全 文 ：藿香正气软胶囊对肠屏障功能保护作用的机理研究
谢肄聪 3 o唐 方
k天津医科大学 总医院 o天津 vsssxul
≈摘要  目的 }探讨藿香正气软胶囊对肠屏障功能的保护作用 ∀方法 }•¬¶·¤µ大鼠 xs只 o建立肢体缺血2再灌注模
型 ∀中药组分别于造模前经口给予藿香正气软胶囊 ~肠组织超微结构观察 !肠黏液分泌及肥大细胞量化分析 !测定血
清一氧化氮浓度 ∀结果 }肢体缺血2再灌注后 o肠道屏障功能明显受到损伤和破坏 ∀藿香正气软胶囊可有效减轻肠黏
膜损伤 ~可显著降低大鼠血清 ‘’浓度 ∀结论 }藿香正气软胶囊对肢体缺血2再灌注损伤时肠道屏障功能具有明显的
保护作用 ∀
≈关键词  藿香正气软胶囊 ~肠屏障功能 ~缺血2再灌注 ~一氧化氮 ~肥大细胞
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlsx2swxy2sv
藿香正气软胶囊源自宋代5太平惠民和剂局方6
的藿香正气散 o目前广泛用于现代医学的胃肠型感
冒 !急慢性肠炎等 ∀在前期的研究中 o笔者通过观察
藿香正气软胶囊k‹÷±l对肢体缺血2再灌注大鼠血
浆二胺氧化酶k⁄„’l活性 !血清肿瘤坏死因子kבƒ2
Αl及肠黏膜上皮细胞细胞膜流动性的影响 o表明其
对肠屏障功能具有保护作用≈t  ∀在此基础上 o笔者
进一步观察了藿香正气软胶囊对肠组织超微结构 !
肠黏液分泌量 !肠壁肥大细胞数以及血清一氧化氮
k‘’l浓度的影响 o以期更全面的揭示藿香正气软胶
囊对肠屏障功能保护作用的机制 ∀
1 材料
1 q1 动物 •¬¶·¤µ大鼠 xs只 o雌雄不限 ~平均体重
kuxs ? usl ªo购自军事医学科学院四所 ∀大鼠适应
性平衡饲养 t周后用于实验 ∀
1 q2 试剂 一氧化氮试剂盒由南京建成生物工程
研究所k批号 ussus|uzl出品 ∀
1 q3 药物制备 藿香正气软胶囊有效提取物由中
新药业天津达仁堂制药厂提供 o批号 sutsuu ∀按比
例用 s qt h羧甲基纤维素钠溶液稀释 ∀
1 q4 主要仪器 ’≠ °˜≥ o…÷ p ys光学显微镜 o日
本 ~北航医学图象处理系统 o北京 ~’≠ °˜≥ p ∂≥°
p v显微照相系统 o日本 ~透射电镜 ∞ p tss≥÷ o由
∞’k日本l生产 ~˜∂ p ∂¬¶{xss型紫外分光光度计 o
上海 ~≤ ±¨·µ¬©∏ª¨ x{ts• 型 ∞³³¨ ±§²µ©低温高速离心机 o
≈收稿日期  ussv2s{2uz
≈通讯作者  3谢肄聪 oר¯ }ksuulysvyuzyu
德国 ∀
2 方法
2 q1 模型制备 肢体缺血再灌注模型采用改良的
≠¤¶¶¬± 法≈u 进行造模 ∀所有大鼠进行腹腔注射麻
醉 ∀中药组及模型组麻醉后用橡皮筋结扎大鼠大腿
kvss ª拉力l o使其缺血时间 v «后松开 o再灌注 t{ «
成模 ∀
2 q2 给药与分组 造模前将实验动物随机分为 x
组 o每组 ts只 ∀中药组分为 ‹÷± 低 !中 !高 v个剂
量组 o用量分别为 s qwxx os q{|s ot qvvx ª#®ªpt体重
k相当于临床用量的 ts ous ovs 倍l ~模型组及正常
组 ∀每次灌胃 u °o每日 t次 ∀模型组及正常组给
