全 文 ：中草蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12月·1897·
以选定检测波长为280am。
3．3样品提取方法的选择：根据对照品的溶解性，选
择以甲醇为溶剂。考察了甲醇质量分数、提取方式、时
间、温度和提取次数对样品中所测成分的影响，以直
铁线莲宁B的峰面积为评价指标，结果表明60％甲
醇60rc下超声提取1h为最佳提取条件。
3．4量的限定：板蓝根药材的主产地为河北、河南、
安徽、江苏等地，对主产地药材定量测定结果表明，
不同产地板蓝根药材直铁线莲宁B的量差别较大，
以江苏、吉林、安徽、河北量较高。各产地平均量为
0．041％，以降低20％为限度计，板蓝根药材中直
铁线莲宁B的量应不低于0．033％。
板蓝根抗病毒的有效成分不明确，导致其原药
材及其制剂的质量控制方法相对落后。本实验是建
立在对板蓝根抗病毒有效成分已进行系统筛选的基
础上，在水提物中已经分离得到31个化合物中，以
木脂素糖苷直铁线莲宁B的量最高，且具有明显的
抗病毒及抗氧化活性，此前对该物质的定量测定方
法未见报道。
参考文献：
[-13HiranoH。TakashiT，ToshioY，eta1．Isolationoffree
radicalseavengerfromCoptidisRhizoma[J]．NatMed，
1997，5l(6)：5391．
[2]俞善昌．氧自由基与清除剂口]．中国实用儿科杂志，1993。
8(2)：78．
[3]张永文，俞敏倩，陈玉武，等．板蓝根中的木脂素双葡萄糖
苷【J]．中国中药杂志．2005，30(5)t395—399．
RP—HPLC法测定赤芍药材中没食子酸、儿茶素、芍药苷、
芍药内酯苷、苯甲酸
董 玄，高文远。，高 颖
(天津大学药物科学与技术学院，天津300072)
摘要：目的 建立了用RP—HPLC对赤芍中没食子酸，儿茶素、芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酸同时定量的方法，并
对不同产地赤芍药材进行考察。方法高效液相色谱法，色谱柱为WatersSunfirecolumnsC】8(150mm×4．6mm，
5gm)，流动相为甲醇一乙腈一0．1％磷酸梯度洗脱；检测波长采用变波长检测；柱温为40fc；进样量为10pL。同时
测定了赤芍中没食子酸、儿茶素、芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酸的量。结果没食子酸在0．013～0．506腭线性关系
良好(r一0．9996)、儿茶素在0．025～0．9936tzg线性关系良好(，．=0．9997)、芍药苷在0．200～8．017弘g线性关
系良好(r----0．9996)、芍药内酯苷在0．030～1．184pg线性关系良好(r一0．9996)、苯甲酸在0．037～1．485pg线
性关系良好(r----0．9996)。平均回收率没食子酸为98．08％，RSD为1．65％；儿茶素为101．80％，RSD为3．07％≯
芍药内酯苷为99．18％，RSD为3．25％；芍药苷为95．95％，RSD为1．39％；苯甲酸为101．85％，RSD为1．35％。
结论本方法测定了不同产地、不同批号赤芍样品中5种化学成分的量，该方法分离度好，快速，简便，重现性好。
关键词：赤芍；没食子酸；儿茶素；芍药苷；芍药内酯苷；苯甲酸；高效液相色谱法
中图分类号：R282．6 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)12—1897一03
赤芍为毛茛科植物芍药Paeonialactiflora
Pall．或川赤芍P．veitchiiLynch的干燥根[1]。主产
于内蒙古、辽宁、河北、黑龙江、吉林等地，甘肃、山
西、青海等地亦产[2]。赤芍的功能为清热凉血、散淤
止痛n]。赤芍总苷中主要含有芍药苷
(paeoniflorin)、芍药内酯苷(albiflorin)、羟基芍药
苷(oxypaeoniflorin)、苯甲酰芍药苷(benzoyl
paeoniflorin)等单萜类化合物，还有儿茶素((+)一
catechin]、没食子酸(galicacid)等多酚类物质。此
外，赤芍中还含有苯甲酸(benzoicac d，BA)【3“]。本
实验采用RP—HPLC法测定了赤芍中有效成分没食
