药理实验方法学 1 第 u版 1 北京 }人
民卫生出版社 ot||t1ttsy1
≈w  李兰青 1地黄药理研究进展 1 中成药 ot||w otyk|l }wz1
≈x  黄 霞 o庆 慧 o王慧森 o等 1 熟地水煎液及其提取物对小鼠外
周血象的比较研究 1 中成药 oussu ouwkul }ttt1
≈y  元阿萍 o刘 超 o黄 霞 1 熟地多糖联合康力龙治疗慢性再生
障碍性贫血 vw例 1中国中西医结合杂志 ot||{ ot{kyl }vxt1
Ινφλυενχε οφ Ρεηµαννια γλυτινοσα πολψσεσ ον µ οδελ µιχε οφ δεφιχιενχψ οφ βλοοδ
‹˜„‘Š ÷¬¤oŒ˜ ¬¨ oŒ˜ ‹∏¬2¬¬¤
( Ηεναν Αχαδεµψ οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Ζηενγζηου wxsssw , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ²¥¶¨µ√¨·«¨ ¬±©¯∏¨ ±¦¨ ²© • Š°k Ρεηµανινα γλυτινοσα ³²¯¼¶¨¶l ²±·«¨ ³¨µ¬³«¨µ¤¯ «¨ °²ªµ¤° o«¨ °²³²¬¨·¬¦¶·¨°
¦¨¯¯ o°¼¨ ²¯¬§®¤µ¼²¦¼·¨ ²© °²§¨¯ °¬¦¨1 Μετηοδ : ∞¤¦«ªµ²∏³²©·«¨ °¬¦¨ º µ¨¨ ©¨ §º¬·« • Š°©²µ{ ∗ | §¤¼¶1 ¬¦¨ °²§¨¯²©§¨©¬¦¬¨±¦¼ ¥¯²²§¬¶
¶¨·∏³¥¼¬±·¨µ¤³¨µ¬·²±¨ ¤¯ ¬±­¨¦·¬²± ²©≤≠ o¤±§·«¨ ³¨µ¬³«¨µ¤¯ «¨ °²ªµ¤° ¤±§°¼¨ ²¯¬§®¤µ¼²¦¼·¨ º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨¤±§¦²∏±·¨§²±·«¨ º«²¯¨¥¯²²§1
∞¤¦«ªµ²∏³²© °¬¦¨ º µ¨¨ ¬±­¨¦·¨§º¬·«·«¨ ¶∏¶³¨ ±¶¬²± ²© °¼¦¯²¬§¦¨¯¯ ²©«²°²¯²ª¼ §²±²µ°¬¦¨ o¤±§·«¨ ©²µ°¤·¬²± ²©¶³¯ ±¨¬¦¯ ¼°³«±²§∏¯ ¶¨º µ¨¨
²¥¶¨µ√ §¨1 ∞¤¦«ªµ²∏³²© °¬¦¨ º µ¨¨ µ¤§¬¤·¨§º¬·«µ¤§¬¤·¬²± §²¶¤ª¨ ²©z1uxŠ≠ o¤±§·«¨ µ¤§¬¤·¬²±2§¤°¤ª¨ °²§¨¯ º µ¨¨ ¶¨·∏³1 ׫¨ ©²µ°¤·¬²± ²©
¶³¯ ±¨¬¦ ¼¯°³«±²§∏¯ ¶¨º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨o¤±§·«¨ ³¨µ¬³«¨µ¤¯ «¨ °²ªµ¤° o°¼¨ ²¯¬§®¤µ¼²¦¼·¨ ¤µ¨ ²¥¶¨µ√ §¨¤±§¦²∏±·¨§1 Ρεσυλτ : ∞¤¦«§²¶¤ª¨ ªµ²∏³
²© • Š° «¤√¨¤±·¤ª²±¬¶° ²± ³¨µ¬³«¨µ¤¯ «¨ °²ªµ¤° ¤±§·«¨ °¼¨ ²¯¬§®¤µ¼²¦¼·¨ ²©·«¨ ≤≠ °¬¦¨ °²§¨¯²©§¨©¬¦¬¨±¦¼ ²©¥¯²²§o¦²°³¤µ¨§º¬·«¦²±·µ²¯
ªµ²∏³1 • Š° ¶«²º¶²¥√¬²∏¶©¤¦¬¯¬·¤·¬²± ¤±¬²2¤¦·¬²±©²µ·«¨ ©²µ°¤·¬²± ²©¶³¯ ±¨¬¦ ¼¯°³«±²§∏¯ ¶¨k Π s1sx o Π s1stl1 ‹¬ª«§²¶¤ª¨ Š• ° ¦¤±
¬±«¬¥¬·¬²±·«¨ §¨¦µ¨¤¶¨ ²© º«²¯¨¥¯²²§¦¨¯¯ ²¥√¬²∏¶¯¼k Π s1sxl1 ²º §²¶¤ª¨ ²© • Š° ¦¤±¬±¦µ¨¤¶¨ ·«¨ º«²¯¨¥¯²²§¦¨¯¯ ²© °²§¯¨ °¬¦¨ º¬·«²∏·
¶·¤·¬¶·¬¦¤¯ ° ¤¨±¬±ª1 Χονχλυσιον : • Š° «¤√¨¤±·¤ª²±¬¶° ²±·«¨ §¨¦µ¨¤¶¨ ²©³¨µ¬³¯ µ¨¤¯ «¨ °²ªµ¤° ¤±§°¼¨ ²¯¬§®¤µ¼²¦¼·¨ ²©§¬©©¨µ¨±·°²§¨¯ °¬¦¨
²©§¨©¬¦¬¨±¦¼ ²©¥¯²²§o¤±§«¤√¨¤±¬²2¤¦·¬²± ²± °∏¯·¬³¯¬¦¤·¬²± ¤±§§¬©©¨µ¨±·¬¤·¬²± ²©·«¨ °¬¦¨ «¨ °²³²¬¨·¬¦¶·¨° ¦¨¯¯k≤ƒ∏2≥l1
[ Κεψ ωορδσ] Ρεηµαννια γλυτινοσα ³²¯¼¶¨¶~ °²§¨¯ °¬¦¨ ²©¥¯²²§§¨©¬¦¬¨±¦¼~³«¤µ°¤¦²§¼±¤°¬¦¶
≈责任编辑 方文贤 
≈收稿日期  ussw2st2ut
≈基金项目  上海市高等学校科学技术发展基金ksu⁄Žs|l
≈通讯作者  3王月颖 oר¯ }ks|vtl{zy{ttx o∞2°¤¬¯}º¤±ª2¼¼zv ƒ ¼¤«²²1¦²°1¦±
梁金菇多糖诱导 Žxyu细胞凋亡的研究
王月颖t 3 o刘正国t o李兴玉u
kt1 兰州医学院 第一附属医院 o甘肃 兰州 zvssss ~
u1 上海师范大学 生命与环境科学学院 o上海 ustwt{l
≈摘要  目的 }探讨梁金菇多糖对 Žxyu细胞凋亡的影响及其机制 ∀方法 }应用集落形成实验观察梁金菇多糖
#sztt#
第 u|卷第 tu期
ussw年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1u| oŒ¶¶∏¨ tu
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussw