全 文 ：·1338· 中革蔼ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9,El
果显示，阴性样品有干扰，干扰的斑点来自吴茱萸药
材。经改用正己烷一醋酸乙酯一乙醇(6．4t 3．6：1)作
为展开剂后，上述现象消失。
共选择50％甲醇、75％甲醇和甲醇3种提取溶
剂提取，结果发现，用含有一定水的甲醇结果均高于
甲醇的提取。由于本品为大蜜丸，用含有一定水的甲
醇采用超声处理方式，易使本品溶散，使被测成分易
于提出，故采用75％甲醇作为提取溶剂。实验中对
桂皮醛提取时间进行了考察，分别超声处理30、45、
60min，结果超声45min与60min测得的结果基
本相同，因此将超声处理时间定为45min。另实验
中对桂皮醛提取溶剂用量(20、25、50mL)亦进行了
考察，溶剂用量为25mL时样品中桂皮醛提取完
全，故提取溶剂用量定为25mL。
报道选择乙腈一水(35：75)乜]，实验发现，桂皮
醛色谱峰有拖尾现象，经加入一定磷酸后，色谱峰拖
尾现象消失。
参考文献：
[1]刘训红．王玉玺，房克慧，等．中药材薄层色谱鉴别[M]．天
津：天津科学技术出版社．1990．
12-1中国药典ES-I．一部．2005．
正交试验优选桂枝茯苓丸处方药材的提取工艺
朱燕飞，楼英，钱建明
(诸暨市人民医院，浙江诸暨311800)
摘要：目的筛选并优化桂枝茯苓丸的提取工艺。方法以正交设计多指标优化提取工艺条件，HPLC法测定各
味药材有效成分，确定最佳提取工艺。结果桂枝和牡丹皮以加6倍量的90％乙醇提取2次，每次2h，A，B。Ca为
最佳提取工艺路线，赤芍、桃仁和茯苓以水提取，桃仁捣碎沸下，加6倍量水提取2次，每次1h为最佳提取工艺路
线。结论优化得到的提取工艺合理、稳定、可行，工艺设计科学合理，提取效率高，适用于工业化生产。
关键词：桂枝茯苓丸；桂枝；牡丹皮I正交试验；高效液相色谱
中图分类号：R286．2 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)09—1338—04
桂枝茯苓丸方出自汉代医圣张仲景《金匮要略·
妇人妊娠病脉证并治》，由桂枝、茯苓、赤芍、牡丹皮、
桃仁组成，具有活血，化瘀，消瘕的作用，用于妇人宿
有瘸块，或血瘀经闭，行经腹痛，产后恶露不尽。原方
制法工艺为生药材粉碎成细粉，加炼蜜制成蜜丸后
入药，生产工艺落后，服用量大，服用不方便。为了去
除原方中的无效成分，富集浓缩有效成分，本实验对
桂枝茯苓丸处方药材的提取工艺进行了改进研究，
使之符合现代生产工艺的要求，为进一步合理开发
桂枝茯苓丸提供参考。
1仪器与试药
LC一10AT高效液相色谱仪(配置为双泵、紫
外检测器，日本岛津)，UV一1700型紫外分光光度
计(日本岛津)，N2000色谱工作站(浙江大学信息工
程研究所)，TG328A型电光分析天平(上海分析天
平厂)。
处方中药材均由本院中药房提供，经鉴定合格。
桂皮醛(批号060110)、丹皮酚(批号060301)对照品
均由中国药品生物制品检定所提供。甲醇、乙腈为色
谱纯，水为亚沸水，冰醋酸等其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1提取工艺路线的选择：桂枝茯苓丸原采用生药
打粉入药，炼蜜制丸，服用剂量大，且生药材难以消
化和吸收。工艺改进依据各药材有效成分的溶解性
质，选择适宜溶媒。桂枝和牡丹皮含有挥发性成分较
多，宜醇提；赤芍、桃仁含苷类成分，宜水提；茯苓按
传统工艺宜采取水提。所以在设计时将5味药分为
两步，一是以乙醇为溶媒提取桂枝和牡丹皮；另一是
以水为提取溶媒提取赤芍、桃仁和茯苓。
2．2桂枝、牡丹皮的提取工艺研究
2．2．1桂皮醛、丹皮酚的HPLC法测定[1’副：色谱
条件为Shim—PackVP—ODS色谱柱(150mmX
4．6ram)(日本岛津)，以乙腈一水一冰醋酸(42。58t
0．8)为流动相，检测波长为280nm(桂皮醛k=
285nm，丹皮酚k=274rim)。
标准曲线的制备：取桂皮醛、丹皮酚对照品适
