全 文 :中草黄ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9月·1415·
HPLC法测定不同产地和品种桃仁中苦杏仁苷
颜永刚1’2,裴瑾2,万德光¨
(1.陕西中医学院药学系,陕西咸阳 712046}2.成都中医药大学药学院,四川成都610075)
桃仁为蔷薇科(Rosaceae)植物桃Prunus
persica(L.)Batsch或山桃P.davidiana(Carr.)
Franch.的干燥成熟种子。味苦、甘,性平,具有活血
化瘀、润肠通便的功效。用于经闭,痛经,瘕瘕痞块,
跌打损伤,肠燥便秘[1’2]。在血府逐瘀汤(《医林改
错》)、生化汤(《傅青主女科》)、桂枝茯苓丸(《金匮要
略》)、桃核承气汤(《伤寒论》)等医家名方中均重用
桃仁。现代研究亦表明桃仁对心脑血管疾病疗效显
著,近年来受到广泛关注。尽管桃仁药用历史悠久
(始载于《神农本草经》),临床应用广泛,但一直以
来,对其有效成分缺乏系统研究,其质量缺乏有效的
控制标准,桃仁含苦杏仁苷(amyadalin)及苦杏仁酶
(emulsin)等物质。为此本实验以苦杏仁苷为指标成
分,采用HPLC法测定了采自四川、陕西、甘肃、山西
以及购自安徽毫州、河北安国、成都荷花池等全国各
大药市的不同产地和不同品种的35份桃仁样品中
苦杏仁苷的量,为评价桃仁质量及临床合理用药提
供科学的依据。
1材料
1.1 样品来源:实验所用桃仁样品,经万德光教授
鉴定,为蔷薇科植物桃P.persica(L.)Batseh或山
桃P.davidiana(Carr.)Franch.的干燥成熟种子。
1.2仪器和试药:美国Agilent1100高效液相色谱
仪及其配套工作站,DAD检测器检测,乙腈为色谱
纯(美国Fisher公司),水为超纯水(Milipore制备),
0.45弘m针式微孔滤膜。其他试剂均为分析纯。苦杏
仁苷对照品,中国药品生物制品检定所,批号
110820—200403,供定量测定用。
2方法和结果
2.1 色谱条件:色谱柱HypersilODS2(150mm×
4.6mm,5弘m)l检测波长210nm;柱温度25℃;流
动相为乙腈一水(11。89);体积流量1mL/min,理论板
数按苦杏仁苷峰计算应不低于2000。色谱图见图1。
2.2对照品溶液的制备:精密称取苦杏仁苷对照品
适量,置10mL量瓶中,加甲醇溶解,并定容至刻度,
配制成含苦杏仁苷0.5mg/mL的对照品溶液。
lO 15 0 5 10 15 0 5
t/miIl
图l苦杏仁苷对照品(A)与桃仁(B)、山桃仁(c)样品HPLC图谱
Fig.1HPLCChromatogramsfamygdalinreferencesubstance(A),
samplesofP.persica(B),andP.daridiana(C)
2.3供试品溶液的制备:取干燥的桃仁药材粉末约
0.2g,精密称定,置50mL带塞锥形瓶中,加甲醇约
20mL,超声提取30rain,放至室温后,滤过,用甲醇
于25mL量瓶中定容,0.45弘m微孔滤膜滤过,取续
滤液,即得。
2.4标准曲线的绘制:精密吸取1、2、4、6、8、10、20
弘L的对照品溶液进样,以对照品溶液进样量的体积
为横坐标(X),色谱峰面积为纵坐标(y)进行线性回
归,结果苦杏仁苷在0.5---25.0Pg线性关系良好,回
归方程为:y=739.69X+2.77(R2=0.9999)。
收稿日期:2008—02—29
基金项目:四JII省中医药管理局科研项目(2006)
作者简介:颜永刚(1978一),男,陕西成阳人,2005级在读中药学博士学位,主要从事中药品种品质与资源开发研究。
E—mail:yunfen8828@163.cornTell 3892062171
-通讯作者万德光Tel:(028)87780831E—mail:wdg:@cdutcm.edu.cn
万方数据
