全 文 ：不同生长期菊茎叶中黄酮类成分的动态变化
钱大玮1 ,朱玲英2 ,段金廒1 ,张 　健2 ,吴 　肖1 ,孙晓东3 3
(11 南京中医药大学 江苏省方剂研究重点实验室 ,江苏 南京 　210046 ; 21 江苏省中医药研究院 ,江苏 南京 　210028 ;
31 江苏苏阳药材集团公司 ,江苏 盐城 　224300)
摘 　要 :目的 　探索不同栽培类型菊茎中黄酮类成分在不同生长期量的变化。方法 　采用高效液相色谱法 ,分别
测定不同栽培类型不同生长期菊茎叶中木犀草素、金合欢素272O2β2葡萄糖苷、木犀草素272O2β2葡萄糖苷和金合欢
素272O2(6″2O2鼠李糖)2β2D2葡萄糖苷的量。结果 　不同栽培类型菊茎叶中黄酮类成分的量差别较大 ,随着生长期
的改变菊茎叶中黄酮类成分的量也有较大的变化。结论 　采用高效液相色谱法测定菊茎叶中黄酮类成分的量 ,方
法简单、可靠。本研究结果为测定菊茎叶中黄酮类成分的量 ,菊采花后茎叶的综合利用提供了一定的依据。
关键词 :菊 ; 黄酮类成分 ; 高效液相色谱法 ; 不同生长期 ; 不同栽培类型
中图分类号 :R28611 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0821317203
　 　 菊 花 系 菊 科 植 物 菊 Chrysant hem um
mori f ol i um Ramat . 的干燥头状花序 ,为一种常用
中药 ,同时又被广泛用于保健茶饮 ,具有疏风、清热、
明目、解毒功效 ,主要治疗头痛、眩晕、目赤、心胸烦
热、疔疮、肿毒等症[1 ] 。菊花中主要含有挥发油、黄
酮类、有机酸类等成分[2～4 ] ,《中国药典》(2005 年
版)以氯原酸为对照品对菊花进行质量控制。在采
摘菊花的同时 ,大量的茎、叶被丢弃 ,但经初步研究 ,
发现菊采花后的茎叶中仍含有大量的黄酮类成分 ,
并对它们进行了药理的筛选工作 ,发现有一定的药
理活性 ,因此对菊进行综合开发利用是必要的。通
过对菊茎叶中的黄酮类成分的分析比较 ,了解其在
生长期内量的变化规律 ,对于深入研究和综合开发
利用菊资源具有十分重要的意义。
菊花的产地不同 ,品种不同 ,其化学成分及质量
分数也有差异 ,江苏省射阳县是我国药用白菊花的
主产区之一 ,在栽培群体中 ,经多年的系统选育 ,筛
选出 4 个已基本稳定的白菊花分化栽培类[5 ,6 ] ,分别
为红心菊、长瓣菊、大白菊、小白菊。笔者对射阳县
产 4 种栽培类型菊茎、叶中木犀草素、金合欢素272
O2β2葡萄糖苷、木犀草素272O2β2葡萄糖苷和金合欢
素272O2(6″2O2鼠李糖)2β2D2葡萄糖苷不同生长期的
量进行测定 ,为充分利用菊花资源提供了依据。
1 　仪器与试药
111 　仪器 : Waters 高效液相色谱仪 (510 泵 ,2487
检测器 ,717 自动进样器 , Empower 色谱工作站) ;
Millipore Milli —Q 纯水器 ; M ET TL ER 万分之一
及十万分之一电子天平。
112 　试药 :木犀草素 (L ) 、金合欢素272O2β2葡萄糖
苷 (A G) 、木犀草素272O2β2葡萄糖苷 (L G) 、金合欢
素272O2(6″2O2鼠李糖)2β2D2葡萄糖苷 ( AR G) 对照
品均由江苏省中医药研究院中药化学研究室提供 ,
各对照品质量分数均大于 98 % ,乙腈为色谱纯 ,水
为超纯水 ,其余试剂均为分析纯。
113 　菊茎叶样品 :于 2004 年 8 月 26 日至 2004 年
11 月 5 日采于江苏省射阳县洋马镇。实验样品均
经江苏省中医药研究院线士辉研究员鉴定为菊科植
物菊 C. mori f ol i um 的以下几种栽培类型 :红心
菊、长瓣菊、大白菊、小白菊。各批样品经统一处理 :
置阴凉通风处 ,晾至近干 ,置鼓风干燥箱于 50 ℃烘
干 ,粉碎过 40 目筛 ,真空包装。
2 　方法与结果
211 　色谱条件
21111 　L 、A G、AR G 色谱条件 :色谱柱为 Alltima
C18 ( 250 mm ×4. 6 mm , 5 μm) ; 流动相为乙腈2
014 % 磷酸水 (25 ∶75) ;体积流量 : 1 mL/ min ;柱
温 : 30 ℃; 检测波长 : L : 347 nm , A G、AR G:
333 nm。色谱图见图 1。
21112 　L G 色谱条件 : 色谱柱为 Alltima C18
(250 mm ×4. 6 mm , 5μm) ;流动相为乙腈2014 %
磷酸水 ( 15 ∶85) ; 体积流量 : 1 mL/ min ; 柱温 :
30 ℃;检测波长 : 347 nm。色谱图见图 2。
·7131·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 8 期 2009 年 8 月
3 收稿日期 :2008212210　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :江苏省自然科学基金 (B K2001219) ; 江苏省公益研究项目 (BM2004525)
作者简介 :钱大玮 (1962 —) ,男 ,江苏人 ,研究员 ,主要从事中药质量控制研究工作。
Tel : (025) 85811916 　E2mail : Qiandw05 @yahoo. com. cn
图 1 　L、AG、ARG对照品 ( A, C, D) 及样品 ( B, E) 色谱图
Fig. 1 　Chromatogram of L , AG, and ARG reference substance ( A, C, and D) and samples ( B and E)
