全 文 ：产地表示怀疑。后来用近红外积分球漫反射法测定
其近红外光谱图, 带入中国红参与进口红参以及国
产红参和合资品牌红参的近红外模型中进行分析,
确定这个样品属于合资品牌的产品。与检验者预先
的判断一致。
本研究采用近红外光谱技术在红参类药材鉴别
研究中的应用进行了尝试, 通过非入侵方式获得了
药材的内在成分信息, 应用判别分析法进行分类, 结
果准确可信。表明本方法适合用于红参高丽参药材
的分类, 能快速准确地鉴别高丽参, 显示了将近红外
光谱技术应用于中药鉴别分析及产地判别的良好前
景。但由于受实验的样本数量和时间的限制, 仍有大
量的模型验证和检验工作等待完成。
参考文献:
[ 1 ]　张　聪, 王智华, 金德庄 1 中国红参与高丽红参的指纹谱
(H PL C2FPS)比较研究 [J ]1 中成药, 2001, 23 (3) : 16021631
[ 2 ]　W oo Y A , Kim H J , Cho J H 1 Iden tification of herbal
m edicines using pattern recogn ition techn iques w ith near2in2
frared reflectance spectra [J ]1 M icrochem J , 1999, 63: 612
701
HPLC 法测定半枝莲中二萜类生物碱 scutebarbatine B①
涂琪顺1, 2, 蔡光明13 , 何　群2, 岳鹏飞1, 鄢　丹1, 杜　群1, 2
(11 中国人民解放军第 302 医院 全军中药研究所, 北京　100039; 21 湖南中医药大学药学院, 湖南 长沙　410002)
摘　要: 目的　建立 H PL C 法测定半枝莲药材中二萜类生物碱 scu tebarbatine B 的方法。方法　色谱柱为 YM C
Japan J′sphere OD S2H 80 (150 mm ×416 mm , 5 Λm ) , 以甲醇2水 (70∶30) 为流动相, 体积流量 110 mL öm in, 检测波
长 264 nm。结果　二萜类生物碱 scu tebarbatine B 的线性范围是01021 2～ 01212 Λg (r= 01999 2) ; 平均回收率为
100169% ; R SD 为 1182%。结论　该定量分析方法简便快速, 稳定可靠, 重现性好, 回收率高, 可用于半枝莲药材的
质量控制与检验。
关键词: 半枝莲; scu tebarbatine B; H PL C
中图分类号: R 28216; R 286102　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253- 2670 (2008) 02- 0280- 03
　　半枝莲为唇形科黄芩属植物半枝莲 S cu tella ria
ba rba ta D 1 Don 的干燥全草。其主要生物活性表现
在抗肿瘤, 抑菌, 抗病毒和免疫调节等方面[1～ 3 ]。《中
国药典》2005 年版中半枝莲药材虽有总黄酮及黄酮
类成分的的定量控制标准, 但现代药理研究认为, 二
萜类生物碱成分具有抗肿瘤、抗病毒等作用[4, 5 ] , 系
该药材中另一类重要的有效成分。曾报道了半枝莲
中二萜类生物碱 scu tebarbat ine B 的分离和鉴定[6 ]。
本研究采用 H PL C 法测定半枝莲中二萜类生物碱
scu tebarbat ine B , 并进行了方法学考察, 为进一步
开发与研究半枝莲这一药用植物资源提供可行的定
量分析方法。
1　仪器与试剂
A gilen t 1100 高效液相色谱仪 (G1311A 四元
泵, G1322A 脱气机, G1315B DAD 检测器, H P
chem sta t ion 化学色谱工作站) (美国安捷伦公司) ,
AL 204 m ett ler To ledo 分析天平 (瑞士) , 色谱柱
( YM C Japan J′sphere OD S2H 80 150 mm × 416 mm , 5 Λm )。半枝莲分别购自北京绿野药材有限公司、河南省确山县中药材收购站、安徽省临泉县药材供应站、湖北省枣阳市枣南地产药材购销部、湖北省新州县中药材公司, 经解放军 302 医院肖小河研究员鉴定为唇形科黄芩属植物半枝莲 S 1 ba rba ta D 1 Don 的干燥全草。scu tebarbat ine B 对照品为外购, 经UV、IR、1H 2NM R、13C2NM R确证结构, 经H PL C 归一化法测定质量分数大于 98% , 符合定量要求。甲醇为色谱纯, 水为重蒸水, 其余试剂均为分析纯。2　方法与结果211　色谱条件及系统适用性试验: 色谱柱: YM CJapan J′sphere OD S2H 80 ( 150 mm × 416 mm , 5Λm ) ; 流动相: 甲醇2水 (70∶30) ; 检测波长: 264 nm ;体积流量 1 mL öm in; 柱温: 室温 (30 ℃)。理论塔板数按 scu tebarbat ine B 峰计算, 不低于4 000。212　对照品溶液的制备: 精密称取 scu tebarbat ineB 对照品 13125 m g, 置 25 mL 量瓶中, 加甲醇 10
·082· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月
① 收稿日期: 2007205230
作者简介: 涂琪顺 (1983- ) , 男, 湖南长沙人, 硕士, 研究方向为中药制剂。　T el: (010) 66933324　E2m ail: tuqishun@ 1631com3 通讯作者　蔡光明　T el: (010) 66933323　E2m ail: cgm 1004@vip1sina1com
