全 文 ：雄黄诱导维甲酸耐药的急性早幼粒细胞白血病细胞
k  • u细胞l凋亡的体外研究
陈思宇 o刘陕西 o李信民
k西安交通大学 血液学研究中心 o陕西 西安 ztssyt l
≈摘要  目的 }深入了解雄黄治疗急性早幼粒细胞白血病k„°l的机理 ∀方法 }以对全反式维甲酸k„× • „l耐
药的 „°细胞株  • u细胞为体外模型 o用不同剂量的雄黄处理细胞一定时间后 o利用  × × 实验观察细胞的存
活 !增殖状态 o应用细胞形态学 !基因组 ⁄‘„电泳 !流式细胞仪检测细胞凋亡 o利用流式细胞仪分析细胞周期及细
胞膜 „±±¨ ¬¬± ∏的表达 ∀结果 }一定浓度范围内雄黄对  • u 细胞的生长 !增殖有剂量 !时间依赖性抑制作用 ~
• µ¬ª«·. ¶及 ‹∞染色均可见凋亡细胞 o透射电镜下可见核染色质边集 !核碎裂及凋亡小体 ~基因组 ⁄‘„ 电泳出现
/梯形0条带 ~流式细胞仪分析出现低于 Št期 ⁄‘„含量的亚二倍体细胞峰 ~经雄黄处理后 „±±¨ ¬¬± ∏2ƒŒ× ≤ n r°Œp
的凋亡细胞逐渐增多 ∀结论 }雄黄可诱导 „× • „耐药的 „°细胞发生凋亡 o提示雄黄治疗 „°的效应途径可能不
同于 „× • „ ∀
≈关键词  雄黄 ~急性早幼粒细胞性白血病 ~细胞凋亡 ~维生素 „酸类
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussulsv2sutt2sx
全反式维甲酸k„× • „l作为诱导分化剂可使大
多数急性早幼粒细胞白血病k„°l患者取得完全缓
解 o但是它有维甲酸耐药和维甲酸综合征两大缺陷 o
特别是几乎普遍发生的维甲酸耐药使 „°患者完
全缓解后短期内复发和失去对维甲酸的反应性≈t  ∀
因此 o进一步寻找对 „°尤其是对维甲酸耐药的
„°患者有效的治疗方法具有重要意义 ∀近年来 o
国内外学者运用砷剂治疗急性早幼粒细胞白血病取
得了较大进展≈u  o尤其是三氧化二砷k„¶u’vl的临床
应用及机制研究进展很快≈v  ∀雄黄是硫化砷类矿
物 o陆道培报道单用雄黄治疗 „°o预期 x年无病生
存率超过 |s h ≈w  o渐引起人们注意 ∀体外研究发现
雄黄可诱导 „°细胞株 ‘…w 细胞发生凋亡≈u ox ∗ z  ∀
在临床实践中发现 o雄黄不仅对初治 „°患者有
效 o而且对于复发及 „× • „耐药的 „°患者同样有
效≈w o{  ∀为了进一步阐明雄黄的药理机制 o我们以
对 „× • „ 耐药的 „°细胞株  • u 细胞为体外模
型 o研究雄黄对其作用 ∀
1 材料与方法
≈收稿日期  usst2s|2tv
≈基金项目  陕西省中医药管理局基金资助项目k||sul
≈通讯作者  电话 }ksu|l{xw{{uw 传真 }ksu|lxuyvt|s ∞2
°¤¬¯}¦«2¶2¼ ƒ uyv q±¨ ·
1 q1 药物配制
雄黄购自西安中药集团k产自湖南l o经酸洗水
飞法炮制后 o以 ÷2衍射测定其纯度k即硫化砷含量l
不低于 |{ h ∀将其溶于 • ° ŒtywskŠ¬¥¦²产品l培
养液 o灭菌分装 o取样用原子吸收光谱法作砷含量测
定 ∀t °°²¯ #pt全反式维甲酸k„× • „ o≥¬ª°¤公
司l以无水乙醇配制 o用时以完全培养液稀释 ∀
1 q2 细胞培养
 • u细胞是来源于 „°细胞株 ‘…w 细胞的对
„× • „耐药的亚细胞克隆 o由上海血液学研究所惠
赠 ∀将细胞以 u ≅ tsx#°p t浓度接种于含或不含药
物的新鲜 • ° Œtyws完全培养液≈内含 ts h小牛血
清k杭州四季青产l otss ˜# °p t青霉素 otss ˜#
