全 文 ：表 2　半枝莲药材和灯盏花素片中野黄芩苷的测定 (n= 6)
Table 2　D eterm ination of scutellar in in H erba Scu tella r iae
B a rba tae and D engzhanhuasu Tablets (n= 6)
样　品 野黄芩苷ö% RSD ö%
半枝莲　　　1 1211 213
　　　　　　2 1213 210
　　　　　　3 1118 311
灯盏花素片　1 1315 211
　　　　　　2 1312 211
　　　　　　3 1311 216
töm in
12野黄芩苷
12scu tellarin
图 2　野黄芩苷对照品 (A)、半枝莲药材 (B)和灯盏花素片
(C)的毛细管电泳图
F ig12　Electrophorogram of scutellar in reference
substance (A) , H erba Scu tella r iae B a rba tae
(B) , and D engzhanhuasu Tablets (C)
溶液接触, 既消除了分离电场对检测的影响, 又不存
在电极中毒的问题; 用毛细管电泳2高频电导检测法
测定, 样品前处理简便易行, 检测方法简便、快速、灵
敏、廉价, 符合药品检测的需要, 是一种较好的、值得
推广的检测中药有效成分的新方法。
参考文献:
[ 1 ]　中国药典 [S ]1 一部1 20051
[ 2 ]　边才苗, 李钧敏 1 中药半枝莲黄酮类化合物含量测定及初步
分析[J ]1 浙江中医学院学报, 2001, 25 (6) : 601
[ 3 ]　李守拙, 潘海峰 , 康少文 1 半枝莲药材中总黄酮含量测定
[J ]1承德医学院学报, 2001, 18 (1) : 332351
[ 4 ]　席荣英, 孙祥德1 半枝莲中总黄酮含量测定 [J ]1 新乡医学院
学报, 2003, 20 (1) : 292301
[ 5 ]　邸多隆, 刘丽春, 刘晔玮, 等1 半枝莲提取工艺的研究[J ]1 中
成药, 2003, 25 (7) : 53025321
[ 6 ]　饶　毅, 魏惠珍, 王义明, 等 1 高效毛细管电泳法测定灯盏花
素系列制剂的含量 [J ]1 中成药, 2002, 24 (8) : 58425861
[ 7 ]　袁崇均, 王　笳, 杨　红, 等 1 正交试验法优选半枝莲提取工
艺的研究 [J ]1 华西药学杂志, 2002, 17 (2) : 11221131
[ 8 ]　Chen Z G, M o J Y, Yang X Y, et a l1 A new cap illary elec2
tropho resis apparatus w ith p iezoelectric ceram ics h igh vo ltage
and amperom etric detecto r [J ] 1 Ch in Chem L ett, 1999, 10
(3) : 2311
[ 9 ]　陈缵光, 莫金垣1 毛细管电泳高频电导检测器的研制 [J ]1 高
等学校化学学报, 2002, 23 (5) : 8011
RP-HPLC 法测定杭白芍及其饮片中芍药内酯苷、
芍药苷和苯甲酰芍药苷
葛志伟, 贺　庆, 林云径, 程翼宇Ξ
(浙江大学药学院 中药科学与工程学系, 浙江 杭州　310027)
摘　要: 目的　采用H PL C 法测定杭白芍药材与饮片中芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷3 种成分的量。方法　
色谱柱为Zo rbax SB 2C18柱; 流动相为0105% 磷酸水溶液20105% 磷酸乙腈溶液; 梯度洗脱; 体积流量1 mL öm in; 柱温
30 ℃; 检测波长230 nm。结果　芍药内酯苷在01131～ 1131 Λg, 芍药苷在01425～ 4125 Λg, 苯甲酰芍药苷在01086～
01576 Λg 与峰面积呈良好的线性关系。加样回收率分别为芍药内酯苷9616% (R SD 为112% ) , 芍药苷9817% (R SD
为213% ) , 苯甲酰芍药苷9714% (R SD 为117% )。结论　所建立的方法适合杭白芍中有效成分的测定, 并且杭白芍
