全 文 ：#研究论文 #
快速筛选金钱松内生真菌抗真菌活性的研究
何 佳 tou o陈 钧 t3 o赵启美 tou o祁红兵 t
kt1江苏大学 食品与生物工程学院 o江苏 镇江 utustv~
u1河南科技大学 食品与生物工程学院 o河南 洛阳 wztssvl
≈摘要   目的 }筛选金钱松内生真菌抗病源真菌的活性菌株 ∀方法 }首次对金钱松内生真菌进行了分离 o以稻
瘟霉 ΠψριχυΛαρια ορψζα °2u¥为筛选模型 o采用微量稀释法筛选金钱松内生真菌抗真菌活性 o研究其抗病源真菌的能
力 ∀结果 }金钱松内存在着大量且具有抗稻瘟霉 °2u¥活性的内生真菌 o占内生真菌总数的 ww1{h ∀其中 vtwo
vuv可诱导稻瘟霉 °2u¥菌丝念珠状 !膨大变形 ovuw可抑制孢子萌发 o它们对红色毛癣菌 Τριχηοπηψτον ρυβρυµ !新
型隐球菌 Χρψπτοχοχχυσ νεοφορµ ανσ!白色念珠菌 Χανδιδα αλβιχανσ等病源真菌都具有强烈的活性 ∀结论 }金钱松内生
真菌是潜在的抗真菌药物资源 ∀
≈关键词   金钱松 ~内生真菌 ~稻瘟霉 ~活性筛选 ~病源真菌
≈中图分类号   ≥ xyz ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukussylut2tzx|2sx
≈收稿日期   ussy2sv2u{
≈基金项目   江苏省 ussw年度博士研究生创新计划项目
k¬°sw2xzl
≈通讯作者   3 陈钧 o∞2°¤¬¯}¶«¦«¨ ±ƒ ∏­¶1 §¨∏1¦±
金钱松 Πσευδολαριξ καεµ πφερι Š²µ§1为我国特有
单属种植物 o属孑遗植物 o含有二萜类 !三萜类 !三萜
内酯及甾醇类等成分 o具有抗真菌 o抗生育 o抗肿瘤
等活性 ≈t2v  o应用前景广阔 o但有限的植物资源已成
为开发其活性产物的巨大障碍 ∀近年来发现 o植物
内生真菌能产生大量新的天然产物 o有些内生真菌
还可以产生与宿主植物相同或相近的代谢产物 o是
新的天然产物重要来源 ≈w2y  ∀东京大学宕崎成夫以
稻瘟霉 ΠψριχυΛαρια ορψζα °2u¥为模型筛选海洋真菌
活性成分时发现 o以菌丝念珠状 !膨大变形及孢子萌
发抑制为指标筛选抗真菌活性成分 o和以菌丝卷曲
变形为指标筛选抗肿瘤活性成分是可行的 ≈zo{  ∀本
研究对金钱松内生真菌进行了分离 o将稻瘟霉 °2u¥
模型引入内生真菌抗真菌活性筛选中 o对活性菌株
抗病源菌能力进行了研究 o旨为开发新的抗真菌药
物提供新思路 ∀
1 材料
111 样品
金钱松 Π1καεµ πφερι枝和叶采摘于江苏大学校
内 o由江苏大学药学院欧阳臻博士鉴定 ∀
112 筛选模型菌株及指示菌
稻瘟霉 ΠψριχυΛαρια ορψζαε °2u¥菌株由沈阳药科
大学姚新生院士提供 ~红色毛癣菌 ×µkΤριχηοπηψτον
ρυβρυµ l!新型隐球菌 ≤±kΧρψπτοχοχχυσ νεοφορµ ανσl!
白色念珠菌 ≤¤kΧανδιδα αλβιχανσl由江苏大学医学
技术学院提供 ∀
113 培养基
马铃薯葡萄糖液体培养基配方为马铃薯 ush !
