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Experimental study on antivirus activity of traditional Chinese medicine

3种中药体外抗巨细胞病毒效应的比较



全 文 :v种中药体外抗巨细胞病毒效应的比较
何超蔓 o闻良珍 3
k华中科技大学 同济医学院 附属同济医院 妇产科 o湖北 武汉 wvssvsl
≈摘要  目的 }探讨中药金叶败毒注射液 !板蓝根注射液 !路边青注射液抗人巨细胞病毒k‹≤  ∂ „⁄ty|l作用
的差异 ∀方法 }采用细胞病变k≤°∞l抑制法观察这 v 种中药对 ‹≤  ∂ „⁄ty| 毒株的抑制作用 ∀使用 ×× 法检测细
胞的损伤程度 o并利用 Α值评价 v种中药的抗 ‹≤  ∂ 的效应 ∀结果 }金叶败毒注射液的半数中毒浓度k×⁄xsl为 us ª
#pt o半数有效浓度kŒ≤xsl为 x qyx ª#pt o治疗指数k׌l为 v qxw ~板蓝根注射液的 ×⁄xs为 ts quv ª#pt oŒ≤xs为 v ª#pt o
׌为 v qwt ~路边青注射液 ×⁄xs为 us quv ª#pt oŒ≤xs为 x qzt ª#pt o׌为 v qxw ∀v种中药均具有抗 ‹≤  ∂ 的作用 o且随
药物浓度的增高其作用也增强 ∀但这 v种中药抗 ‹≤  ∂ 作用的差异无显著性k Ё s qsxl ∀结论 }在 tΒuss o金叶败
毒注射液 !板蓝根注射液 !路边青注射液均具有较强的抗病毒作用 o都是理想的抗 ‹≤  ∂ 中药 ∀
≈关键词  金叶败毒注射液 ~板蓝根注射液 ~路边青注射液 ~抗病毒作用 ~细胞培养 ~巨细胞病毒
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlsx2swxu2sw
人巨细胞病毒k‹≤ ∂l是一种人类疱疹病毒组
的 ⁄‘„ 病毒 ∀ ‹≤ ∂ 感染对免疫正常的个体是良
性过程 o但 ‹≤ ∂ 是宫内感染造成胎儿畸形 !死胎的
重要原因 o同时也是免疫缺陷患者感染致死及器官
移植失败的根源 ∀ ‹≤ ∂ 是引起围生期感染最重
要 !最常见的病原 o发生率占全部活产儿的 t h o超
过 ts h 的先天性 ≤ ∂ 感染的新生儿出生时即表现
感染症状 o大部分患儿没有感染症状 o但无症状性
≤  ∂ 感染者有 ts h ∗ tx h 出现远期神经系统后遗
症 o如智力低下 !耳聋和视觉障碍等≈t  ~闻良珍等≈u 
报道孕妇 ‹≤ ∂ 既往感染率为 {{ q|v h o活动性感染
率为 x qwu h ∀而目前对易感人群 ‹≤ ∂ 感染的预防
及治疗缺乏有效的药物 o祖国传统医药 ) ) ) 中药药
源广泛 o价格低廉 o服用方便 o具有抗炎 !解毒 !抗病
毒 !提高机体免疫功能 !抑菌等作用 ∀本室应用 ≤°∞
法和 ×× 法反映金叶败毒注射 !南板蓝根注射液 !