收稿日期：2008—02—25
作者简介：朱燕飞Tel：(0575)87173054E—mail：zhuyanfei7709@126．corn
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9月·1339·
量，分别精密称定，加无水乙醇制成含丹皮酚29．12
／比g／mL、桂皮醛16．20pg／mL的溶液作为对照品溶
液。取一定量进样测定，结果丹皮酚在0．1456～
1．7472pg与峰面积值具有良好的线性关系，回归
方程为A—10794．70C+9783．24，，．=0．9999；桂
皮醛在0．0578～0．4624pg与峰面积值具有良好
的线性关系，回归方程为A=8048297．3C+
7 352．3，，．=0．9999。
供试品溶液的制备：称取桂枝、牡丹皮各30g，
按正交试验设计方案进行提取，每份提取2次，将2
次提取所得的溶液合并，用乙醇加至1000mL，超
过1000mL则回收溶剂至1000mL，作为样品液。
精密吸取样品液5．0mL，置25mL量瓶中，加乙醇
定容，再精密量取1．0mL置10mL量瓶中，用乙醇
定容，摇匀，0．45弘m微孔滤膜滤过，即得，作为供试
品溶液。
样品测定：分别精密吸取供试品溶液及相应质
量浓度的对照品溶液各20弘L注入液相色谱仪，测
定，按照外标法计算提取样品中有效成分的质量分数。
牡丹皮中丹皮酚的测定：牡丹皮中丹皮酚质量
分数为2．12％(以=6)。
桂枝中桂皮醛的测定：桂枝中桂皮醛质量分数
为1．42％(咒=6)。
2．2．2试验设计：根据预试验结果，每次试验称取桂
枝、牡丹皮各30g，提取2次，以乙醇体积分数(A)、
溶剂用量(B)和提取时间(C)3个因素的3个水平，
采用L。(3‘)正交试验进行优化，因素水平见表1，各
次试验的测定结果见表2，其中桂皮醛和丹皮酚的
转移率以提取液中有效成分的质量与投料的药材中
有效成分的质量相比而得，综合评分为桂皮醛转移
率×50％+丹皮酚转移率×50％。对试验结果的方
差分析见表3。
哀l桂枝和牡丹皮醇提正交试验的因素水平
Table1 Fatorsandleversoforthogonaltest
ofCassiaTwigandCortexMoutan
结果表明，A、B、C因素对桂枝和牡丹皮提取效
率影响的主次关系为A>C>B，即乙醇体积分数对
提取效率影响最大，其次为提取时间，再次为乙醇用
量。且每个因素各水平的关系为A。>A。>A。，B。>
裹2桂枝和牡丹皮醇提正交试验结果
Table2 ResultoforthogonaltestofCassiaTwig
andCort“Moutan
试验号 A B C D(空白)桂皮醛丹皮酚综合评分
1 1 l 1 l 64．3763．2665．68
2 1 2 2 2 73．8372．9075．52
3 1 3 3 3 77．9977．6880．12
4 2 1 2 3 77．3075．8278．81
5 2 2 3 1 84．5382．2685．84
6 2 3 1 2 75．6373．8376．92
7 3 1 3 2 97．3296．99100
8 3 2 1 3 87．8782．9587．91
9 3 3 2 1 93．Ol89．5593．95
K1 221．32244．49230．51245．47
K2 241．57249．27248．28252．44
K3 281．86Z50．99265．96246．84
R 60．546．5035．456．97
表3牡丹皮、桂枝醇提的方差分析
Table3 AnalysisofvarianceforCassiaTwig
andCortexMoutan
Fo．05(2，2)=19．0Fo．01(2·2)=99．0
B：>B。，C。>C。>C。。方差分析结果表明，乙醇体积
分数和提取时间对桂皮醛和丹皮酚的提取效率的影
响差异有统计学意义(P计无显著影响。故从节约成本的角度考虑最佳组合
水平A。B，C。，即加6倍量90％乙醇提取2次，每次
2 h。
2．3茯苓、赤芍、桃仁提取工艺研究
