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Studies on Polysaccharide of Cynomorium songaricum Rupr.

锁阳多糖的研究



全 文 :锁阳多糖的研究
张思巨 o张淑运 o扈继萍
k中国中医研究院 中药研究所 o北京 tsszssl
≈摘要  目的 }对中药锁阳中活性总多糖进行研究 ∀方法 }≥ ³¨«¤§¨ ¬ Š2tss和 Š2txs凝胶柱色谱纯化多糖 ~高
效凝胶渗透色谱法测定多糖纯度和分子量 ~°≤ o׏≤ 及 Š≤ 法测定中性糖组成 ~咔唑法测定糖醛酸含量 ∀结果 }
≥≠ °2„和 ≥≠ °2…的分子量分别为 v qt ≅ tsx和 u q{ ≅ tsx ∀中性单糖组成均为半乳糖 !葡萄糖 !阿拉伯糖 !鼠李糖 !甘
露糖和核糖 o摩尔比 ≥≠ °2„为 x qtΒw qtΒt qyΒt qsΒs qxΒs qv o≥≠ °2…为 x quΒw quΒt qxΒt qsΒs qxΒs qu ∀糖醛酸含量分别
为 ts qz h和 ts qx h ∀结论 }≥≠ °2„和 ≥≠ °2…为均一的酸性杂多糖 ∀
≈关键词  锁阳 ~酸性杂多糖
≈中图分类号  • u{w qt ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstlsy2sws|2sv
锁阳又名不老药 o系锁阳科植物 Χψνοµοριυ µ
σονγαριχυ µ • ∏«µq的干燥肉质茎 ∀性甘温 o具有补肾
阳 !益精血 !润肠通便之功能 ∀临床用于腰膝痿软 o
阳痿滑精 o肠燥便秘等 ∀锁阳的化学成分研究有些
文献报道≈t ∗ w  o但未见多糖的研究工作报道 ∀作者
从活性总多糖 ≥≠ °k对正常小鼠溶血空斑试验具有
显著影响 o抑制率最高为 xv q{ h l中分离得到了 u个
均一多糖 ≥≠ °2„和 ≥≠ °2…o本文报道其提取 !分离 !
纯化方法及多糖组分分析和理化性质等 ∀
1 仪器和材料
岛津 ˜ ∂2vsss ~岛津 Š≤2• Œ„ 气相色谱仪 o
• °•2Š微处理机 ~…¬²2• ¤§高效液相色谱仪 o色谱柱
≥«²§¨ ¬ ≥∏ª¤µŽ≥2{sw ~¤¶¦² ⁄¬³2t{t型和 °2∞uwt ¦
旋光仪 ~…• ˜Ž∞• Œƒ≥2xx型红外分光光度仪 ∀
锁阳购自北京市药材公司 o谢宗万研究员鉴定
为锁阳科植物锁阳 Χ. σονγαριχυ µ • ∏«µq的干燥肉
质茎 ∀单糖标准品为日本东京化学工业株式会社产
品 o核糖为 qׅ„Ž∞• 出品 ∀ × 系列 ⁄¨ ¬·µ¤±标准
品和 ≥ ³¨«¤§¨ ¬ Š系列葡聚糖凝胶均为 °«¤µ°¤¦¬¤公
司产品 o三氟乙酸为 •¬¨§¨ 2¯§¨ ‹¤•± 出品 o其余为国
产 „ • 级试剂 ∀
2 实验方法和结果
2 q1 提取 !分离和纯化
锁阳药材 t ®ªo粉碎 o|x h乙醇回流提取脱脂 o