葡萄糖 uh o其中加入 t1xh 琼脂为固体培养基
k°⁄„lo加入 txs Λª# °pt青霉素钾和 tus Λª#
°pt硫酸链霉素为双抗培养基 ~水琼脂双抗固体培
养基为琼脂 t1xh otxs Λª# °pt青霉素钾和 tus
Λª# °pt硫酸链霉素 ~沙保氏培养基 k南京博尔迪
生物科技有限公司 l∀
114 试剂与药品
氯化三苯四氮唑 k××≤ lk上海试剂三厂 l~次氯
酸钠溶液 k活性氯含量 x1uh lo二甲基亚砜 k⁄ 2
≥’lo׺¨¨ ± {sk国药集团化学试剂有限公司 l~青霉
素钾 o硫酸链霉素 k华北制药有限公司 l~两性霉素
… k„°…o≥∏±¶«¬± 公¨司 l∀
115 仪器
‘¬®²± ×≥tss倒置显微镜 ~上海跃进集团 ≥°÷ p
uxs…生化培养箱 ~上海福玛试验设备有限公司 ± ≠ ≤
p utt摇床 ~苏净集团 ≥• p ≤p uƒ⁄超净工作台 ~
#|xzt#
第 vt卷第 ut期
ussy年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto Œ¶¶∏¨ ut
‘²√ °¨¥¨ µo ussy
≤²µ±¬±ª|y孔微量板 ∀
2 方法
211 内生真菌的分离纯化
用自来水将无病害金钱松的茎 !叶冲洗干净 o将
茎剪成 x ¦°长小段 o再用 zxh乙醇浸泡 u °¬±o次
氯酸钠溶液浸泡 u ∗ us °¬±o无菌水冲洗 w次 o无菌
纱布蘸干 ∀按无菌操作方法将茎剪成 s1x ¦°小段 o
去除木质部 o保留韧皮部 ~将叶剪成 s1x ¦°小片 ∀
把处理过的韧皮部和叶片种植于马铃薯葡萄糖双抗
固体培养基 !水琼脂双抗固体培养基平板中 ∀ u{ ε
培养 o待茎 !叶切面处长出菌丝后 o挑取其尖端部分
移至新的 °⁄„培养基上 o经几次纯化后 o即得到金
钱松的内生真菌 o编号 o备用 ∀为检验表面灭菌的效
果 o将 °⁄„平板与上述表面灭菌的完整茎段和叶
片接触 x °¬±o u{ ε 培养 x §o若平板上无菌落出现 o
证明材料表面灭菌彻底 o否则 o分离结果不能使用 ∀
212 内生真菌代谢产物粗提物制备
于 uxs °的三角瓶中加入 xs °马铃薯葡萄
糖液体培养基 o分别将内生真菌接种在培养液中 ou{
ε 摇床 ktus µ# °¬±pt l振荡培养 y ∗ z §∀将内生真
菌发酵液在 pzs ∗ us ε 条件下冻融 v次 ≈|  o以释放
胞内产物 o过滤去菌丝体 o滤液冷冻干燥 o甲醇浸提 ∀
挥干提取液中的甲醇 o至衡重 o称重 o将提取物溶于
v °甲醇 o即为甲醇粗提液供试样品 ∀
213 抗真菌阳性药物溶液制备
参考 ‘≤≤≥ v{2„≈ts 方案 o先用 ⁄ ≥’溶解两
性霉素 …o再用无菌水稀释成含 tsh ⁄ ≥’的 u sss
Λª# °pt两性霉素 …原液 o p zs ε 保存 o使用时稀
释 o使 ⁄ ≥’终浓度低于 th ∀
214 稻瘟霉模型筛选 ≈z 
21411 稻瘟霉培养及孢子悬液制备 菌种接种在
°⁄„斜面上 ou{ ε 培养 tu ∗ tw §∀每个斜面加无菌
水 ts °o刮下孢子 o振摇片刻 o用 w层纱布过滤 o
镜检调整至孢子数为 w ≅ tsw ≤ƒ˜# °pt k≤ƒ˜o菌
落形成单位 lo孢子液中加沙保氏液体培养基 ∀
21412 活性筛选 将 ts ˏ各样品甲醇粗提液分
别加入 |y孔微量板中 o挥干甲醇后 o每孔加无菌水
ts ˏ~以甲醇为阴性对照 o阴性对照孔每孔加甲醇
ts ˏo挥干后 o加无菌水 ts ˏ~空白对照孔每孔加
ts ˏ无菌水 ∀所有孔加孢子悬液 ws ˏo每孔总体
积 xs ˏ∀ w ε 低温放置扩散 u «ou{ ε 培养 t{ «∀
重复 v次 ∀在倒置显微镜下观察稻瘟霉孢子萌发 !
