全 文 ：鹅不食草挥发油治疗过敏性鼻炎作用机理的研究
刘志刚１，余洪猛２，文三立２，刘玉琳１
（１深圳大学 生命科学学院，广东 深圳 ５１８０６０；
２江西医学院 第一附属医院，江西 南昌 ３３０００６）
［摘要］ 目的：探讨鹅不食草治疗过敏性鼻炎的作用机理。方法：运用豚草花粉过敏原建立豚鼠过敏性鼻炎
的动物模型，通过提取鹅不食草的有效成分，对过敏性鼻炎进行治疗，观察豚鼠鼻黏膜组织形态学的动态病理变
化。结果：过敏性鼻炎阳性对照组鼻黏膜上皮组织充血、水肿，炎性细胞浸润，可见大量中性粒细胞、嗜酸性粒细
胞、淋巴细胞以及肥大细胞，鼻黏膜上皮细胞出现大量溶酶体、细胞器空泡化、细胞核变形，固有层结缔组织细胞结
构紊乱，细胞器呈碎片状。而鹅不食草挥发油治疗组上述变化明显减轻至接近阴性对照组。结论：鹅不食草挥发
油对过敏性鼻炎有明显治疗效果。
［关键词］ 过敏性鼻炎；豚草花粉；动物模型；鹅不食草；鼻黏膜；电镜
［中图分类号］Ｒ２８５５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００５）０４０２９２０３
［收稿日期］ ２００３０８１０
［基金项目］ 国家自然科学基金资助项目（３００７０７０２）
［通讯作者］ 刘志刚，Ｔｅｌ：（０７５５）２６５５８９４１，Ｆａｘ：（０７５５）
２６５５８９４０，Ｅｍａｉｌ：ＬＺＧ＠ｓｚｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
过敏性鼻炎是临床上的常见病和多发病，其发
病率可达 ５％左右［１，２］，严重影响人们的生活和工
作，其病因主要与空气中的花粉、尘螨、真菌等变应
原有关。豚草花粉作为北美地区的主要过敏原［３］，
近２０年来在我国许多地区已成为过敏性鼻炎的主
要病因之一。
近年来国内外不少学者对鹅不食草（又名通天
窍）治疗过敏性鼻炎进行了许多研究，ＮａｉｔｏＫ等报
道了鹅不食草在治疗过敏性鼻炎过程中有减轻鼻阻
塞的作用［４］。陈鹤凤、阎荣军等分别报道了鹅不食
草软膏、浸液在治疗过敏性鼻炎中有较好的治疗疗
效［５，６］。但目前对鹅不食草治疗过敏性鼻炎的研究
大部分仍局限在临床疗效的观察上，而通过建立过
敏性鼻炎动物模型，进一步探讨鹅不食草作用机理
以及观察治疗前后鼻黏膜组织超微结构的动态变
化，尚未见报道。
本研究选用豚草花粉建立过敏性鼻炎动物模
型，以探讨鹅不食草治疗前后鼻黏膜组织形态学的
变化，报道如下。
１ 材料与方法
１１ 实验动物
豚鼠３０只，雌雄各半，体重（４００±５０）ｇ，在清洁
级动物饲养室饲养，由中山大学医学动物实验中心
提供。豚鼠分为正常对照组、阳性对照组、鹅不食草
治疗组（鹅不食草挥发油滴鼻）３组，每组１０只。
１２ 试剂与仪器
０５％地塞米松麻黄素（江西医学院第一附属医
院院内制剂），超声粉碎仪（１５０ｕＳＥ，日本），高速冷冻
离心机（ＪＺ－２１ＢＡＣＫＭＡＮ，德国），荧光分光光度计
（Ｆ３０１０，ＨＩＴＡＣＨＩ，日本），透射电子显微镜（ＴＥＭ－
１００ＣＸ，日本）。
１３ 药物制备
鹅不食草（ＣｅｎｔｉｐｅｄａｍｉｎｉｍａＬ）于夏季采收，经
江西医学院药理教研室形态鉴定后，洗净、晒干，然
后经过蒸馏、石油醚萃取得鹅不食草纯挥发油，配制
成０５％鹅不食草挥发油乳状液。
１４ 豚草花粉变应原液的制备
１４１ 豚草花粉的收集 １０月初于南昌市郊收集
新鲜豚草（三叶裂豚草）花粉。
１４２ 豚草花粉变应原液的制备 豚草花粉１０ｇ，
过８０目筛，与ｐＨ７４的ＰＢＳ缓冲液按１∶２５稀释，在
冰浴条件下匀浆和超声粉碎。然后经高速冷冻离心
机离心３０ｍｉｎ（１５０００ｒ·ｍｉｎ－１），弃上层脂质，即为豚
草花粉变应原。用紫外吸收法［７］（Ｌｏｗｒｙ法）测定蛋
白质含量并稀释至８ｍｇ·ｍＬ－１，－２０℃低温冰箱中
保存备用。
１５ 过敏性鼻炎动物模型的建立
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１５１ 免疫接种 阳性对照组及鹅不食草治疗组
每只豚鼠用豚草花粉变应原液０７５ｍＬ与等量佛氏
完全佐剂（ＦＣＡ）或不完全佐剂（ＦＩＡ）进行人工免疫
接种。第１次采用变应原加佛氏完全佐剂，于腹腔
注射０５ｍＬ，四肢皮下（腋下、腹股沟）各注射 ０２５
ｍＬ共 １５ｍＬ。２周后改为豚草花粉变应原加佛氏
不完全佐剂，每周１次，连续２周；正常对照组以生
理盐水代替抗原，注射方法同致敏组。
１５２ 激发 于第４周末进行鼻腔激发，模型组配
制０５％的豚草花粉变应原生理盐水溶液，用加样
器滴入豚鼠双侧鼻孔（每侧 １０μＬ），每日 １次，连续
５ｄ后改为隔日激发１次（维持）。正常对照组以生
理盐水代替抗原滴鼻。实验组小鼠出现明显打喷
