全 文 ：天麻促智颗粒对反复脑缺血再灌小鼠脑组织
递质性氨基酸含量的影响
傅建华 3 o杜贵友
k中国中医研究院 中药研究所 o北京 tsszss ~l
≈摘要  目的 }为探讨天麻促智颗粒k×  ≤Žl的脑保护作用机制 o观察了该药对反复脑缺血再灌注小鼠的
脑组织递质性氨基酸含量的影响 ∀方法 }结扎小鼠双侧颈总动脉进行反复缺血再灌注 o造成小鼠血管性学习记忆
障碍模型 o测定小鼠大脑皮层和海马区递质性氨基酸含量的变化 o探讨该药的脑保护作用 ∀结果 }×  ≤Ž大 !中 !
小 v个剂量组均可非常显著升高小鼠脑皮层和海马的谷氨酸含量k Π s qsstl o升高海马区天门冬氨酸含量k Π
s qsstl o非常显著降低脑皮层的 Χ2氨基丁酸的含量k Π s qsstl ∀结论 }提示 ×  ≤Ž可调节脑内递质性氨基酸含
量 o维持兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸的动态平衡 o从而可对抗兴奋性氨基酸毒性作用 ∀
≈关键词  天麻促智颗粒 ~脑缺血 ~反复再灌注损伤 ~递质性氨基酸
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstlst2ssxv2sw
脑缺血再灌注可造成脑细胞损伤 o其主要机制
是兴奋性氨基酸k∞„„l释放增多 o细胞内钙超载 o自
由基生成增加和代谢性酸中毒等 o这三者相辅相
成≈t  ∀近 ts年来国内外越来越多的研究证明脑组
织递质性氨基酸的含量对脑缺血再灌注脑细胞损伤
及其脑保护有重要意义 ∀天麻促智颗粒k×  ≤Žl
是以天麻钩藤饮化裁而成 o具有平肝息风 !清热活
血 !补肾益智之功效 ∀为了进一步阐明天麻促智颗
粒的中枢作用机制 o本实验进一步研究了该药对血
管性记忆障碍动物模型的改善作用 ∀
1 材料和方法
111 动物及分组
昆明种小鼠 |s只 o⎯ o体重为kvv ? vl ªo由中
国中医研究院动物房提供 o饲养温度 us ∗ ux ε o自
然光照 o自由饮食 ∀将小鼠随机分为假手术 o模型 o
×  ≤Ž大 !中 !小剂量和都可喜组 o共 y组 o每组
tx只动物 ∀
112 药品
天麻促智颗粒k×  ≤Žl o含生药 y q{ ª#ªp t o
中国中医研究院中药所剂型室提供 ~都可喜k§∏¬¬¯l o
法国施维雅药厂生产 o批号 z…s{wt o上海福达制药
有限公司分装 ∀
≈收稿日期  usss2sv2tu
3 中国中医研究院 西苑医院 o北京 tsss|t
113 给药方法
将 ×  ≤Ž分别配成 ts h ox h ou qx h v种浓
度及都可喜配成 x h 浓度的药液备用 ∀ ×  ≤Ž
大 !中 !小剂量组分别在术前灌胃 ×  ≤Žt os qx o
s qux ª#®ªp t ~都可喜组术前给药 tx °ª#®ªp t ~假手
术组和模型组都给予生理盐水灌胃 ∀术前连续灌胃
u周 o灌胃量均为 s qt °¯ #ts ªp t#§p t ∀
114 模型制备
连续灌胃给药 u 周后 o术前禁食 uw«o按文献
≈u 方法 o用 s qt h阿托品 u °ª#®ªp t体重¬³小鼠 ox
°¬±后 o用 x h乌拉坦 t qux ª#®ªp t体重麻醉 o仰卧固
定于手术台上 o颈部正中切口 o分离双侧颈总动脉及
伴行神经 o穿上丝线 o用动脉夹夹闭双侧颈总动脉 o
缺血 us °¬± 后松开双侧动脉夹 o恢复脑血流 us
°¬±o然后重复缺血再灌各 us °¬±o如此共 v次 o最后
恢复血供 o缝合皮肤 ∀假手术组同上处理 o但只游离
双侧颈总动脉而不进行反复缺血再灌 ∀术后护理动
物 ∀
115 取材 !处理及脑组织递质性氨基酸的含量测定
各组小鼠术后 uw «即行断头处死 o迅速取出脑
组织 o于冰台上分离皮层和海马 o尔后立即投入液氮
中冷冻 o于 p zs ε 保存待测 ∀测定时 o将脑组织溶
解 vs °¬±恢复至室温 o按文献≈v 方法制备氨基酸
提取液 o进行含量测定 ∀
#vx#
第 uy卷第 t期
usst年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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¤±qousst
116 统计学处理
计量资料用 ξ ? σ表示 ∀实验结果各给药组与
模型组和假手术组间进行方差分析 o用 ≥⁄法计算
检验统计量 τ o各给药组与模型组和假手术组间进
行两两比较 o模型组与假手术组之间也进行比较 ∀
2 结果
211 对兴奋性递质性氨基酸天门冬氨酸k„¶³l和谷
氨酸kŠ¯ ∏l含量的影响
皮层脑组织 „¶³的含量 o只有都可喜组含量明
显升高 o×  ≤Ž大 !中 !小 v剂量组与模型组相比
有升高的趋势 ~而海马的 „¶³含量各给药组与模型
组相比升高都有显著性差异 ∀皮层和海马 Š¯ ∏的变
化与模型组相比 o×  ≤Ž大 !中 !小剂量均使其升
高且有非常显著的意义 o海马脑组织 ×  ≤Žv组
与假手术组相比仍有非常显著差异 o见表 t ou ∀
212 对抑制性递质性氨基酸 Š¯ ¼和 Š„…„ 的含量
影响
皮层脑组织中 oŠ¯ ¼含量只有 ×  ≤Ž中剂量
组与模型组相比降低有显著意义 ~而 Š„…„ 的含量
变化则非常明显 o与模型组比较 o×  ≤Ž大 !中 !