菌丝生长及形态变化情况 ∀
根据初筛结果 o采用微量稀释法对活性菌株进
行复筛 ∀ |y孔微量板每列 t ∗ z孔分别加入 usotxo
tso{oyowou ˏ各甲醇粗提物样品 o挥干甲醇后 o每
孔加无菌水 ts ˏ~以二倍系列稀释的两性霉素 …
为阳性对照药品 o每孔加 ts ˏo使阳性对照 t ∗ {
孔终浓度为 us ∗ s1tx Λª# °pt ∀其余操作同前 ∀
215 活性菌株抗病源真菌试验
根据复筛选结果 o参考 ‘≤≤≥ v{2„和  uz试
验方案 ≈tt  o测定各活性内生真菌对病源菌抗菌效果 ∀
21511 病源菌菌悬液制备 红色毛癣菌在沙保氏
斜面上 u{ ε 培养 z ∗ tw §o产生孢子 o加入含有
s1th ׺¨¨ ± {s的沙保氏液体培养基制备悬液 o悬
液静置 v ∗ x °¬±后 o大颗粒沉于底部 o取上层均质
液体 k含孢子以及菌丝片段 l至无菌试管 o振荡 x ¶o
镜检 o用沙保氏液体培养基调整菌悬液浓度 w ≅ tsw
≤ƒ˜# °pt ∀用沙保氏斜面活化新型隐球菌 !白色
念珠菌 o以沙保氏液体培养基稀释至菌含量为
s1u ≅ tsw ∗ t ≅ tsw ≤ƒ˜# °pt ∀
21512 抗病源菌试验 采用微量稀释法进行抗菌
试验 o样品处理方法同复筛 o所有孔加病源菌菌悬液
ws ˏo每孔总体积 xs ˏ∀红色毛癣菌 vx ε 培养
zu «∀新型隐球菌 !白色念珠菌培养 w{ «后 o每孔加
入 s1uxh ××≤ x ˏo继续培养 v «∀重复 v次 ∀用
肉眼和倒置显微镜观察培养孔 o以未见红色毛癣菌
生长的最低样品浓度为其最小抑菌浓度 k Œ≤ lo以
新型隐球菌 !白色念珠菌培养孔不呈现红色的最低
样品浓度为其  Œ≤o两性霉素 …的  Œ≤值判定为没
有可见生长的最低药物浓度 ≈ts  ∀
3 结果与讨论
311 内生真菌分离结果
金钱松属落叶松 ox月发芽 ott月落叶 ∀根据菌
落培养特征 o先后 w次共从金钱松茎和叶中分离出
内生真菌出 tsx株 o分离结果见表 t∀结果表明 }金
钱松体内存在内生真菌且种类繁多 !十分丰富 o菌株
数量随气温的升高而增加 o茎 !叶中均有分布 o叶中
的内生真菌数量明显少于茎中 ∀
312 活性菌株的初筛选
经反复筛选 o从 tsx株内生真菌中筛选出 wz株
粗提物原液对稻瘟霉孢子具抗菌活性的菌株 o活性
菌株占总分离菌株的 ww1{h o其中 tu株使孢子不

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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto Œ¶¶∏¨ ut
‘²√ °¨¥¨ µo ussy
表 t 金钱松内生真菌的分离结果
分离日期 来源于茎 r株 来源于叶 r株 合计
x月 z t {
y月 vs p vs
{月 ws p ws
ts月 tz | uy
注 }/ p 0表示未分离出
能萌发 o占 tt1wh ~|株使孢子略微萌发 o严重变形 o
占 {1yh ~tv株使菌丝生长缓慢 o中度变形 o占
tu1vh otv株使菌丝轻度变形 o占 tu1vh ∀这表明
金钱松内生真菌中存在广泛的抗真菌资源 ∀结合各
菌株的生长特点和抗菌稳定性 o从具强抗菌能力的
菌株中选出 t{ou{outsouwvovtwovt{o
vuvovuwovuyo≠wz等 ts株内生真菌进行进一
步研究 ∀
内生真菌发酵培养后 o发酵液反复冻融 o以释放
胞内产物 o所得甲醇粗提物包括了胞内 !胞外代谢产
物 o避免了对胞内产物的漏筛 ∀从表 u可以看出 o经
xs °培养液发酵 o各菌株的甲醇粗提物产量差距
较大 o最大差距达 ts倍左右 o所以 o在筛选抗菌活性