嚏、流清涕、抓挠鼻、面部等症状，而正常对照组无明
显症状和体征。
１６ 治疗
正常对照组在治疗阶段用生理盐水滴鼻，每天
３次，共１５ｄ。阳性对照组：在激发第５天后改为隔
日抗原滴鼻激发 １次（模型维持），同时用生理盐水
滴鼻治疗，每天３次，共１５ｄ。药物治疗组：在激发
第５天后改为隔日抗原滴鼻激发１次，同时用０５％
鹅不食草挥发油滴鼻治疗，每天３次，共１５ｄ。
１７ 形态学观察
鼻黏膜组织病理动态变化的光镜、电镜观察：将
豚鼠于末次局部激发后１５ｈ在４０ｍｇ·ｋｇ－１戊巴比
妥钠麻醉下分别断头处死迅速打开鼻背，取双侧鼻
甲及鼻中隔黏膜，部分鼻黏膜组织放入１０％甲醛溶
液中固定，石腊切片、ＨＥ染色、光镜下观察。部分鼻
黏膜组织迅速放入 ２５％戊二醛溶液中，磷酸缓冲
液浸洗后用 １％锇酸固定、系列酒精脱水、Ｅｐｏｎ８１２
包埋，半薄切片、甲苯二蓝染色、光镜下定位，超薄切
片机超薄切片，醋酸铀枸缘酸铅染色、ＴＥＭ－１００ＣＸ
透射电镜观察。
２ 结果
２１ 正常对照组
鼻黏膜上皮组织结构清晰，可见黏膜上皮层和
固有层（图１Ａ），上皮细胞核规则，位于细胞的基底
部，呈卵圆形。细胞游离缘有许多粗短的微绒毛（图
１Ｂ），细胞内可见丰富的线粒体、粗面内质网、高尔
基体等细胞器（图 １Ｃ）。线粒体体嵴长而密，彼此
呈平行排列，且与线粒体长轴垂直，腔内基质电子密
度中等，粗面内质网发达，呈板层状排列，细胞与细
胞之间以“桥粒”相连。上皮细胞下为基底膜及固有
层，固有层见成纤维细胞及大量的胶原纤维，胶原纤
维呈束状，无炎性细胞浸润。
２２ 阳性对照组 鼻黏膜上皮组织充血水肿，炎性
细胞明显浸润（图 １Ｄ），鼻黏膜上皮细胞结构明显
改变，细胞核变形，不规则，微绒毛减少或消失（图１
Ｅ）。细胞内可见大量溶酶体出现，线粒体肿胀、体
嵴消失、细胞器空泡化，细胞间连接不清晰。固有层
结缔组织细胞结构紊乱，细胞器破坏，成碎片状，胶
原纤维不清晰，排列紊乱（图 １Ｆ）。固有层嗜酸性
粒细胞、肥大细胞、中性粒细胞及淋巴细胞浸润。
２３ 鹅不食草治疗组 鼻黏膜上皮组织结构清晰，
组织仍有充血水肿，但较阳性对照组明显减轻（图１
Ｇ），上皮细胞核规则，呈类卵圆形，微绒毛较阴性对照
组无明显变化（图１Ｈ）。细胞内线粒体不肿胀，但体
嵴减少、变短，细胞与细胞之间以“桥粒”相连（图 １
Ｉ）。同时可见含大量分泌性颗粒的杯状细胞，基底膜
结构未见明显改变。固有层见成纤维细胞及大量的
胶原纤维，胶原纤维呈束状分布，可见淋巴细胞浸润。
图１ 鹅不食草治疗过敏性鼻炎组织病理变化的观察
Ａ正常对照组；Ｂ正常对照组；Ｃ正常对照组；Ｄ阳性对照
组；Ｅ阳性对照组；Ｆ阳性对照组；Ｇ鹅不食草治疗组；Ｈ鹅不
食草治疗组；Ｉ鹅不食草治疗组
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３ 讨论
鹅不食草，别名地胡菽、又名通天窍，其味辛、性
温，有祛风、散寒、通窍之功。近年来国内外不少学
者运用鹅不食草治疗过敏性鼻炎取得了良好疗效，
并积累了丰富的经验［５，６］。余洪猛等报道鹅不食草
挥发油组在治疗过程中症状逐渐得到控制，嗜酸性
粒细胞在外周血、鼻分泌物、鼻黏膜组织中明显减
少，黏膜组胺含量也明显少于阳性对照组［８］。
本实验形态学观察可见阳性对照组鼻黏膜上皮
细胞出现明显的病理变化。细胞核变形、细胞器空
泡化、线粒体肿胀、体嵴消失、溶酶体大量出现，固有
层结缔组织细胞结构紊乱，大量淋巴细胞、嗜酸性粒
细胞、肥大细胞浸润，这与ＹｅｎＣＨ等报道的结果一
致［９］。阳性对照组淋巴细胞大量浸润，与 Ｔｈ２辅助
细胞在过敏性鼻炎的迟发反应期调节嗜酸性粒细
胞、嗜碱性粒细胞和中性粒细胞的募集和其他效应
细胞的活性起重要作用［１０］。鹅不食草挥发油治疗
组鼻黏膜上皮细胞结构清晰、细胞器未见破坏，固有
层胶原纤维呈束状、可见淋巴细胞浸润，未见嗜酸
性粒细胞和肥大细胞。提示鹅不食草挥发油可能有
调节细胞免疫、抑制 Ｔｈ２细胞及细胞因子的产生、
阻止以ＴＨ２ＩｇＥ肥大细胞 （嗜碱性粒细胞）嗜酸
性粒细胞为轴心的免疫反应，从而减轻鼻黏膜组织
病理损伤作用。
本实验证实鹅不食草挥发油对豚鼠过敏性鼻炎
治疗中能显著抑制嗜酸性粒细胞和肥大细胞的产
生、减轻鼻黏膜组织的病理学变化，而且在较长时间
的治疗过程中未造成对鼻黏膜的损害。因此鹅不食
草挥发油是治疗过敏性鼻炎的一种较有前途的药
物，应进一步分离、纯化其挥发油的有效成分，加强
其治疗作用机理研究。
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ＬＩＵＺｈｉｇａｎｇ１，ＹＵＨｏｎｇｍｏｎｇ２，ＷＥＮＳｈａｎｌｉ２，ＬＩＵＹｕｌｉｎｇ１
