全 文 :≈| 黄 阁 o赵怀清 o李发美 q °2°≤ 法测定苦地丁及其复方制 剂中紫堇灵的含量 q沈阳药科大学学报 ousst ot{kyl }wt| q
Πρεπαρατιον ανδ Σιµ υλτανεουσ ∆ετερµινατιον
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¬¶²¯¤·¨ ¤±§³∏µ¬©¼ ¦²µ¼±²¯¬±¨ ¤±§¤¦¨·¼¯¦²µ¼±²¯¬±¨ ©µ²° Χορψδαλισ βυνγεανα ¤±§§¨ √¨¯²³¤µ¨√ µ¨¶¨§2
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[ Κεψ ωορδσ] °2°≤ ~ Χορψδαλισ βυνγεανα ~¦²µ¼±²¯¬±¨ ~¤¦¨·¼¯¦²µ¼±²¯¬±¨
≈责任编辑 李 禾
高效液相色谱法测定进口芦荟药材中
芦荟苷的含量
曹 红 o刘 云
k解放军总后勤部 卫生部 药品仪器检验所 o北京 tsssztl
≈摘要 目的 }建立了测定进口药材芦荟中芦荟苷含量的高效液相色谱法 ∀方法 }采用高效液相色谱法 o以
÷ ≥
2≤t{kw qy °° ≅ uxs °° ox Λ°l为色谱柱 o流动相乙腈2水kuxΒzxl o检测波长 vxx ±° o流速 t qs °#
°¬±p t ∀结果 }芦荟苷在 s qtz ∗ x q| Λª线性关系良好 oρ s q||| | o芦荟苷平均加样回收率为 |{ qy h o ≥⁄ t qvu h
k ν yl ∀结论 }试验结果表明 o该方法准确 !灵敏度高 o重现性好 ∀
≈关键词 芦荟 ~芦荟苷 ~高效液相色谱法
≈中图分类号 u{w qt ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussvlsw2svw|2sv
中药芦荟具有抗肿瘤 !通便 !抗菌等作用≈t o而
芦荟苷为芦荟药材的主要有效成分之一 ∀ 5中国药
典6usss年版一部芦荟项下 o对其有效成分芦荟苷
≈收稿日期 usst2tu2sx
≈通讯作者 ר¯ }kstslyy|w|s{t ƒ¤¬}kstslyv{yy{uy
的含量测定 o采用紫外分光光度法≈u ∀由于芦荟药
材中含有许多蒽醌类及其苷类 o如 }异芦荟大黄素
苷 !大黄酚葡萄糖苷 !芦荟皂草苷 ´和 µ等等≈v ∀
这些物质在采用紫外分光光度法测定含量时 o都会
参与反应 o所以紫外分光光度法测定的结果是一混
合物 o而不是单一组分的芦荟苷 ∀
#|wv#
第 u{卷第 w期
ussv年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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芦荟药材中芦荟苷的含量测定方法 o文献报道
还有高效液相色谱法≈w !紫外分光光度法≈t 及其色
谱2分光光度法≈t 等 o我们采用高效液相色谱法 o用
乙腈2水为流动相进行分离 o现报道如下 ∀
1 仪器与试剂
惠普 °2tsxs四元梯度泵 o°2tsxs ⁄⁄检测
器 o°2ttss自动进样器 o° 化学工作站k美国惠
普l ∀
对照品 }芦荟苷k中国药品生物制品检定所 o
z{z2|sst o供鉴别用l o采用归一化法 o对其纯度进行
了测定 o结果芦荟苷的纯度为 |w qxv h ∀乙腈为色
谱纯 o甲醇等其他试剂均为分析纯 o水为超纯水 ∀
样品 }全国各药品检验所提供并鉴定 ∀
2 方法与结果
2 q1 色谱分析条件
÷ ≥
2≤t{分析柱kw qy °° ≅ uxs °° ox
Λ°l o流动相乙腈2水kuxΒzxl o检测波长 vxx ±° o流