·1416· 中草焉ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9月
2.5精密度试验:精密吸取对照品溶液10弘L,连续
进样5次,测定苦杏仁苷峰面积,结果其RSD为
0.40%,表明仪器的精密度良好。
2.6重现性试验:取同一样品,按“2.3”项下方法平
行制备供试品溶液5份,测定,计算苦杏仁苷质量分
数,RSD为0.6%,表明该条件重现性良好。
2.7稳定性试验:将供试品溶液在室温放置0、2、4、
6、8、12h后分别进样lo肛L进行测定,结果苦杏仁苷
峰面积RSD为0.7%,表明在本实验条件下供试品溶
液在室温下放置12h内基本稳定。
2.8 回收率试验:取四川(成都)山桃仁粉末9份,各
0.1000g,精密称定。分别按其质量分数的80%、
100%、120%精密加入苦杏仁苷对照品适量,按照
“2.3”项方法制备供试品溶液,测定,计算加样回收
率,结果平均回收率为99.8%,RSD=2.93%,表明本
法回收率较好。
2.9样品的测定:取35个产地和品种不同的桃仁药
材按“2.3”项制成供试品溶液,测定,以外标法计算苦
杏仁苷的质量分数,结果见表1。
3讨论
3.1桃仁样品通过回流、渗漉、超声3种不同提取方
法的考察,表明超声提取方法效果最好。同时又考察
了溶剂(甲醇、乙醇),溶剂体积(10、20、40mL),提取
时间(20、30、40rain)等相关因素,最终确定以甲醇20
mL超声提取30rain制备样品溶液。并经过色谱条件
筛选,确定色谱柱HypersilODS2(150mm×4.6
mm,5弘m),检测波长210nm,柱温25℃,流动相为
乙腈一水(11。89),体积流量1mL/min。有关苦杏仁
苷定量测定的文献报道有高效液相色谱法、薄层扫描
法和分光光度法等[3~5]。本实验系统与已报道的
HPLC系统相比,具有色谱分离度高、干扰少、易重复
等优点,可直接测定苦杏仁苷的量,较测定其水解产
物(HCN)更科学准确,更有利于药材的质量控制。
3.2本实验研究结果表明,山桃仁较桃仁的苦杏仁
苷量高,20份山桃仁样品质量分数为0.67%~
2.81%,平均质量分数1.39%;15份桃仁样品质量分
数为0.63%~1.63%,平均质量分数0.95%。产地不
同桃仁药材中苦杏仁苷量差异较大,如山桃仁采自新
疆乌鲁木齐的量最高(2.29%),而四川北川的量最低
(O.67%);桃仁采自陕西延安的量最高(1.38%),山
西汾阳的量最低(o.67%),但采于陕西同一省区的3
份样品量则差异较小。
裹1不同产地和品种桃仁中苦杏仁苷的测定结果佃=3)
Table1 Determinationof mygdalinofSemenPersicae
fromdifferenthabitatsandpecies(露=3)
3.3本实验测定了采自四川、陕西、甘肃、山西以及
购自安徽毫州、河北安国、成都荷花池、西安万寿路、
重庆储奇门等全国各大药市的不同产地和不同品种
的35个桃仁样品中苦杏仁苷的量,样品不仅包含了
桃仁的主产区域,还几乎包含了我国各大中药材市场
流通的主要桃仁商品药材,这对进一步客观评价桃仁
药材质量提供科学依据。
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万方数据
HPLC法测定不同产地和品种桃仁中苦杏仁苷
作者: 颜永刚, 裴瑾, 万德光
作者单位: 颜永刚(陕西中医学院药学系,陕西,咸阳,712046;成都中医药大学药学院,四川,成都
,610075), 裴瑾,万德光(成都中医药大学药学院,四川,成都,610075)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2008,39(9)
被引用次数: 9次
参考文献(5条)
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