全 文 ：相色谱仪,测定峰面积,按外标法计算, 结果见表 1。
表 1　复方五仁醇胶囊中五味子乙素的
质量分数测定结果 ( n= 5)
Table 1　Determination of schizandrin B in Compound
Wurenchun Capsule ( n= 5)
批　号 五味子乙素/ ( mg·g- 1) RSD/ %
021118 38 0. 88
021129 32 0. 67
021201 35 1. 25
3　讨论
3. 1　样品的平均质量分数为 35 mg/ g ,考虑到生产
中的损耗等问题,为保证产品质量,暂定本品含五味
子以五味子乙素计, 应不得少于 30 mg/ g。
3. 2　曾用甲醇、乙醇、正己烷进行提取。除甲醇提取液
外,溶剂挥干后均出现大量黄色油状物, 影响分离效
果。甲醇提取液挥干后无明显油状物,但杂质峰较多。
因此选用正己烷提取, 提取液挥干后,残留物再用甲醇
溶解, 可除去油脂,又可避免甲醇提取时多余的杂质。
HPLC法测定野马追药材及其制剂中金丝桃苷的含量
肖　晶1 ,王钢力2,林瑞超2

( 1. 中国疾病控制中心营养与食品安全所,北京　100021; 2. 中国药品生物制品检定所,北京　100050)
　　野马追为菊科泽兰属植物林泽兰 Eupatorium
lindleyanum DC. 的全草, 属多年生草本, 药源丰
富,易于采收。野马追味苦、平,归肝、脾经, 具有清热
解毒、祛痰定喘、降血压的功效 [ 1]。临床常用于治疗
慢性气管炎、支气管炎、高血压病。其枝叶入药有发
表祛湿、和中化湿之效,用于劳伤咳嗽、吐血咳血以
及淋浊白带、无名肿痛等。野马追片为野马追浸膏
片,具有化痰、止咳、平喘的功效,用于治疗慢性支气
管炎、痰多、咳喘等症状。
　　金丝桃苷是野马追有效活性成分之一, 在药材
中质量分数相对较高。据报道电刺激猫的喉上神经
引咳实验中, 100 mg/ kg 金丝桃苷 ip 给药有止咳作
用;用小鼠喷雾法, ig 500 mg / kg 的镇咳效果不亚于
ig 可待因 80 mg/ kg , ip 本品 100 mg/ kg 和可待因
50 mg / kg 的 EDT 50分别比对照组延长 56%和
78%。此外还具有抗炎、抗菌、同化等作用, 具有明显
的外周镇痛作用。有效的检测野马追药材中的金丝
桃苷对于保证药物的临床疗效具有积极的意义。因
此本实验对其中金丝桃苷进行测定,结果表明方法
操作简单、准确、重现性好。
1　仪器与材料
　　高效液相色谱仪: SP—8800输液泵, SP—200
紫外检测器, SP—4400积分仪, AT—130柱温箱。
金丝桃苷对照品由中国药品生物制品检定所提供,
甲醇、乙腈为色谱纯,其他试剂均为分析纯。野马追
药材样品由广州安格药业有限公司提供,采自江苏,
经中国药品生物制品检定所中药标本馆张继副主任
药师鉴定, 样品标本保存在中国药品生物制品检定
所标本馆。野马追片由广州安格药业有限公司提供。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件: 色谱柱: Kromasil, KR100-5 C18
( 250 mm×4. 6 mm, 5
m) ; 流动相:乙腈-1%冰醋
酸( 16∶84) ;体积流量 1. 0 mL/ min;检测波长: 360
nm ; 柱温: 室温( 25 ℃) ; 理论板数按金丝桃苷峰计
算应不低于 3 000。
2. 2　对照品溶液的制备:精密称取金丝桃苷对照品
2. 64 mg, 置 50 mL 量瓶中, 加甲醇稀释至刻度, 制
成 0. 052 8 mg / mL 金丝桃苷的对照品溶液。
2. 3　供试品溶液的制备
2. 3. 1　药材供试品溶液的制备: 取样研细,精密称
取 0. 5 g,置 150 mL 锥形瓶中,加 70%甲醇 50 mL,
超声处理 1 h, 滤过, 蒸干, 残渣加甲醇溶解并转移
至 5 mL 量瓶中,稀释至刻度, 摇匀, 即得。
2. 3. 2　野马追片剂供试品溶液的制备: 取样品 25
片, 研细, 精密称取 1. 0 g ,置 150 mL 锥形瓶中, 加
70%甲醇 50 mL,超声处理 1 h, 滤过,蒸干,残渣加
甲醇溶解并转移至 5 mL 量瓶中, 稀释至刻度, 摇
匀,即得。
2. 4　线性关系的考察: 精密称取对照品适量, 加甲
醇制成 0. 264 mg/ mL 的溶液。精密吸取上述溶液
2、4、6、8、10 mL 于 50 mL 量瓶中,加甲醇稀释至刻
度, 摇匀, 各进样 10
L,按上述色谱条件测定峰面
·60· 中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 36 卷第 1 期 2005年 1月