予等量蒸馏水 o各组连续灌胃 x §∀于实验开始第 y
天 o将模型组及中药组进行肢体缺血与再灌注 ∀正
常对照组不作任何处理 ∀
2 q3 光镜标本制备 再灌注后 t{ «o大鼠断头处
死 ∀在距回肠末端 u ¦°处切取肠组织 o将所取组织
纵行剖开 o浸入 ts h中性福尔马林固定 o脱水 o石蜡
包埋等程序后 o进行特殊染色 ∀
2 q4 黏液染色与结果判断 以阿尔辛蓝过碘酸雪
夫反应k„…2°„≥l染色法显示肠黏膜表层黏液 ∀应用
图象分析系统 o在低倍镜视野下k ≅ tssl每一检体随
机计测 x个视野内黏液物质面积 o计算平均数 ∀由
此计算黏液的面积密度k„¤h l ok黏液物质面积之和
与单位面积之比的百分数l o每组各 ts例 ∀
2 q5 肥大细胞的染色与结果判断 将回肠末端组
织切片 oys ε 烤箱内烘干 { «∀以甲苯胺蓝改良法显
示胞核呈蓝色 o胞质呈紫红色肥大细胞颗粒 ∀应用
#yxw#
第 u|卷第 x期
ussw年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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图象分析系统 o于高倍镜视野下k ≅ wssl o每例检体
随机计数 ts个视野内肥大细胞数 ∀求取平均值作
为每例检体肥大细胞个数 o每组各 ts例 o计数结果
以个数r视野表示 ∀
2 q6 电镜标本制备及观察 每组随机取 u例 o摘取
距回肠末端 t °°v 肠组织 o常规固定 !脱水 !树脂包
埋切片 o于 ∞ p tss≥÷ 透射电镜下观察 ∀
2 q7 血清 ‘’浓度测定 采用硝酸还原酶法 o具体
操作按试剂盒说明书进行 ∀
2 q8 统计学处理 采用 ≥·¤·√¬¨º统计软件 o结果以
ξ ? σ表示 ∀多组间样本均数比较采用方差分析 ∀
3 结果
3 q1 黏液物质染色结果 图 t显示 o光镜下与正常
对照组相比 o模型组因肢体缺血2再灌注肠组织黏液
含量明显减少k Π s qstl ∀而藿香正气软胶囊中 !高
图 t „…2°„≥染色显示回肠黏液含量
„ q正常对照组 o回肠黏液含量丰富 o分布均匀 ~
…q模型组 o回肠黏液分泌量减少 o分布不均 ~ ≤ q‹÷± 高浓度组 o
回肠黏液分泌较模型组增多 o并分布明显改善
图 u 甲苯胺蓝染色显示肥大细胞
„ q正常对照组 ~
…q模型组 o肥大细胞数与正常对照组比较明显增多 ~
≤ q‹÷± 高浓度组 o肥大细胞数与模型组比较显著减少
浓度组黏液含量明显增高k Π s qstl ∀见表 t ∀
3 q2 肥大细胞个数 图 u显示 o模型组肥大细胞数
与正常对照组比较明显增高k Π s qstl o藿香正气软
胶囊高浓度组肥大细胞数与模型组比较显著减少
k Π s qstl ∀见表 t ∀
3 q3 超微结构观察 模型组微绒毛排列不整 o并大
量脱落 ~大量视野可见线粒体肿胀 !扩张 o嵴减少 !断
裂 !消失 o甚至呈空泡状 ∀高尔基体层数减少 o体积
缩小 ∀粗面内质网扩张呈池状或囊泡变 o胞质面附
着的多聚核糖体脱颗粒 ~藿香正气软胶囊高浓度组
上皮细胞超微结构与正常组相近 o微绒毛排列整齐 !