小剂量组的含量降低有非常显著意义 ∀海马脑组织
×  ≤Ž小剂量组和都可喜组的 Š¯ ¼含量高于模
型组 o且有显著差异 ~海马脑组织的 Š„…„含量与假
手术组相比较而言 o×  ≤Ž大剂量组升高有差
异 o而 ×  ≤Ž小剂量组和都可喜组含量的升高非
常显著 o见表 t ou ∀
表 t 实验各组小鼠的皮层脑组织递质性氨基酸的含量测定
组别
剂量r
ª#®ªp t
ν
递质性氨基酸含量rΛ°²¯#ªp t
„¶³ Š¯ ∏ Š¯ ¼ Š„…„
假手术组 ts u qsy ? s quw w qvy ? s qvxwl s q|| ? s qs{wl u qvu ? s qu|
模型组 | t q|y ? s qtw v qy| ? s qvttl t qtw ? s qs|tl u qxs ? s qvy
×  ≤Ž t qs tt u quz ? s qyv x qxt ? t qswv oyl t qsw ? s qtx t qz| ? s qw|v oyl
s qx | t q|y ? s qtx x qsv ? s qv{t oyl s q|x ? s qtsxl t qzs ? s quuv oyl
s qux | u qsv ? s qwx x qs| ? s q{tt oyl t qtt ? s qt{ t q|x ? s qvut oyl
都可喜组 s qstx { u qu| ? s qwswl w q{u ? s qxyyl t qsy ? s qty u qt| ? s quswl
注 }ξ ? σ 与假手术组比较 t) Π s .sx u) Π s .st v) Π s .sst 与模型组比较 w) Π s .sx x) Π s .st y) Π s qsstk下同l
表 u 实验各组小鼠的海马脑组织递质性氨基酸的含量测定
组别
剂量r
ª#®ªp t
ν
递质性氨基酸含量rΛ°²¯#ªp t
„¶³ Š¯ ∏ Š¯ ¼ Š„…„
假手术组 ts t qzw ? s qv| z qtz ? t qtwwl t qw{ ? s quxxl t q|y ? s qvywl
模型组 | t qxv ? s qu| x q{y ? s q|ytl t q{u ? s quvul u qwt ? s qvvtl
×  ≤Ž t qs tt v qsu ? s qzxv oyl | qyy ? u qswv oyl t q|t ? s quyvl u qxs ? s qvutl
s qx | u q|y ? s qvtv oyl | qws ? t qv|v oyl t qyv ? s quv u quy ? s qu|
s qux | u q{v ? s qxwv oyl tt qsz ? t qu{v oyl u qty ? s qvsv oxl u q{| ? s qvwvl
都可喜组 s qstx { v qtu ? s qwxv oyl tt qux ? t qt|v oyl u quv ? s qvwv oxl v quu ? s q{uv owl
3 讨论
脑内氨基酸类神经递质是近年来研究的新领
域 o氨基酸类神经递质代谢紊乱而出现的兴奋毒性
在反复脑缺血再灌注脑细胞损伤的机理中具有重要
的意义 ∀在脑组织反复缺血再灌注的过程中 o∞„„
和 Œ„„等递质性氨基酸的变化 o可通过多种途径激
活其受体 o受体活化引起神经细胞去极化 o使神经细
胞兴奋性增高 o导致 ‘¤n oŽn o≤¤u n o≤¯p等离子通道
的通透性增加 o使细胞内外离子分布异常 o引起神经
细胞的多种生理生化特性改变 o最终导致脑组织水
分增多 o神经细胞肿胀 o细胞膜损伤 o蛋白质水解 o引
起不可逆性蛋白质变性而致神经细胞死亡≈w  ∀
近年来的实验研究表明 o脑缺血及再灌注损伤
与氧自由基增多 !钙超载 !兴奋性氨基酸毒性 !酸中
毒等多种因素有关 ∀目前我们对 ×  ≤Ž在脑反
复缺血及再灌的保护作用机理方面的研究表明 o其
可增高 Š≥‹2°¬o≥’⁄等酶的生物活性 o加强机体清
除体内过氧化脂质的能力 o抑制心 !肝 !脑等组织的
过氧化脂质的生成 o降低 °’ 含量 o改善脑组织的