药渣挥尽乙醇 o沸水提取多次 o合并提取液 o离心取
上清液 o浓缩至小体积 o蒸馏水返溶 o加 v 倍量
≈收稿日期  usss2sz2t{
|x h乙醇 o离心 o收集沉淀 o有机溶剂洗涤后得粗多
糖 ∀粗多糖经鞣酸液和 ≥ √¨¤ª法去蛋白 o‹u ’u 脱
色 o透析 o|x h 乙醇 !丙酮 !乙醚等洗涤 o得总多糖
≥≠ ° ∀ ≥≠ ° 分 别 经 ≥ ³¨«¤§¨ ¬ Š2tss k … 柱 l 和
≥ ³¨«¤§¨ ¬ Š2txsk„ 柱l凝胶柱色谱分离 os qt °²¯ #
pt‘¤≤¯洗脱 o苯酚2硫酸法检测 o合并主峰部分 o从
…柱中收集到 …ƒt 和 …ƒu o从 „ 柱中收集到 „ƒt o
„ƒu和 „ƒv o各组份分别用蒸馏水透析 u §o内液适
当浓缩后冷冻干燥 o得到类白色粉末 o又经 ≥ ³¨«¤§¨ ¬
Š2uss凝胶柱色谱检测 o…ƒt 和 „ƒu 均呈现对称单
峰 o定名为 ≥≠ °2…和 ≥≠ °2„ ∀
2 q2 纯度和分子量测定
按文献方法≈x 测定 ∀ ‹°≤ 条件 }柱 ≥«²§¨ ¬
≥∏ª¤µŽ≥2{sw o流动相 s qsu °²¯#pt‘¤„¦o流速 s qw
°¯ #°¬±p t o示差折光检测 ∀测定结果表明 ≥≠ °2„和
≥≠ °2…为均一多糖 o重均分子量分别为 v qt ≅ tsx 和
u q{ ≅ tsx ∀ ‹°≤ 图谱见图 t ∀
2 q3 理化性质分析
≥≠ °2„和 ≥≠ °2…均溶于水和二甲基亚砜中 o遇
碘溶液不呈蓝色 o ²¯¬¶«反应阳性 o茚三酮检测阴
性 ∀紫外扫描在 uys ou{s ±°处未见核酸和蛋白质
特征吸收峰 ∀元素分析 }≥≠ °2 „ ≤ vy qyx h o‹
x quz h ~≥≠ °2… ≤ vz qxv h o‹ x qvx h ~均不含氮 o说
明均非蛋白多糖 ∀ ≥≠ °2„ ≈Α ux⁄ € n tx qvβks qw o
‹u’l o≥≠ °2… ≈Α us⁄ € n usβks qwx o‹u ’l ∀红外光谱
图均呈现多糖类物质特征吸收峰 o在 ttss ∗ tsts
¦°p t区域内均出现 u 个强吸收峰ktszt otsvw 和
#|sw#
第 uy卷第 y期
usst年 y月
中 国 中 药 杂 志
≤«¬±¤²∏µ±¤¯ ²© ≤«¬±¨ ¶¨ ¤·¨µ¬¤  §¨¬¦¤
∂ ²¯ quy o‘²qy
∏±¨ ousst
tszy otsu|l ∀
2 q4 糖组成分析
2 q4 q1 多糖的完全酸水解
分别取 ≥≠ °2„ 和 ≥≠ °2…各 ts °ªo溶于 u°²¯#
pt × ƒ„ v °¯ 中 o封管 tts ε 水解 o取出后除尽
× ƒ„ o进行 °≤ o׏≤ 和衍生化后 Š≤ 分析 ∀
2 q4 q2 °≤ 和 ׏≤ 分析
• ¤·°¤± t号滤纸 o溶剂系统为乙酸乙酯2吡啶2
醋酸2水kxΒxΒtΒvl ∀ ׏≤ 分析按文献方法≈y  ∀结果
二种多糖均显示半乳糖 !葡萄糖 !阿拉伯糖 !鼠李糖 !