路边青注射液对 ‹≤ ∂ „⁄ty|毒株液有效的抗病毒
作用以及 v种中药间抗病毒作用的差异有无显著
性 ∀为临床对于巨细胞病毒的治疗和预防提供多种
有效药物参考 ∀
1 材料与方法
≈收稿日期  ussv2ts2s{
≈基金项目  湖北省自然科学基金资助项目kussu„…tvul
≈通讯作者  3闻良珍 oר¯ }ksuzl{vyyutyw oƒ¤¬}ksuzl{vyyuxzt o
∞2°¤¬¯}º ±¨¯¬¤±ª½«¨ ± ƒ «²·°¤¬¯q¦²°
1 q1 材料
1 q1 q1 人胚肺成纤维细胞k‹∞l 由同济医院儿科
临床病毒研究室提供 ∀实验所需细胞代数 z ∗ us
代 ∀细胞生长液为高糖 ⁄∞ 加 ts h新生小牛血
清 otss ®˜#pt青霉素 otss °ª#pt链霉素 ∀细胞维
持液除新生小牛血清为 u h外 o其余同细胞生长液 ∀
1 q1 q2 病毒 ‹≤ ∂2„⁄ty|由湖北省预防医学科
学院病毒研究室提供 o按常规传代 o并测定半数组织
培养感染数量 ×≤Œ⁄xs € tsp v qytw ∀
1 q1 q3 药物 注射用更昔洛韦kŠ≤∂l购自湖北科
益药业股份有限公司 o粉剂 o每支 xs °ªo批号
sus{sx ∀将 Š≤∂ 溶于注射用水中 o配制成 xs ª#浓
度 o临用时用高糖 ⁄∞ 配成不同浓度的溶液 ∀金
叶败毒注射液由同济医科大学附属同济医院制药厂
提供 o针剂 o每支为 t °kt °相当于原生药 t ªl o
批号 sutuvt ∀板蓝根注射液购自江西余江制药厂 o
针剂 o每支 u °ku °相当于原生药 t ªl o批号
susyst ∀路边青注射液购自广东省博罗先锋药业集
团有限公司 o针剂 o每支 u °ku °相当于原生药 u
ªl o批号 susztt ∀临用时用高糖 ⁄∞ 配成不同浓
度的溶液 ∀
1 q1 q4 其他主要试剂及仪器 ××≈v2kw oy2二甲基
噻唑2u2¬¯l2u ox2乙苯基2四唑溴盐 购自 „°µ¨¶¦²公
司 ~二甲基亚砜k⁄≥’l购自 ≥¬ª°¤公司 ~高糖 ⁄∞
购自 ŠŒ…≤’ o新生小牛血清购自 ŠŒ…≤’ 公司 ∀超级
酶标仪 美国 …¬²p × ®¨型号 ∞÷{s{ ∀
#uxw#
第 u|卷第 x期
ussw年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ x
¤¼oussw
1 q2 方法
1 q2 q1 病毒感染性滴度的测定 予以长成单层的
‹∞细胞接种不同稀释度ktsp t otsp u otsp v otsp w o
tsp x otsp y otsp z otsp { otsp |l的病毒 o每个稀释度设
{孔 o每孔 ux ˏovz ε ox h ≤’u培养箱吸附 t «后 o
弃上清 o加维持液 s qt °r孔 o同时设细胞对照孔 {
孔 ~置 vz ε ox h ≤’u培养箱培养 o每日检查病毒生
长情况 o观察并记录特征性细胞病变k≤°∞l的孔数 o
z ∗ u{ §后记录结果 ∀按 • ¨¨§2∏¨±¦«法≈v 计算病
毒的半数感染量k×≤Œ⁄xsl ∀
1 q2 q2 药物细胞毒性试验 将 t ≅ tsx °pt ‹∞细
胞悬液 uss ˏ接种于 |y孔培养板内 o待细胞长成单
层后 o同步化 uw «~用未含抗生素的维持液将 Š≤∂
k药物对照组l稀释成wss ouss otss oxs oux otu qx o
y qux °ª#pt等 z 个浓度 ~将金叶败毒注射液 !南板
蓝根注射液和路边青注射液稀释成 tΒts otΒux otΒ
xs otΒtss otΒuss otΒwss otΒ{ss等 z个浓度 ~将各浓度
药物k每孔 uss ˏl加入培养板 o每个浓度设 w 孔做
实验孔 o同时设正常细胞对照组各 w 孔 ∀ ≠ 置 vz
