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Study on Anticancer Activity of Syngnathus in Vitro

海龙体外抗肿瘤活性研究



全 文 :海龙体外抗肿瘤活性研究
李士敏 o吴筱丹 o曾 苏 o栾连军 o邵 青
k浙江大学 药物制剂研究所 o浙江 杭州 vtssvtl
≈摘要  目的 }筛选不同品种海龙的体外抗肿瘤活性部位 ∀方法 }采用  × × 法观察海龙的各种提取物对多种
人癌细胞株生长的影响 ∀结果 }尖海龙的 |x h乙醇提取物对 Ž…细胞的生长具有抑制作用 o并呈量效关系 ~粗吻海
龙的脂溶性非皂化物具有不同程度的抑制人癌细胞株 Ž…o‹¨¯¤o…¦¤³vz oŽxyu o°„„ 细胞的作用 o并有明显的量效
关系 ~拟海龙的各提取物未见有明显的抑制肿瘤细胞生长的作用 ∀结论 }海龙是一种有开发前景的抗肿瘤中药 ∀
≈关键词  拟海龙 ~尖海龙 ~粗吻海龙 ~体外抗肿瘤 ~  × × 法
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussstlsv2st|{2sv
由于海洋生物特殊的生活环境 o海洋生物常能
产生众多的结构特异的生物活性物质 ∀目前 o人们
从海洋生物中发现了多种具有抗肿瘤作用的生物活
性物质 ∀海龙 Σψνγνατηυσ属于硬骨鱼纲 Στειχητηψσ
海龙目 Σψνγνατηιφορµεσ海龙科 Σψνγνατηιδαε ,具有
温肾壮阳 !散结消肿之功效≈t  ∀本实验观察了尖海
龙 !拟海龙 !粗吻海龙的各提取物对人癌细胞株的细
胞毒作用 o确定了尖海龙 !粗吻海龙的体外抗肿瘤的
活性部位 ∀
1 材料和方法
111 药材来源
海龙购于河北省安国市药材市场 o经浙江大学
药学院生药教研室郭汉生教授鉴定为尖海龙 Σψνγ2
νατηυσ αχυσ ¬±±¤¨ ∏¶o拟海龙 Σψνγνατηοιδεσ βιαχ2
υλεατυσk…¯ ²¦«l o粗吻海龙 Τραχηψρηαµ πηυσ σερρατυσ
kר°°¬±¦® ·¨≥¦«¯ ª¨¨ l¯ ∀
112 样品配制
取尖海龙粗粉适量 o|x h乙醇提取 o回收溶剂得
醇提浸膏 ∀将浸膏以氯仿萃取 o分别回收溶剂得醇
提脂溶物氯仿萃取物和醇提水层 ∀另取尖海龙醇提
后的残渣 o水提取 o回收溶剂得水提物 ∀
取拟海龙和粗吻海龙粗粉适量 o|x h乙醇提取 o
回收溶剂得醇提浸膏 ∀将浸膏依次用石油醚 !氯仿 !
正丁醇萃取 o回收溶剂得石油醚萃取物 !氯仿萃取
物 !正丁醇萃取物 !醇提水层 ∀石油醚萃取物经皂化
后再用乙醚萃取 o乙醚萃取液经回收溶剂得非皂化
物 ∀醇提后的海龙残渣用水提得水提物 ∀
≈收稿日期  t|||2ts2s{
≈基金项目  浙江省自然科学基金课题kv|xtvtl
取各提取物适量 o用生理盐水配成所需浓度 o脂
溶物以 ⁄ ≥’助溶 o其最终浓度小于 s qsx h ∀ ⁄2
≥’在该浓度下对细胞的生长无影响 ∀
113 方法≈u 
人癌细胞株 Ž…o‹¨¯¤o…¦¤³vz o Žxyu o°„„k浙
江医科大学肿瘤所细胞室常规传代培养l在含 ts h
小牛血清的 • ° Œ2tyws培养液 ovz ε ox h ≤ ’u培养
箱中生长至细胞旺盛 o经 s qux h胰酶加 s qsu h ∞⁄2
× „消化 o制成细胞悬液 o将细胞悬液均匀接种于 |y
孔微量培养板中k细胞浓度为 x ≅ tsx# °¯ p tl o给药组
分别加入不同剂量的尖海龙 !拟海龙 !粗吻海龙各提
取物 o对照组加入相应的溶剂 o加药后细胞培养 zu
«o按  × × 法用酶标仪在 xxs ±°波长处测定吸光