过程中 o不仅要考虑  Œ≤o也应适当考虑活性成分产
量 o尽量使单位体积发酵液总抗菌能力最大 ∀
表 u 内生真菌发酵液甲醇粗提物产量
内生真菌 粗提物干重 r°ª 粗提物质量浓度 r°ª# °pt
t{ uv{qtw z|qv{
u{ t|{qyy yyquu
uts txvqv xtqt
uwv tz|qxx x|q{x
vtw tusqzx wsqux
vt{ zsqxy uvqxu
vuv x{sqww t|vqw{
vuw t|wqyz ywq{|
vuy tsyquy vxqwu
≠wz x|qyw t|q{{
313 活性菌株的复筛及抗病源真菌的能力
筛选高效低毒抗真菌药物具有重要的临床意
义 o但在初筛时 o往往很难甄别对人和动物体高毒性
的抗真菌样品 ∀ Š¤µ¼ ≥·µ²¥¨ 等¯ ≈tu 认为 }内生真菌和
宿主长期共生 o已形成和谐的共生关系 o由内生真菌
产生的抗真核生物抗生物质 o对宿主植物应该是低

毒的 o否则 o易造成宿主组织死亡 o宿主植物和高等
动物都是真核生物 o因此推测 o对于内生真菌产生的
抗生物质 o宿主植物本身就是一个对高等生物低毒
性抗生物质的筛选系统 ∀宕崎成夫用稻瘟霉模型筛
选的抗真菌剂 ƒ∏¶¤µ¬¨ ¬¯± „可使稻瘟霉菌丝呈念珠
状变形 o它对 ‹ ¨¤ ≥vo‘≤Œ2‹y|细胞株具有很弱的
细胞毒性 o为低毒性抗真菌剂 ≈z  ∀ Š∏±­¬≥等以诱导
稻瘟霉菌体变形为指标 o筛选的 ³²¯¼²¬¬±通过阻止
真菌细胞壁几丁质的合成 o引起稻瘟霉的菌丝和孢
子念珠状 !膨大变形 o对高等动物来说 o是一种选择
性低毒抗真菌剂 ≈tv  ∀因此 o作者认为 o以稻瘟霉 °2
u¥为模型 o筛选植物内生真菌抗真菌活性成分 o得
到选择性低毒抗真菌成分可能性更大 ∀
从表 v 可以发现 o t{o u{o uwvo vtwo
vt{ovuv在高浓度下抑制稻瘟霉孢子萌发 o随着
浓度的降低 o具有使稻瘟霉孢子及菌丝严重变形的
能力 o活性物质浓度和抗菌活性呈正相关 o并具有量
效关系 ∀其中 uwvovtwovuv分别在质量浓度
|1x{ov1uuouv1uu °ª# °pt时使稻瘟霉菌丝表现
出明显的念珠状膨大变形现象 o表明这 v个菌株代
谢产物中可能具有选择性低毒抗真菌物质 ~t{o
u{ovt{在低浓度下使稻瘟霉菌丝呈现卷曲变
形 o表明它们的代谢产物可能具有肿瘤活性成分 o抗
肿瘤活性有待进一步研究 ~utsovuwovuyo≠wz
高浓度下可抑制稻瘟霉孢子萌发 o但浓度降低后不
具抗性 o表明其活性成分不具量效关系 ∀
ts株内生真菌对病源真菌的  Œ≤见表 wot{o
u{ovtwovuvovuw对 v种病源真菌都具有强抗
菌活性 o且抗菌活性与稻瘟霉筛选结果及阳性对照药
物呈正相关 o表明稻瘟霉 °2u¥活性筛选模型对内生
真菌活性产物也具有理想的筛选作用 ∀金钱松内生
真菌代谢产物具有抗真菌活性 o与金钱松抗真菌活性
是否具有相关性值得关注 ∀根据抗菌活性较好的
vtw菌株对各病源菌  Œ≤和阳性对照的  Œ≤及单
位发酵液粗提物产率推算 oxs °发酵液抗 ×µo≤±o≤¤
的能力相当于 yv1szovz1xsovz1uy Λª两性霉素 …∀
表 v 活性菌株对稻瘟霉 °2u¥的抗菌活性
抗性 样品质量浓度 r°ª# °
pt
t{ u{ uts uwv vtw vt{ vuv vuw vuy ≠wz
„°…质量浓度
rΛª# °pt
n |qxv tuquw txqvv tzq|x yqww |qws x{qsw tsqv{ tsqyv zq|x uqx
7 yqvx tys n ttq|z wq{v zqsy vsq|y n n n tqux
6 vqt{ zq|x n |qx{ vquu wqzs uvquu n n n sqvt