2．3．1苦杏仁苷、芍药苷的HPLC法测定[3’‘1
色谱条件：以乙腈一0．2％磷酸(15：85)为流动
相，检测波长为225rim(苦杏仁苷k=218am，芍
药苷k一230rim)。
标准曲线的制备：取芍药苷、苦杏仁苷对照品适
量，分别精密称定，加无水乙醇制成含69．6ptg／mL
苦杏仁苷、100．8／-g／mL芍药苷的溶液，作为对照
品溶液。取适量，进样测定，结果芍药苷在0．219一-
10．996pg与峰面积值具有良好的线性关系，回归
方程为A=1731478．8C+665．9，r=0．9999f苦
杏仁苷在1．01～10．1Pg与峰面积值具有良好的线
性关系，回归方程为Y=8398．68+12043．47X，
万方数据
·1340· 中草焉ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9月
，．=0．9997。
供试品溶液的制备：称取茯苓、桃仁、赤芍各20g，
总计60g，按正交试验设计进行提取，提取2次，将
2次提取所得的溶液合并，用水加至1000mL，超过
1000mL则回收溶剂至1000mL，作为样品液。精
密吸取样品液5．0mL，置25mL量瓶中，加乙醇定
容，再精密量取1．0mL置10mL量瓶中，用乙醇定
容，摇匀，0。45弘m微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
测定：将提取液浓缩一定体积，必要时用乙醇稀
释定容，作为供试品溶液。分别精密吸取供试品溶液
和对照品溶液各20弘L注入液相色谱仪，测定，外标
法计算有效成分的质量分数。
赤芍中芍药苷的测定：赤芍中芍药苷的质量分
数为2．61％(行=6)。
桃仁中苦杏仁苷的测定：桃仁中苦杏仁苷的质
量分数为2．53％(，z=6)。
2．3．2试验设计：根据预试验结果，每次试验称取
茯苓、桃仁、赤芍各20g，总计60g，共9份，提取2
次，并以桃仁投料方式(A)、加水量(B)、提取时问
(C)为考察因素，进行L。(34)正交试验，因素水平见
表4，试验设计见表5，其中苦杏仁苷、芍药苷的转移
率以测得值与投料的药材中质量相比得出的，综合
评分指标为芍药苷转移率×50％+苦杏仁苷转移
率×50％。试验结果的方差分析见表6。
表4茯苓、赤芍、桃仁正交试验因素水平
Table4 FatorsandleversoforthogonaltestforPoria，
RadixPaeoniaeRubra，andSemenPersicae
结果表明，A、B、C因素对桃仁、赤芍、茯苓提取
率影响的主次关系为A>B>C，即投料方式对提取
效率影响最大，其次为加水倍数，再次为提取时间。
且每个因素各水平的关系为As>Az>At，Bz>B。>
B。，C。>C：>C。。方差分析结果表明，投料方式对提
取效率的影响差异有统计学意义(P水倍数和提取时间对统计结果无显著影响。故从节
约成本的角度考虑最佳组合水平A。B。C。，即桃仁捣
碎沸下，加6倍量水提取2次，每次1h。
2．4验证试验：以优化所得工艺条件放大10倍进
行3次验证试验，结果桂皮醛和丹皮酚的转移率分
别为(92．43士1．76)％、(91．73士2．08)％，RSD分
裹5茯苓、赤芍、桃仁正交试验结果
Table5 ResultoforthogonaltestforPoria，Radix
PaeoniaeRubra，andSemenPersicae
试验号A B c啦白，裂黧喜芸
l l 1 1 1 67．0357．6367
2 1 2 2 2 73．1856．1368．66
3 1 3 3 3 77．9753．6969．77
4 2 1 2 3 83．1959．9875．93
5 2 2 3 l 88．2758．2377．57
6 2 3 1 2 76．396Z．5773．87
7 3 1 3 2 97．3272．5990．17
8 3 2 1 3 82．6790．3692．48
9 3 3 2 1 87．9084．3291．82
K1 205．43233．1233．35236．39