度k Αl值 o并按下列公式计算其抑制率 ∀
抑制率 €对照组 Α值 p试验组 Α值对照组 Α值 ≅ tss h
2 结果
211 尖海龙提取物对 Ž…细胞的作用
尖海龙提取物对 Ž…细胞的作用结果见表 t ∀
从表 t可见 o尖海龙的 |x h乙醇提脂溶性物质可抑
制 Ž…细胞的生长 o并呈明显的量效关系 ∀
表 t 尖海龙各种提取物对 Ž…细胞的抑制率 h
药物浓度
rΛª# °¯ p t
醇提脂溶物 醇提水溶物 水提物
ts vs qzz ? y qtx x q|z ? s q{x t qss ? s qsu
tss vv q{x ? ts qtx tt q|w ? t qst u q|z ? s qsx
uss v{ qwy ? | qyt tt q|w ? t qxx v q|y ? s qtu
xss yz qy| ? y qww x q|z ? s qyy x q|w ? s qtu
t sss z{ qwy ? x qw| s y q|v ? s qvy
注 }≠ ν € y  ξ ? σk表 u ∗ w同l
#{|t#
第 uy卷第 v期
usst年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o‘²qv
¤µqousst
212 拟海龙提取物对 Ž…细胞的作用
拟海龙提取物对 Ž…细胞的作用结果见表 u ∀
从表 u中可见 o拟海龙的各种提取物未见有明显的
体外抑制 Ž…细胞生长的作用 ∀
表 u 拟海龙各种提取物对 Ž…细胞的抑制率 h
药物浓度
rΛª# °¯ p t
非皂化物 氯仿萃取物 正丁醇萃取物 醇提水层 水层
ts v quu ? s qxw v qv| ? s qsy s v qvv ? s qsy t qzx ? s qsv
tss v quu ? s qut s s s t qzx ? s qty
uss t qyt ? s qsv s s s v qxt ? s qtv
xss uu qx{ ? s q|w s s s { qzz ? s qvw
t sss xw q{w ? v q|u s s s tu qu{ ? s q|{
213 粗吻海龙各种提取物对 Ž…细胞的作用
粗吻海龙提取物对 Ž…细胞的作用结果见表 v ∀
从表中可见 o粗吻海龙的脂溶性非皂化物具有显著
的抑制 Ž…细胞生长的作用 o并呈明显的量效关系 ∀
表 v 粗吻海龙提取物对 Ž…细胞的抑制率 h
药物浓度
rΛª# °¯ p t
非皂化物 氯仿萃取物 正丁醇萃取物 醇提水层
ts s w q|u ? s qs{ s w q{w ? s qux
tss w q|u ? s qux v qu{ ? s qtz s | qy{ ? s qvw
uss |y qzu ? w{ qw s y qyz ? s qtu tu q| ? s qzs
xss |{ qvy ? s qst s tt qyz ? s quu { qsy ? s qu{
t sss |{ qvy ? s qst s tx qss ? s qx| y qwx ? s qvv
214 粗吻海龙非皂化物对 ‹¨¯¤o…¦¤³vz oŽxyu o°„„
细胞的作用
在观察粗吻海龙提取物非皂化物部分对 Ž…细
胞作用的基础上 o进一步观察了粗吻海龙非皂化物
对 ‹¨¯¤o…¦¤³vz oŽxyu o°„„ 细胞的作用 o结果见表
w ∀从表中可见 o粗吻海龙提取物非皂化物部分对
‹¨¯¤o…¦¤³vz oŽxyu o°„„ 细胞的生长均具有不同程
度的抑制作用 ∀
表 w 粗吻海龙提取物非皂化物部分
对 ‹¨¯¤o…¦¤³vz oŽxyu o°„„细胞的抑制率 h
药物浓度
rΛª# °¯ p t
‹¨¯¤ …¦¤³vz Žxyu °„„