图 2 　L G对照品( A)及样品( B)色谱图
Fig. 2 　Chromatograms of L G reference
substance ( A) and sample ( B)
21 2 　供试品溶液的制备 :取菊茎、叶粗粉约 1 g ,精
密称定 ,置圆底烧瓶中 ,加 80 % 甲醇 25 mL ,称质
量 ,加热回流 1 h ,放冷 ,以 80 % 甲醇补质量 ,摇匀 ,
静置 ,取上清液微孔滤膜 (0145μm) ,滤过 ,即得。
213 　对照品溶液的制备 :取各对照品适量 ,加甲醇
分别制成含 L :4414μg/ mL 、A G:2712μg/ mL 、L G:
4214μg/ mL 、AR G:121μg/ mL 的对照品溶液。
214 　标准曲线制备 :分别精密吸取各对照品溶液
210、510、1010、2010、3010、4010μL ,按确定的色谱
条件测定其峰面积。以进样量 (μg) 为横坐标 ,峰
面积积分值为纵坐标 ,分别求得回归方程 ,L : Y =
5128 ×106 X - 1142 ×105 , r = 01999 3 , 线性范围
01089～1178 μg ; A G: Y = 2181 ×106 X - 1124 ×
105 , r = 01999 9 ,线性范围 01212～4124 μg ;L G:
Y = 2178 ×106 X - 6148 ×105 , r = 01999 6 ,线性范
围 01424 ～ 8148 μg ; AR G: Y = 1147 ×106 X -
6188 ×104 , r = 01999 9 ,线性范围 01242～4184μg。
215 　精密度试验 :精密吸取 L 4414 μg/ mL 、A G
2712μg/ mL 、L G 4214μg/ mL 、AR G 121μg/ mL 的
对照品溶液 20μL ,连续进样 6 次 ,L 峰面积的 RSD
为 118 % ,A G 峰面积的 RSD 为 113 % ,L G 峰面积
的 RSD 为 118 % ,AR G 峰面积的 RSD 为 017 % ,
以上结果表明 ,精密度良好。
216 　重现性试验 :取同一样品 6 份按样品测定方法
测定 ,测得 L 质量分数的 RSD 为 11 3 % ,A G 质量
分数的 RSD 为 019 % , L G 质量分数的 RSD 为
114 % ,A R G 质量分数的 RSD 为 016 %。结果表明
本方法有较好的重现性。
217 　稳定性试验 :对同一供试品溶液每隔 2 h 进样
1 次 ,依法测定 ,计算各峰面积积分值 RSD ( %) 。
测得 L 的 RSD 为 118 % ,A G的 RSD 为 116 % ,L G
的 RSD 为 11 9 % ,AR G 的 RSD 为 115 % ,以上结
果表明 ,供试液在 12 h 内稳定。
218 　回收率试验 :采用加样回收法 ,取已测定的样
品粗粉 ,精密称定 ,定量加入 L 、A G、L G、AR G 对照
品 ,按供试品液制备法制备供试液 , 按确定的
H PL C 条件测定 ,计算回收率。各黄酮的加样回收
率分别为 :L 9616 ,RSD 为 118 % ;A G 9717 % ,RSD
为 118 % ;L G 9918 % ,RSD 为 115 % ;A R G 9714 % ,
RSD 为 119 %。
219 　样品测定 :将不同生长期采集的样品 ,分别按
212 项制备供试品溶液 ,在上述色谱条件下测定 ,采
用外标一点法计算各生长时期菊花茎、叶中 L 、A G、
AR G、L G 的量 ,结果见表 1、2。
3 　分析与讨论
311 　4 种栽培类型菊茎、叶中在不同生长期均含有
所测的 4 种黄酮成分 ,叶中的量远高于茎 ,菊在采花
后的茎叶中仍含有大量的黄酮类成分 ,有进一步开
发利用的价值。
312 　大白菊、小白菊、长瓣菊茎、叶中所含单黄酮成
分规律基本相似 ,金合欢素272O2(6″2O2鼠李糖)2β2
D2葡萄糖苷 ( AR G) 的量远高于其他黄酮 ,木犀草
·8131· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 8 期 2009 年 8 月
表 1 　不同生长期不同栽培类型菊叶中黄酮的量
Table 1 　Flavonoids in chrysanthemum leaves from different growth period and various cultivated types
采收
日期
大白菊叶黄酮/ (mg ·g - 1)
L A G L G AR G
小白菊叶黄酮/ (mg ·g - 1)
L A G L G AR G
长瓣菊叶黄酮/ (mg ·g - 1)
L A G L G AR G
红心菊叶黄酮/ (mg ·g - 1)
L A G L G AR G
08226 01364 01184 01 581 21 528 01382 01 700 01 338 71 324 01783 01 440 11 188 71519 01038 31 477 01 524 41480
09206 01465 01441 11 365 41 495 01800 01 745 01 505 81 744 01507 11 259 11 108 101359 01044 41 948 01 739 51481
09216 01551 01171 11 166 41 669 11132 01 459 01 414 61 379 11118 01 314 01 982 51727 01119 41 778 01 478 41557
