全 文 ：射干提取物在大鼠体内的药动学研究
李国信,王光函,姜 鸿, 邹桂欣,邸子真
收稿日期: 20100409
基金项目:科技部重大专项 十一五 重大新药创制项目 ( 2009ZX09103330)
作者简介:李国信( 1963 ! ) ,男,博士,教授,从事临床药理研究工作多年,获辽宁省政府科技进步一等奖 1项,三等奖 3项。
T el : ( 024) 86803318 Email: syyl jdlgx024@ 126. com
(辽宁省中医药研究院 ,辽宁 沈阳 110034)
摘 要:目的 研究射干提取物中鸢尾苷及鸢尾黄素在大鼠体内的药动学。方法 Wist ar 大鼠一次性 ig 给予相
当于 32 倍临床等效剂量即 10 8 g/ kg 射干提取物 (每 1 g 提取物相当于 5 g 生药量) ,采用高效液相色谱法对血
浆中鸢尾苷和鸢尾黄素进行定量测定,应用 DAS 软件计算主要药动学参数。结果 鸢尾苷及鸢尾黄素在大鼠体
内的药时过程符合二室模型, tmax 均为 1 5 h, Cmax 分别为 0 89、3 35 g/ mL, AUC0t分别为 0 983、19 769 mg ∀
L- 1 ∀ h, AU C( 0# )分别为 1 034、23 927 mg ∀ L - 1 ∀ h; 鸢尾苷及鸢尾黄素的 t1/ 2分别为 1 05、8 863 h。结论 鸢尾
黄素与鸢尾苷的达峰时间相同,但鸢尾黄素的消除半衰期比鸢尾苷消除半衰期长, 说明鸢尾黄素在体内的药效有
可能发挥得更持久。
关键词:射干提取物; 鸢尾苷; 鸢尾黄素; 药动学
中图分类号: R285 61 文献标识码: A 文章编号: 0253 2670( 2010) 12 2052 02
射干为鸢尾科植物射干 Belamcanda chinensis
( L . ) DC. 的干燥根茎, 具有清热解毒, 消痰, 利咽
之功效。射干中的主要成分鸢尾苷及其苷元鸢尾黄
素均具有抗炎作用[ 1] 。本实验对射干提取物中鸢尾
苷和鸢尾黄素在大鼠体内药动学进行研究。
1 材料
1 1 药品与试剂:射干提取物,自制,以蒸馏水配制
成 0 54 g/ mL (每 1 g 提取物相当于 5 g 生药量, 其
中含鸢尾苷及鸢尾黄素分别为 21 36、83 01 mg/
g)。鸢尾苷, 购于中国药品生物制品检定所, 鸢尾
黄素, 购于上海融禾医药科技有限公司。乙腈为色
谱纯,甲醇、磷酸、醋酸乙酯为分析纯,水为娃哈哈纯
净水。
1 2 实验动物: Wistar 大鼠, 购于吉林省动物质量
检测中心, 合格证号: SCXK (吉) 20030001, 辽宁
省中医药研究院动物观察室适应性饲养 1 周后使
用,合格证号: SYXK (辽) 20030010, 饲料购于沈
阳市实验动物饲料厂。
1 3 实验仪器: Agilent 1100 液相色谱仪 (美国
Agilent 科技公司) ;色谱工作站 ( A gilent Chemsta
t ion 工作站) ; W ! 80涡旋混合器 (上海第一医学院
仪器厂) ; SLJ∃型电动离心机 (沈阳理化仪器厂) ;
TG ! 328A 光电分析天平 (上海天平仪器厂)。
2 方法
2 1 色谱条件:色谱柱为 Kromasil C18 ( 200 mm %
4. 6 mm, 5 m) 翡纳米科技发展有限公司(天津) ;
柱温 30 & ,流动相为乙腈 ( A ) 和 0 2% 磷酸水溶
液 ( B) 两相梯度洗脱, 洗脱程序: 0~ 10 min, A 为
15%~ 25%; 10~ 15 min, A 为 25% ~ 35%; 15~ 30
min, A为 35%~ 50%; 30~ 55 min, A 为 50%。体积流
量 1 0 mL/ min,检测波长为 260 nm,进样量为 20 L。
2 2 对照品溶液的制备: 精密称取鸢尾苷适量, 置
25 mL 量瓶中,用 70% 甲醇溶解并稀释至刻度,摇
匀,质量浓度为 0 432 mg / mL; 精密称取鸢尾黄素
适量,置 50 mL 量瓶中,用 70% 甲醇溶解并稀释至
刻度,摇匀, 质量浓度为 0 259 mg/ mL,作为标准储
备液,冰箱 ( 4 & ) 内保存备用。
2 3 血浆样品处理: 取血浆 1 mL, 置具塞试管中,
分别用 2 mL 醋酸乙酯提取 2 次, 每次涡旋混合 3
m in,合并有机相, 60 & 水浴挥干, 残渣加 70% 甲
醇 200 L 使溶解,离心后进样 20 L。
2 4 方法学考察
2 4 1 线性范围及检测限:取空白血浆 1 mL, 依次
加入鸢尾苷及鸢尾黄素对照品溶液, 使鸢尾苷及鸢
尾黄素质量浓度分别为 0 27、0 54、1 08、2 16、
4 32、8 64 g/ mL 及 1 62、3 23、6 46、12 94、
25 87、51 74 g/ mL 模拟血浆样品, 共 6 份。按
2 3 血浆样品处理 项下的方法操作,以所测峰面
积 ( A ) 对质量浓度 ( C) 作加权线性回归分析, 得回
归方程, 鸢尾苷: C = 0. 017 55 A - 0 058, r =