（１ＣｏｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＳｈｅｎｚｈｅｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｚｈｅｎ５１８０６０，Ｃｈｉｎａ；
２ＦｉｒｓｔａｆｉｃｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＪｉａｎｇｘｉＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，Ｎａｎｃｈａｎｇ３３０００６，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｈｅａｉｍｏｆｔｈｉｓｓｔｕｄｙｗａｓｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆＣｍｉｎｉｍａｉｎｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆａｌｅｒｇｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓ
Ｍｅｔｈｏｄ：ＡｎａｌｅｒｇｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｉｎｄｕｃｅｄｂｙｒａｇｗｅｅｄｐｏｌｅｎｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄＡｆｔｅｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｗｉｔｈａｎａｃｔｉｖｅｅｘｔｒａｃｔｏｆＣｍｉｎｉｍａ，
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ｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｒｅａｐｐｅａｒａｌａｒｇｅｎｕｍｂｅｒｏｆｌｙｓｏｓｏｍｅｓｉｎｔｈｅｎａｓａｌｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍｗｉｔｈｏｒｇａｎｅｌｅｓｖａｃｕｏｌａｔｅｄａｎｄｎｕｃｌｅｕｓｄｅｆｏｒｍｅｄＣｅｌｓｉｎｔｈｅ
ｐｒｏｐｅｒｌａｍｉｎａｏｆｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅｔｉｓｓｕｅｗｅｒｅｄｉｓａｒａｎｇｅｄｗｉｔｈｏｒｇａｎｅｌｅｓｄａｍａｇｅｄ，ａｎｄｔｈｅｒｅｗａｓａｌｓｏｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｏｆｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｓａｎｄｍａｓｔｃｅｌｓｉｎｔｈｅ
ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅｔｉｓｓｕｅＨｏｗｅｖｅｒ，ｉｎｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐｒｅｃｅｉｖｉｎｇＣｍｉｎｉｍａｅｘｔｒａｃｔ，ｔｈｅｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｍｅｎｔｉｏｎｅｄａｂｏｖｅｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ
ｄｅｃｒｅａｓｅｄＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｃｍｉｎｉｍａｉｓｅｆｅｃｔｉｖｅｉｎｔｒｅａｔｉｎｇａｌｅｒｇｅｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓ
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ａｌｅｒｇｅｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓ；ｒａｇｗｅｅｄｐｏｌｅｎ；ａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌ；Ｃｅｎｔｉｐｅｄａｍｉｎｉｍａ；ｎａｓａｌｍｕｃｏｓａ；ｔｒａｓｍｉｓｓｉｏｎｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ
［责任编辑 古云侠］
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