ts y qxy ? s quv w qsx ? s qtz ts qss ? s q|u t qx| ? s qsx
tss vw qwu ? x qty tv qxt ? t qw{ t qyz ? s qs{ uu quu ? s q|t
uss xz qv{ ? u qut yu qty ? tx qxw vy qyz ? t q|v tt qtt ? s qws
xss ys qyy ? x qsx zw qvu ? v q|t w{ qvv ? w qy{ y| q{w ? s qst
t sss zs qw| ? v q|u zs quz ? tx q|z zs qss ? v q{| y| q{w ? v qyz
3 讨论
从以上结果可见 ov种海龙的体外抗肿瘤活性是
有差异的 ∀其中粗吻海龙具有较明显的体外抗肿瘤
活性 o粗吻海龙的脂溶性非皂化物不仅具有抑制 Ž…
细胞生长的作用 o且具有不同程度抑制人癌细胞株
‹¨¯¤o…¦¤³vz oŽxyu o°„„ 生长的作用 ∀尖海龙醇提
脂溶性部分也能抑制 Ž…细胞的生长 ∀而拟海龙的
各提取物未见有明显的抑制肿瘤细胞生长的作用 ∀
粗吻海龙的脂溶性非皂化物对不同肿瘤细胞系
的细胞毒活性具有选择性 ∀对 x 种肿瘤细胞 Ž…o
‹¨¯¤o…¦¤³vz oŽxyu o°„„ 的 Œ≤xs分别为 txs Λª#
°¯ p t ot{u Λª# °¯ p t otvt Λª# °¯ p t ovvy Λª# °¯ p t ovws
Λª# °¯ p t o其中 Ž…细胞最为敏感 o其次为 …¦¤³vz细
胞 ∀
在历版5中国药典6收载的海龙为刁海龙 !拟海
龙 !尖海龙 o粗吻海龙仅仅作为地方习用品≈v  ∀而本
实验中揭示了粗吻海龙也具有体外抗肿瘤活性 o从
而为扩大海龙药源 o进一步开发利用海龙这一宝贵
的海洋生物资源提供依据 ∀同时 o尖海龙和粗吻海
龙体外抗肿瘤活性部位的确定也为海龙新药的开发
奠定了一定的基础 ∀
≈参考文献 
≈t  中国药典 1 一部 1t|{x1uxx1
≈u  韩 锐 1 抗癌药物研究与实验技术 1 北京 }北京医科大学中国
协和医科大联合出版社 ot||z1u{w1
≈v  5广东中药志6编辑委员会 1 广东中药志 1 第一卷 1 广州 }广东
科技出版社 ot||w1zzu1
#||t#
第 uy卷第 v期
usst年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o‘²qv
¤µqousst
Στυδψ ον Αντιχανχερ Αχτιϖιτψ οφ Σψνγνατηυσιν ςιτρο
Œ ≥«¬2°¬±o • ˜ ÷¬¤²2§¤±o∞‘Š ≥∏o˜„‘¬¤±2­∏±o≥‹ „’ ±¬±ª
k≥¦«²²¯ ²© °«¤µ°¤¦¼ o«¨­¬¤±ª ˜±¬√ µ¨¶¬·¼ o ‹¤±ª½«²∏ vtssvt o«¨­¬¤±ªo≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¶·∏§¼ ·«¨ ¤±·¬¦¤±¦¨µ¤¦·¬√¬·¼ ²© Σψνγνατηυσ¬± √¬·µ²q Μετηοδ : ’¥¶¨µ√¬±ª·«¨
¬±©¯∏¨ ±¦¨ ²©§¬©©¨ µ¨±·¨ ¬·µ¤¦·¶©µ²° Σψνγνατηυσ²± ªµ²º·«²©§¬©©¨ µ¨±·¦¤±¦¨µ¦¨¯¯ ¶·µ¤¬±¶¥¼  × × ° ·¨«²§qΡε2
συλτ : Œ·«¤¶¥¨ ±¨ ©²∏±§²∏··«¤··«¨ ©¤·2¶²¯∏¥¯¨±²±¶¤³²±¬©¬¨§ ¬¨·µ¤¦·©µ²° Τε µ µινχκ ετ Σχηλεγε뤱§·«¨ ¤¯¦²2
