全 文 ：补阳还五汤对沙土鼠脑缺血再灌注
星形胶质细胞的影响
赖 真t o王沙燕t o耿小茵t o邓常青u o张阮章t
kt q暨南大学医学院 附属第二医院 深圳市人民医院 o广东 深圳 xt{sus ~
u q广州中医药大学 糖尿病研究所 o广东 广州 xtswsxl
≈摘要  目的 }探讨补阳还五汤对脑缺血再灌注后星形胶质细胞k„≥l的影响 ∀方法 }采用沙土鼠双侧颈动脉
夹闭脑缺血模型 o于脑缺血 tx °¬± !再灌注 uw «和 w{ «后 o运用免疫组织化学技术观察星型胶质纤维酸性蛋白
kŠƒ„°l的动态表达 ∀结果 }缺血 tx°¬±再灌注 uw «后 oŠƒ„°免疫阳性反应达高峰 o补阳还五汤可使 Šƒ„°免疫
反应减轻 ~缺血 tx °¬±再灌注 w{ «后 Šƒ„°表达减弱 o补阳还五汤可使其增强 ∀结论 }补阳还五汤对脑缺血再灌
注后星形胶质细胞的调节作用可能与脑缺血损伤后神经功能的恢复有关 ∀
≈关键词  补阳还五汤 ~脑缺血 ~星形胶质细胞
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussults2szyv2sv
补阳还五汤是治疗中风的常用方 ∀以前的研究
证实 o该方通过减轻自由基的毒害 !调节 × ÷ „ur
°ŠŒu平衡 !防止脑内钙积聚≈t 及降低兴奋性氨基酸
等机理来对抗脑缺血再灌注后的脑损伤作用 ∀星形
胶质细胞是在 t|世纪后期被命名的 o它参与中枢神
经系统内神经元功能的调节 o在维持神经元的生存
微环境中起着重要的作用 ∀我们用沙土鼠制成脑缺
血再灌注模型 o观察补阳还五汤对脑缺血再灌注后
星形胶质细胞的影响 ∀
1 材料与方法
1 q1 药物 补阳还五汤由黄芪 ys ª!赤芍 | ª!川芎
y ª!当归 | ª!地龙 | ª!桃仁 | ª!红花 | ª组成 ∀上
述药物由本院药剂科一次性购齐并鉴定 o各药按比
例混合 o按水煎醇沉法制备成注射剂 o生药含量为 u
ª#°p t o用时以生理盐水稀释成 s qw ª#°p t ∀
1 q2 实验动物及分组 沙土鼠体重 ys ∗ zs ªo为蒙
古沙土鼠 o雌雄兼用 o由卫生部上海生物制品研究所
购进 o合格证号为医动字第 su2ut2{号k上海市医学
实验动物管委会颁发l ∀沙土鼠随机分为假手术对
照组k假手术组l !模型对照组k模型组l !补阳还五汤
组 ∀各组动物雌雄比例相近 ∀
1 q3 动物模型 补阳还五汤组腹腔内注射补阳还
≈收稿日期  ussu2st2ut
≈基金项目  广东省中医药管理局科研项目k||ytzl
≈通讯作者  电话 }kszxxluyuxwu{
五汤 w qs ª#®ªp t ∀模型组和假手术组腹腔内注射等
量生理盐水 ∀次日缺血实验前同前给药 t次 ∀给药
后 vs °¬±o各组动物腹腔内注射盐酸氯氨酮 ys °ª#
®ªp t麻醉 o分离暴露双侧颈总动脉 ∀除假手术组外 o
各组以无创性动脉夹夹闭颈两侧总动脉 o造成脑缺
血 ∀缺血 tx °¬±后各组均处死两只动物 o取脑检
测 ∀其余动物缺血 tx °¬±后松开动脉夹 o再灌流 o
缝合皮肤 o继续饲养 ∀各组均于再灌注后 tu ouw ovy
«同前腹腔内注射药物或生理盐水 o并分别于再灌
注后 uw «!再灌注后 w{ «快速断头取脑 o常规石蜡
包埋 ∀
1 q4 免疫组化染色
1 q4 q1 实验试剂 Šƒ„°多克隆抗体 o≥°|sss试
剂药盒及 ⁄„…显色药盒 o均购于北京中山生物公
司 ∀
1 q4 q2 免疫组化实验步骤 标本制作 }上述各组动
物在预定时间断头处死 o迅速取脑 o常规脱水 !石腊
包埋 ox Λ°厚度切片 o进行 ‹∞染色 ∀免疫组化 }将
组织切成 x Λ°厚的切片 o经二甲苯脱水 o以 t qx h