°p t链霉素 中 o在 vz ε !饱和湿度 !含 x h ≤ ’u培
养箱中进行培养 o隔日换液以保证细胞浓度在 u ≅
tsx ∗ x ≅ tsx#°p t ∀
1 q3 细胞形态学观察
培养细胞经不同浓度雄黄作用一定时间后 o涂
片 o分别进行 • µ¬ª«·. ¶染色及苏木素2伊红k‘∞l染
色 o光镜下观察细胞形态及凋亡情况 ∀取 t ≅ tsy 细
胞用 °…≥ks qst °²¯#pt o³‹ z qwl洗 u次 o在 u qx h
戊二醛固定液k含少量多聚甲醛l中 w ε 下固定 u «
以上 o经缓冲液冲洗后 t h四氧化锇后固定 u «o梯
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度脱水 o浸透 o∞°’‘{tu包埋 o超薄切片 o铀及铅双
重染色 o透射电镜观察 ∀
1 q4  × × 法检测细胞生长 !增殖状态
将对数生长期细胞以 u ≅ tsx#°p t浓度接种于
|y孔板ktss ˏr孔l o试验组加入各浓度雄黄溶液
tss ˏr孔 o对照组加入培养液 tss ˏr孔 o每组各设
w个平行孔 o并分别设空白孔k即只加入药液和培养
液 o不加细胞l以调零 ∀培养一定时间后 o加入 x °ª
#°p t  × × k≥¬ª°¤产品lus ˏo继续培养 w «o离
心 o弃上清 o加入 ⁄ ≥’k≥¬ª°¤产品ltxs ˏo混匀 o
xzs ±°处测 „ 值 ∀细胞生长抑制率 € kt p处理组
„值r对照组 „值l ≅ tss h ∀重复 v次 ∀
1 q5 流式细胞仪检测细胞周期及凋亡
取实验组及对照组各约 t ≅ tsy 细胞 o°…≥洗 u
次 o加入 zs h k ς/ ςl冷乙醇 ow ε 固定 uw «以上 o随
后清洗细胞 o加入 °Œ染液k含 °Œ tss Λª# °p t o
• ‘¤¶¨ xss Λª#°p tl孵育 vs °¬±进行 ⁄‘„ 染色 o
用流式细胞仪k≤²∏¯·¨µ∞°Œ≤≥µ ∞¯¬·¨l分析细胞周期
和凋亡细胞 o资料经  ∏¯·¬≤¼¦¯¨ 软件分析 ∀
1 q6 „±±¨ ¬¬± ∏2ƒŒ× ≤ 检测早期凋亡
按照 „±±¨ ¬¬± ∏细胞凋亡检测试剂盒k北京宝
赛生物技术公司产品l说明书操作 ∀取约 t ≅ tsy 细
胞 o冷 °…≥洗 u次后重悬于 uss ˏ¥¬±§¬±ª …∏©©¨µo
加入 ts ˏ„±±¨ ¬¬± ∏2ƒŒ× ≤ 和 x ˏ°Œo轻轻混匀 o
于 w ε 避光反应 vs °¬±o加入 vss ˏ ¥¬±§¬±ª
…∏©©¨µo立即进行流式细胞仪检测 ∀
1 q7 基因组 ⁄‘„电泳
取各组细胞 o°…≥清洗 o加入细胞裂解液 o常规
酚2氯仿r异戊醇抽提 o无水乙醇沉淀 o⁄‘„ 沉淀经
zs h乙醇洗后溶解于 ×∞缓冲液中 o在 t qux h琼脂
糖凝胶上 ys ∂ 电泳 t «o紫外灯下观察并摄像 ∀
1 q8 硝基四氮唑盐k‘…×l还原试验
取约 t ≅ tsy 细胞 o°…≥清洗后加入 ‘…× 反应
液k含 s qt h ‘…× 和佛波酯 tss ±ª#°p tl ovz ε 孵
育 vs °¬±o滴片 o光镜下计数阳性细胞率 o每个视野
至少计数uss个细胞 o余细胞以ts h ≥⁄≥溶解 o
xy{ qx ±°处测吸光度 ∀
2 结果
2 q1  • u细胞的基本特点
 • u细胞是来源于 „°细胞株 ‘…w 细胞的对
„× • „耐药的亚细胞克隆 ot Λ°²¯#p t „× • „ 并不
影响  • u细胞的生长和活力 ∀ ‘…× 还原能力是从