药材中芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷的量高于饮片。
关键词: 杭白芍; 芍药内酯苷; 芍药苷; 苯甲酰芍药苷; 高效液相色谱
中图分类号: R 286102　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253- 2670 (2008) 03- 0378- 03
　　杭白芍为毛茛科植物芍药 P aeon ia lactif lora
Pall1 的干燥根, 具有平肝止痛、养血调经、敛阴收汗
的功效。白芍总苷具有调节免疫、改善学习记忆行
为、镇痛、镇静、解痉等作用[1 ] , 其主要活性成分为芍
药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷等单萜苷类化合
物[2 ]。本实验比较了杭白芍药材与饮片中芍药苷、芍
药内酯苷和苯甲酰芍药苷的量, 为更全面评价白芍
的质量并制定合理加工工艺提供了依据。
·873· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 3 期 2008 年 3 月
Ξ 收稿日期: 2007206201
基金项目: 国家重点基础研究发展计划 (973)项目 (2005CB523402) ; 浙江省中医药管理局科技计划重点项目 (2006Z14)3 通讯作者　程翼宇
1　仪器与试药
　　A gilen t 1100 型高效液相色谱仪(美国A gilen t 公
司) , 配四元梯度泵、在线脱气机、自动进样器、柱温箱、
UV 检测器、Chem Stat ion 色谱数据工作站; A E240 电
子分析天平(梅特勒2托利多仪器有限公司)。
　　乙腈 (色谱纯, 德国M erck 公司) , 超纯水, 其他
试剂均为分析纯。芍药苷对照品 (批号 1107362
200422) 购自中国药品生物制品检定所, 芍药内酯苷
和苯甲酰芍药苷对照品均由本课题组自制, 经NM R
鉴定其结构, H PL C 峰面积归一化法检测质量分数≥
98%。杭白芍药材与饮片经本课题组贺庆博士鉴定为
毛莨科植物芍药P 1 lactif lora Pall1 的根。
2　方法与结果
211　色谱条件: Zo rbax SB 2C 18 (250 mm ×416 mm ,
5 Λm ) ; 流动相: 0105% H 3PO 4 水溶液 (A ) 20105%
H 3PO 4 乙腈溶液 (B ) ; 梯度洗脱: 0～ 5 m in, 95%A ,
5～ 20 m in, 85%A , 20～ 30 m in, 75%A , 30～ 45
m in, 50%A , 45～ 50 m in, 5%A ; 体积流量: 1 mL ö
m in; 柱温 30 ℃; 检测波长: 230 nm ; 进样量: 10 ΛL。
在此条件下, 3 种被测成分色谱峰均达到基线分离。
212　对照品溶液的制备: 取芍药内酯苷、芍药苷和
苯甲酰芍药苷对照品适量, 精密称定, 以甲醇溶解并
稀释至10 mL 量瓶中, 摇匀, 分别配制成1164、5132、
1181 m gömL 的对照品溶液。
213　供试品溶液制备: 取白芍粉末约 1 g (过四号
筛 ) , 精密称定, 加入甲醇50 mL , 热回流提取1 h, 滤
过, 滤液用微孔滤膜(0145 Λm ) 滤过, 取续滤液, 即得。
214　线性关系与线性范围: 取上述对照品溶液各
018 mL , 定容于 10 mL 量瓶中, 分别进样 1、2、4、6、
8、10 ΛL , 测定峰面积。以进样量为横坐标, 峰面积为
纵坐标, 进行回归计算, 得回归方程。芍药内酯苷:
Y = 11234 X + 5187, r= 01999 9, 在01131～ 1131 Λg
呈良好的线性关系; 芍药苷: Y = 01764 2 X + 1712,
r= 01999 9, 在01425～ 4125 Λg 呈良好的线性关系;
苯甲酰芍药苷: Y = 11212 X + 2178, r= 01999 8, 在
01086～ 01576 Λg 呈良好的线性关系。
215　精密度试验: 取 6 号样品一份, 制备供试品溶
液, 连续进样6 次, 测定, 计算芍药内酯苷、芍药苷和
苯甲酰芍药苷峰面积的R SD , 结果显示R SD 分别为
