全 文 ：·1630· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月
·制剂与质量·
HPLC法测定白芍总苷胶囊中芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷
王巧“2，刘荣霞“2，毕开顺2，果德安”
(1．北京大学中医药现代研究中心，北京100083l2．沈阳药科大学药学院．辽宁沈阳110016)
摘要，目的建立HPLC对白芍总昔胶囊中芍药内醑苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷同时定量的分析方法。方法采
用HPLC法。色谱柱：ZorbaxSB-Cla色谱柱(250mm×4．6mm，5卢m)I流动相lA为乙腈，B为0．015％磷酸溶液，
梯度洗脱程序为：0rain(8“A)，5rain(12蹦A)，20rnin(20％A)．25rain(20“A)；35rain(45％A)，40min
(45％A)I检测波长：230nm；柱温：30℃。蛄果芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷质量浓度与峰面积均呈良好
的线性关系。平均回收率芍药内醣苷为96．99％，RSD为0．56％‘芍药苷为103．6“．RSD为0，77“，苯甲酰芍药
苷为104．2“．RSD为1．35％“一5)。结论该方法分离度好，简便易行，具有良好的重现性，可用于白芍总苷胶囊
中芍药内醋苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷的同时测定。
关■词：白芍总苷胶囊I芍药内酯苷I芍药苷·苯甲酰芍药苷；高效液相色谱
中啊分粪号：R286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2005)1l一1630—03
HPLCDeterminationofalbiflorin，paeoniflorin，andbenz ylpaeoniflorin
inTotalG ucosideofPaeonyCapsule
WANGQia01”．LIURong—xial～，BIKai—shun2，GUODe—anl
(1．ModernResearchCenterforTraditionalChineseMedicine，PekingUniversity，Beijing100083．China‘
2-SchoolofPharmacy·ShenyangPharm ceuticalUniversity，Shenyang110015，China)
Abstraet：0bjectiveAnHPLCmethodwasdevelopedforthedeterminationofalbiflorin，
paeoniflorin，andbe zoylpaeon珊o“ninTotalG ucosideofPaeonyCapsule(TGPC)．MethodsHPLC
analysiswaperformedonaZorbaxSB—C18column(250mm×4．6mm，5川n)withmixtureofacetonitrile
(A)and0．015％phosphoricacidsolutionasmobilephaseingradientmode．Theconcentrationsofsolvent
Awere8％，12％，20％，20％，45％，and45％at0，5，20，25，35，and40rain，respectivelytthe
detectionwavelengthwas230nmandthecolumntemperatureWaS30C．ResultsThestandardcurvesof
albiflorin，paeoniflorin，andbenzoylp eoninorinshowedagoodlinearityandtheaveragerecoverieswere
96．99％withRSD0．56％foralbiflorin，103．6％withRSD0．77％forpaeoniflorin，and104．2％with
RSD1．35％forbenzoylpaeoniflorin一5)，respectively．ConclusionThemethodisquick，simple，and
repeatableforthedeterminationof albiflorin．paeoniflorin．andbenzoylpaeoniflorininTGPC