功能及生化学变化来反映早幼粒细胞分化的常用指
标 o其测定结果显示 „× • „ 处理的  • u 细胞其
‘…× 还原值无明显变化 o这与 ‘…w 细胞截然不同 o
‘…w细胞在 t Λ°²¯#pt „× • „处理后 ‘…× 还原值
明显上升 ∀
2 q2 雄黄对  • u细胞生长 !增殖的影响
 × × 实验发现 o一定浓度范围内的雄黄对
 • u细胞生长有明显抑制作用 o且此作用呈现明显
的剂量及时间依赖性k表 tl ∀
表 t 雄黄对  • u细胞的抑制作用 h
τr« ztt Λª#p t vxx Λª#p t tzz Λª#p t {{ Λª#p t
uw xz q| vv q| p p
w{ {y q{ wy qu v q{ p
zu tss yu qz tv q| ty qz
注 }/ p 0示处理组 „值 ∴对照组 „值
2 q3 雄黄诱导  • 2 细胞凋亡
2 q3 q1 形态学观察 相差显微镜下观察 o加药后细
胞数量明显减少 o细胞变小 o胞体发污 o折光性差 ∀
同时 o细胞间粘附 !聚集性下降 o随雄黄剂量增大细
胞越分散 o而对照组细胞则明显聚集成簇k图 tl ∀
图 t 雄黄作用后  • u细胞
时间 }¤2¨quw« ©2­qw{ « 剂量 }¤o©qs ¥oªqww Λª#p t ¦o«q{{ Λª#p t §o¬qtzz Λª#p t ¨o­qvxx Λª#p t 倒置显微镜下观 ≅ tss
#utu#
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• µ¬ª«·. ¶及 ‹∞ 染色均可见凋亡细胞 }细胞体
积缩小 o细胞核固缩 !浓染 o继尔断裂成小团块分散
在胞膜周边 o而细胞膜完整 ∀透射电镜下可见在细
胞膜及核膜均完整的情况下 o胞浆中有大量大小不
一的圆滴状空泡 o核染色质沿核膜边缘浓集 o形成月
芽状电子密度增高区 o随药物浓度增加和培养时间
的延长 o可见核碎裂及凋亡小体形成k图 ul ∀
图 u 雄黄作用前后  • u细胞
„ q未处理  • u细胞 …o≤ qvxx Λª#p t雄黄作用后  • u细胞 …q凋亡小体 ≤ q核边集 × ∞ ≅ x sss
2 q3 q2 流式细胞仪分析细胞周期及凋亡  • u 细
胞经雄黄处理后 oŠsrŠt 期细胞明显减少 o≥期细胞
明显增加k表 ul o并出现低于 Št 期 ⁄‘„ 含量的亚
二倍体细胞峰k图 vl o且呈时间剂量依赖性 ∀
表 u 雄黄对  • u细胞周期分布及凋亡的影响 h
药物
rΛª#p t
细胞周期
ŠsrŠt期 ≥期 Šur  期
总计 凋亡细胞
s xw qx vy qu | qv |z qs v qs
tzx wx qz wx qz { qy {| qt ts q|
vxx vs q| yz q{ t qv yx q| vw qt
ztt t qu |{ q{ s xy qz wv qv
注 }本表为雄黄作用  • u细胞 ys «的结果
图 v vxx Λª#p t雄黄作用后  • u细胞周期
2 q3 q3 细胞浆膜不对称性丧失导致磷脂酰丝氨酸
k°≥l外翻是细胞凋亡的早期过程 o„±±¨ ¬¬± ∏可与
°≥特异性强烈结合 o被用来检测早期细胞凋亡 ∀
„±±¨ ¬¬± ∏2ƒŒ× ≤ n r°Œp双标检测可见 o随雄黄剂量
加大或时间延长 o„±±¨ ¬¬± ∏2ƒŒ× ≤ n r°Œp的凋亡细
胞逐渐增多 ∀
2 q3 q4 基因组 ⁄‘„ ¤¯§§¨µ 雄黄处理  • u细胞的
基因组 ⁄‘„电泳出现明显阶梯状条带/ ¤¯§§¨µ0 o而
对照组无此现象k图 wl ∀