线粒体 !粗面内质网肿胀 !扩张明显改善 ∀
3 q4 血清 ‘’浓度 与正常组比较 o模型组血清 ‘’
浓度显著升高k Π s qstl ~而藿香正气软胶囊中 !高
浓度组血清 ‘’ 浓度较模型组降低 o差异有显著性
k Π s qstl ∀见表 t ∀
表 t 各组间黏液物质面积密度 !肥大细胞个数 !‘’浓度比较k ξ ? σ, ν € tsl
组别 剂量rª#®ªpt „¤h 肥大细胞数r个 血清 ‘’浓度rΛ°²¯#pt
模型组 p s qtw ? s qsv tx qy{ ? u qws yz q{v ? { qsw
正常组 p s quw ? s qsutl { qzy ? s qx|tl v| qy| ? z qz|tl
‹÷± s qwxx s qtx ? s qsx tx qx| ? v qww zs qx| ? ut qz{
s q{|s s qt| ? s qsxtl tv qzx ? u qyt wv qyz ? { quyt ovl
t qvvx s qut ? s qswt oul ts qsv ? u qzxt ov owl vv qtt ? tu qvtt ovl
注 }与模型组比较tl Π s qst ~与低剂量组比较ul Π s qsx ovl Π s qst ~与中剂量组比较wl Π s qst
4 讨论
肠黏膜表面的黏液具有润滑作用 o同时还可阻
止致病菌对黏膜的损伤 o起到对黏膜防御性保护作
用 ∀为此通过特殊染色及面积密度测定对黏液含量
进行对比观察 ∀结果显示 o缺血再灌注导致的黏膜
损伤使黏液含量减少 o黏液面积缩小 ∀给予 ‹÷±
后 o在黏膜上皮细胞损伤改善的同时 o黏液含量也明
显增高 ∀由此可以认为 o‹÷± 对肠黏膜的保护作
用 o还包括通过增强杯状细胞分泌功能 o提高肠道自
身防御体系 ∀
资料报道 o肥大细胞可产生白细胞介素 ¶ !颗粒
细胞2巨噬细胞克隆刺激因子 !肿瘤坏死因子等≈v ow  o
故肥大细胞的升高可导致促炎反应的加剧 ∀通过特
殊染色对肥大细胞进行量化的观察与分析 o发现肠
屏障损伤后肥大细胞数目明显增多 ∀ ‹÷± 可减少
肢体缺血2再灌注模型大鼠的肠壁各层内肥大细胞
数量 o从而抑制 בƒ2Α的释放 o这与笔者前期实验结
果一致≈t  ∀由此说明 ‹÷± 对肠屏障功能的保护作
用是通过减少肥大细胞数量 o抑制细胞因子的释放 o
以减轻相关的病理程度 o达到保护肠屏障的作用 ∀
一氧化氮在器官 !组织的创伤及修复等病理 !生
理过程中也发挥了重要的作用 ∀ ‘’ 的过量生成将
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会对组织 !细胞起到损伤作用≈x  ∀研究表明≈y  בƒ2Α
等细胞因子均可诱生 ‘’ 合成酶 o从而诱生大量的
‘’ ∀创伤后血中 ‘’浓度升高在动物实验及临床试
验中均已得到证实≈z2ts  ∀本试验观察到肢体缺血再
灌注后 o大鼠血中 ‘’u p含量明显升高 ∀但中药干预
大鼠在肢体缺血再灌注后血中 ‘’u p含量较模型组
显著降低 ∀
本实验在前期观测 ⁄„’ oבƒ2Α浓度及肠上皮细
胞膜流动性的基础上≈t  o进一步对肠黏液分泌 !肥大
细胞数及 ‘’浓度等进行观测 o发现 ‹÷± 对肠屏障
功能的保护是多方位 !多靶点立体发挥作用 ∀其作
用既有对肠组织形态 !结构等机械屏障的保护作用 ~
又有抑制细胞因子释放 o加强免疫屏障功能 ~同时可
直接对肠上皮细胞膜起稳定作用 ∀通过研究笔者认
为 o临床应用 ‹÷± o可促进病人胃肠功能恢复 o尽早
恢复肠内营养支持 o从而降低抗生素使用量 o对减少
感染 !电解质紊乱等并发症的发生起到积极的作用 ∀
本研究为其临床应用提供了有利的理论依据 ∀
≈参考文献 
≈t  谢肄聪 o唐 方 q藿香正气软胶囊对肠屏障功能保护作用的实