过氧化氢甲醇溶液阻断内源性过氧化酶 tx °¬±后 o
用 u h正常山羊血清孵育 tx °¬±o然后与多克隆兔
抗 Šƒ„°抗体于 vz ε 反应 t «o其后按试剂说明书
程序进行操作 ∀
采用 ⁄„…显色 o以苏木精对染 o并以中性树胶
封片 ∀
#vyz#
第 uz卷第 ts期
ussu年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o‘²qts
’¦·²¥¨µqoussu
2 结果
2 q1 细胞形态学观察 脑缺血 tx °¬±后立即处死
的各组在形态上无明显变化 ∀在缺血 uw «后 o假手
术组未见明显异常 o但模型组在海马区锥体细胞可
见胞浆深染 !缩小 o细胞核固缩 o细胞周围间隙普遍
增大 o而补阳还五汤组病理改变均较模型组轻 o仅少
数锥体细胞胞浆深染 o细胞核固缩 ∀
2 q2 Šƒ„°免疫组化染色结果 脑缺血立即处死
的各组 Šƒ„°免疫细胞化学染色阴性 ∀缺血再灌注
uw «后 o假手术组可见极少量表达 o而模型组在海马
区表达达高峰 oŠƒ„°免疫染色强阳性 ~补阳还五汤
组 Šƒ„°免疫染色呈轻 ∗ 中度阳性 o与模型组相比
表达明显减弱 o提示补阳还五汤可抑制缺血再灌注
uw «后 Šƒ„°的过度表达 ∀再灌注 w{ «后 o假手术
组无明显变化 ~模型组 Šƒ„°免疫染色呈中度阳性 o
与再灌注 uw«比较表达减弱 ~补阳还五汤组免疫染
色稍有增强 o呈中度阳性 o说明补阳还五汤对缺血再
灌注 w{ «后 Šƒ„°表达不仅无抑制作用 o相反促使
其表达增强k图 t ∗ xl ∀
图 t 缺血再灌注 uw «假手术组 Šƒ„°的免疫染色 ≅ uss
假手术组 Šƒ„°免疫细胞化学染色阴性
图 u 缺血再灌注 uw «模型组 ≅ uss
模型组 Šƒ„°免疫染色强阳性 ~
在海马区可见大量 Šƒ„°免疫反应阳性细胞
图 v 脑缺血再灌注 uw «补阳还五汤组 ≅ uss
补阳还五汤组 Šƒ„°免疫染色呈轻 ∗ 中度阳性 o
可见较多 Šƒ„°免疫反应阳性细胞
图 w 缺血再灌注后 w{ «模型组 ≅ uss
模型组 Šƒ„°表达减弱 oŠƒ„°免疫染色呈轻 ∗ 中度阳性
图 x 缺血再灌注 w{«补阳还五汤组 ≅ uss
补阳还五汤组可见较多 Šƒ„°免疫细胞 oŠƒ„°染色中度阳性
3 讨论
脑缺血缺氧时星形胶质细胞k„≥l对中枢神经
的重要作用近年来受到人们的关注 ∀缺血性脑损伤
后 „≥增生并产生许多生物活性物质 o如分泌多种
神经营养因子 o代谢多种神经递质 o对缺血损伤神经
元具有保护作用 o利于损伤的修复 ~另一方面过度的
胶质化却可作为机械屏障影响髓鞘和轴索的再生 o
从而影响周围神经组织的结构修复和功能恢复 ∀我
们曾对大鼠脑缺血 „≥的表达及其与神经营养因子
 Žk°¬§®¬±¨ l 进行了观察 o结果表明  Ž在脑缺血
早期梗死邻近区域的星形胶质细胞中表达活跃 o有
#wyz#
第 uz卷第 ts期
ussu年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o‘²qts
’¦·²¥¨µqoussu
可能影响缺血脑损伤的发展和转归≈u  ∀
在脑缺血后 tx °¬± ∗ uw «短暂时间内 o„≥呈正
常血浆 ŒªŠ阳性反应 ~缺血再灌流时 o伴随着神经元
的损伤 o„≥ 出现激活增生 !肥大 !水肿等一系列改
变 ∀ „≥激活的生化标志是其细胞内星型胶质纤维
酸性蛋白 Šƒ„°表达增强 o故 Šƒ„°可作为研究脑
损伤后胶质反应的特征性标志≈v  ∀本实验的细胞形
态学表明 o在脑缺血再灌注 uw «后 o模型组在海马
区锥体细胞可见胞浆深染 !缩小 o细胞核固缩 o细胞