ε ox h ≤’u培养箱中继续培养 uw «后在倒置显微
镜下观察细胞形态变化 o细胞破坏k≤°∞l记录方
法≈v  }ux h 以下记 n ouy h ∗ xs h 记 n n oxt h ∗
zx h 记 n n n ozy h ∗ tss h 记 n n n n o用 • ¨¨§2
∏¨±¦«法计算药物半数中毒浓度k×⁄xsl和最大无毒
浓度k×⁄sl ∀  细胞 ×× 染色法 }观察药物对 ‹∞
细胞的毒性 ≤°∞结果后 o每孔加入 ×× 染液 us ˏo
置 vz ε ox h ≤’u培养 w «o可见细胞内形成甲赘结
晶 o弃染色液 o加入 ⁄≥’ 每孔 txs ˏo振荡 ts °¬±o
直至甲赘全部溶解后 o在超级酶标仪 w|s ±°测吸光
度kΑl值 o计算各药物浓度时细胞的存活率及 ×⁄xs
和 ×⁄s ∀试验重复 v次 ∀取 v次试验的平均值作为
试验结果 ∀
1 q2 q3 药物体外对病毒增殖的抑制作用 取生长
良好的 ‹∞o将细胞加入|y孔板 o每孔ussˏk约
t ≅ tsx个细胞r孔l ovz ε ox h ≤’u培养箱中培养 uw
«o细胞长成单层 ~同步化 uw «后以每孔约 tss ×≤Œ⁄xs
攻击量攻击细胞 o于 vz ε ox h ≤’u培养箱中吸附 t
«o弃上清 ~将药液以 ×⁄s为最低稀释度作 w个稀释度
分别加入细胞孔中 o每孔 uss ˏo每一稀释度设 w
孔 o同时设立细胞对照组 !病毒对照组 ~更换维持液
隔天 t 次 ~在 vz ε ox h ≤’u培养箱中培养约 ts §o
待病毒对照组细胞病变达到 |s h 时按上述 ≤°∞方
法判断结果 ∀观察药物抗病毒作用的结果后每孔加
入 ××us ˏo继续培养 w «o吸弃上清 o每孔加入 ⁄2
≥’txs ˏo振荡 ts °¬±o在超级酶标仪测 w|s ±°测吸
光度k Αl值 o按下列公式计算细胞存活率并采用
• ¨¨§ ∏¨±¦«法计算半数有效浓度kŒ≤xsl及治疗指数
k׌l ∀试验重复 v次 ∀取 v 次试验的平均值作为试
验结果 ∀
细胞存活率k h l € k试验组 Α值/对照组 Α值l ≅ tss h
׌k h l € ×⁄xsrŒ≤xs
1 q2 q4 统计分析 使用 ≥„≥{ qt专业统计软件进行
数据分析 ∀利用方差分析检验中药组间的效应差
异 o各试验组与病毒对照组间差异性采用 §∏±±¨·. ¶
·2·¨¶·o任意两组间的多重比较采用 ≥‘Ž法 ∀
2 结果
2 q1 病毒感染性滴度
不同滴度下 o病毒感染的判读结果见表 t ∀该
病毒的滴度k×≤Œ⁄xsl为 tsp v qytw ∀
表 t 病毒感染性滴度的测定
病毒
稀释
判读结果 累积值
≤°∞ ‘²±2≤°∞ ≤°∞ ‘²±2≤°∞
感染率 ≤°∞
数r总和
感染率
r h
tsp t { s ux s uxrux tss
tsp u { s tz s tzrtz tss
tsp v y u | u |rtt {t q{
tsp w v x v z vrts vs
tsp x s { s tx srtx s
tsp y s { s uv sruv s
tsp z s { s vt srvt s
tsp { s { s v| srv| s
tsp | s { s wz srwz s
注 }用 • ¨¨ §2∏¨±¦«公式计算 ×≤Œ⁄xs
×≤Œ⁄xs € ≈≤°∞ xs h病毒稀释度 n k  xs h 的百分数 p xslrk 
xs h的百分数 p  xs h的百分数l  ≅ Œªts
2 q2 药物的细胞毒性
Š≤∂ 及金叶败毒注射液 !板蓝根注射液和路边
青注射液对 ‹∞细胞毒性作用表现为 }细胞变大变
圆 o偶见聚集成团 o颗粒增多 !培养液混浊 o折光性改
变并且吸光值明显下降 ∀ Š≤∂ !金叶败毒注射液 !板