图 w  • u细胞 ⁄‘„电泳
t q¤µ®¨ µ u qvxx Λª#p t雄黄作用 vy «后
 • u细胞 ⁄‘„ v q未处理  • u细胞 ⁄‘„
3 讨论
长期以来 o砷剂被人们视为毒药 o对其应用慎之
又慎 ∀近年来 o国内外学者运用砷剂尤其是三氧化
二砷k„¶u’vl治疗急性早幼粒细胞白血病取得了较
大进展≈u  o已证实 „¶u’v 具有诱导 „°细胞凋亡和
分化的剂量依赖性双重效应≈v  o并且发现 „¶u’v 不
仅可诱导 ‘…w 细胞凋亡 o而且可使维甲酸耐药的
 • u细胞发生凋亡≈|  o提示 „¶u’v治疗 „°的效应
途径可能不同于维甲酸 ∀但同时也发现 „¶u’v 尽管
可使 „°达完全缓解 o却不能完全清除白血病克
#vtu#
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隆 o尚需联合应用化疗 o且仍存在短期内复发等现
象≈ts  ∀
雄黄的主要成分是硫化砷 o包括 „¶w≥w 和
„¶u≥u o其治疗 „°及慢性粒细胞白血病k≤  l的
疗效已被初步肯定≈w ott  o毒副作用较 „¶u’v 轻≈w  o长
期疗效仍有待继续观察 ∀我们在临床实践中也发
现 o雄黄类似于 „¶u’v o不仅对初治 „°患者有效 o
对于复发及维甲酸耐药的 „°患者同样有效≈{  ∀
据我们测定 o长期服用雄黄的 „°患者血砷含量为
w qx ∗ x{ Λª#pt o我们以接近体内生理浓度的剂量
研究了雄黄对 „°细胞株的作用 o发现雄黄不仅能
诱导维甲酸敏感的细胞株 ‘…w 细胞凋亡 o而且能促
进维甲酸耐药的细胞株  • u 细胞发生凋亡 ∀已知
引起维甲酸耐药的机制研究很多≈tu  o其中主要原因
为药代动力学改变 o即维甲酸耐药患者的 „°细胞
胞内维甲酸结合蛋白 µk≤ • „…° µl升高引起的游离
维甲酸浓度下降≈tv 或细胞色素 °wxsk≤°wxsl活性
增加导致的维甲酸代谢增加≈tw  ∀至今未见报道雄
黄胞内代谢与上述因素有关 o说明雄黄与维甲酸之
间无交叉耐药 o提示雄黄治疗 „°的效应途径可能
与维甲酸不同 o而其具体作用机制尚有待于进一步
研究 ∀
需补充说明的是 o在本实验中 o发现低剂量雄黄
在短时间内对  • u 细胞的生长 !增殖无抑制作用 o
甚或有一定的促进作用 o说明不同剂量雄黄其作用
亦不完全相同 ∀另外 o我们已发现雄黄对 ‘…w 细胞
在诱导凋亡的同时 o存在促进细胞分化的作用 o其对
 • u细胞是否也有促进分化作用 ‚我们将继续研
究 ∀
≈参考文献 
≈t  • ¤µµ¨¯¯ • ° q • ·¨¬±²¬§ • ¶¨¬¶·¤±¦¨ ¬± „¦∏·¨ °µ²°¼¨¯²¦¼·¬¦
¨∏®¨ °¬¤} ‘¨ º  ¦¨«¤±¬¶°¶o ≥·µ¤·¨ª¬¨¶ ¤±§ Œ°³¯¬¦¤·¬²±¶q
…¯²²§ot||v o{ukzl }t|w| q
≈u  陈思宇 o李信民 o刘陕西 q含砷类中药在恶性血液病治疗中的
研究概况 q中国中药杂志 ousss ouxk{l }wxw q
≈v  ≤«¨ ± Š ± o ≥«¬÷ Š o פ±ª • o ·¨¤¯ q ˜¶¨ ²© „µ¶¨±¬¦ ×µ¬²¬¬§¨
k„¶u’v l ¬± ·«¨ ×µ¨¤·° ±¨·²© „¦∏·¨ °µ²°¼¨¯²¦¼·¬¦ ¨∏®¨ °¬¤
k„°l qŒq „¶u’v ∞¬¨ µ·¶ ⁄²¶¨2⁄¨ ³¨ ±§¨ ±·⁄∏¤¯ ∞©©¨ ¦·¶²± „°
≤¨¯ ¶¯q …¯ ²²§ot||z o{|k|l }vvwx q