子酸JL茶素、芍药内酯苷、芍药苷的量，同时对苯甲
酸也进行了定量。
1仪器与试药
美国HPll00色谱仪Agilent公司，G1311A四
元泵，G1322A、G1314AVWD检测器，HPRev．
A0501化学工作站；甲醇、乙腈为色谱纯，康科德公
司生产；实验用水为娃哈哈纯净水，其余试剂均为分
收稿日期：2008—06—22
基金项目：天津市科技创新专项资金项目(06FZZDSH00404)
作者简介：董玄(1985一)，女，天津人，在读硕士。主要从事中药资源学及中药质量控制方法研究。
*通讯作者高文远Tel／Fax：(022)87401895E—mail：pharmgao@tju．edu．cn
万方数据
·1898· 中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12月
析纯。本研究收集了不同产地的赤芍药材5批，经天
津大学高文远教授鉴定为正品赤芍。
芍药内酯苷对照品购自中新药业研究中心，质
量分数大于98．o％；其余对照品购自中国药品生物
制品检定所，芍药苷批号：110736—200732，没食子酸
批号：110831—200302，儿茶素批号：877—200001，苯
甲酸批号：100419—200301。
电子天平：SartoriusCP225D(O．01mg)，由北
京赛多利斯仪器系统有限公司生产；KQ3200DB型
数控超声清洗器，由昆山市超声仪器有限公司生产。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱为WatersSunfireC18(150
mm×4．6mm，5lam)；流动相采用三元体系，A为
甲醇，B为乙腈，C为0．1％磷酸梯度洗脱，梯度洗
脱程序为：0～7min(1％～1％A，4％～4％B，
95％～95％C)，体积流量0．5～0．5mL／min；7～
14min(1％～1％A，4％～12％B，95％～87％
C)，体积流量0．5～0．8mL／min；14～1．5min
(1％～1％A，12％～12％B，87％～87％C)，体积
流量0．8～O．6mI。／min；15～32min(1％～1％A，
12％～17％B，87％～82％C)，体积流量0．6---,0．6
mL／min；32～45min(1％～1％A，17％～17％B，
82％～82oAC)，体积流量o．6～O．6mL／min。检测
波长采用可变波长检测：0--20min，275nm；20～45
min，230nm；柱温40℃；进样量10pL。对照品及
样品的色谱图见图1。
4
r—而—可广1矿—矿
mHl
l一没食子酸 2-)L茶素3一芍药内酯苷 4一芍药苷 5一苯甲酸
l-galicacid2-(+)-catechin3-alb florin4-paeoniflorin
5一benzoicacid
图1对照品(A)和赤芍样品(B)的HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsofreferenceubstance(A)
andRadixPaeoniaeRubras mple(B)
2．2对照品溶液制备方法：精密称取没食子酸、儿
茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸对照品，用甲醇溶
解分别配制成一定质量浓度对照品溶液；分别精密
吸取上述对照品若干配制成质量浓度分别为250、
50、60、400、75肛g／mL的混标溶液25mL；精密吸
取上述溶液0．25、1、2、4、6、8mL置10mL容量瓶
中，加甲醇定容至刻度，制成一系列不同质量浓度的
混和对照品溶液。
2．3供试品溶液制备方法：精密称取赤芍粉末0．2
g至具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇20mL，称
定质量，冷浸16h，超声提取45min(功率100
W)，取出放冷，50％甲醇补质量，静置，吸取上清
液，0．22lam微孔滤膜滤过即得。
．4线性关系考察：在上述色谱条件下，将配制的
系列对照品溶液分别进样20弘L，以进样量为横坐
标，峰面积为纵坐标进行线性回归，得回归方程分别
为：没食子酸y一6256．7X+17．384，r=0．9996，
在0．013～0．506lag线性关系良好；儿茶素Y一
4 953．4X一14．493，，．一0．9997，在0．025～0．993