蓝根注射液和路边青注射液分别在 xs °ª#pt ots o
x ots ª#pt以内均未见明显的细胞毒性作用 o但经较
高浓度的药物作用后 o细胞死亡数增加 o药物有明显
的细胞毒作用 ~注射用更昔洛韦 wss ouss otss oxs o
ux otu qx oy qux °ª#pt对 ‹∞细胞的细胞存活率
k h l分别为 s ow qux oyz q{ oz| qy o{| qx o|{ otss ~金
叶败毒注射液 !板蓝根注射液 !路边青注射液不同药
#vxw#
第 u|卷第 x期
ussw年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ x
¤¼oussw
物浓度时ktΒts otΒux otΒxs otΒtss otΒuss otΒwss o
tΒ{ssl对 ‹∞细胞的细胞存活率k h l分别为 x qwy o
us qyw oww qy o{z qus o|v qys o|x qys otss ~{ qyv ouv qx o
v| qw ozy o{y qw o|w otss ~tu q|w ouy qw ow{ o{v o|s o
tss otss ∀以上结果经 ≥„≥{ qt专业统计软件进行方
差分析 o各药物不同浓度组与对照组比较k⁄∏±±¨·
检验l oΠ  s qsx o有显著性差异 o同时采用 • ¨¨§2
∏¨±¦«法计算出 Š≤∂ !金叶败毒注射液 !板蓝根注
射液和路边青注射液对 ‹∞细胞的 ×⁄s分别为 xs
°ª#pt ots ox ots ª#pt o×⁄xs分别为 tss °ª#pt o
us ots quv ous quv ª#pt ∀
2 q3 Š≤∂ 及中药对巨细胞病毒增殖的抑制作用
‹≤ ∂ 对 ‹∞的 ≤°∞的表现为细胞肿胀 o变大
变圆 o折光性改变 o胞浆内颗粒增多 ∀将 Š≤∂ 以 xs o
ux otu qx oy qux °ª#pt ~金叶败毒注射液 !板蓝根注射
液和路边青注射液以 tΒtss otΒuss otΒwss otΒ{ss 进
行抑制 ‹≤ ∂ 实验 otΒuss 金叶败毒注射液 otΒuss
板蓝根注射液和 tΒuss 路边青注射液均表现出较强
的抑制病毒对细胞的病变作用 ∀经统计分析 o不同
浓度下各组药物均具有抗病毒作用k除 tΒwss 板蓝
根注射液外l o结果见表 u ∀利用 • ¨¨§2∏¨±¦«法计
算出 Š≤∂ !金叶败毒注射液 !板蓝根注射液和路边青
注射液对 ‹∞细胞的半数有效浓度kŒ≤xsl分别为
tu qx °ª#pt ox qyx ov ox qzt ª#pt ∀同时 o采用前述
的公式可计算出 Š≤∂ !金叶败毒注射液 !板蓝根注射
液和路边青注射液对 ‹∞细胞的治疗指数k׌l分别
为 { ov qxw ov qwt和 v qxw ∀
2 q4 在 Œ≤xs下 ov种中药及 Š≤∂ 抗巨细胞病毒作用
的比较
在Œ≤xs下 o检测 v 种中药和 Š≤∂ 抗巨细胞病毒
的作用 ∀经比较 o发现 v 种中药的抗巨细胞病毒作
用 k Α值 l与 Š≤∂组比较差异均有显著性 k Π 
s qsxl o且 Š≤∂组的平均 Α值最高 o表明中药抗
‹≤ ∂ 作用较 Š≤∂ 弱 ~但各中药组间的抗巨细胞病
毒作用kΑ值l差异均无显著性k Ё s qsxl o说明这 v
种中药的抗 ‹≤ ∂ 效应相似 ∀
结果在 Œ≤xs下 Š≤∂ktu qx °ª#ptl !金叶败毒注
射液kx qyx ª#ptl !板蓝根注射液kv ª#ptl和路边
青注射液kx qzt ª#ptl的抗巨细胞病毒作用分别为
ks qzyy ? s qssxl oks qzuw ? s qss|l oks qy{z ? s qssyl o
ks qy{w ? s qsszl oΠ s qsx ∀
表 u Š≤∂ !金叶败毒注射液 !板蓝根注射液 !