0. 997, 线性范围为 0 27~ 8 64 g/ mL;鸢尾黄素:
C= 0 037 6 A - 0 394 4, r = 0 999 7, 线性范围为
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1 62~ 51 74 g/ mL。
2 4 2 精密度与准确度:取空白血浆 1 mL, 按照标
准曲线制备方法分别制成含有鸢尾苷和鸢尾黄素
高、中、低 3个质量浓度的 QC 样品 (鸢尾苷质量浓
度分别为 8 64、1 08、0 27 g/ mL; 鸢尾黄素质量
浓度分别为 51 74、6 46、1 62 g / mL) , 每一个质
量浓度进行 5样本分析, 连续测定 3 d, 根据当日的
标准曲线,计算 QC 样品的测得质量浓度。结果表
明鸢尾苷和鸢尾黄素的日内精密度 RSD 均小于
5%, 日间精密度 RSD 均小于 6% , 相对回收率在
96% ~ 107%,均符合目前生物样品分析方法指导原
则的有关规定。
2 5 给药方法及样品采集:取体质量 220~ 250 g
健康 Wistar 大鼠,随机分为 14 组,每组 6 只,雌雄
各半。空白对照组 ig 等体积蒸馏水, 其余 13 组为
不同时间点采血组,一次性 ig 给予相当于 32 倍临
床等效剂量即 10 8 g / kg 射干提取物, 给药体积均
为 20 mL/ kg ,给药前各组大鼠禁食不禁水 16 h,分
别于给药后 10、20、30、60、90、120、150、180、240、
360、480、720、1 440 m in 时采血。各组大鼠以乙醚
吸入麻醉后腹主动脉采血 3 mL, 放置 30 m in 后,
3 500 r/ min 离心 10 m in,取血浆,待测。
2 6 数据处理: 采用 DAS 软件对数据进行处理,
分析鸢尾苷及鸢尾黄素的药动学参数及模型。
3 结果
3 1 专属性考察:在上述色谱条件下, 空白血浆中
的内源性物质和代谢物不干扰血浆中的鸢尾苷和鸢
尾黄素色谱测定, 见图 1。
1鸢尾苷 2鸢尾黄素
1t ectoridin 2t ectorigenin
图 1 空白大鼠血浆 (A)、鸢尾苷及鸢尾黄素对照品 ( B)、药后 1 5 h血浆样品 HPLC图
Fig. 1 HPLC Chromatograms of blank plasma of rats ( A) , tectoridin and tectorigenin reference substances ( B) ,
and plasma samples obtained af ter 1. 5 h of administration ( C)
3 2 药动学结果:见表 1。结果表明,给药后, 鸢尾
苷及鸢尾黄素的吸收较快,达峰时间相同,但鸢尾黄
素的消除半衰期比鸢尾苷消除半衰期长, 说明鸢尾
黄素在体内的药效有可能发挥得更持久。鸢尾苷及
鸢尾黄素在大鼠体内的药时过程符合二室模型, 药
时曲线见图 2。
表 1 鸢尾苷及鸢尾黄素在大鼠体内的药动学参数
( x ∋ s, n= 6)
Table 1 Pharmacokinetic parameters of tectoridin
and tectorigenin in rats (x ∋ s, n= 6)
参 数 单 位 鸢尾苷 鸢尾黄素
tmax h 1 5 1 5
t1/ 2 h 1 05 8 863
Cmax m g ∀ L- 1 0 89 3 35
AUC( 0t ) m g ∀ L- 1 0 983 19 769
AUC( 0# ) m g ∀ L- 1 1 034 23 927
4 讨论
4 1 在进行血浆样品分析方法建立时,根据鸢尾苷
及鸢尾黄素属于黄酮类化合物, 采用了通过聚酰胺
柱、用醋酸乙酯提取富集的方法,最终确定用醋酸乙
酯提取 2次的方法,专属性强, 准确度较高。
图 2 鸢尾苷及鸢尾黄素药时曲线
Fig. 2 Concentrationtime curve of tectoridin and tectorigenin
4 2 Zhang 等[ 2] 对大鼠口服鸢尾黄素或其前体药
物鸢尾苷后的药动学特征进行研究, 实验中给予大
鼠鸢尾苷和鸢尾黄素纯品,发现二者的吸收特征有
明显不同。鸢尾黄素的 tmax远小于鸢尾苷, 即鸢尾
黄素在体内的吸收较快。在本实验中给大鼠 ig 含
鸢尾黄素和鸢尾苷的射干提取物, 获得鸢尾黄素与
鸢尾苷 tmax相近的实验结果, 可能由于中药复杂成
分之间存在协同作用, 提取物中有其他成分促进了
鸢尾苷的吸收,而使得鸢尾苷 tmax提前。
参考文献:
[ 1] 李晓兰 中药射干的研究概况 [ J] 海峡药学, 2003, 15
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[ 2] Zhang W D, Qi L W, Yang X L, et al . Determin at ion of tec
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