6lag线性关系良好；芍药内酯苷Y=1088．5X—
18．8，r=0．9996，在0．030～1．184肛g线性关系良
好；芍药苷y=2757．2X一93．786，，．=0．9999，在
0．200～8．017lag线性关系良好；苯甲酸Y一
9 651．6X一51．605，r一0．9996，在0．0371．485
pg线性关系良好。
2．5精密度考察：精密吸取对照品溶液20弘L，连
续重复进样5次，记录峰面积，结果没食子酸、儿茶
素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸峰面积的RSD分
别为1．36％、1．25％、1．44％、1．37％、0．63％，表明
精密度良好。
2．6稳定性考察：取同一供试品溶液，按照上述色
谱条件，在0、2、4、6、8h进样，结果表明供试品溶液
在8h内稳定，没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药
苷、苯甲酸峰面积的RSD分别为0．54％、1．49％、
2．01％、1．19％、0．39％。
2．7重现性考察：取同一批赤芍药材，制备供试品
溶液5份，分别进样10肛L，测定峰面积和质量分
数。没食子酸JL茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸
质量分数的RSD分别为1．84％、1．82％、2．82％、
1．48％、1．84％。
2．8加样回收率试验：精密称取赤芍样品0．1g，
共6份，分别加入一定量对照品，按照2．2项下制
备，在上述色谱条件下进样分析，计算回收率。没食
子酸平均回收率98．08％，RSD为1．65％；儿茶素
平均回收率101．80％，RSD为3．07％；芍药内酯苷
平均回收率99．81％，RSD为3．25％；芍药苷平均
回收率95．95％，RSD为1．39％；苯甲酸平均回收
率101．85％，RSD为1．35％。
2．9样品测定：取不同产地的赤芍药材，按供试品
制备方法制备样品，测得5种成分质量分数，结果见
表1。
(下转附4页)
万方数据
：附4· 中草喃 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12月
放射医学与防护杂志，1996，16(1)：61．
[3]肖 俐，何秀兰．“治末病”理论在治疗放疗副反应中的I临床
应用EJ]．中国中医基础医学杂志，20047，13(i)：66．
[43苏文娜，蒋铭敏．辐射损伤防治药物的研究进展[J]．中华
放射医学与防护杂志，2006，26(3)：307．
[5]张长林．王兆强．中药抗辐射作用的研究概况[J]．中国中
西医结合影像学杂志，2006，4(5)：377．
[63赵莲芳。郑丘淑，朴惠顺．等．黄苠多糖及人参总皂苷对衰
老小鼠的抗衰老作用口]．延边大学医学学报，2006，29
(4)：249．
[7]邹丹，乔海灵，全宏勋，等．三七皂甙对辐射所致小鼠骨
髓抑制的对抗作用口]．中华放射医学与防护杂志，2000，
20(6)：413．
[8]陶明飞，杨卫东，王俊和．刺五加对放射损伤骨髓微血管的
保护作用[J]．中国公共卫生，2004，20(6)：683．
[9]陶明飞，杨卫东，王俊和．刺五加注射液、血府逐瘀口服液
对小鼠骨髓微循环的影响[J]．成都中医药大学学报，2004，
27(1)：11．
Do]刘振芳．孙汉英。刘文励，等．川芎嚓促进急性放射损伤小
鼠骨髓造血修复作用的研究[J]．中华放射医学与防护杂志，
2004，24(5)：396．
[11]孙岚，刘文励。孙汉英，等．川芎嗪对放射损伤小鼠骨髓
基质细胞血管内皮生长因子表达的影响[J]．中国实验血液
学杂志，2004，12(1)：86．
D2]汪德清，沈文梅，田亚平，等．黄芪总黄酮对犬模拟肺癌术
中放疗抗辐射损伤作用的研究口]．中华放射医学与防护杂
志，1996，16(6)：399．
[13]金宏，刘丽，王先远，等．大豆异黄酮抗辐射作用的实
验研究[J]．氨基酸和生物资源，2004，26(3)：23．
[14]李德远，张晓字，汤坚，等．银杏叶提取物对小鼠的抗辐
射效应[J]．华中农业大学学报，Z003，22(3)：289．
[15]刘丽渡，孙晓玲．人参二醇组甙对小鼠骨髓细胞染色体的辐
射防护作用[j]．中华放射医学与防护杂志，2002，22(2)：
114．