simultaneously．
Keywords；TotalGlucosideofPaeonyCapsule(TGPC)；alhiflorin；paeoniflorin；benzoylpaeo—
niflorin：HPLC
白芍总苷(totalglucosideofpaeony，TGP)是
由白芍的干燥根中提取的有效部位，含有芍药苷、芍
药内酯苷、羟基芍药苷和苯甲酰芍药苷等单萜苷类
成分。现代药理及临床研究发现，TGP具有多途径
抑制自身免疫反应，以及抗炎、止痛、保肝的作用，对
类风湿性关节炎有确切疗效[1]，其制荆白芍总苷胶
囊(商品名：帕夫林)临床上主要用于类风湿性关节
炎的治疗。一般以芍药苷作为单一定量指标来控制
自芍总苷的质量口13]。
本实验采用HPI。C法同时测定了自芍总苷胶
囊中的3种主要成分：芍药苷、芍药内酯苷和苯甲酰
芍药苷，以期为建立该制剂科学合理的质量控制方
法提供依据。
1仪器与试药
Agilent1100高效液相色谱系统：包括G1379A
脱气机，G1311A四元泵，G1313A进样器，G1316A
柱温箱，G1315B检测器和分析工作站。芍药苷对照
品购自中国药品生物制品检定所；芍药内酯苷和苯
警茎是訾：鹜禁嚣装蒜资助项目(z002BA906A29)，国家中医药管理蔚资助项目(2004zx01)
*通讯作者皋德安Tel{(010)82801516Fax；(010)82802700Email}gda@bjmu．edu．en
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月· 631·
甲酰芍药苷均由本实验室自制，采用uV、
1H—NMR、“C—NMR和MS法鉴定结构。经HPLC纯
度检查，符合定量要求。自芍总苷胶囊由三九医药股
份有限公司生产。乙腈(色谱纯)，无水乙醇、磷酸(分
析纯)，水为双蒸馏水。
2方法与结果
2．1 色谱条件：ZorbaxSB—c18色谱柱(250mm×
4．6mm，5呻)；流动相采用二元体系，A为乙腈，B
为0．015％磷酸溶液，梯度洗脱程序为0rain(8％
A)，5min(12％A)，20min(20％A)，25min
(20％A)；35min(45％A)，40min(45％A)}体
积流量为1．0mL／min；检测波长为230am；柱温为
30℃。色谱图见图1。
一i}：j
0 5 lO 15 20 25 30 35
t／rain
1一芍萄内酯苷2芍药昔3一苯甲酰芍药苷
1 alb[floria2 p eoniflorin3_benzoylpae。n珊。nn
图1对照品(A)和白芍总苷胶囊(B)色谱圈
Fig．1HPLCchromatogramsfreference
substances(A)andTGPC(B)
2．2对照品溶液的制备：精密称取对照品芍药内酯
苷12．8mg、芍药苷22．2mg、苯甲酰芍药苷6．0
mg，分别置10mL量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至刻
度，作为储备溶液。分别精密吸取上述各储备溶液
1．0mL置同～10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，
摇匀，即得对照品溶液。
2．3供试品溶液的制备：取本品内容物约20mg，
精密称定，置10mL量瓶中，加甲醇约8mL，超声
处理使样品全部溶解，放冷至室温，加甲醇至刻度，
摇匀。精密吸取上述溶液1．0mL置5mL量瓶中，
加甲醇稀释至刻度，摇匀，0．45gm微孔滤膜滤过，
即得供试品溶液。
2．4标准曲线的制备：精密吸取对照品溶液0．04、
0．1、0．2、0．4、0．8、1．0、1．5、1．8mL，分别置2mL
量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别进样5pL，
记录色谱图和峰面积。以各成分峰面积(y)为纵坐
标，质量浓度(x)为横坐标，绘制标准曲线，得线性
回归方程。芍药内酯苷：l，一5．5963X+1．0124，
，=0．9995，线性范围为2．56～115．2“g／mL；芍
药苷：y一6．6015x一0．8197，r=0．9998，线性
范围为4．44～199．89／mL；苯甲酰芍药苷：y一
10．7627x+0．7010，r=0．9994，线性范围为
1．2～54．0pg／mL。
2．5 精密度试验：取同一供试品溶液重复进样6
次，每次5肚，测定峰面积。芍药内酯苷、芍药苷和
苯甲酰芍药苷6次峰面积测定结果的RsD分别为
1．43％、1．42％和1．26％。
2．6 重现性试验：取批号20030701白芍总苷胶囊