甘露糖 !核糖的斑点 o且不排除含有糖醛酸 ∀
2 q4 q3 糖醛酸定性 !定量分析
≥≠ °2„和 ≥≠ °2…均在tv≤ ‘ • k⁄ ≥’l∆tzv qv
∗ tzy处呈现多个糖醛酸的 ≤ ’ 共振信号 ∀
咔唑法≈z o{  o半乳糖醛酸为标准品制作标准曲
线 o测定糖醛酸含量 o结果 ≥≠ °2„ 和 ≥≠ °2…分别含
ts qz h和 ts qx h ∀
2 q4 q4 气相色谱分析
Š≤条件 糖腈乙酸酯衍生物 }柱 v h ’ ∂2uux
„ • 2⁄ ≤≥2≤«µ²°²¶²µ¥ • {s ∗ tss 目 o柱温 uvx
ε o检测 uzs ε o‘ukxs °¯ #°¬±p tl ∀糖肟三甲基硅
醚衍生物 }柱 v h ’ ∂2tz柱k担体同 ’ ∂2uux柱l o柱
温 t{s ε o检测 uvs ε o‘ukxs °¯ #°¬±p tl ∀
鼠李糖 !核糖 !阿拉伯糖 !甘露糖 !葡萄糖 !半乳
糖及木糖k内标l按文献方法≈| 制备糖腈乙酸酯衍生
物k配成氯仿溶液l ∀阿拉伯糖 !鼠李糖 !果糖 !甘露
糖和葡萄糖按文献方法k李铁林 o吴昌贤 q糖的气相
色谱分析及其应用 q第二届全国植物原料水解学术
讨论会 qt|{v qtu ql制备成糖肟三甲基硅醚衍生物 ∀
≥≠ °2„和 ≥≠ °2…的完全水解物分别制成糖腈乙酸
酯和糖肟三甲基硅醚衍生物 ∀根据色谱峰面积和内
标校正因子计算各组成单糖的相对含量及摩尔比
值 o≥≠ °2„ 和 ≥≠ °2…所含中性单糖均为半乳糖 !葡
萄糖 !阿拉伯糖 !鼠李糖 !甘露糖 !核糖 o不含果酮糖 ∀
摩尔比 ≥≠ °2„为 x qtΒw qtΒt qyΒt qsΒs qxΒs qv ~≥≠ °2
…为 x quΒw quΒt qxΒt qsΒs qxΒs qu ∀
≈致谢  多糖的纯度 !分子量及 ≥≠ °2„ 的比旋度为中
国科学院上海药物研究所方积年等测定 o≥≠ °2…的比旋度由
中国药品生物制品检定所测定 o元素分析由中国医学科学院
药物研究所测定 ∀红外光谱由本所杨键测定 ∀
≈参考文献 
≈t  张思巨 o张淑运 q常用中药锁阳挥发性成分的研究 q中国中药
杂志 ot||s otx }tsv q
≈u  张思巨 o张淑运 q中药锁阳化学成分研究 q中国药学杂志 o
t||t ouy }yw| q
≈v  柴田浩树 q汉方补剂的成分研究ktl ) ) ) 关于锁阳的成分 q国
外医学#中医中药分册 ot|{| ottkyl }vy q
≈w  马超美 o贾世山 o孙 韬 o等 q锁阳中三萜及甾体成分的研究 q
药学学报 ot||v ou{kul }txu q
≈x  魏远安 o方积年 q高效凝胶渗透色谱法测定多糖纯度及分子
量 q药学学报 ot|{| ouwkzl }xvu q
≈y  张思巨 o张淑运 o王 岚 o等 q大黄多糖的研究 q中国中药杂志 o
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≈|  李铁林 q糖和糖醇的气相色谱研究 q分析化学 ot|{u otskxl }
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¤±§±¨ ∏·µ¤¯ ¶∏ª¤µ¶º µ¨¨ ¦²°³²¶¨§²©ª¤¯¤¦·²¶¨ oª¯∏¦²¶¨ o¤µ¤¥¬±²¶¨ oµ«¤°±²¶¨ o °¤±±²¶¨ ¤±§µ¬¥²¶¨ q ׫¨ °²¯¤µ
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第 uy卷第 y期
usst年 y月
中 国 中 药 杂 志
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[ Κεψ ωορδσ] Χψνοµοριυ µ σονγαριχυ µ ~¤¦¬§¬¦«¨ ·¨µ²³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨
≈责任编辑 徐美珍 
紫外分光光度法对天南星药材的定量评价研究
杜树山 o林宏英 o周玉新 o魏璐雪
k北京中医药大学 中药学院 o北京 tsssu|l
≈摘要  目的 }比较不同采集时间 !地点 o不同品种及生品 !炮制品天南星中总黄酮的含量 ∀方法 }紫外分光光
度法测定总黄酮含量 ∀结果 }总黄酮含量为采集时间 z月下旬  z月初  {月  |月 ~采集地点北京 陕西 四川
安徽 ~天南星 异叶南星 朝鲜南星 东北南星 ~生品 炮制品 ∀结论 }z月下旬为最佳采集时间 o建议以北京 !