töm in
12scu tebarbatine B
图 1　scutebarbatine B 对照品 (A)和半枝莲
样品 (B)的 HPLC 图
F ig11　HPLC Chromatogram s of scutebarbatine B
reference substances (A) and S1 ba rba ta
sample (B)
mL 超声溶解, 放冷, 加甲醇稀释至刻度, 摇匀。用 1
mL 移液管精密移取 1 mL 溶液于 5 mL 量瓶中, 加
甲醇稀释至刻度, 摇匀, 作为对照品溶液 (每 1 mL
含 scu tebarbat ine B 01106 m g)。
213　供试品溶液的制备: 取过 3 号筛的半枝莲药材
粉末 210 g, 精密称质量, 置 50 mL 圆底烧瓶中, 加
甲醇 30 mL , 称定质量, 加热回流提取 2 h, 放冷, 用
甲醇补足损失质量, 摇匀。取上清液用 0145 Λm 微
孔滤膜滤过, 取续滤液, 作为供试品溶液。
214　线性关系考察: 吸取 scu tebarbat ine B 对照品
储备液, 稀释成 2112、5130、10160、15190、21120ΛgömL 溶液, 分别进样 10 ΛL , 测定峰面积。以峰面
积 (Y ) 为纵坐标, 溶液质量浓度 (X ) 为横坐标, 绘制
标准曲线, 计算回归方程为: Y = 408168 X -
457161, r = 01999 2, 表 明 scu tebarbat ine B 在
01021 2～ 01212 Λg 与峰面积呈良好的线性关系。
215　精密度试验: 精密吸取同一对照品溶液 10ΛL , 重复进样 6 次, scu tebarbat ine B 峰面积R SD 为
1113% (n= 6)。
216　重现性试验: 取同一批样品, 制备 6 份供试品
溶液, 各进样 10 ΛL 测定, 结果 6 份样品中 scu te2
barbat ine B 质量分数R SD 为 1184%。
217　稳定性试验: 取同一试品溶液, 于配制后 0、2、
4、8、12、24 h 分别进样 10 ΛL , 依法测定 scu tebarba2
t ine B 峰面积, 结果R SD 为 1175% , 表明供试品溶
液在 24 h 内基本稳定。
218 　加样回收率试验: 取同一批 6 份样品 (含
scu tebarbat ine B 01107 m gög) 约 110 g, 精密称定,
置锥形瓶中, 分别精密加入 scu tebarbat ine B 对照
品 (01106 m gömL ) 110 mL , 制备供试品溶液, 进样
测定, 计算回收率, 平均回收率为 100169% , R SD 为
1182%。
219　样品测定: 分别精密称取各来源产地供试品
210 g, 制备供试品溶液, 进样测定峰面积, 外标法计
算, 结果见表 1。
表 1　半枝连中 scutebarbatine B 的测定 (n= 3)
Table 1　D eterm ination of scutebarbatine B
in S 1 ba rba ta (n= 3)
来　源 scu tebarbatine Bö%
北京绿野 01011 5
河南确山 01010 6
安徽临泉 01010 2
湖北枣阳 01008 5
湖北新州 01008 7
3　讨论
311　供试品溶液提取工艺筛选: 半枝莲中 scu te2
barbat ine B 的量较低, 所以对半枝莲干燥药材设计
正交试验提取条件, 考察项目包括提取溶媒 (水、甲
醇、乙醇)、粉碎度 (干燥药材、过 3 号筛的粗粉、过 5
号筛的细粉)、提取方法 (回流提取、索氏提取、超声
提取) , 结果表明, 以甲醇经回流提取粗粉效果最好。
又考察了提取时间对提取效率的影响: 提取时间分
别进行了 1、2、3 h 的考察, 2、3 h 所测得 scu tebarba2
t ine B 的量已无差别, 说明已提取完全, 故确定最佳
提取条件为: 甲醇回流提取 2 h, 样品处理简单, 目
标成分的量最高。
312　检测波长的确定: 实验中共考察了 210、264、
282、320、400 nm 波长, 结果表明, 210 nm 波长下,
溶剂吸收峰较高, 282、320 nm 波长色谱峰数目少,
检测波长为 264 nm 色谱峰数目多, 峰型好, 所以选
定 264 nm 为检测波长。
313　试验结果表明, 不同来源产地半枝莲中二萜类
生物碱成分 scu tebarbat ine B 的量存在较大差异。
北京绿野药材有限公司的药材中该成分的量最高,
scu tebarbat ine B 作为二萜生物碱类化合物, D ai
等[6 ]从半枝莲中分离出了多种二萜类生物碱成分,
由于其结构相似, 给分离鉴定过程带来了一定难度,
本实验在其研究的基础上, 从中选择量最高的成分
scu tebarbat ine B 作为测定的对照品, 为研究半枝莲
总生物碱类成分及其相关制剂提供了质量评价
依据。
参考文献:
[ 1 ]　L ee T K, Kim D I, O ng Y L , et a l1 D ifferen tial inh ib it ion of
S cu tella ria barba ta on HCG22 p romo ted p ro liferation of cu l2
tu red u terine leiom yom al and m yom etrial smoo th m uscle cells
[J ]1 Imm unop harm acol Imm unotox icol, 2004, 26 (3) : 3292