速 t qs °#°¬±p t o柱温 ws ε ∀
按以上色谱条件得到芦荟苷对照品 !库拉索芦
荟k习称老芦荟l !好望角芦荟k习称新芦荟l的分离
色谱图见图 t ∀
图 t 芦荟苷对照品的 °≤ 色谱图
t q芦荟苷k图 u o图 v同l
图 u 库拉索芦荟的 °≤ 色谱图
图 v 好望角芦荟的 °≤ 色谱图
2 q2 供试品溶液及对照品溶液的制备
供试品溶液的制备 取库拉索芦荟粉末k过 x
号筛l约 s qszx ªk或好望角芦荟粉末约 s qt ªl o精密
称定 o置 tss °量瓶中 o加入甲醇适量 o超声提取
vs °¬±o放冷 o用甲醇稀释至刻度 o摇匀 o滤过 o弃去
初滤液 o收集续滤液作为供试品溶液 ∀
对照品溶液的制备 精密称取芦荟苷对照品适
量 o加甲醇制成每 t °含 s qt °ª的溶液 o作为对
照品溶液 ∀
对供试品中芦荟苷色谱峰和对照品中芦荟苷色
谱峰进行光谱扫描 o结果两者光谱吸收图谱基本一
致 o且样品色谱中芦荟苷的色谱峰峰纯度亦符合要
求 ∀
2 q3 样品溶液稳定性试验
取供试品溶液分别于配制后 s ot ov ow ox oy oz o
t| «o依次进样 o照药材的测定法测定 o{次所测得
的芦荟苷峰面积的 ≥⁄为 s q|x h o测定结果表明 o
样品溶液在 t| «内基本稳定 ∀
2 q4 精密度试验
精密吸取芦荟苷对照品溶液 ts Λ o重复进样
z次 o计算精密度 o结果测得 z次峰面积的 ≥⁄为
u quy h ∀
2 q5 线性关系的考察 精密吸取芦荟苷对照品溶
液ks q{x{ °ª#°p tls qu os qx ot ot qx ou qs °o及芦
荟苷对照品溶液ku q|xs ª#p tls qt os qu os qx ot qs o
t qx ou qs °o分别置于 ts °量瓶中 o加甲醇稀释
至刻度 o摇匀 o分别精密吸取各对照品溶液 ts Λo
依次注入高效液相色谱仪 o按上述色谱条件测定峰
面积 o以峰面积积分值为纵坐标 o进样量kΛªl为横坐
标 o绘制标准曲线 o回归方程 Ψ t vxv .tus u Ξ n
w .xzt | , ρ s .||| |u( ν ttl ∀结果表明芦荟苷在
s qtz ∗ x q| Λª呈良好的线性关系 ∀
2 q6 重现性试验
取同一批次的芦荟药材粉末 o提取方法等同 o按
前述高效液相色谱法重复测定样品 z次 o芦荟苷的
平均含量为 y{ q|{ °ª#ªp t o ≥⁄ s qww h k ν zl o
结果表明此法重现性良好 ∀
2 q7 加样回收率试验
精密称取已知含量的同一批芦荟药材粉末 s q
sx ª o精确加入芦荟苷对照品 o按样品溶液的制备
方法操作 o测定其含量 o并计算回收率 o测定结果见
表 t ∀
2 q8 样品测定
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 ts
Λo注入高效液相色谱仪 o依上述色谱条件 o以外标
法计算含量 o测定的样品结果见表 u ∀
#sxv#
第 u{卷第 w期
ussv年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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表 t 样品中芦荟苷加样回收率试验结果
称样量r
ª
相当量
r°ª
加入量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
ξ
r h
≥⁄
r h
s qsys{ w qt|w v qwt z qx|s || qx|
s qsxu| v qyw| v qwt z qsts |{ qxy