119%、115%、113%。
216　稳定性试验: 取 6 号样品一份, 制备供试品溶
液, 分别于 0、2、4、8、12、24 h 注入高效液相色谱仪,
测定峰面积, 计算得芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍
药苷峰面积R SD 分别为 116%、113%、110% , 结果
显示供试品溶液中芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍
药苷在24 h 内稳定。
217　重现性试验: 精密称取6 号样品粉末6 份, 各1
g, 制备供试品溶液, 测定, 计算各成分的质量分数,
结果芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷的R SD 分
别为111%、119%、0186%。
218　加样回收率试验: 精密称取 6 号样品粉末 015
g, 以样品中各成分量的等倍水平加入各对照品, 制
备供试品溶液, 进样测定, 重复试验 6 次取平均值,
计算回收率, 结果芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药
苷的平均回收率和 R SD 分别为 9616%、1118% ,
9817%、2128% , 9714%、1168%。
219　样品的测定: 对收集11 批不同产地、不同批号
杭白芍药材及饮片, 按所建立分析方法测定峰面积,
重复 3 次取平均值, 按外标法计算样品中芍药内酯
苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷的量, H PL C 图谱见图 1,
测定结果见表1。
töm in
12芍药内酯苷　22芍药苷　32苯甲酰芍药苷
12alb iflo rin　22paeon iflo rin　32benzoylpaeon iflo rin
图 1　杭白芍药材 (A)、饮片 (B)和对照品 (C)的HPLC 图
F ig11　HPLC Chromatogram s of Rad ix Paeon ia
A lba (A) , processed products (B) , and
reference substances (C)
3　讨论
　　在色谱条件优化过程中, 选择了水2乙腈、水2乙
腈2乙酸、水2乙腈2甲酸、水2乙腈2磷酸体系, 结果水2
乙腈体系所得色谱峰的拖尾比较严重, 峰 4 的峰宽
在 2 m in 左右; 水2乙腈2乙酸、水2乙腈2甲酸体系能
较好的抑制峰 4 的拖尾, 但是易造成基线漂移; 水2
乙腈2磷酸体系不但明显改善了峰4 的峰形, 对待测
·973·中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 3 期 2008 年 3 月
表 1　样品中各有效成分的测定结果 (n= 3)
Table 1　Analysis results of samples (n= 3)
样品 收购地 (批次)
芍药内
酯苷ö% 芍药苷ö% 苯甲酰芍药苷ö%
1 浙江磐安新渥镇上葛南坡 (药材) 01306 11991 01177
2 浙江磐安大盘镇学田 (药材) 01211 21043 01165
3 浙江磐安冷水镇岩潭 (药材) 01250 21489 01181
4 浙江磐安新渥镇上葛北坡 (药材) 01378 21276 01299
5 浙江磐安新渥镇祠下 (药材) 01241 21379 01117
6 浙江杭州武林药店 (生白芍饮片) 01618 01510 01083
7 浙江杭州张同泰药店 (生白芍饮片) 01992 01734 01080
8 浙江杭州天天好大药房 (生白芍饮片) 01773 01607 01069
9 浙江磐安 (炒白芍饮片, 040814) 01579 01312 01051
10 浙江磐安 (炒白芍饮片, 050621) 01504 11004 01067
11 浙江磐安 (炒白芍饮片, 060224) 01557 01475 01057
成分的峰形也得到了优化, 最终选择水2乙腈2磷酸
体系为流动相体系。
　　在所测样品中, 杭白芍饮片中芍药苷和苯甲酰
芍药苷的量均明显低于杭白芍药材。以往研究亦有