[16]陈月。王宝贵，张桂英。等．刺五加皂苷的抗辐射损伤作
用[J]．吉林大学学报：医学版，2005，31(3)：423．
[17]迟文，徐静，郭凌燕。等．梅多酚对核辐射损伤的血细
胞与造血组织的保护作用[J]．解放军药学学报，2003，19
(3)：168．
[18]隋萍，钟进义．葡多酚对骨髓细胞辐射损伤的保护作用
[J]．中国公共卫生，2006，22(8)：942．
[19]钟迸义，于洪升，栗世如．葡多酚x,t4,鼠急性放射损伤的防
护作用研究[J]．中华放射医学与防护杂志，1999，19(5)：
345．
[20]周丽君。方允中，章扬培。等．绿茶多酚等五抗辐射药物对
质粒pBR322DNA辐射损伤防护效应的研究[J]．华放射医
学与防护杂志。1999．15(6)：415．
[213刘国廉，康鑫，祝霄霞，等．茶多酚对7一射线辐射体外诱
发CHL细胞转化的防护作用[J]．中华放射医学与防护杂
志，1999，16(3)：183．
[22]唐于平。楼凤昌，王景华。等．银杏叶中黄酮类成分的研究
[J]．中国药学杂志，2001，36(4)：231．
[233韩京艳，邢东明，孙虹，等．银杏叶提取液内酯及天然配
比抗氧化作用的比较EJ]．中国药理学通报，2002，18(I)t
115．
[24]张艳，李京培，李文方．银杏叶提取物的体外抗病毒作用
EJ3．安徽中医临床杂志，2000，12(3)：206．
[25]刘哲峰，赵宏．生脉注射液提高机体抗辐射能力临床研究
EJ]．科技技术与工程，2005．5(14)：980．
[26-1隋燕霞，肖纯，赵东利．康艾注射液对乳腺癌患者抗辐射
损伤的研究EJ]．西北药学杂志，2006．21(20)：75．
[27]纪辉，张春霞，吕志友．人及动物慢必放射性皮肤溃疡电
镜观察[J]．中华放射医学与防护杂志，1999，19：39．
[28]卢金利，刘小平．芦荟凝胶对放射性皮炎愈合的影响[J]．
实用医学杂志，2006，22(19)：22(i9)：2226．
[293宇艮青，王言，张永．巴氏膏治疗急性放射性皮肤损伤
的I临床观察[J]．中华放射医学与防护杂志，2003，23(5)：
333．
[30]杨晓虹．郁海香对慢性放射性皮肤损伤的疗效观察[J]．中
华放射医学弓防护杂志．2006，26(1)：80．
[31]周富玲，张金桃，黄晓艳，等．口灵在放射性口咽黏膜损伤
中的防治作用[J]．广西医学，2004，26(5)：732．
[32]刘雪华，王阿克，李铁红．中药雾化吸人预防放射性口腔黏
膜反应35例EJ]．中医外治杂志，2006，15(5)：20．
[333纪明侯．海藻化学[M]．北京：科学出版社，1997．
[34]王文祥。廖惠珍，李锋平，等．茶多酚促排镉作用的实验
[J]．毒理学杂志，2005，19(增刊)：270．
[35]陈斌．周熙成．天然抗氧化剂对空间辐射的防护作用[J]．
航天医学与医学工程，2003，16(增刊)：514．
搴牙她萍笞的莽菩她$髫嘲蹲若勒昏笤啦莽葛警莽笛蚍彝苔均昂苔均萍留屹器岔弛芦男均萍苫的昏苫啦彝茅电器努的零学电器努迎器学勒滓牙昀$葶昀淬岔电器苕朝器{浮
(土接第1898页)
表l不同产地赤芍药材中的没食子酸、儿茶素、
芍药内酯瞀、芍药苷、苯甲酸测定结果(一=3)
Table1 Determinationofgalica id，(+)-catechin，
albiflorin，paeoniflorin，andbenz icac d
inRadixPaeoniaeRubracollectedfrom
differenthabitats(辟一3)
3讨论
3．1本研究以没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药
苷、苯甲酸为测定指标，考察了50％甲醇、75％乙
醇、甲醇的提取效果，结果表明50％甲醇提取效果
为佳；比较超声和回流两种提取方式，结果表明超声
提取效果较好；进而比较了超声提取15、30、45、60
min的提取效果，结果表明随提取时间的延长，提取
效率提高，但增高趋势逐渐减缓，综合各因素，最终
选择超声提取45min。
3．2本实验采用RP—HPLC法对5批赤芍样品中
的没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸5
种化学成分同时进行定量测定。结果表明，不同产地
赤芍药材中5种成分的量变化很大。参照2005年版
