全 文 ：　青海农林科技 ·试　验　研　究· 2009年第 1期　
雄黄兰花蕾离体培养技术探讨＊
张文莲 ,黄　洁
(城南苗圃 ,青海　西宁　810000)
　　　　摘　要:以雄黄兰花蕾为外植体 , 以 MS为基本培养基 ,通过添加不同浓度的 BA、NAA等激素 , 探讨外源激
素对其愈伤组织诱导 、不定芽分化 、增殖与不定根形成的影响 ,并建立了微繁体系;通过采取不同驯化炼苗措
施 , 总结了一整套炼苗与栽培技术。试验表明:选用 MS+6-BA2.0mg· l-1 +NAA0.2 mg· l-1培养基 , 其外植
体诱导率达 84.4%, 不定芽诱导率达 68.2%, 选用 MS+6-BA2.0mg· l-1的培养基进行增殖培养 , 可得到优良
的雄黄兰小种球 , 球茎增殖系数达 4.9;在 1/2MS培养基中培养 15d,球茎生根率达 98%;瓶苗常规驯化后选用
国产泥炭土炼苗 ,成活率在 90%以上;冬末春初繁殖的生根苗定植大田后当年开花。
关键词:雄黄兰;花蕾;离体培养;探讨
中图分类号:S682.2　　　　　　文献标识码:A　　　　　　文章编号:1004-9967(2009)01-0009-03
ApproachonCrocomiaCrocosmifloraFlowerBudsIsolatedCultureTechnique
ZHANGWen-lian, HUANGJie
(ChingnanNursery, XiningQinghai810000, China)
　　Abstract:Exogenousefectofcrocomiacrocosmifloraflowerbudsexternalimplantationsofcalusinduced,
adventitiousbuddiferentiation, multiplicationandformadventitiousrootwereapproachedbyMSculture
mediaanddiferentconcentrationBA, NAA.Micro-systemofbreedingwasestablished.Thetechniqueof
culturenurserystockwassummarizedbydiferentculturemeasures.TheresultsshowedCrocomiacrocosmiflora
isolatedcultureinducedratewas84.4% byMS+6-BA2.0 mg· l-1 +NAA0.2mg· l-1.itsadventitious
budsinducedratewas68.2%, andformexcelentsmalseedbal, andcoeficientofcormmultiplicationwas
4.9% byMS+6-BA2.0 mg·l-1.Thestrikerateofseedbalwas98% after15daysin1/2MS.Itsbotle
seedlingsdomesticatedcommonlythattherateofsurvivalwasover90% whichculturedinthelocalpeaty.
Seedlingofstrikewilbeflowerplantedfieldduringtheendofwinterandfirstofspringmultiply.
Keywords:Crocomiacrocomiflora;Flowerbud;Isolatedculture;Approach
　　雄黄兰(Crocosmiacrocosmiflora), 又名火星
花 ,鸢尾科雄黄兰属多年生草本 ,高 50 ～ 70cm,球
茎扁圆球形 。叶多基生 ,剑形 ,基部鞘状。穗状圆
锥花序 ,花火红色 ,花期 6 ～ 8月。蒴果三棱状球
形 ,果期 8 ～ 10月。原产南非。喜充足阳光 ,耐
寒 ,在长江中下游地区球茎露地能越冬。是布置
花境 、花坛和作切花的优良植物材料 ,宜成片栽植
于街道绿岛 、建筑物前 、草坪上 、湖畔等。随着花
卉产业的快速发展 ,近几年西宁地区对雄黄兰的
需求也逐年增加 ,主要用于切花栽培和花镜栽植
(冬季需采挖后储藏或采取简单的越冬保护措
施)。由于雄黄兰常规繁殖为分球繁殖 ,一般 3
年分球 1次 。传统的分株繁殖无法满足市场需求
为了适应市场商品化生产的需求 ,特进行了组织
培养实验 ,初步掌握和总结了该品种的花蕾离体
技术 , 并成功繁殖了球茎万余粒 ,现正在大量扩
繁 。
1　材料与方法
1.1　材料
外植体材料是 2006年 4月引进栽植的健壮
成品植株上幼嫩花蕾 。
1.2　方法
1.2.1　外植体的清洗 、灭菌
成品健壮植株上剪取的长 0.5cm2左右的幼
嫩花蕾 ——— 10%洗衣粉液浸泡 15min—流水冲洗
30min—超净台上 75%的酒精浸泡 30s— 0.1%升
9
＊ 收稿日期:2008-10-10
　作者简介:张文莲(1973—),本科 ,林业工程师,现从事花卉 、苗木的组织培养研究。电话:0971-6272359.