收稿日期: 2004-03-11
积。以峰面积值为纵坐标,金丝桃苷量为横坐标绘制
标准曲线, 计算得回归方程为 Y = - 14 809. 10+
2 863 201. 70 X , r= 0. 999 6。金丝桃苷在0. 105 6～
0. 528 0
g 与峰面积具有良好线性关系。
2. 5　方法学考察
2. 5. 1　精密度试验:精密吸取金丝桃苷对照品溶液
( 0. 052 8 mg/ mL) 5
L, 重复进样 5次,测定金丝桃
苷峰面积,得其 RSD为 1. 74%。
2. 5. 2　稳定性试验: 取野马追药材供试品溶液 20

L,每隔2 h 测定1次,结果表明样品在 10 h 内稳定,
样品中金丝桃苷峰面积的RSD为1. 86% ( n= 6)。
2. 5. 3　重现性试验:取野马追药材样品平行取样 5
份制备供试品溶液、测定, 结果金丝桃苷峰面积的
RSD为 1. 97% ( n= 5)。
2. 5. 4　回收率试验:采取加样回收法。取已知质量
分数(含金丝桃苷为 0. 12 mg / g )野马追药材样品
0. 25 g ,精密加入金丝桃苷对照品溶液( 0. 052 8 mg /
mL) 0. 5 mL, 按上述色谱条件测定, 计算回收率, 结
果平均回收率为 95. 5%, RSD 为1. 90% ( n= 5)。
2. 6　样品质量分数测定: 精密吸取供试品溶液, 按
上述色谱条件,每个样品测定 3 次, 取平均值, 按标
准曲线法计算各样品中金丝桃苷的质量分数, 9 月
药材样品、11月药材样品、野马追片剂色谱图见图
1, 结果金丝桃苷的质量分数分别为 0. 12 mg/ g
( RSD = 1. 27%)、0. 011 mg/ g ( RSD = 1. 94% )、
1. 16 mg / g ( RSD= 1. 81% )。
* -金丝桃苷
* -h ypers ide
图 1　金丝桃苷对照品(A)、9月份药材样品( B)、11 月份药材样品(C)和野马追片(D)的 HPLC图
Fig. 1　HPLC chromatograms of hyperside reference substance (A) , crude drug collected in September (B) ,
crude drug collected in November (C) , and Yemazhui Tablet (D)
3　结论
3. 1　试验中曾以甲醇-水( 40∶60)、甲醇-0. 1%磷
酸溶液( 40∶60)、甲醇-0. 1%冰醋酸溶液( 40∶60)
为流动相进行试验,结果金丝桃苷的分离较差。经实
验摸索,以乙腈-1%冰醋酸( 16∶84)为流动相, 金丝
桃苷与其他组份色谱峰达到较好分离。以金丝桃苷
对照品溶液进行紫外( 200～400 nm )扫描,在 360、
257 nm 处均有吸收, 经实验结果证明金丝桃苷在
360 nm 处样品干扰较少,且分离效果良好,故选择
360 nm 作为检测波长。
3. 2　样品用甲醇溶解,分别考察回流提取、索氏提
取及超声提取的效果。结果表明,样品用甲醇超声提
取 1 h效果较好, 方法简便,金丝桃苷提取完全。金
丝桃苷可溶于甲醇、乙醇等溶剂, 因此采用 30%甲
醇、50%甲醇、70%甲醇、70%乙醇、甲醇超声提取 1
h 比较。结果表明,用 70%甲醇超声提取效果最佳,
金丝桃苷提取完全, 杂质较少。
3. 3　通过本实验建立了 HPLC 测定野马追药材及
其制剂中金丝桃苷质量分数的方法,该方法准确、可
靠。但是由于时间的关系,采集的药材批数有限, 所
以该方法只做方法学研究, 为提高野马追及其制剂
质量标准提供有效的分析手段。通过对9、11月采收
的野马追药材样品的测定结果表明: 9月采收的野
马追药材样品中金丝桃苷的质量分数为 11月采收
的样品的 11倍。9月采集的药材样品中有效成分金
丝桃苷质量分数明显高于 11月,建议该药材的采收
应注意季节的变化。
References:
[1]　J iangsu New Medical Col leg e. Dictionary of Chine se Mater ia
Medica ( 中药大辞典 ) [ M ] . S han ghai: S hanghai Scient if ic
and Tech nical Publis her s, 1999.
·61·中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 36 卷第 1 期 2005年 1月