路边青注射液抗病毒效应k Α值l
分组 浓度 Α
细胞对照 s q{ws ? s qsuy
病毒对照 s qxyu ? s qsuw
Š≤∂ xstl s q{ut ? s qstvul
uxtl s qzy| ? s qss{ul
tu qxtl s qzyx ? s qssxul
y quxtl s qx{x ? s qsuy
金叶败毒注射液 tΒtss s q{sz ? s qstvul
tΒuss s qzzu ? s qstyul
tΒwss s qy{z ? s qssyul
tΒ{ss s qx|u ? s qsuxul
板蓝根注射液 tΒxs s q{sz ? s qstvul
tΒtss s qzzu ? s qstyul
tΒuss s qzts ? s qsszul
tΒwss s qy{z ? s qssy
路边青注射液 tΒxs s qzyv ? s qstxul
tΒtss s qzt{ ? s qsszul
tΒuss s qy{w ? s qsszul
tΒwss s qysw ? s qstzul
注 }tl浓度为 °ª#pt o与病毒对照组比 ulΠ s qsx
3 讨论
本研究通过体外实验研究证明了 v种中药金叶
败毒注射液 !板蓝根注射液和路边青注射液具有抗
‹≤ ∂ 作用 ∀在 tΒuss金叶败毒注射液 !板蓝根注射
液和路边青注射液均表现出较强抑制病毒对细胞的
病变作用 o且随药物浓度的增高抑制作用增强 ∀经
统计分析 ov种中药的抗 ‹≤ ∂ 效应相似 ∀虽然金
叶败毒注射液 !板蓝根注射液和路边青注射液对抗
‹≤ ∂ 效果比 Š≤∂ 弱 o但它们具有药源充足 o经济方
便 o毒副作用极小 o患者易接受等优点 ∀
中药金叶败毒注射液主要成分由金银花 !鱼腥
草 !路边青 !蒲公英 w味中草药组成 ∀经过多年的临
床应用及基础研究 o证实该方既能祛邪抗病原微生
物 o抗内毒素 o抗氧自由基 o降低细胞因子水平 ~又能
扶正调整免疫功能 o保护细胞器 o维护细胞钙稳
态≈w ox  ∀与功能主治有关的主要药效学研究显示该
制剂具有抗病毒 !抗菌 !抗内毒素 !解热 !抗炎 !增强
机体免疫功能等作用≈y  ∀大量临床应用证明中药金
叶败毒注射液对许多急性感染性疾病和病毒感染性
疾病有较好的疗效 ∀本研究的体外实验证明 o金叶
败毒注射液能有效抑制 ‹≤ ∂ 在细胞内的繁殖 ∀其
半数有效浓度为 x qyx ª#pt o治疗指数为 v qxw ∀与
病毒组比较 o有显著性差异k Π s qsxl ∀
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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板蓝根味苦性寒 o功善清热解毒 o凉血利咽 ∀目
前板蓝根抗病毒 !抗菌等活性成分也不是很清晰 o有
些学者认为板蓝根中含有效成分嘌呤 !嘧啶及吲哚
等干扰多种病毒 ⁄‘„ o• ‘„ 的复制 o从而抑制病毒
增殖 o起到保护细胞免受损害的作用 ∀现代医学研
究表明 o板蓝根具有很好的抗病毒效应 o但对于其抗
‹≤ ∂ 作用的研究甚少 o其成分中含有靛蓝 !靛玉
红 !Β2谷甾醇 !尿苷 !次黄嘌呤 !尿嘧啶 !青黛酮 !胡萝
卜苷等多种化合物 o其多糖成分可显著的增强免疫
功能 ∀本研究体外实验表明 o板蓝根注射液能有效