«²¯¬¦ ¬¨·µ¤¦·©µ²° Σψνγνατηυσ αχυσ «¤√¨ ¦¼·²·²¬¬¦¤¦·¬√¬·¬¨¶q׫¨ ±²±¶¤³²±¬©¬¨§ ¬¨·µ¤¦·©µ²° Τε µ µινχκ ετ
Σχηλεγε릤±¬±«¬¥¬··«¨ ªµ²∏·«²©¦¤±¦¨µ¦¨¯¯ ¶·µ¤¬±¶Ž…o‹¨¯¤o°„„ oŽxyu o¤±§…¦¤³vz o¤±§·«¨ ¤¯¦²«²¯¬¦ ¬¨·µ¤¦·
©µ²° Σψνγνατηυσαχυ󦤱¬±«¬¥¬··«¨ ªµ²º·«²©¦¤±¦¨µ¦¨¯¯ ¶·µ¬± Ž…o…∏·…¯²¦«¶«²º¶±²¤³³¤µ¨±·¤±·¬¦¤±¦¨µ¤¦2
·¬√¬·¼ qΧονχλυσιον : Σψνγνατηυσ «¤¶³µ²°¬¶¬±ª³µ²¶³¨¦·¶¤¶¤± ¤±·¬¦¤±¦¨µ≤«¬±¨ ¶¨ ° §¨¬¦¬±¨ q
[ Κεψ ωαρδσ] Σψνγνατηυσ αχυσ; Σψνγνατηοιδεσ βιαχυλεατυσ; Τραχηψρηαµ πηυσσερρατυσ~¤±·¬¦¤±¦¨µ¤¦·¬√¬2
·¼¬± √¬·µ²~ × × ° ·¨«²§
≈责任编辑 古云霞 
大剂量黄芪注射液对慢性肾功能不全
患者血浆 !尿液内皮素的影响
周 钦 3 o曹文富 o李荣亨
k重庆医科大学 附属第一医院 o重庆 wssstyl
≈摘要  目的 }观察大剂量黄芪注射液对慢性肾功能不全k≤ • ƒl患者血浆 !尿液内皮素2tk∞×2tl的影响 ∀方法 }
应用放射免疫分析法检测了 {{例慢性肾功能不全患者及 vt例正常人的血浆 !尿液 ∞×2t水平 o观察了常规治疗与常
规治疗加大剂量黄芪注射液治疗两种疗法对慢性肾功能不全患者血浆 !尿液 ∞×2t的影响 ∀结果 }大剂量黄芪注射液
慢性肾功能不全患者血浆 !尿液 ∞×2t水平能显著降低k Π s1ssuxl ~而常规治疗组患者血浆 !尿液 ∞×2t无明显变化
k Ё s1ul ∀结论 }大剂量黄芪注射液可有效地降低慢性肾功能不全患者血浆及尿液 ∞×2t水平 o有益于延缓慢性肾功
能不全患者病情的进展 o为该药治疗慢性肾功能不全提供了进一步的临床理论依据 ∀
≈关键词  黄芪注射液 ~慢性肾功能不全 ~内皮素
≈中图分类号  • u{v qytt ~• y|u qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstlsv2suss2sv
慢性肾功能不全k≤ • ƒl为各种肾脏疾病持续发
展的共同转归 o体内血管活性物质的代谢紊乱以及
由此引发的血流动力学异常是促使其病情慢性渐进
性发展的重要环节之一 ∀内皮素k∞×l是目前已知
的体内最强的缩血管物质 o在 ≤ • ƒ 中的作用 o正日
益受到国内外学者的广泛关注 ∀研究表明 o其在肾
≈收稿日期  usss2sv2s{
3 现为上海医科大学中山医院肾内科 ||级博士研究生
脏中的生物学作用为 }增加肾血管阻力k• ∂ • l !
降低肾血浆流量k• °ƒl和肾小球滤过率kŠƒ • l o促
进系膜细胞k  ≤l增殖和细胞外基质k∞≤  l合成 o
加速肾小球硬化的过程 ∀因此 o寻求调节 ≤ • ƒ 患者
∞× 异常变化的有效手段 o对减轻和延缓慢性进行性
肾损害有重要的理论和实际意义 ∀为此 o本实验用
放射免疫分析法k• Œ„l测定了 {{例 ≤ • ƒ患者及 vt
例正常人血 !尿 ∞×2t水平 o并观察了大剂量黄芪对
≤ • ƒ患者血 !尿 ∞×2t的影响 ∀现报道如下 ∀
#ssu#
第 uy卷第 v期
usst年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o‘²qv
¤µqousst