周围间隙普遍增大 o而补阳还五汤组锥体细胞病理
改变较模型组轻 o表明补阳还五汤组可减轻脑缺血
再灌注脑锥体细胞损伤 ∀ Šƒ„°免疫组化染色结果
表明 o缺血 tx °¬±后 Šƒ„°表达阴性 ~缺血再灌注
uw «后 o在海马区模型组 Šƒ„°表达呈强阳性 ~而补
阳还五汤组仅呈轻 ∗ 中度阳性 ∀再灌注 w{ «后 o模
型组 Šƒ„°表达较再灌注 uw «减弱 o免疫染色呈中
度阳性 ~而补阳还五汤组免疫染色则有所增强 o呈中
度阳性 ∀提示 }≠短暂性脑缺血后无 Šƒ„°表达 o脑
缺血再灌注 uw ow{ «后 Šƒ„°表达增强 o说明 „≥增
生活化高峰和时间与脑损伤神经元坏死程度密切相
关 ~补阳还五汤可能通过抑制急性脑缺血早期 „≥
的过度表达 o并维持缺血后期 „≥的增生状态 o有利
于缺血后期损伤脑组织的修复 o从而在参与脑缺血
损伤后神经功能的恢复中发挥重要作用 ∀
≈参考文献 
≈t  邓常青 o刘志龙 o葛金文 o等 q补阳还五汤抗脑缺血再灌注损伤
作用机理的研究 q中国中医基础杂志 ot||{ owk{l }vu q
≈u  • ¤±ª≥ ≠ o ≠²¶«¬§¤ ≠ oŠ²·²  o ·¨¤¯ q ¬§®¬±¨ ∞¬¬¶·¶¬± „¶·µ²2
¦¼·¨¶¬± ·«¨ ∞¤µ¯¼ ≥·¤ª¨ ²© ≤ µ¨¨¥µ¤¯ Œ±©¤¦·¬²± q …µ¤¬± • ¶¨ ⁄¨ √
…µ¤¬± • ¶¨ot||{ otsy }usx q
≈v  ²µª¨ ±¶¨±  …o ƒ¬±¶¨± … • o¨ ¶¨±  …o ·¨¤¯ q ¬¦µ²ª¯¬¤¯ ¤±§
„¶·µ²ª¯¬¤¯ • ¤¨¦·¬²±¶·² Œ¶¦«¨ ±¬¦¤±§ Ž¤¬±¬¦„¦¬§2¬±§∏¦¨§ ¨¶¬²±¶
²©·«¨ „§∏¯·• ¤·‹¬³³²¦¤°³∏¶q∞¬³ ‘¨ ∏µ²¯ ot||v otusktl }zs q
Εφφεχτσ οφ Βυ Ψανγ Ηυαν Ωυ ∆εχοχτιον
ον Αστροχψτεσ αφτερ Χερεβραλ Ισχηεµια ανδ Ρεπερφυσιον
„Œ «¨ ± o• „‘Š ≥«¤2¼¤± o Š∞‘Š ÷¬¤²2¼¬± o⁄∞‘Š ≤«¤±ª2 ¬´±ªo ‹ „‘Š • ∏¤±2½«¤±ª
kt q≥«¨ ±½«¨ ± ° ²¨³¯ .¨ ¶‹²¶³¬·¤¯ o≥«¨ ±½«¨ ± xt{sus o Š∏¤±ª§²±ªo≤«¬±¤~
u qŒ±¶·¬·∏·¨ ²© ⁄¬¤¥¨·¨¶o Š∏¤±ª½«²∏ ˜±¬√ µ¨¶¬·¼ ²© ×µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨  §¨¬¦¬±¨ o Š∏¤±ª½«²∏ xtswsx o Š∏¤±ª§²±ªo≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¶·∏§¼·«¨ ©¨©¨ ¦·¶²© …∏ ≠¤±ª ‹∏¤± • ∏ ⁄¨ ¦²¦·¬²± ²± ¤¶·µ²¦¼·¨¶¤©·¨µ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤¤±§µ¨³¨µ©∏2
¶¬²± q Μετηοδ :≤ µ¨¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤ °²§¨¯¬± ª¨µ¥¬¯¶º¤¶³µ²§∏¦¨§¥¼ ¬¯ª¤·¬±ª¥¬¯¤·¨µ¤¯ ¦²°°²± ¦¤µ²·¬§¤µ·¨µ¼ q × «¨ §¼±¤°¬¦ ¬¨³µ¨¶¶¬± ²©