≈w  ∏⁄ ° o ±¬∏ ≠ o¬¤±ª …o ·¨¤¯ q ∞©©¨ ¦·¬√¨ ×µ¨¤·° ±¨·²© „¦∏·¨
°µ²°¼¨¯²¦¼·¬¦¨∏®¨ °¬¤ k„°l º¬·« × ·¨µ¤2¤µ¶¨±¬¦ × ·¨µ¤2¶∏¯©¬§¨
k„¶w≥wl o¤  ²±²¬±¶·¬·∏·¬²±¤¯ ≥·∏§¼ q…¯ ²²§ot||| o|wk≥∏³³¯¼ tl }
y|{¤q
≈x  刘延方 o江 滨 o陆道培 q硫化砷诱导 ‘…w 细胞凋亡及细胞周
期阻滞的研究 q中华血液学杂志 ousss outktul }ywz q
≈y  白月辉 o黄世林 q雄黄对 ‘…w 及 ‹2ys细胞的促凋亡作用 q中
华血液学杂志 ot||{ ot|k|l }wzz q
≈z  张 晨 o黄世林 o向 阳 o等 q低剂量雄黄诱导 ‘…w细胞凋亡的
研究 q中国中医基础医学杂志 ousss oykul }tt q
≈{  刘陕西 o李信民 o王梦昌 o等 q诱导凋亡剂瑞尔康治疗恶性血液
病的临床研究 q见 }中华医学会青海分会编 q中国西部医学文集
#血液学分册 q西宁 }青海人民出版社 ousst qvv q
≈|  蔡 循 o贾敬敏 o石学耕 o等 q氧化砷诱导维甲酸耐药早幼粒细
胞白血病细胞 k  •2ul凋亡的体外研究 q中华血液学杂志 o
t||{ ot|kzl }vv| q
≈ts  黄秋花 o倪建华 o唐 玮 o等 q • ×2°≤ • 检测氧化砷治疗 „°
复发患者的 °  2• „ • Α融合基因 q上海医学 ot||{ outkxl }
uxs q
≈tt  ∏⁄ ° q „µ¶¨±¬¦≥∏¯©¬§¨ ≤²°³²∏±§¶¤±§ ⁄¨ µ¬√¤·¬√ ¶¨·«¨ µ¨ ²©©²µ
·«¨ ×µ¨¤·° ±¨·²©  ¤¯¬ª±¤±¦¬¨¶q °≤ × Œ±·„³³¯ q • ’ || xx ovww
k≤Œq„ytŽvvrvyl ow ‘²√ qt||| o≤ ‘ „³³¯ |{ otst qyvx ouw „³µ
t||{ owu³³q
≈tu  ≤¬·i ≥ o «²∏ ⁄ ≤ o …¬¤±¦«¬±¬„ o ·¨¤¯ q „ ·¯¨µ¨§ ¬ª¤±§ …¬±§¬±ª
¤±§ ×µ¤±¶¦µ¬³·¬²±¤¯ • ª¨∏¯¤·¬²± ¥¼  ∏·¤·¬²±¶ ¬± ·«¨ °  r
• „ • Α¬ª¤±§2¥¬±§¬±ª ⁄²°¤¬± „µ¬¶¬±ª¬± • ·¨¬±²¬¦ „¦¬§2• ¶¨¬¶·¤±·
°¤·¬¨±·¶ º¬·« „¦∏·¨ °µ²°¼¨¯²¦¼·¬¦ ¨∏®¨ °¬¤q …¯²²§ousss o|y
k|l }vuss q
≈tv  ⁄¨ √¯¤ o≤²µ±¬¦  o…¤¯¬·µ¤±§ ‘o ·¨¤¯ q • ¶¨¬¶·¤±¦¨ ·² „¯¯2 Τρανσ
• ·¨¬±²¬¦„¦¬§k„× • „l ׫¨ µ¤³¼¬± • ¨¯¤³¶¬±ª „¦∏·¨ °µ²°¼¨¯²¦¼·2
¬¦¨∏®¨ °¬¤} ≥·∏§¼ ²© ιν ϖιτρο „× • „ ≥ ±¨¶¬·¬√¬·¼ ¤±§ ≤¨¯ ∏¯¯¤µ
• ·¨¬±²¬¦„¦¬§ …¬±§¬±ª °µ²·¨¬± ¨√¨¯¶¬± ¨∏®¨ °¬¦≤¨¯ ¶¯q …¯ ²²§o
t||v o{ukzl }utzx q
≈tw  Ž¬½¤®¬ o ˜ ±¨² ‹ o ≠¤°¤½²¨ ≠ o ·¨¤¯ q  ¦¨«¤±¬¶°¶²© • ·¨¬±²¬§
• ¶¨¬¶·¤±¦¨ ¬± ¨∏®¨ °¬¤ ≤¨¯ ¶¯}°²¶¶¬¥¯¨ • ²¯¨²© ≤¼·²¦«µ²°¨°wxs