注 } n表示抑制孢子萌发 o7 表示孢子略微萌发 o严重变形 o6 表示菌丝生长缓慢 o中度变形
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto Œ¶¶∏¨ ut
‘²√ °¨¥¨ µo ussy
表 w 活性菌株对指示菌的  Œ≤
指示菌 样品  Œ≤ rΛª# °
pt
t{ u{ uts uwv vtw vt{ vuv vuw vuy ≠wz
„°…  Œ≤
rΛª# °pt
×µ yqvx zq|x yqtv wqz| vquu tq{{ zqzw uqys xqyz xq|y tqux
≤± |qxu t|q{z tsquu p tuqsz |qwt x{qsw tuq|{ tsqyv p uqx
≤¤ t{q{{ uyqw| p p tyqts p zzqv| uxq|y p p x
注 } p表示没有测出
4 结论
本研究系统筛选 !研究了金钱松内生真菌抗病
源菌活性 o分离内生真菌 tsx株 o其中 wz株对稻瘟
霉 °2u¥孢子具有活性 o表明金钱松内生真菌中存在
广泛的抗真菌资源 ∀ vtwovuvovuw菌株对 v株
供试病源菌都具有强烈的抗菌能力 o其中 vtwo
vuv使稻瘟霉菌丝呈现念珠状膨变形 o可能含有低
毒性抗真菌成分 ∀关于活性物质基础有待进一步研
究 ∀
稻瘟霉 °2u¥模型对植物内生真菌抗真菌活性
的筛选结果 o与活性菌株 !阳性药物对病源菌的抗性
具有良好的相关性 o这表明筛选方法可靠 !准确率
高 o适用于内生真菌的筛选 ∀
≈参考文献  
≈t  ≤«¨ ± Žo «¤±ª≠ o ¬ o ·¨¤¯1 ≥·µ∏¦·∏µ¨ ¤±§¶·¨µ¨²¦«¨ °¬¶·µ¼
²©³¶¨∏§²¯¤µ²¯¬§¨ o¤±²√¨¯ ±²µ·µ¬·¨µ³¨ ±¨ ¤¯¦·²±¨©µ²° Πσευδολαριξ
καεµ πφερι≈ q ‘¤·°µ²§o t||yo x|ktul} tussq
≈u  ¬÷ ≤o ∞ ¶¯²«¯¼ ‹ ‘q ׺² ¤∏µ²±²¯¶©µ²° Πσευδολαριξ αµ αβιλισ
≈ q ‘¤·°µ²§o t|||o yu kxl}zyzq
≈v  王伟成 o陆蓉发 o赵世权 o等 q土荆皮甲酸和乙酸抗早孕作用
和毒性的比较 ≈ q中国药理学报 ot|||o|kxl}wwxq
≈w  ≥·¬¨µ¯¨ „o ≥·µ²¥¨ ¯Šo ≥·¬¨µ¯¨ ⁄q פ¬²¯ ¤±§·¤¬¤±¨³µ²§∏¦·¬²± ¥¼
פ¬²°¼¦¨¶¤±§µ¨¤±¤¯o ¤± ±¨§²³«¼·¬¦©¤±ª∏¶²©³¤¦¬©¬¦¼¨ º ¦²°2
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≈y  邹文欣 o谭仁祥 q植物内生菌研究新近展 ≈  q植物学报 o
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(t1ΣχηοολοφΦοοδ & Βιοενγινεερινγ , ϑιανγσυ Υνιϖερσιτψ, Ζηενϕιανγ utustv, Χηινα;
u1Σχηοολοφ Φοοδ & Βιοενγινεερινγ , Ηεναν Υνιϖερσιτψ οφ Σχιενχε ανδ Τεχηνολογψ, Λυοψανγ wztssv, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶¦µ¨ ±¨ ¤±·¬©∏±ª¤¯ ¤¦·¬√¬·¼ ²© ±¨§²³«¼·¨¶©µ²° Πσευδολαριξ καεµ πφερι. Μετηοδ : ∞±§²³«¼·¨¶©µ²° Π.