样品各6份，按供试品溶液的制备方法制备6份供
试品溶液，分别进样5,uL，测定峰面积，计算其质量
分数。芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷6次质量
分数测定结果的RSD分别为1．69％、1．73％和
1．77％。
2．7稳定性试验：取同一供试品溶液分别在0、l、
2、4、6、12、24h进样(不测定时于冰箱4℃冷藏)，
测定峰面积。结果表明，供试品溶液在24h内稳定
性良好，芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷峰面积
的RSD分另Ⅱ为1．86％、1．38％，2．06％。
2．8加样回收率试验：精密称取白芍总苷胶囊(批
号：20030701)5份，各约10mg，分别精密加入一定
量的芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷对照品混
合溶液(含芍药内酯苷0．512mg、芍药苷0．888mg
和苯甲酰芍药苷0．024mg)，制备供试品溶液，测定
各成分峰面积，计算回收率。结果芍药内酯苷的平均
回收率为96．99％，RSD为0．56％；芍药苷的平均
回收率为103．6％，RSD为0．77％；苯甲酰芍药苷
的平均回收率为104．2％，RSD为1．35％。
2．9样品测定：分别取不同批号的白芍总苷胶囊约
20mg，按上述方法制备供试品溶液，分别进样5
皿，测定峰面积，根据标准曲线计算样品中芍药内
酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷的质量分数。每批样品
测定3份，以3次测定结果的平均值作为测定值，结
果见表1。
3讨论
考察提取溶剂时，曾对甲醇和75％、50％甲醇液
进行了比较，发现三者均可将芍药苷、芍药内酯苷和
苯甲酰芍药苷3种成分充分提取。但含水甲醇液即使
经过超声处理也不能使样品完全溶解，样品溶液棍
浊，需经滤过后进行测定。而纯甲醇液可将样品完全
溶解，溶液澄清，免于滤过，使测定过程简单易行。
B
一
万方数据
·1632· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月
衰1 自芍总苷胶囊中芍药内蘸苷、芍药苷和
苯甲融芍药苷的测定结果(”一3)
TableAlbiflorintpaeoniflorin·andbenzoyl—
paeonlflorininTGPC(n一3)
利用二级管阵列检测器对芍药苷、芍药内酯苷
和苯甲酰芍药苷在190～400nm波长进行扫描，经
比较，三者在230nm波长处均有最大吸收，故选择
230nm作为检测波长。
化合物在色谱柱上的保留行为与其化学结构有
关。苯甲酰芍药苷结构中比芍药内酯苷和芍药苷多
一苯环，这一苯环结构使其与其他二者的色谱行为
产生巨大差别，以至在反相色谱柱上采用等度洗脱
时，苯甲酰芍药苷的保留时间远远长于芍药苷和芍
药内酯苷，甚至不能洗脱或即使洗脱也因其保留时
间过长峰形过宽而无法定量。故等度洗脱不适宜同
时测定这3种成分。本实验采用梯度洗脱，可缩短分
析时间，并同时定量3个成分。
在流动相中加人酸可改善芍药内酯苷的峰形。
在酸的选择上，比较了相同pH值的冰醋酸、甲酸和
磷酸溶液，发现加入冰醋酸，基线噪音大，且漂移严
重；甲酸可使基线噪音明显减少，但当流动相中酸溶
液比例较大时，基线仍不平衡；而磷酸可消除基线嗓
音和漂移现象，基线平稳，故采用磷酸。
白芍总苷胶囊中含有多种单萜苷类成分，且这
些成分均有药理活性，故测定3种单萜苷比仅单一
测定芍药苷更能有效控制其质量。本实验所建方法
简单易行、重现性好．可同时测定芍药苷、芍药内酯
苷和苯甲酰芍药苷3种有效成分，为白芍总苷胶囊
的质量控制提供了一种新方法。
Referenees：
[1]ZhouQ，LizG．Pharmaceuticalffectsoftotalg ucosidesof
peonyanditsapplicationinautoimmunediseasc口]ChinJ
NewDrugs@iRem(中国新药与临床杂志)，9003，22
(11)I687—691．
[2]ChenYC，MuHC，LiuSQDeterminadonofp e aiflorinin
TotalG ucosidesofPaeonyCapsulesbyhighpeTformance
capillaryelectrophoresis(HPCE)口]PharmJ ChinPLA
(解放军药学学报)，2002，18(2)：107—108．