K2 227．37238．71236．41232．70
K3 274．47235．46237．51238．18
R 69．045．61 4．16 5．48
裹6茯苓、赤芍、桃仁水提的方差分析
Table6 AnalysisofvarianceforPoda，Radix
PaeoniaeRubra，andSemenPersicae
Fo．05(2，2)=19．0Fo．Ol(2，2)=99．0
别为1．91％和2．27％，苦杏仁苷和芍药苷的转移率
分别为(92．47土2．07)％、(87．97士1．46)％，RSD
分别为2．24％和1．66％。可见优化后指标成分转移
均较为充分，表明优化工艺较为理想。
3讨论
桂枝茯苓丸系传统名方，方中各药成分复杂，药
效各异，在工艺设计前，根据方剂的功能、主治、通过
文献资料分析每味药中有效成分与药理作用，根据
有效成分或有效部位及其理化性质，选择适宜的溶
剂和提取方法。方中5味药单纯水提，桂枝和牡丹皮
中挥发性成分易流失；单纯醇提，则耗醇量大，出膏
量相应增加，为挥发性成分的保留增加难度(对挥发
性成分拟用(p一环糊精包裹处理)。根据方中各药有
效成分的性质，采取不同的提取溶剂，5味药中的4
味有了量的控制，既能保证有效成分能够最大溶出，
又能减少服用剂量。
根据中药“多靶点、多方位”的原则，为避免活性
成分的损失，从中各选取二味药的特征成分的转移
万方数据
中草黄 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9月·1341·
率作为评价指标进行综合评分。在用乙醇提取桂枝
和牡丹皮时，选择桂皮醛和丹皮酚的量作为控制指
标，水提取另外3味药材时，选择芍药苷和苦杏仁苷
作为控制指标。采用HPLC法同时可以检测出处方
中成分的量。在数理统计时给每一个指标权重均为
0．5，用权重影响该指标在方案得分中所占的分值。
若以桂皮醛或芍药苷等单一成分的量为指标对
提取工艺条件进行优选，得到的结果常常不完全一
致，有时甚至是矛盾的。用多指标经综合平衡所得的
工艺条件能根据实际需要并兼顾到各指标的理化性
质，是中药复方研究中应提倡的方法。这种方法，较
控制处方中某味药材某种单一成分的量，更为科学
合理。
参考文献：
[1]华剑，武超．HPLC法测定桂枝茯苓胶囊中肉桂酸、桂皮
醛和丹皮酚的含量[J]．安徽医药，2006．10(11)：30—31．
[2]刘彩霞，陈靖．朱晓薇，等．不同形态桂枝饮片中桂皮醛和
桂皮酸含量的考察FJ]．中药材，2006，29(10)：1031—1032．
[3]王友兰．李红兵，华玉琴．HPLC法测定桃仁中苦杏仁苷的含
量[J]．中国药师．2002，5(9)，555—556．
[4]萧伟。彭国平．HPLC法测定醒脑通络粉针中苦杏仁苷与
芍药苷的含量[J]．南京中医药大学学报．2003，19(2)，
102—103．
地榆药材及地榆升白胶囊中没食子酸的HPLC法测定
江帆1，安崇惠1，朱亭潘1，杨世林2
(1．贵州益佰制药股份有限公司，贵州贵阳 550008；2．中药固体制剂国家工程技术研究中心，
江西中医学院，江西南昌 330000)
摘要：目的建立地榆药材及其制剂地榆升白胶囊中没食子酸的测定方法。方法采用高效液相色谱法。色谱条
件：HypersilODS2色谱柱，流动相为甲醇一乙腈一0．05mol／L磷酸(5l6：89)；检测波长：270nm。结果没食子酸
在0．0424～o．424Pg时线性关系良好，回归方程为A一5403987．2706X一27334．9781，r=0．9998，药材及其
制剂的平均回收率分别为98．64％(RSD为1．44％，恕=5)和98．57％(RsD为1．56％，疗一5)。结论该法操作简
便，重现性好，能有效控制质量，可作为地榆药材内控标准和地榆升白胶囊的测定方法。
关键词：地榆}地榆升白胶囊；没食子酸，高效液相色谱
中图分类号：R286．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)09—1341一03
地榆升白胶囊为收载于《国家中成药标准汇编》