s qs{sw x qxwy v qxu | qsut |{ qzu |{ qyw t qvu
s qsysy w qt{s v qzu z q|tt tss qvs
s qsxzs v q|vu v qvv z qtwy |y qxu
s qsxty v qxx| v qx{ z qszu |{ qtv
表 u 芦荟药材中芦荟苷的测定结果k ν vl
送检
单位
品种 批号
含量r h
°≤ 法 药典法
上海所 好望角芦荟 进 z{tvxwksl z qww tv qst
上海所 好望角芦荟 进 z{tvwxktl y qts tu qwy
上海所 好望角芦荟 进 z{tvxvk|l { qvx tv qvy
上海所 好望角芦荟 进 z{tvywkusl w qyz tt qtt
上海所 好望角芦荟 进 z{tvysktyl | qtt tw qwy
上海所 库拉索芦荟 进 z{suys tu q{v y qtt
天津所 库拉索芦荟 ||⁄⁄{vsst≥ us qwu uw qzw
天津所 库拉索芦荟 ||⁄⁄{vss{≥ us qt{ vs qvx
天津所 库拉索芦荟 || {v|st uv qvs wt qv{
国家药监局 库拉索芦荟 无 ut qww u| q||
广州所 库拉索芦荟 |{ 2{vtvw uv qvx wz quv
3 讨论
3 q1 现已有文献报道采用高效液相色谱法测定芦
荟药材中芦荟苷的方法≈w o采用的流动相为甲醇2
s qst °²¯#pt三氟醋酸kuuΒz{l o测定波长为 vx|
±° o而三氟醋酸长期使用对色谱柱不利 o本文对流
动相的选择进行了反复摸索 o发现采用乙腈2水就能
对芦荟苷很好地分离 o在我们的实验中 o采用 ⁄⁄
检测器 o对色谱峰进行光谱扫描 o结果供试品与对照
品均在 vxx ±°处有最大吸收波长 o在我们的实验
条件下 o测定进口芦荟药材中芦荟苷k¤¯²¬±l的含量 o
即可排除干扰 o又能使各组分达到基线分离的效果 ∀
3 q2 实验条件的选择 从提取溶剂和提取条件两
方面来考察 }芦荟苷易溶于吡啶 o溶于冰醋酸 !甲醇 !
丙酮 !水及乙醇中≈v ∀考虑到对芦荟苷的溶解性及
其在流动相中的分配 o我们选择了用甲醇作为溶媒
来溶解芦荟药材 ∀
对提取条件的选择 o我们试验了用甲醇水浴回
流提取 us ovs °¬±ot ot qx «o浸泡过夜及用超声波提
取 us ovs owx °¬±等方法 ∀结果表明 }超声波提取 vs
°¬±和 wx °¬±的方法 o测得的结果芦荟苷的含量明
显高于浸泡过夜所得的芦荟苷的含量 o而水浴回流
提取所得的芦荟苷的含量在 v种提取方法中最低 o
故最终选择了超声波提取 vs °¬±∀
3 q3 由于库拉索芦荟与好望角芦荟中所含有芦荟
苷的量差异较大 o故在选择标准曲线时 o对芦荟苷量
的上下线范围作的比较宽 o取了 tt个点进行测定 o
结果比较满意 ∀
≈参考文献
≈t 阴 健 o郭力弓 q中药现代研究与临床应用kl q北京 }学苑出版
社 ot||v qvw{ q
≈u 中国药典 q一部 qusss qtu| q
≈v 国家医药管理局中草药情报中心站 q植物药有效成分手册 q北
京 }人民卫生出版社 ot|{y qww q
≈w 张永文 o陈玉武 o李克明 q °2°≤ 法测定芦荟中芦荟苷的含
量 q中草药 ot||| ovsk{l }xzz q
∆ετερµινατιον οφ Αλοιν ιν Αλοεσ βψ ΗΠΛΧ
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≈责任编辑 李 禾
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