·182·中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月
3421
[ 2 ]　L ee T K, L ee D K, Kim D I, et a l1 Inh ib ito ry effects of
S cu tella ria barba ta on hum an u terine leiom yom al smoo th
m uscle cell p ro liferation th rough cell cycle analysis [J ]1 In t
Imm unop harm acol, 2004, 4 (3) : 4472245411
[ 3 ]　Sato Y, U zak i S, N ishh ikaw a T , et a l1 Phytochem ical
flavones iso lated from S cu tella ria barba ta and an tibacterial
activity against m eth icillin resistan t S tap hy lococcus au reus
[J ]1 J E thnop harm acol, 2000, 72 (3) : 4832248811
[ 4 ]　汤新铭, 孙桂芝 1 乌头碱抑瘤及抗转移的研究与治癌的观察
[J ]1 北京中医杂志, 1986 (3) : 272281
[ 5 ]　王景毅, 车金峰 1 乌头注射液治疗肝癌临床疗效分析 [J ]1
黑龙江中医药, 2001 (6) : 292301
[ 6 ]　D ai S J , T ao J Y, L iu K, et a l1 N eo2C lerodane diterpeno ids
from S cu tella ria barba ta w ith cyto tox ic activit ies [J ]1 P hy to2
chem istry , 2006, 67 (13) : 1326213301
RP-HPLC 法测定番石榴叶中番石榴苷①
严　海1, 2, 王力生2, 周艳林2, 邹节明23
(11 武汉大学药学院, 湖北 武汉　430072; 21 桂林三金药业股份有限公司, 广西 桂林　541004)
摘　要: 目的　用H PL C 法测定番石榴叶中番石榴苷的量。方法　选用 YM C2JM C18色谱柱 (150 mm ×416 mm , 5Λm ) , 流动相为甲醇2012% 磷酸溶液 (36∶64) , 检测波长为 257 nm , 柱温为 40 ℃。结果　番石榴苷在 01787～
111805 Λg 与峰面积具有良好的线性关系 ( r= 01999 9) , 平均回收率为 99102% , R SD 为 1121%。结论　建立的定量
方法可以用于药材的质量控制。
关键词: 番石榴叶; 番石榴苷; H PL C
中图分类号: R 286102　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253- 2670 (2008) 02- 0282- 02
　　番石榴叶为桃金娘科植物番石榴 P sid ium g ua2
javae L 1 的干燥叶[1 ] , 收载于《广西药材标准》。原标
准只有来源及性状鉴别, 相关报道有显微、薄层色谱
鉴别[2 ]以及槲皮素量的测定[3 ]。槲皮素为苷元, 通常
需要水解。因为重现性不理想, 国家药典委员会不提
倡使用分解或降解产物做指标进行测定。因此, 本研
究从番石榴叶中分离得到番石榴苷, 建立番石榴苷
H PL C 测定方法, 以便更有效地控制药材质量。
1　仪器与材料
W aters 2695 色谱仪,W aters 2996 检测器; Em 2
pow er 色谱工作站。A G245 电子天平 (梅特勒2托利
多公司)。超声波清洗器 (必能信上海公司)。番石榴
苷对照品 (自制, 质量分数为 99107% ) , 番石榴叶药
材购自广西桂林药材站, 经桂林三金业股份有限公
司钟小清鉴定为桃金娘科植物番石榴 P 1 g uajavae
L 1 的干燥叶。
2　方法与结果
211　色谱条件与系统适用性: YM C2JM C18色谱柱
( 150 mm ×416 mm , 4 Λm ) , 流动相: 甲醇2012% 磷
酸溶液 (36∶64) , 检测波长 257 nm , 柱温: 40 ℃。理
论板数以番石榴苷峰计不低于4 000。色谱图见图 1。
212　对照品溶液的制备: 精密称取番石榴苷对照品
适量, 加甲醇制成 0105 m gömL 的溶液, 即得。 töm in3 2番石榴苷3 2guaijaverin图 1　番石榴苷对照品 (A)和番石榴叶药材 (B)的 HLC 图谱F ig11　HPLC Chromatogram s of gua ijaver inreference substance (A) and F oliumPs id ii Guaj avae (B)213　供试品溶液的制备: 取本品粗粉 2 g, 精密称定, 置具塞锥形瓶中, 精密加入甲醇 50 mL , 称定质量, 超声处理 (功率 250 W , 频率 25 kH z) 30 m in, 放冷, 再称定质量, 用甲醇补足减失的质量, 滤过, 取续
·282· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月
① 收稿日期: 2007205209
作者简介: 严　海 (1978- ) , 男, 武汉大学在读硕士, 研究方向为天然药物化学。3 通讯作者　邹节明　T el: (0773) 5842588　E2m ail: San jin@gl1gx1cm nfo1net