验研究 q中草药 oussv ovwkvl }uxu q
≈u  ≠¤¶¶¬±   Œo…¤µµ²¶⁄. ≥ „ o°¤µ®¶× Š o ετ αλq²º µ¨¯¬°¥¬¶¦«¨ °¬2
¤2µ¨³¨µ©∏¶¬²±¬±­∏µ¼ ¤¯·¨µ¶ª¤¶·µ²¬±·¨¶·¬±¤¯ ¶·µ∏¦·∏µ¨ ¤±§©∏±¦·¬²±q Βρ ϑ
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Εξπεριµενταλστυδψ ον προτεχτινγ ιντεστιναλ βαρριερ φυνχτιον
οφ Ηυοξιανγ Ζηενγθι σοφτ χαπσυλε
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k Γενεραλ Ηοσπιταλ οφ Τιανϕιν Μεδιχαλ Υνιϖερσιτψ, Τιανϕιν vsssxu , Χηιναl
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¶·∏§¼·«¨ ©¨©¨¦·²© ‹∏²¬¬¤±ª«¨ ±ª´¬¶²©·¦¤³¶∏¯¨²± ³µ²·¨¦·¬±ª¬±·¨¶·¬±¤¯ ¥¤µµ¬¨µq Μετηοδ : ²º µ¨¯¬°¥¬¶2
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¥¨©²µ¨ ¬±²¦∏¯¤·¬²± µ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼q׫¨ ¶°¤¯¯¬±·¨¶·¬±¤¯ «¬¶·²³¤·«²¯²ª¼ ¤±§∏¯·µ¤¶·µ∏¦·∏µ¤¯ ²©µ¤·¶º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨ º¬·«²³·¬¦¤¯ °¬¦µ²¶¦²³¨ ¤±§¨¯ ¦¨2
·µ²±¬¦°¬¦µ²¶¦²³¨ µ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼q ∏¦∏¶º¤¶²¥¶¨µ√ §¨∏±§¨µ„…2°„≥ ¶·¤¬±¬±ªo °¤¶·¦¨¯¯¶º µ¨¨ ¶·∏§¬¨§∏±§¨µ·²¯∏¬§¬±¨ ¥¯∏¨ ¶·¤¬±¬±ªo¤±§¶¨µ∏°
‘’ º¤¶§¨·¨µ°¬±¨ §q Ρεσυλτ : „©·¨µ²º µ¨¯¬°¥¬¶¦«¨ °¬¦µ¨³¨µ©∏¶¬²±o·«¨ ¬±·¨¶·¬±¤¯ ¥¤µµ¬¨µ©∏±¦·¬²± º¤¶¶¨√ µ¨¨ ¼¯ §¤°¤ª¨§q ‹∏²¬¬¤±ª «¨ ±ª´¬
¶²©·¦¤³¶∏¯¨¦²∏¯§¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ µ¨§∏¦¨ ·«¨ ¯¨ √¨¯¶²©·«¨ ¶¨µ∏° ‘’ k Π s qstl qΧονχλυσιον : ‹∏²¬¬¤±ª«¨ ±ª´¬¶²©·¦¤³¶∏¯¨«¤¶¤³³¤µ¨±·³µ²2
·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·²±·«¨ ¬±·¨¶·¬±¤¯ ¥¤µµ¬¨µ©∏±¦·¬²±¬± ²¯º µ¨¯¬°¥¬¶¦«¨ °¬¦µ¨³¨µ©∏¶¬²±µ¤·¶q
[ Κεψ ωορδσ] ‹∏²¬¬¤±ª«¨ ±ª´¬¶²©·¦¤³¶∏¯¨~¬±·¨¶·¬±¤¯ ¥¤µµ¬¨µ©∏±¦·¬²±~¬¶¦«¨ °¬¤µ¨³¨µ©∏¶¬²±~‘’ ~ °¤¶·¦¨¯¯
≈责任编辑 古云侠 
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