报道芍药中芍药苷在炮制后的量均有所下降[3 ] , 通
过比较杭白芍药材与饮片的H PL C 图谱, 发现饮片
中出现一新成分 (峰4)。通过进一步质谱分析, 该化
合物相对分子质量m öz 544, 通过多级质谱研究其
与芍药苷裂解规律, 推测该化合物为芍药苷 4 位羟
基与 SO 2 结合形成的人工产物芍药苷璜酸酯
(paeon if lo rin su lfonate) [4 ] , 苯甲酰芍药苷与芍药苷
有相似的母核, 也生成相应的璜酸酯导致其量下降。
测定结果表明饮片中的芍药苷的量未能达到《中国药
典》2005 年版一部的要求, 而芍药苷璜酸酯的量较
高, 按照《中国药典》2005 年版一部规定, 生白芍的炮
制工艺: 洗净, 润透, 切薄片, 干燥; 炒白芍: 取白芍净
片清炒至微黄, 根据上述研究, 推测白芍在炮制过程
中可能采用硫磺熏制, 从而导致芍药苷的量下降。
参考文献:
[ 1 ]　周　强, 栗占国 1 白芍总苷的药理作用及其在自身免疫性疾
病中的应用[J ]1 中国新药与临床杂志, 2003, 22 (11) : 6872
6911
[ 2 ]　王　巧, 刘荣霞, 毕开顺, 等 1 H PL C 法测定白芍总苷胶囊中
芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷[J ]1 中草药, 2005, 36
(11) : 1630216321
[ 3 ]　张家富, 孟　楣, 邢安之1 H PL C 法测定白芍不同饮片中芍药
苷的含量[J ]1 安徽医药, 2005, 9 (8) : 58825891
[ 4 ]　H ayes P Y, L ehm ann R , Penm an K1 Sodium paeon iflo rin
su lfonate, a p rocess derived artifact from paeon iflo rin [J ] 1
T etrahed ron L ett, 2005, 46: 2615226181
超微冻干人参的粉体特征、皂苷测定及功效研究
赵伯涛1, 钱　骅1, 徐德然2, 张卫明1, 戴　岳2, 黄晓德1Ξ
(11 南京野生植物综合利用研究院, 江苏 南京　210042; 21 中国药科大学中药学院, 江苏 南京　210038)
摘　要: 目的　研究超微粉碎对冻干人参粉体特征、皂苷的量及功效影响。方法　采用电子显微镜扫描、H PL C 分析、
动物试验对超微粉碎冻干人参粉进行粉体特征观察、皂苷溶出量测定和抗应激能力比较。结果　超微粉碎使冻干人
参细胞壁破碎、皂苷溶出量提高、小鼠耐缺氧和低温游泳时间显著延长。结论　超微粉碎可提高冻干人参功效。
关键词: 人参; 冻干; 超微粉碎; 粉体特征; 皂苷溶出; 耐缺氧
中图分类号: R 28611　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253- 2670 (2008) 03- 0380- 03
　　人参是我国传统滋补中药。冻干加工的人参其
热敏性成分丙二酸单酰基皂苷损失很少, 传统经热
处理加工的人参 (如红参等)中丙二酸单酰基皂苷成
分大部分降解; 人参冻干加工可保留鲜人参中绝大
部分的活性成分, 药性与鲜人参相同, 偏凉平和, 适
合大部分人群应用[1 ]。冻干人参抗疲劳作用显著[2 ]。
超微粉碎技术是近年来发展起来的一种粉碎新技
术, 在中药加工上的应用研究日趋增多, 取得了良好
的效果。由于超微粉碎使颗粒微细化导致表面积和
孔隙率增加, 细胞破壁, 活性成分溶出速率和含量提
高, 因而能加强生物活性。对冻干人参进行超微粉碎
加工, 在保持成分稳定和药性平和基础上, 可提高人
参的生物利用度、减少用药量、使活性作用增强。本
实验研究了冻干人参超微粉碎对粉体特征、皂苷成
分和小鼠抗应激能力的影响。
1　仪器与材料
　　GQU S—300 型气流粉碎机,A gilen t 1100 高效
液相色谱系统, G1312A 泵, G1313A 自动进样器,
·083· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 3 期 2008 年 3 月
Ξ 收稿日期: 2007205208
基金项目: 科技部成果转化项目 (05EFN 2172200440)