¤±§°2 Š¯ ¼¦²³µ²·¨¬±q …¯²²§ot||y o{zkul }zux q
Ιν ϖιτρο Στυδψ ον Ρεαλγαρ Ινδυχεδ Αποπτοσισ οφ Αλλ2τρανσ Αχιδ
Ρεσισταντ Αχυτε Προµεψλοχψτιχ Λευκεµια Χελλ Λινε (ΜΡu)
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²¯¦¼·¬¦¯¨ ∏®¨ °¬¤k„°l q Μετηοδ : „¯¯2τραν󵨷¬±²¬¦¤¦¬§k„× • „l µ¨¶¬¶·¤±·„°¦¨¯¯ ¬¯±¨  • u º¤¶∏¶¨§¤¶¬± √¬·µ² °²§¨¯q× «¨ ©¨©¨ ¦·
²©µ¨¤¯ª¤µ²±  • u ¦¨¯¯ º¤¶²¥¶¨µ√ §¨¥¼ º¤·¦«¬±ª¦¨¯¯ √¬¤¥¬¯¬·¼ o¦¨¯¯ ªµ²º·«o¤±§¥¼ ∏¶¬±ª  ·¨«¼·«¬¤½²¯ ¼¯ ·¨·µ¤½²¯¬∏° k  × ×l ¤¶¶¤¼ o
¦¨¯¯ °²µ³«²¯²ª¼ o⁄‘„ ª¨¯¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶¤±§©¯²º ¦¼·²° ·¨µ¼ ¤¶¶¤¼ qΡεσυλτ : × «¨ √¬¤¥¬¯¬·¼ ¤±§ªµ²º·«²©  • u ¦¨¯¯ º µ¨¨ ¬±«¬¥¬·¨§¤©·¨µ
·«¨ ·µ¨¤·° ±¨·o·²¶²°¨ ¬¨·¨±·o¬± ¤§²¶¨ ¤±§·¬°¨§¨ ³¨ ±§¨ ±·°¤±±¨ µq„©·¨µ¥¨¬±ª·µ¨¤·¨§ º¬·«µ¨¤¯ª¤µo  • u ¦¨¯¯ ³µ¨¶¨±·¨§ °²µ³«²2
²¯ª¬¦¤¯ ¼¯ ¶²°¨©¨ ¤·∏µ¨¶²©¤³²³·²·¬¦¦¨¯¯¶¶∏¦«¤¶¬±·¤¦·¦¨¯¯ °¨°¥µ¤±¨ o¦«µ²°¤·¬± ¦²±§¨ ±¶¤·¬²± ¤±§±∏¦¯ ¤¨µ©µ¤ª° ±¨·¤·¬²±o¤±§¤³²³2
·²·¬¦¥²§¼ ¦²∏¯§ ¥¨ ©²∏±§ ¥¼ ¨¯ ¦¨·µ²± °¬¦µ²¶¦²³¼ ¤¶ º¨¯¯q ≥∏¥2Št ¦¨¯¯¶ º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨ ¥¼ ©¯²º ¦¼·²° ·¨µ¼ o¤¶ º¨¯¯ ¤¶ „±±¨ ¬¬± ∏
ƒŒ× ≤ n r°Œp ¦¨¯¯¶q⁄‘„ ¤¯§§¨µ¦²∏¯§¥¨ ©²∏±§¥¼ ⁄‘„ ª¨¯¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶qΧονχλυσιον : • ¤¨¯ª¤µ¦¤±¬±§∏¦¨ ¤³²³·²¶¬¶²© „× • „ µ¨¶¬¶2
·¤±·„°¦¨¯¯ ¬¯±¨  • u o • «¬¦«¶«²º¶·«¨ ·«¨µ¤³¨ ∏·¬¦ ©¨©¨ ¦·²©µ¨¤¯ª¤µ²± „°°¤¼ ¥¨ §¬©©¨ µ¨±·©µ²° ·«¤·²© „× • „ q
[ Κεψ ωορδσ] µ¨¤¯ª¤µ~¯ ∏¨®¨ °¬¤o³µ²°¼¨ ²¯¦¼·¬¦o¤¦∏·¨ ~¤³²³·²¶¬¶~µ¨·¬±²¬¦
≈责任编辑 方文贤 
复方玄驹制剂抗炎作用的实验研究
魏日胞t o霍海如u o李小芹u o周爱香u o沈 鸿u o田甲丽u
kt q解放军空军总医院 o北京 tsssvy ~u q中国中医研究院 中药研究所 o北京 tsszssl
≈摘要  目的 }观察复方玄驹中药制剂的抗炎作用 ∀方法 }采用大鼠实验性关节炎模型 o观察复方玄驹中药制