陕西产为道地药材 o天南星和异叶南星质量较好 o炮制工艺应作进一步研究 ∀
≈关键词  天南星 ~含量测定 ~总黄酮
≈中图分类号  • u{u qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstlsy2swtt2su
天南星味苦 o辛 o性温 o有毒 ~是临床燥湿化痰 o
祛风止痉 o散结消肿的常用药 ∀天南星中夏佛托苷
和总黄酮的药理实验 o有较强的镇静及杀虫活性 ∀
杀虫结果提示可能具有抗癌活性 ∀本文对天南星不
同采集时间 !不同采集地点 !不同品种以及生品与炮
制品中的总黄酮进行含量比较 o分析药效物质含量
变化的规律 o探索天南星药材的道地性 o最佳采收
期 o品种的优劣以及炮制前后的变化 o为天南星药材
质量标准化提供参考 ∀采用紫外分光光度法≈u 测
定 o以夏佛托苷计算总黄酮的含量 ∀
1 仪器 !试剂和药材
≥‹Œ „⁄ ˜ ˜ ∂2tus2su型分光光度计k日本岛
津l ∀甲醇为分析纯 ∀对照品夏佛托苷纯度 |{ qx h
以上 ∀药材分别经北京中医药大学李家实教授 !刘
春生副教授 !中国中医研究院李先端研究员 !四川中
医药大学刘友平博士鉴定为天南星 Αρισαε µ α
ερυβεσχενσ k • ¤¯¯ql ≥¦«²··o异叶南星 Α . ηετεροπηψλ2
λυ µ …¯ ∏°¨o东北天南星 Α . αµ υρενσε ¤¬¬° ∀样本
保存在北京中医药大学药化教研室 ∀均粉碎 o过 ys
≈收稿日期  usss2tt2ts
≈基金项目  /九五0国家重点科技攻关计划资助项目k|y|sv2
su2sul
林宏英现在湖南省宏生堂制药有限公司 o湖南 长沙 wtsstw
目 ∀炮制品由辽宁中医学院炮制教研室贾天柱教授
提供k按 t||x年版5中国药典6规定炮制l ∀
2 方法与结果
2 q1 对照品溶液与供试品溶液的制备
精密称取夏佛托苷对照品 ts qz{ °ªo置 tss °¯
容量瓶中 o甲醇定容为对照品溶液 ∀分别精密称取
天南星各样品约 s qt ªo加 ws °¯ 甲醇 o超声提取 vs
°¬±o甲醇洗涤残渣及容器 o合并滤液 o置 xs °¯ 容量
瓶中 o甲醇定容为为供试品溶液 ∀
2 q2 线性关系
分别精密吸取对照品溶液 s qx ot qs ot qx ou qs o
u qx °¯ o置 ts °¯ 容量瓶中 o甲醇定容 ∀甲醇为空白 o
uzs ±°处测定吸收度 ∀以浓度与吸收度作线性回
归 o回归方程 Α € s .swxu n ux .ss|v Χ, ρ € s q|||| ∀
x qv| ∗ uy q|x Λª范围内线性关系良好 ∀
2 q3 精密度试验
供试品溶液测定 y次 o含量分别为 v q{v ov q{t o
v q{t ov qz| ov q{t ov q{t °ª#ªp t o平均值为 v q{t °ª#
ªp t oΡΣ∆为 s qws h ∀
2 q4 重现性试验
天南星样品 y份 o测得结果分别为 z qz| oz q|t o
{ qvs oz q|s oz q{x oz q|t °ª#ªp t o平均值为 z q|w °ª#
ªp t oΡΣ∆为 u qu{ h ∀
2 q5 回收率试验
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第 uy卷第 y期
usst年 y月
中 国 中 药 杂 志
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