Šƒ„° º µ¨¨ §¨·¨µ°¬±¨ §¥¼¬°°∏±²¦«¨ °¬¶·µ¼ ¤©·¨µ¦¨µ¨¥¼¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤©²µtx°¬± ©²¯ ²¯º §¨ ¥¼ µ¨³¨µ©∏¶¬²± ©²µuw «²∏µ¶¤±§w{ «²∏µ¶q
Ρεσυλτ : Šƒ„° ³²¶¬·¬√¨µ¨¤¦·¬²±¶µ¨¤¦«¨ §¤ ³¨ ¤® ¤©·¨µ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤©²µtx °¬± ©²¯ ²¯º §¨ ¥¼ µ¨³¨µ©∏¶¬²± ©²µuw «²∏µ¶q …∏ ≠¤±ª
‹∏¤± • ∏ ⁄¨ ¦²¦·¬²± §¨¦µ¨¤¶¨§·«¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± qŠƒ„° ³²¶¬·¬√¨µ¨¤¦·¬²±¶§¨¦µ¨¤¶¨§¤©·¨µ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤©²µtx °¬±©²¯ ²¯º §¨¥¼ µ¨³¨µ2
©∏¶¬²± ©²µw{ «²∏µ¶o…∏ ≠¤±ª ‹∏¤± • ∏ ⁄¨ ¦²¦·¬²±¬±¦µ¨¤¶¨§·«¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± qΧονχλυσιον :× «¨ µ¨ª∏¯¤·¬²± ²©…∏ ≠¤±ª ‹∏¤± • ∏ ⁄¨ ¦²¦2
·¬²± ²± ¤¶·µ²¦¼·¨¶¤©·¨µ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤¤±§µ¨³¨µ©∏¶¬²± °¤¼ ¥¨ µ¨ ¤¯·¨§·²µ¨³¤¬µ¬±ª³µ²¦¨¶¶¤©·¨µ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤q
≈Κεψ ωορδσ] …∏ ≠¤±ª ‹∏¤± • ∏ ⁄¨ ¦²¦·¬²± ~¥µ¤¬±¬¶¦«¨ °¬¤ ~¤¶·µ²¦¼·¨¶
≈责任编辑 方文贤 
5国外药讯6是国家药品监督管理局信息中心主办的 o为全国医药系统及有关单位提供国外医药信息的重要媒介 o自 t|{w
年创办以来 o受到广大读者的厚爱 ∀主要内容包括 }医药法规管理 主要国际组织和国家的有关处方药 !非处方药 !通用名药 !
替代治疗药等的法规管理政策 !信息 ~新药评审和上市批准 美国 !欧盟及日本等有关新处方药 !非处方药的上市批准及背景材
料 ~新药临床开发和应用 处于临床开发后期即 ¶期 !有重要价值的 ´期和 µ期临床试验中的药物 !新发现 ~生物技术及产品
有关生物药物及疫苗的新技术 !新工艺及产品 ~药物安全性监察 对重点药物及植物药的安全性政策 !法规r报告制度及案例
进行跟踪 ~药物经济学和合理用药 治疗方案的经济考虑 !• ‹ ’ 的基本药物治疗建议 !通用名药的审批状态及使用的推广等 ~
植物药 发展趋势 !法规管理 !传统药现代化和新产品 ~药物研发 !生产及市场分析 重点企业的药物研究开发及生产动态 !主要
国际市场的分析及预测 ~热门话题与评述 重要的医药学专题讨论 !重要的国际医药会议和活动 ∀每月一期 o全年 tu期 ∀另有
t||v ∗ ussu各年度合订本 ∀
k索要订单请与5国外药讯6编辑部 佟桂茹联系 o电话 }sts y{vtvvww转 v|sw或 y{vxs{{|l
#xyz#
第 uz卷第 ts期
ussu年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o‘²qts
’¦·²¥¨µqoussu