血流动力学状态 o改善大 !小鼠学习记忆能力
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等≈x ∗ z  ∀本研究证明 ×  ≤Ž对反复缺血再灌小
鼠大脑皮层 !海马脑组织各种递质性氨基酸含量具
有积极的调节作用 o×  ≤Ž对海马脑组织 „¶³含
量的增加和对大脑皮层 !海马脑组织 Š¯ ∏含量的升
高都有非常显著的意义 ~×  ≤Ž各剂量组还使皮
层抑制性氨基酸 Š„…„ 含量明显降低 o其机制可能
是通过增强神经细胞对 Š¯ ∏再摄取和抑制神经细胞
的瀑布性释放 o减弱其对受体的过度激动作用 o阻止
∞„„对脑细胞的急性神经毒性损害 ~同时加速 Š„2
…„合成 o并促进其大量释放 o以对抗 ∞„„ 毒性 o从
而通过调节脑内递质性氨基酸的含量 o维持 ∞„„ 和
Œ„„的动态平衡而发挥脑保护作用 ∀
有研究表明 oŠ„…„r苯二氮 r≤¯p通道受体复
合物是哺乳动物脑内最主要的抑制性神经介质受
体 o小鼠口服 ×  ≤Ž后 o药物中的天麻素进入体
内 o在血 !脑 !肝等脏器中可迅速被降解为天麻甙元
kª¤¶·µ²§¬ª¨ ±¬±l≈{  o和药物中本就含有的天麻甙元穿
过血脑屏障进入脑组织 o然后与细胞膜上苯二氮
受体结合 o增强 Χ2氨基丁酸r苯二氮 受体复合体的
功能 o进而调节氯离子通道 o而显示镇静 !抗惊等中
枢抑制效应≈| ots  o×  ≤Ž的脑保护作用可能与此
也有关 ∀
总之 o通过对 ×  ≤Ž的研究 o我们希望有助
于寻找能够通过多途径 !多靶点发挥脑保护作用的
药物 ∀
≈致谢  本工作承蒙我室王秀荣 !崔海峰 !赵雍 !曹春雨
和分析室付桂兰 !张启伟等老师指导和帮助 ∀
≈参考文献 
≈t  • ¤·¨µ©¤¯¯ „ ‹ o≥¬±ª« Š oƒµ¼  • o ·¨¤¯ q „¦∏·¨ „¦¬§²¶¬¶∞¯ √¨¤·¨¶
 ¤¯²±¤¯§¨ «¼§¨ ¬± • ¤·…µ¤¬±¬± ∂¬√²q …µ¤¬± • ¶¨ot||y oztuktl }
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≈u  左萍萍 o刘 娜 o雒蓬轶 o等 1 还少丹的脑保护机制研究 1 中国
中西医结合杂志 ot||z otzkzl }wus q
≈v  傅建华 o杜贵友 1u ow2二硝基氯苯柱前衍生化高效液相色谱法
测定小鼠脑内递质氨基酸 1 中国药理通讯 ot||| otykul }w q
≈w  任家顺 o毕 敏 1 缺血2再灌注对脑组织递质性氨基酸代谢的
影响 1 中华麻醉学杂志 ot||v otvkvl }usw q
≈x  杜贵友 o叶文华 o吕 烽 1 天麻钩藤饮提取液对组织脂质过氧
化作用的影响 1 中国中药杂志 ot||t otyk{l }w|z q
≈y  杜贵友 o刘淑芝 o王跃生 o等 1 益脑灵对大 !小鼠记忆损害的改
善作用 1 中国中西医结合杂志k基础理论研究特集l ot||x otx }
vvt q
≈z  杜贵友 o王秀荣 o赵 雍 o等 q益脑灵对家兔血液动力学的影响 q
中国中西医结合杂志k基础理论研究特集l ot||x otx }x{ q
≈{  游金辉 o谭天秩 o匡安仁 o等 1v ‹2天麻甙元和v ‹2天麻素在小鼠
体内的分布和代谢 1 华西医科大学学报 ot||w ouxkvl }vux q
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[ Κεψ Ωορδσ] ׬¤±°¤ ≤∏½«¬Ž¨ ¬¯~¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤~µ¨³¨·¬·¬²±∏¶µ¨³¨µ©∏¶¬²± ¬±­∏µ¼ ~·µ¤±¶°¬··¨µ¤°¬±²
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≈责任编辑 方文贤 
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