汞浸泡 5min—无菌水涮洗 8次—纵切成 2块 —
伤口向下平接到预备好的培养基中。
1.2.2　基本培养基及培养条件
以 MS为基本培养基 ,分别附加激素 6-BA
(0.5mg· l-1、1.0mg· l-1 、1.5mg· l-1、2.0mg·
l-1)和 NAA(0.1mg· l-1 、0.2mg· l-1)进行不定
芽的诱导及增殖培养;以 MS为基本培养基 ,选择
不同无机盐浓度 ,进行不定根的诱导培养。以上
培养基中均附加蔗糖 30g· l-1 、琼脂 6.4g· l-1 ,
pH值 5.8。
培养条件:温度 20 ±2℃;光照强度 2000 ～
2500lx;光照时数 12h/d。
2　结果与分析
2.1　不同激素浓度及配比对愈伤组织诱导及分
化的影响
花蕾块接种 10d左右 ,基部花托部分变绿膨
大 。约 30d时膨大部分表面出现瘤状突起 , 40d
时逐步分化出不定芽 。具体结果见表 1。
表 1 不同激素浓度对雄黄兰幼嫩花蕾诱导培养的影响
6-BA
(mg· l-1)
NAA
(mg· l-1) 接种数量
外植体诱导率(%)
不定芽诱导率(%) 不定芽生长情况
0.5 0.1 28 51.3 42.9 数量少 、苗弱小 、叶色黄绿 , 根多
1.0 0.1 28 65.4 45.8 数量少 、苗较小 、叶色淡绿 , 根较多
1.5 0.1 28 75.1 53.1 数量较多 、苗健壮 、叶色绿 、根较少
2.0 0.1 28 80.4 64.9 数量多 、苗健壮 、叶色深绿 , 根少
0.5 0.2 28 69.3 51.3 数量少 、苗较小 、叶色淡绿 , 根多粗壮
1.0 0.2 28 75.2 54.5 数量少 、苗较健壮 、叶色绿 , 根较多
1.5 0.2 28 82.7 61.3 数量较多 、苗健壮 、叶色深绿 、根少
2.0 0.2 28 84.4 68.2 数量多 、苗很健壮 、叶色深绿 , 根极少
　　注:接种后 60d观察
　　从表 1可看出 ,雄黄兰花蕾在以上培养基中
既能脱分化诱导出愈伤组织 ,又能再分化诱导出
不定芽 。在 NAA含量不变的情况下 ,其外植体诱
导率与 6-BA含量呈正比;经继续诱导进行再分
化时 , 不定芽诱导率也与 6-BA含量呈正相关。
当生长素 NAA浓度略有增加时 ,诱导出的不定芽
表现良好。由于培养基中还有一定数量的生长素
NAA,所以在分化芽的同时有一定的根系生成 ,但
随着 6-BA含量的增加 ,根系数量减少。
2.2　雄黄兰的增殖培养
根据诱导培养中不定芽增殖中伴有生根现象
存在的试验结果 , 在增殖培养中去除生长素
NAA,通过增殖培养筛选最佳 6-BA浓度 。具体
结果见表 2。
表 2 6-BA含量对增殖培养的影响
6-BA
(mg· l-1)
接种数量
不定芽分化率%
增殖系数 生 长 情 况
0.5 28 81.5 2.8 不定芽及球茎弱小 , 叶色黄绿 ,均有根系生长
1.0 28 85.6 3.5 不定芽及球茎较小 , 叶色淡绿 ,有少量根系生长
1.5 28 92.1 4.7 不定芽健壮 , 球茎较大 ,叶色绿色 , 有个别根系生长
2.0 28 98.3 4.9 不定芽健壮 , 球茎较大 ,叶色深绿 , 没有根系生长
　　注:接种后 40d观察
　　从表 2可看出 ,雄黄兰球茎增殖中需要细胞
分裂素的含量较大 ,当 6-BA为 2mg· l-1时分化
的不定芽健壮 、叶色深绿 ,没有根系生长 ,形成的
球茎较大。所以 ,在雄黄兰的增殖培养中选择 MS
+6-BA2.0mg·l-1为最佳增殖培养基 。
2.3　雄黄兰的生根培养
