全 文 ： uw q部分木栓细胞表面观可见细密的孔状纹孔
ux q厚化木栓细胞表面观未见纹孔 ~菊糖结晶较多
u„ q杏叶沙参, , , , , , , , , , , , ,
ux q厚化木栓细胞表面观纹孔狭缝状或孔状 ~菊糖
结晶较少 uƒ q天山沙参, , , , , , , , ,
uw q木栓细胞表面观未见或偶见纹孔
uy q部分网纹导管网孔倾斜 o上下面呈交叉状
uŒq川藏沙参, , , , , , , , , , ,
uy q网纹导管未见斜向纹孔
uz q厚化木栓细胞表面观垂周壁不呈连珠
状增厚 o纹孔未见
u…q华东杏叶沙参
, , , , , , , ,
, , , , , , ,
uz q厚化木栓细胞表面观垂周壁常呈连珠
状增厚 o纹孔明显
u{ q乳汁管较多 o有的分泌物呈圆球状
u≤ q宽萼沙参, , , , , , , ,
u{ q乳汁管较少 o分泌物呈颗粒状 ,
u∞q薄叶荠艹尼, , , , , , , ,
注 }生药编号的/ t0表示第一报 o/ u0表示第二报
3 讨论
3 q1 从沙参属植物根的粉末特征可以看出 o基
生叶组厚化木栓细胞偶见 o细胞较小 o壁较薄kv
∗ xΛ°l ~沙参组厚化木栓细胞较常见 o细胞较
大 o壁较厚kt ∗ utΛ°l ~有柄组厚化木栓细胞偶
见k苏南宽萼沙参未见l细胞较大 o壁较厚ku ∗
tzΛ°l ~筒花组厚化木栓细胞较易见k川藏沙参
偶见l o细胞较大 o壁较厚ku ∗ uzΛ°l ∀因此厚
化木栓细胞可作为组间的鉴别特征 ∀
3 q2 杏叶沙参和华东杏叶沙参药材性状和根
的组织构造都非常相近 o难以区别 o两者的粉末
特征也较相近 o但杏叶沙参木栓细胞表面观可
见乳头状突起和细密的纹孔 o而华东杏叶沙参
木栓细胞表面观未见乳头状突起和纹孔 o据此
可对二者进行鉴定 ∀宽萼沙参与苏南宽萼沙
参 o二者生药性状和组织特征也较相似 o区别困
难 o但粉末特征中 o宽萼沙参可见厚化木栓细
胞 o乳汁管中有的内含物呈圆球状 o木薄壁细胞
表面未见交错纹理 ~苏南宽萼沙参未见厚化木
栓细胞 o乳汁管中有的内含物呈颗粒状或圆球
状 o木薄壁细胞表面可见交错纹理 o二者区别较
明显 ∀
3 q3 u|种沙参属药用植物根的粉末显微鉴定
研究表明 o厚化木栓细胞的多少 !形状 o壁的厚
度 !纹孔 o导管的直径 !纹孔 o木栓细胞的垂周壁
弯曲与否 o乳汁管的多少 o分泌物的特征 o菊糖
结晶的多少可作为粉末主要显微鉴别特征 ∀同
时表明粉末显微鉴定可作为沙参类生药种类鉴
别的有效手段之一 ∀
3 q4 商品药材调查表明 o目前沙参大多带皮使
用 o极少数去皮使用 o所以木栓层k包括厚化木
栓细胞l的鉴别特征仍可作为主要鉴别特征 ∀
对于去皮的药材 o可侧重于导管 !乳汁管和菊糖
结晶等特征 ∀
t||x ) tt ) sz收稿
用 • „°⁄分析法鉴定木蓝属生药
张荣 张步振 叶浩
k成都军区昆明总医院药剂科 昆明 yxssvul
摘要 用 • „°⁄分析法对木蓝属 {种生药进行鉴定研究 o结果表明 • „°⁄分析法是一种有效的中
药鉴定方法 ∀
关键词 • „°⁄分析法 木蓝属 鉴定
随机扩增多态性 ⁄‘„k• ¤±§²°¯ ¼ „ °³¯¬2
©¬¨§ °²¯¼°²µ³«¬¦⁄‘„ o • „°⁄l是新发展起来
的一种分子标记方法≈t  o在 |s年代的数年中获
得迅速发展而得到广泛应用≈u ov  ∀该方法与另
一常用的分子标记法 ) ) ) 限制性片段长度多态
性k • ¶¨·µ¬¦·¬²± ƒµ¤ª° ±¨·¨±·« °²¯¼°²µ³«¬¶° o
• ƒ°l类似 o也可检测 ⁄‘„ 多态性 o但检测的
不是限制性片段长度的多态性 o而是 °≤ • 随意
扩增的 ⁄‘„多态性 ∀其分析方法简单 o快速 o
不使用 ≥²∏·«¨µ±杂交 o仅通过 °≤ • 反应就可完
#uz# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 u期
成 o故我们采用 • „°⁄法于生药鉴定研究 o以
探讨直接采用 ⁄„‘对生物类中药进行鉴定的