抑制 ‹≤ ∂ 在细胞内的繁殖 ∀其半数有效浓度为 v
ª#pt o治疗指数为 v qwt ∀与病毒组比较 o有显著性
差异k Π s qsxl ∀
路边青k又名大青叶l o是常用中药材 o其质脆 o
气微臭 o味稍苦而涩 ∀经试验对多种细菌与病毒有
抑制作用 o具有消炎镇痛 !清热解毒 !凉血清斑 !解热
等功效 ∀本研究体外实验表明 o路边青注射液能有
效抑制 ‹≤ ∂ 在细胞内的繁殖 ∀其半数有效浓度为
x qzt ª#pt o治疗指数为 v qwt ∀与病毒组比较 o有显
著性差异k Π s qsxl ∀
综上所述 o金叶败毒注射液 !板蓝根注射液和
路边青注射液对 ‹≤ ∂ 抑制作用虽然较更昔洛韦
弱 o但其为纯中药制剂 o毒副作用小 o具有安全性 !
选择性高 !疗效高 !价格适宜的特点 ∀本研究为寻求
和探讨中药抗病毒感染的作用提供了可靠的实验依
据 ∀中药究竟何种成分在反映其药效上占主要地
位 o是作用于单一靶点还是作用于不同部位协同地
表现其药效尚不清楚 ∀尚需进一步研究其作用机
理 o以提供更为可靠的资料 o便于临床应用和推广 ∀
≈参考文献 
≈t  ¤½½¤µ²·² × o ∂¤µ¤±¬≥ oŠ∏¨µµ¤ …o ετ αλ. °µ¨±¤·¤¯ ¬±§¬¦¤·²µ¶²©¦²±2
ª¨ ±¬·¤¯ ¦¼·²°¨ ª¤¯²√¬µ∏¶¬±©¨¦·¬²±¶q ϑ Πεδιατρ,usss otvzktl }|s q
≈u  闻良珍 o吴圣楣 o吕绳敏 o等 q三城市孕妇人巨细胞病毒感染及
其母婴传播的流行病学调查 q中华妇产科杂志 ot||y otu kvtl }
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京 }科学出版社 ot|z{ qvw q
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氧自由基代谢的影响 q同济医科大学学报 ot||v ouu k增刊l }
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临床及实验研究 q中国中西医结合杂志 ousss ouskwl }uwx q
Εξπεριµενταλστυδψ ον αντιϖιρυσ αχτιϖιτψ οφ τραδιτιοναλ Χηινεσε µεδιχινε
‹∞ ≤«¤²2°¤±o • ∞‘¬¤±ª2½«¨ ±
( ∆επαρτµεντ οφ Οβστετριχσ ανδ Γψνεχολογψ, Αφφιλιατεδ Ηοσπιταλ οφ Τονγϕι Μεδιχαλ Χολλεγε ,
Ηυαζηονγ Υνιϖερσιτψ οφ Σχιενχε ανδ Τεχηνολογψ, Ωυηαν wvssvs , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ §¬©©¨µ¨±¦¨ ²©¤±·¬¦¼·²° ª¨¤¯²√¬µ¤¯ ¤¦·¬√¬·¼ ²©·«µ¨¨®¬±§¶²©·µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ ° §¨¬¦¬±¨ ¶º«¬¦«