口腔肿瘤儿科分册的地榆升白片的剂改品种，具有
升高白细胞的功效，临床上用于白细胞减少症[1矗]。
本品为单方制剂，方中药材地榆为《中国药典>>2005
年版一部收录品种，其质量标准较为简单，定量项下
仅有鞣质的测定。地榆中除含有较多鞣质外，还含有
游离的没食子酸和鞣花酸等口]。为了更好控制产品
质量，提高定量测定方法的特异性，本实验选用地榆
药材中没食子酸为定量指标，对样品前处理和色谱
条件等[‘羽进行了优化，分别建立了地榆药材和地榆
升白胶囊的测定方法，进一步提高药材质量控制水
平，达到更有效控制制剂质量的目的。
I仪器与试药
Watersl525高效液相色谱仪，487紫外检测
器；恒温柱箱；Breeze工作站数据处理系统；25弘L
微量进样器(Hamilton公司)。
没食子酸对照品(批号：110831—200302，中国
药品生物制品检定所)，甲醇、乙腈为色谱纯试剂。地
榆药材购于贵州省药材公司，经贵阳中医学院生药
系江维克副教授鉴定，地榆升白胶囊由本公司提供。
2方法与结果
2．1溶液的制备
2．1．1对照品溶液的制备：精密称取没食子酸对照
品10．6mg，置10mL量瓶中，加50％甲醇至刻度，
摇匀。精密量取1mL置50mL量瓶中，加50％甲
醇至刻度，制成21．2／ug／mL的溶液，即得。
2．1．2药材供试品溶液的制备：取本品细粉约
0．1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50％
甲醇25mL，称定质量，加热回流1h后，放冷，再称
定质量，用50％甲醇补足减失质量，摇匀，0．45／Lm
滤膜滤过，即得。
2．1．3制剂供试品溶液的制备：取地榆升白胶囊内
收稿日期：2008—02—25
作者简介：江帆(1963一)，女，贵州都匀人，副主任药师．硕士，1984年毕业于华西医科大学药学院，2001年获中国药科大学硕士学位．
先后就职于贵州省药品检验所、珠海丽珠集团科研管理部，现为贵州益佰药物研究所所长、贵阳医学院院外硕士生导师，主要
从事药物质量及新药开发研究．Tel：(0851)4705590—8158E—mail：dyjiangfan@126．com
万方数据
正交试验优选桂枝茯苓丸处方药材的提取工艺
作者： 朱燕飞， 楼英， 钱建明
作者单位： 诸暨市人民医院,浙江,诸暨,311800
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(9)
被引用次数： 1次

参考文献(4条)
1.华剑;武超 HPLC法测定桂枝茯苓胶囊中肉桂酸、桂皮醛和丹皮酚的含量[期刊论文]-安徽医药 2006(11)
2.刘彩霞;陈婧;朱晓薇 不同形态桂枝饮片中桂皮醛和桂皮酸含量的考察[期刊论文]-中药材 2006(10)
3.王友兰;李红兵;华玉琴 HPLC法测定桃仁中苦杏仁苷的含量[期刊论文]-中国药师 2002(09)
4.萧伟;彭国平 HPLC法测定醒脑通络粉针中苦杏仁苷与芍药苷的含量[期刊论文]-南京中医药大学学报 2003(02)

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1. 王华.艾桂云.陈海清 桂杏止咳颗粒提取工艺正交试验研究[期刊论文]-青岛医药卫生2008,40(3)
2. 王留兴 牡丹皮乙醇提取工艺研究[期刊论文]-长春中医药大学学报2008,24(1)
3. 陈卫卫.邓超澄.冯看.黄忆阳 正交试验优选白虎汤的提取工艺[期刊论文]-中药材2007,30(5)
4. 张学兰.徐萍 均匀设计优选桂枝甘草汤的半仿生提取工艺条件[期刊论文]-中成药2006,28(8)
5. 郝柳妮.吴纯洁.Hao Liuni.Wu Chunjie 消疤软膏提取工艺研究[期刊论文]-亚太传统医药2009,5(8)

引证文献(1条)
1.王霞.靳凤云.马克勤 正交试验优选紫虎烧伤膏的提取工艺[期刊论文]-中国医药导报 2009(34)


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