καεµ πφερι º µ¨¨ ¶¨³¤µ¤·¨§q …¼ ° ¤¨±¶²©°¬¦µ²§¬¯∏·¬²± ° ·¨«²§o ¤±·¬©∏±ª¤¯ ¤¦·¬√¨ ±¨§²³«¼·¨¶º µ¨¨ ©¤¶·¶¦µ¨ ±¨ §¨¥¼ Πψριχυλαρια ορψζαε °2
u¥°²§¨ o¯ ¤±§¤¦·¬√¬·¼ ²© ±¨§²³«¼·¨¶¤ª¤¬±¶·³¤·«²ª¨ ±¬¦©∏±ª∏¶º¤¶¶·∏§¬¨§q Ρ εσυλτ: ww1{h ²© ±¨§²³«¼·¨¶¶«²º §¨ ¤¦·¬√¬·¼ ¤ª¤¬±¶·
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≈责任编辑 张宁宁  
≈收稿日期   ussy2sw2tz
≈基金项目   国家科技攻关计划项目 kusst…„zst„yu2swl
≈通讯作者   3 郭巧生 oר¯}ksuxl {wv|yx|t~∞2°¤¬¯}ª´ ¶ƒ
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水蛭及其养殖基地农药与重金属残留分析
郭巧生 3 o刘 飞 o史红专
k南京农业大学 中药材研究所 o江苏 南京 utss|xl
≈摘要   目的 }通过对水蛭药材 !养殖基地土壤 !养殖用水的重金属与农药残留的比较研究 o为水蛭的安全规
范化生产提供依据和实践 ∀方法 }采用等离子发射光谱仪 !原子荧光分光光度计和气相色谱仪对水蛭 !基地土壤和
养殖用水的重金属与农药残留进行了比较分析 ∀结果与结论 }除水蛭药材中铅超出国家现行有关标准外 o水蛭药
材 o养殖基地土壤和养殖用水的六六六 !⁄⁄×和重金属残留各项指标均符合国家标准规定 ∀建议今后在制订国家
有关标准时将类似水蛭类等动物的安全限量单独列出 ∀
≈关键词   蚂蟥 ~水蛭 ~农药 ~重金属 ~残留
≈中图分类号   • u{u1zw ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukussylut2tzyv2sv
水蛭为环节动物门水蛭科动物蚂蟥 Ωηιτµ ανια
πιγρα • «¬·°¤±的干燥全体 ∀随着以水蛭为原料的
中成药及保健产品日渐增多 o蚂蟥的野生资源日益
枯竭 o人工养殖工作已受到业界高度重视 ∀近年来
水蛭的研究多注重于药理和药效及生理方面的比较
研究 ≈t2v  o但有关水蛭中重金属和农药残留的研究未
见报道 ∀本研究运用原子吸收分光光度计 !等离子
发射光谱仪和气相色谱仪对药材蚂蟥生态环境中
水 !土壤中以及药材水蛭本身的重金属与农药残留
进行了比较研究 o为蚂蟥人工养殖及有关标准的制
订提供科学依据 ∀
1 材料
ussw年 y月将野生蚂蟥 Ω1 πιγραk经作者鉴
定 l养殖于南京市江宁区上峰镇水蛭规范化养殖基
地 ∀ ussx年 ts月 tx号自养殖池中随机采捕蚂蟥 o
并按照药典要求用沸水烫死 o晒干 ∀
ussx年 ts月 tx日采集水样和土样 o水样为池
塘养殖用水 o土样为养殖池蚂蟥栖息的土壤 ∀ ussx
年 ts月 t{日 ∗ ts月 vs日检测 ∀
2 方法
211 农药残留量的测定 参照 5中国药典 6ussx年版
一部附录 ¼ ±有机氯农药残留量测定法项下测定 ≈w  ∀
212 重金属残留量的测定 重金属元素按
Š…txyt{x1t1x1u的规定执行 ∀铜 !铅 !镉 !砷 !铬的
测定采用 Œ≤°法测定 o≠ts p yuu p tsu{ ²³·¬°¤wvss
等离子发射光谱仪 ∀汞残留量采用双道原子荧光法
测定 o„ƒ≥ p uusu¤型双道原子荧光光度计 k北京万
拓仪器有限公司 l∀为保证测试数据的准确性与代
表性 o每个样品均设 v个重复 o最后取 v组数据均
值 ∀并取 Α €s1sx水平进行差异显著性分析 ∀
3 结果与分析
311 农药残留量比较 从表 t看出基地所产的水
蛭药材中总六六六农药残留为 |z1w| Λª# ®ªpt o低
于国家 Š…t{wsy1w2usst5农产品安全质量无公害水
产品安全要求 6和 ‘≠ xszv2usst5无公害食品水产
品中有毒有害物质限量 6标准中六六六农药残留量
最高限量 u °ª# ®ªpt ∀基地土壤的六六六为 t1v
Λª# ®ªpt o符合 Š…r× t{wszw2usst5农产品安全质
#vyzt#
第 vt卷第 ut期
ussy年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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