剂对大鼠佐剂性足肿胀的抑制和治疗作用以及对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀和大鼠棉球肉芽肿的影响 ∀结果 }复方
玄驹中药制剂对各种致炎剂引起的水肿均具有明显的抑制作用 ∀口服 s qu os qw os q{ ª#®ªp t的复方玄驹中药制剂
对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀以及棉球肉芽肿有显著的抑制作用 o用药后 t «对角叉菜胶致大鼠足肿胀的抑制率均
达 ux h以上 oy «的抑制率分别为 uv q{ h ouu qu h ov| qz h ∀复方玄驹中药制剂对大鼠佐剂性足肿胀具有显著的
预防和治疗作用 ∀结论 }复方玄驹中药制剂对动物炎症模型具有明显的抗炎作用 ∀
≈关键词  玄驹 ~复方玄驹中药制剂 ~动物实验性关节炎模型 ~动物炎症模型 ~抗炎作用
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussulsv2sutx2sw
复方玄驹中药制剂是由玄驹 !淫羊藿 !枸杞子 !
蛇床子组成的复方胶囊 o具有祛风除湿 !通络止痛 !
滋补肝肾 !镇静安神等功能 ∀用于治疗风湿性关节
炎之风湿痹痛 !肝肾阴虚之腰膝酸软 !失眠多梦等
症 ∀本研究观察复方玄驹胶囊的祛风除湿和抗炎作
用 o为该制剂的临床应用提供实验理论依据 ∀
1 材料与方法
1 q1 药品和试剂 复方玄驹中药制剂 os qwu ªr粒
胶囊 o含玄驹 !淫羊藿 !枸杞子 !蛇床子提取物 o由中
国中医研究院中药研究所提供 o批号 sssvuu ∀阳性
对照药通络开痹片 o由中外合资邢台通络药业有限
公司提供 o批号 ussss|tu ∀ ƒµ¨∏±§. ¶完全佐剂 o美
国 ≥¬ª°¤公司提供 o批号 °txsv ~巴豆油 o日本和光
株式会社提供 o批号 ⁄≤≤zzvz ∀角叉菜胶 o美国
≈收稿日期  usst2s|2ts
≈通讯作者  电话 }tv|sts|utsv 传真 }kstsly{wuyx{x
≥¬ª°¤公司提供 o批号 wxƒ2swuz ∀
1 q2 动物 大鼠 o• ¬¶·¤µ系 o雄性 otvs ∗ tys ª体
重 o均由北京医科大学实验动物中心提供k合格证
号 }医动字第 st2vsw|号l ∀
1 q3 仪器 ˜ ∂2zxw连续式分光光度计 o上海医用
分析仪器厂产品 ∀
1 q4 实验方法
1 q4 q1 佐剂性足肿胀的预防作用≈t ou  选取 tws ∗
tys ª雄性大鼠 o按体重随机分成 x组 o空白对照组 o
复方玄驹胶囊分高 !中 !低ks q{ os qw os qu ª#®ªp tlv
个剂量组 o阳性对照药k通络开痹片l给药剂量 s qus
ª#®ªp t o每组 ts只 ∀试验前先用自制软尺测量每鼠
左 !右后足跖周长k¦°l作为基础值 ∀大鼠提前 u §
给药 ot qs °#tss ªp t o共 uy §∀第 v天 o于右后足
垫皮内注射 ƒµ¨∏±§. ¶完全佐剂 s qts °r只致炎 o分
别于致炎后 u ot{ «及第 w天测量对照组和预防给
药组大鼠右后足跖周长 ∀
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第 uz卷第 v期
ussu年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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