在雄黄兰的诱导培养和增殖培养中均有根系
生长的现象 ,说明雄黄兰植株含有一定浓度水平
的内源生长素 ,在没有外源生长素存在的情况下
也能生根。因此 ,在雄黄兰的生根培养中通过调
整大量元素的浓度主要研究了无机盐浓度对生根
培养的影响 。具体结果见表 3。
10
表 3 大量元素对雄黄兰生根培养的影响
大量元素 接种数量 生根率(%) 平均根数 瓶苗生长情况
1/4MS 280 94 1-3 苗及球茎较弱小 、叶尖枯黄 ,根数量较少
1/2MS 280 97 3-5 苗及球茎健壮 、叶色深绿 ,根数量较多
MS 280 98 2-5 苗及球茎健壮 、叶色深绿 ,根数量较多
　　注:接种 15d观察。
　　从表 3可看出 ,大量元素的浓度对雄黄兰的
生根率影响不大 ,但对生根苗的生长有一定影响。
当大量元素为 1 /4时其苗叶尖易缺素枯黄;大量
元素减半和不变的情况下 ,其生根苗均生长良好。
因组培苗在 2周内基本能生根 , 15d以内出瓶移
栽易于成活 。选择大量元素减半的培养基作为生
根培养基 ,既保证了较高生根率又降低了雄黄兰
生产成本。
2.4　雄黄兰的炼苗移栽
雄黄兰为球茎花卉 ,在其继代培养中基本形
成了球茎 ,生根后无须诱导球茎生长 。当瓶苗平
均根长达 1 ～ 2cm左右时 ,在温室闭瓶炼苗 3d,开
瓶炼苗 1d后 ,将根部培养基冲洗干净 ,栽入经消
毒处理过的不同基质中。栽植后土壤湿度不宜过
大 ,保持空气湿度不低于 80%,种植后前 7d用
50%遮荫网进行遮盖 , 20d后调查其成活率 ,以植
株直立 、萌发新叶 、根尖明显伸长为幼苗成活的标
准 。调查结果见表 4。
表 4 不同炼苗基质对生根苗炼苗成活率的影响
炼苗
基质
移栽数量
(株)
成活数量
(株)
成活率
(%) 生长表现
国产泥炭 100 90 90 植株直立 、萌发新叶 、叶色深绿 、无干尖现象 、球茎生长明显
黑土 100 78 78 植株直立 、萌发新叶 、叶色绿 、稍有干尖现象 、球茎生长不明显
园土 100 60 60 植株直立 、萌发新叶 、叶色绿 、有干尖现象 、球茎没有生长
珍珠岩 100 45 45 植株直立 、不萌发新叶 、叶尖枯黄 、部分球茎进入休眠
　　由上表得知:在雄黄兰组培瓶苗经过常规驯
化后移栽 ,国产泥炭为较理想的炼苗基质 ,其炼苗
成活率达 90%。
2.5　籽球复壮
通过对雄黄兰的周年繁殖 ,发现冬末春初繁
殖的小球茎炼苗成活后不进入休眠而继续生长 ,
并且炼苗成活后在苗期定植大田后当年就能开
花 。而在秋末冬初繁殖的小球茎易进入休眠 ,只
有采取储藏或保护越冬次年才能萌发生长 。
3　讨论
采用幼嫩花蕾离体培养技术繁殖雄黄兰 ,从
根本上解决繁殖慢需求多的难题 ,在短期内可为
花卉市场提供大量的优质种球。本试验研究表
明:选用 MS+6-BA2.0mg· l-1 +NAA0.2 mg·
l-1培养基 ,其外植体诱导率达 84.4%,不定芽诱
导率达 68.2%,选用 MS+6-BA2.0mg· l-1的培
养基进行增殖培养 ,可得到优良的雄黄兰小种球 ,
球茎增殖系数达 4.9;在 1/2MS培养基中培养
15d球茎生根率达 98%;瓶苗常规驯化后选用国
产泥炭土炼苗 ,成活率在 90%以上;冬末春初繁
殖的生根苗定植大田后当年开花。
参考文献:
〔1〕谭文澄 ,戴策刚.观赏植物组织培养技术〔M〕.北京:
中国林业出版社 , 2001.
〔2〕韦三立.花卉组织培养 〔M〕.北京:中国林业出版社 ,
2000.
〔3〕王家福.花卉组织培养与快繁技术〔M〕.北京:中国林
业出版社 , 2006.
11