方法 ∀现将初步结果报道如下 ∀
1 材料 !试剂和仪器
材料 木蓝属植物k见附表l ∀标本由作者
采集在云南省各地 !鉴定 o并存昆明总医院 o实
验材料取地上部分 o晒干备用 ∀
附表 实验材料
编号 名称 产地
t 蒙自木蓝 Ινδιγοφεραε µεντζεανα 蒙自
u 鸡眼草 Ι . στριατα 昆明
v 苍蝇草 Ι . ηανχοχκιι 昆明
w 山皮条 Ι . σζεχηυενενσισ 昆明
x 小苦参 Ι . σενσιτιϖα 大理
y 野青树 Ι . συφφρυτιχοσα 景洪
z 尾叶木蓝 Ι . χαυδατα 景洪
{ 昆明木蓝 Ι . µ αιρει 昆明
试剂 引物为 ts2° µ¨引物 o购自中国科学
院遗传研究所 ∀ פ´ 酶购自美国 °∞公司 ∀
°≤ • 仪 购自美国 °∞公司 o型号为 ° µ¨2
®¬± ∞¯ ° µ¨≤ ·¨∏¶⁄‘„ ׫¨µ°¤¯ ≤¼¦¯¨ µw{s q
2 方法
模板 ⁄‘„ 提取 取 tª材料研碎 o加入
us °¯ 提取缓冲液k{°°²¯r ˜µ¨¤o s qw°²¯r
‘¤≤¯os qsx°²¯r×µ¬¶2‹≤¯o³‹{ qs os qsu°²¯r
∞⁄× „ ou h ¶¤µ¦²¶¼¯ ox h ³«¨ ±²¯ l于 ys ε 保温
vs°¬±o用等体积的氯仿萃取后 o上清液再用等
体积的苯酚2氯仿2异戌醇kuxΒuwΒtl抽提 t次 o
用无水乙醇沉淀后将沉淀的 ⁄‘„ 离心分离 o
再用 zs h酒精洗 u遍 o干燥 o溶于适量 ×∞中 o
冰冻保存 ∀
• „°⁄反应 扩增总体积 uxΛ¯ o其中含
ts°°²¯r ×µ¬¶2‹≤ k¯³‹{ qvl o u qs °°²¯r
ª≤ u¯ o§„×° o§≤ ×° o§× ×° o§Š×°各s qt°°²¯r
o引物为 s quΛ°²¯roxs±ª核 ⁄‘„ ou单位的
פ´ 酶 ∀整个扩增程序为 }|w ε ot°¬±~vy ε o
t°¬±~zu ε ou°¬±~经 ws个循环后 o再在 zu ε
延伸 x°¬±∀扩增产物在 t qw h 的琼脂糖中电
泳 o经 ∞…染色 o紫外灯下观察结果 o照相 ∀
3 结果与讨论
我们对云南木蓝属进行生药学研究后发现
本文所涉 {种植物在云南民间有广泛的药用 o
一般用作消炎 !解毒草药 o但不同的草医各有独
特的用途 o如小苦参在大理常用于抗肿瘤 o尾叶
木蓝在西双版纳常用于治风湿 o昆明有用昆明
木蓝和鸡眼草治肝炎者 o其中有些用途值得深
入研究开发 o但因名称混乱 o生药鉴定困难较
大 o故采用 • „°⁄法对该群生药进行鉴定研
究 ∀对 xs个随机引物进行 °≤ • 扩增 o{个引
物扩增成功 ∀有些扩增结果不显多态性 o而有
些引物扩增结果表明种间差异明显 o如 Β2s{k见
附图l ∀山皮条在 s qy®¥处有一条带 o尾叶木蓝
有一s q|®¥的带 o而小苦参在 s qy ∗ s q|®¥间有
一条带 o很易区别 ∀鸡眼草在 s qy ∗ s q|®¥间有
w条带 o而蒙自木蓝在 s qy ∗ s q|®¥间有 v条带
相区别 o昆明木蓝的 v条带则存在于 s q| ∗ t qx
®¥间 ∀苍蝇草和野青树在 s q| ∗ s qy®¥间都有
两条带 o前者有 t条带接近 s qy®¥o后者有 t条
带接近 s q|®¥o两者的另 t带相近 o也易区别 ∀
参考另外的引物扩增结果就更易进行种间鉴
定 ∀当然各谱带的分子生物学含意必须深入研
究才能明确 o因与本文无直接关系而不论 ∀由
于本研究采用晒干的材料 o极近似实际应用的
生药状态而非固定或新鲜材料 o故证明 • „°⁄
分析法作为鉴定植物类生药是可行的 ∀再由于
不需同位素标记 o故其实际应用价值较高 ∀
附图 {种木蓝属生药的
Β2s{引物扩增的 ⁄‘„指纹图谱
t q蒙自木蓝 u q鸡眼草 v q苍蝇草 w q山皮条
x q小苦参 y q野青树 z q尾叶木蓝 { q昆明木蓝
4 参考文献
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