《中国药典》规定，赤芍药材中芍药苷的量不得低于
1．8％，以此为标准所测5批药材质量均合格，但采
用本方法检测的结果显示除芍药苷外的4种成分的
量差异较大，5批赤芍药材质量明显存在优劣。该方
法简便、快捷、准确，为全面控制赤芍的质量提供了
方法基础。
参考文献：
[1]中国药典Is]．一部．2005．
[2]江苏新医学院．中药大辞典(上)[M]．上海：上海人民出版
社。1993．
[3]阮金兰，赵钟祥．曾庆忠．等．赤芍化学成分和药理作用的
研究进展[J]．中国药理学通报，2003，19(9)：965—970．
[4]张克荣，刘荣霞，许俊博。等．RP—HPLC同时测定赤芍3种
化学成分[J]．中国药学杂志。2003．38(10)：793—796．
万方数据
RP-HPLC法测定赤芍药材中没食子酸、儿茶素、芍药苷、芍药
内酯苷、苯甲酸
作者： 董玄， 高文远， 高颖
作者单位： 天津大学药物科学与技术学院,天津,300072
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(12)
被引用次数： 3次
参考文献(4条)
1.中华人民共和国药典(一部) 2005
2.江苏新医学院 中药大辞典(上) 1993
3.阮金兰;赵钟祥;曾庆忠 赤芍化学成分和药理作用的研究进展[期刊论文]-中国药理学通报 2003(09)
4.张克荣;刘荣霞;许俊博 RP-HPLC同时测定赤芍3种化学成分[期刊论文]-中国药学杂志 2003(10)
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1. 张克荣.刘荣霞.许俊博.毕开顺 RP-HPLC同时测定赤芍3种化学成分[期刊论文]-中国药学杂志2003,38(10)
2. 冯学锋.胡世林.张永欣.赫炎.张启伟.格小光.杨京玉.FENG Xue-feng.HU Shi-lin.ZHANG Yong-xin.HE Yan.
ZHANG Qi-wei.GE Xiao-guang.YANG Jing-yu 多伦野生芍药中芍药苷含量动态变化[期刊论文]-中国中药杂志
2008,33(3)
3. 王巧.刘荣霞.毕开顺.果德安.WANG Qiao.LIU Rong-xia.BI Kai-shun.GUO De-an HPLC法测定白芍总苷胶囊中芍
药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷[期刊论文]-中草药2005,36(11)
4. 王彦志.石任兵.刘斌.WANG Yan-zhi.SHI Ren-bing.LIU Bin 赤芍化学成分的分离与结构鉴定[期刊论文]-北京
中医药大学学报2006,29(4)
5. 周红涛.骆亦奇.胡世林.李润锴.刘虎威.冯学峰 赤芍与白芍的化学成分含量比较研究[期刊论文]-中国药学杂志
2003,38(9)
6. 张博.冯锁民.扈本荃.李金娟.贺晨龙 赤芍中化学成分的测定方法探索[会议论文]-2009
7. 刘玉红.张惠珍 高效液相色谱法测定芍药中芍药苷的含量[期刊论文]-中国医院药学杂志2006,26(10)
8. 林海.胡黎 不同产地赤芍中芍药苷的含量测定[期刊论文]-中国医药指南2009,7(16)
9. 王彦志.冯卫生.石任兵.刘斌.姜艳艳.WANG Yan-zhi.FENG Wei-sheng.SHI Ren-bing.LIU Bin.JIANG Yan-yan
赤芍中的单萜类成分[期刊论文]-中国药学杂志2008,43(9)
10. 吴少华.陈有为.杨丽源.李绍兰.李治滢.WU Shao-hua.CHEN You-wei.YANG Li-yuan.LI Shao-lan.LI Zhi-ying
川赤芍的化学成分研究[期刊论文]-中草药2008,39(1)
引证文献(3条)
1.高明.赵镭.赵光树 白芍和赤芍HPLC指纹图谱比较研究[期刊论文]-中草药 2010(11)
2.俞敬波.章军.王文全.黄璐琦.冯学锋.程明.格小光.杨连菊.杨京玉 赤芍野生品与栽培品4种化学成分含量的比较
[期刊论文]-中国实验方剂学杂志 2011(18)
3.李智勇.张建军.曾文雪.王洛临 香芍胃舒康颗粒的质量标准研究[期刊论文]-江西中医学院学报 2011(2)
本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200812049.aspx