¤µ¨ ·«¨ ¬±­¨¦·¬²±¶²©¬±¼¨ …¤¬§∏o Ραδιξ Ισατιδι󤱧Œ±§¬ª²º²¤¬± √¬·µ²q Μετηοδ :׫¨ ¬±«¬¥¬·²µ¼ ¤¦·¬√¬·¼ ²©·«µ¨¨·µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ ° §¨¬¦¬±¨ ¶
¤ª¤¬±¶·«∏°¤± ¦¼·²° ª¨¯²√¬µ∏¶k ‹≤  ∂ „⁄ty|l ¬±©¨¦·¨§«∏°¤± °¨¥µ¼² ∏¯±ª©¬¥µ²¥¯¤¶·¶k‹∞ƒl º¤¶²¥¶¨µ√ §¨ ¥¼ ¦¼·²³¤·«¬¦ ©¨©¨¦·° ·¨«²§
k≤°∞l ¤±§ ×× ° ·¨«²§¬± √¬·µ²q„¦¦²µ§¬±ª·«¨¬µ√¤¯∏¨ ²© Αo¤±·¬¦¼·²° ª¨¤¯²√¬µ¤¯ ¤¦·¬√¬·¼ «¤¶ √¨¤¯∏¤·¨§q Ρεσυλτ :∞¬³¨µ¬° ±¨·¤¯ ¶·∏§¼ ιν ϖιτρο
¶«²º §¨·«¤··«¨ xs h ·²¬¬¦¬·¼ §²¶¨ k×⁄xsl ²©¬±¼¨ ⁄¨·²¬¬©¼¬±ªo•¤§¬¬Œ¶¤·¬§¬¶µ²²·¤±§Œ±§¬ª²º²¤º µ¨¨ us ots quv ous quv ª#pt µ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼ ~
·«¨ xs h ¬±«¬¥¬·²µ¼ ¦²±¦¨µ·µ¤·¬²± kŒ≤xsl º µ¨¨ x qyx ov ox qzt ª#pt µ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼ ~·«¨ ·«¨µ¤³¨ ∏·¬¦¬±§¨¬k׌l º µ¨¨ v qxw ov qwt ¤±§v qxw µ¨2
¶³¨¦·¬√¨¯¼ qŒ·¶∏ªª¨¶·¨§·«¤··«µ¨¨·µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ ° §¨¬¦¬±¨ ¶«¤§¤±·¬¦¼·²° ª¨¯²√¬µ∏¶¤¦·¬√¬·¼ ¤±§·«¨¬µ ©¨©¨¦·¬±¦µ¨¤¶¨§º¬·«·«¨¬µ¦²±¦¨±·µ¤2
·¬²±q Χονχλυσιον :׫µ¨¨·µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ ° §¨¬¦¬±¨ ¶²©·«¨ ³¤µ¨±·¨µ¤¯ ¶²¯∏·¬²± ²©¬±¼¨ ⁄¨·²¬¬©¼¬±ªo •¤§¬¬Œ¶¤·¬§¬¶µ²²·¤±§Œ±§¬ª²º²¤ «¤√¨
¤±·¬√¬µ¤¯ ¤¦·¬√¬·¼ º«¨ ±·«¨ ¼ ¤µ¨ §¬¯∏·¨§¬± tΒuss q׫¨ ¼ ¤µ¨ ¶¤©¨ ¤±§√¤¯∏¤¥¯¨§µ∏ª©²µ¬±«¬¥¬·¬±ª¦¼·²° ª¨¯²√¬µ∏¶¬±©¨¦·¬²±q
[ Κεψ ωορδσ] ¬±¼¨ …¤¬§∏¬±­¨¦·¬²±~ •¤§¬¬Œ¶¤·¬§¬¶¬±­¨¦·¬²±~Œ±§¬ª²º²¤~¤±·¬√¬µ¤¯ ¤¦·¬√¬·¼~¦¨¯¯ ¦∏¯·∏µ¨ ~«∏°¤± ¦¼·²° ª¨¯²√¬µ∏¶
≈责任编辑 方文贤 
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∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ x
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