09227 01054 11061 01 493 01 449 01165 11 489 01 749 71 954 11596 01 319 01 983 41014 01070 61 508 01 707 51742
10209 01487 11177 11 707 41 310 01548 01 863 11 076 71 435 01290 11 553 11 337 51468 01442 41 627 01 946 41528
10218 01094 01053 21 275 41 022 01190 01 317 11 379 71 235 01134 01 043 21 170 31587 01087 31 383 11 436 41332
10226 01124 01030 21 266 31 401 01145 01 493 11 372 61 315 01063 01 075 21 660 31246 01030 31 108 11 722 31089
10205 01239 01042 31 036 31 632 01406 01 282 01 960 61 282 01279 01 088 21 873 51736 01098 21 958 11 086 21939
表 2 　不同生长期不同栽培类型菊茎叶中黄酮的量
Table 2 　Flavonoids of chrysanthemum stems from various growth period and different cultivated types
采收
日期
大白菊茎黄酮/ (mg ·g - 1)
L A G L G AR G
小白菊茎黄酮/ (mg ·g - 1)
L A G L G AR G
长瓣菊茎黄酮/ (mg ·g - 1)
L A G L G AR G
红心菊茎黄酮/ (mg ·g - 1)
L A G L G AR G
08226 01034 01212 01 124 11 394 01010 01 124 - 11 741 01072 01 178 01 131 11673 01004 01 827 01 061 11485
09206 01011 01236 01 271 11 152 01006 01 151 01 029 11 901 01074 01 254 01 079 21317 - 01 724 - 11004
09216 01036 01151 01 085 11 208 01031 01 143 - 11 846 01091 01 119 01 062 11883 01007 01 575 - 01902
09227 01005 01303 - 01 273 01022 01 225 - 11 619 01051 01 081 01 074 11674 01009 01 564 - 01838
10209 01037 01449 01 117 11 075 01018 01 181 01 051 11 510 01028 01 251 01 088 11375 01015 01 534 01 025 01660
10218 01021 01078 01 183 11 168 01046 01 086 01 083 11 864 01036 01 027 01 300 11525 01015 01 477 01 033 01738
10226 01028 01134 01 196 01 877 01022 01 090 01 044 11 314 01037 01 027 01 374 11052 01010 01 439 - 01571
11205 01061 01090 01 511 11 173 01057 01 081 01 133 11 831 01098 01 023 01 170 11418 01019 01 886 01 163 01915
　　　“ - ”低于检测限
　　　“ - ”below testing limit
素272O2β2D2葡萄糖苷 (L G) 的量随着生长期的延
长逐渐增加 ,木犀草素 (L) 和金合欢素272O2β2D2葡
萄糖苷 ( A G) 的量在整个生长期中由小变大又
变小。
313 　红心菊中金合欢素272O2β2D2葡萄糖苷的量明
显高于其他几种栽培类型 ,几乎和金合欢素272O2
(6″2O2鼠李糖)2β2D2葡萄糖苷的量相同 ,这一点与其
他几种菊花明显不同 ,其成因有待进一步研究 ,各黄
酮随着采花期邻近有所下降。
参考文献 :
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在质量的比较研究 [J ]1 中国中药杂志 , 2002 , 27 (12) : 8962
8981
山西大学—荷兰莱顿大学
代谢组学国际合作交流研讨班通知
　　时间 :2009 年 10 月 19～21 日 　　　　　地点 :山西省太原市 山西大学
上课内容 :代谢组学仪器分析技术、多元数据统计及在中医药研究中的应用。
收费标准 :注册费 1000 元/ 人 (含资料费、学费) ,食宿统一安排 ,费用自理。中国药学会、中国药理学会、
中国植物学会会员 (凭会员证) 800 元/ 人 ,学生 (凭学生证) 500/ 人。
研讨班组织者 :秦雪梅 教授 ,山西大学 ,中国太原
Robert Verpoorte 教授 ,莱顿大学 ,荷兰
报名方法 :将报名表回执通过 E2mail 发送到 qinxm @sxu. edu. cn 或传真至 (0351) 7011202。
联系人 :张丽增 　　　　电话 (传真) : (0351) 7011202
·9131·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 8 期 2009 年 8 月