[3]QianYN，LiuXS，ZhangXF．Quantitativede erminationof
paeoniflorininDaeonialblnosIdesbyHPLC[13．ChinTradit
HerbDrugs(中草药)．1995，26(7)：349—350．
HPLC法测定大麦芽中麦黄酮
凌俊红1，王楠1，任玉珍2，王龙虎2，王金辉”，李铣1
n。沈阳药科大学，辽宁沈阳】10016，2．中国药材集团公司，北京100007)
摘要：目的建立用HPLC测定大麦芽中麦黄酮的方法。方法采用色谱柱SpherigelCts(150mm×4．6mm，5
pm)，流动相为乙腈一水一四氢呋哺一甲酸(26：74：10}1)，检测波长350nmt体积流量1．0mL／mln，进样量20pI。。
结果麦黄酮在0．22～2．15mg／L(r一0．9998)峰面积与屡量浓度呈莨好的线性关系；平均回收率为97．4％，
RSD为1．7％b=9)。结论该方甚可用于大麦芽中麦黄酮的测定。
关键词：麦芽；麦黄酮j高效液相色谱
中围分类号：R286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2005)11—1632—03
Determinationoftr cini maltbyHPLC
I。INGJun—hon91，WANGNan2，RENYu—zheno，WANGLong—hu2，WANGJin—huf7，I。IXianl
(1．ShenyangPharmaceuticalUniversity，Shenyang110016，China；2．GroupofMedicinalHerbs
ofChina，Beljing100007，China)
Abstract：ObjectiveTodevelopanHPLCmethodforthequantitativeanalysisoftricinmalt．
MethodsHPLCmethodwasused．AnalysiswaperformedonSpherigelC】Rcolumn(150mm×4．6mm，
5gm)withacetonitrile—water—tetrahydrofuran—methanoicacid(26：74：10；1)asmob leph e．The
釜鍪景眢：蓄装：竿参重太科技专项资助项目(2。01BA70lA55—50)I国家自然科学基金资助项目(30472190)尊翥募霖擎由篓茹79乏：％蠹燃产读Fa碗x：士(研02究4)‰23。。E。-。m，；hEli—n鲥uil；nj：翟船972hoo@,co。iprn．,她cn。．⋯
万方数据
HPLC法测定白芍总苷胶囊中芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍
药苷
作者： 王巧， 刘荣霞， 毕开顺， 果德安， WANG Qiao， LIU Rong-xia， BI Kai-shun， GUO
De-an
作者单位： 王巧,刘荣霞,WANG Qiao,LIU Rong-xia(北京大学,中医药现代研究中心,北京,100083;沈阳
药科大学药学院,辽宁,沈阳,110016)， 毕开顺,BI Kai-shun(沈阳药科大学药学院,辽宁,沈
阳,110016)， 果德安,GUO De-an(北京大学,中医药现代研究中心,北京,100083)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(11)
被引用次数： 17次

参考文献(3条)
1.Zhou Q;Li Z G Pharmaceutical effects of total glucosides of peony and its application in
autoimmune disease[期刊论文]-中国新药与临床杂志 2003(11)
2.Chen Y C;Mu H C;Liu S Q Determination of paeoniflorin in Total Glucosides of Paeony Capsules by
high performance capillary electrophoresis (HPCE)[期刊论文]-解放军药学学报 2002(02)
3.Qian Y N;Liu X S;Zhang X F Quantitative determination of paeoniflorin in paeonialbiflosides by
HPLC 1995(07)

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