全 文 ：·1884· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第12期2007年12月
表3益母草氮、磷、钾肥数学模型及其分析
Table3 MathematicmodelsandtheiranalysesofN，P，andKonL．japonicus
部分，所以氮素对益母草总生物碱和水苏碱的生物
合成产生了极大的促进作用，其作用机制还需进行
深入研究。
磷以磷酸根形式存在于糖、磷酸、核酸、核苷酸、
辅酶、磷脂腐植酸等中。磷在ATP反应中起关键作
用H]，施磷能促进各种代谢正常进行，植株生长良
好，所以磷对发挥氮和钾的肥效起到重要的支撑作
用，磷对益母草总生物碱的促进作用就很明显。
钾能促进糖分转化和运输，使光合产物迅速转
移到其他部位，钾供应充分时，糖类合成加强，纤维
束和木质素的量提高，茎秆坚韧，抗伏倒[4]。本试验
也显出钾对益母草株高和生物量的促进作用。
总之，在本实验条件下，得出合理的需氮量为
37．5～44．0g／m2，磷量为37．4～54．3g／m2，钾量
为31．6～34．4g／m2，平均为氮40g／m2，磷44．8g／
m2，钾3．39／m2。氮、磷、钾最佳配比为4：4．5：
3．3。由于氮、磷、钾是植物生长的基本3要素，但不
同的植物对其需要量及其比例是不同的，不同肥力
水平的土壤，施用肥料的最佳用量差别很大，尤其是
药用植物，对其精准施肥的研究不仅要追求产量，还
要注重次生代谢产物的量嘲，所以就需要针对其生
物学特性和有效成分种类等方面进行系统研究。
References：
[1]ChP(中国药典)Es]．VolI．2005．
[2]XuJz，WangZA，YuXP，eta1．Organismfertilizerand
inorganicfertilizermathehingexperimentonLeonurus
japonicusHoutt．[J]，CtunaJChinMaterMed(中国中药杂
志)，2006，31(4)：340—342。
[3]ChP(中国药典)[S]．VolI．2000．
[4]PanRZ．PlantPhysiology(植物生理学)[M]．Beijing：
HigherEducationPublishingHouse，2004．
[53ZhangY，LiuY，WangJY，eta1．Presentituationand
prospectsforChinesetraditionalmedicine’Sspecialfertilizer
[J]．ChinaJChinMaterMed(中国中药杂志)，2004，29
(8)：719—722．
半夏栽培品遗传差异的AFLP分析
张杰1’2，徐涛1，张建光1，陈集双p
(1．浙江理工大学生物工程研究所，浙江杭州310018；2。杭州职业技术学院，浙江杭州310018)
摘 要：目的 构建不同地区来源半夏栽培品的DNA指纹图谱，探讨利用AFLP分子标记在半夏遗传多样性、亲
缘关系及种质鉴别上的可行性。方法运用扩增片段长度多态性技术(AFLP)，对我国17个地区的51份半夏栽培
品和4份掌叶半夏样品(外群)进行基因组DNA多态性分析。结果从64对引物组合中筛选出8对多态性丰富、
鉴别效率高的AFLP引物组合，构建了51份半夏栽培品的AFLP指纹图谱。聚类分析结果表明：所有半夏栽培品
完全被区分开，来源地相同的种质表现出相对密切的亲缘关系，浙江等华东地区的栽培半夏同其他地区半夏有着
明显遗传差异，聚类分析结果获得了Bootstrap校验的支持。结论AFLP分子标记可用于半夏遗传多样性、亲缘
关系及种质鉴别分析，浙江、江苏等华东地区栽培半夏的遗传特性相对独立。
关键词：半夏；AFLP；DNA指纹图谱；种质鉴定
中图分类号：R282．23 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2007)12—1884—06
收稿日期：2007—03—10
基金项目：国家“863”课题(2002AA241121)；科技部国际合作重点项目(2004DFA05000)资助
作者简介：张杰(1982一)，男，湖南省永州市人，浙江理工大学硕士研究生，从事DNA分子标记研究。
Tel：(0571)86843195Fax：(0 71)86843196E—mail：jzhan9821209@163．corn
*通讯作者陈集双Tel：(0571)86843195Fax：(0571)86843196E—mail：ehenjs@ZStU．edu．cn
万方数据
中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第12期2007年12月·1885·
ApplicationofAFLPmarkersforanalyzingge eticd fference
amongcultivatedPinelliaternata
ZHANGJiel“。XUTa01，ZHANGJian～guan91，CHENJi—shuan91
(1，InstituteofBioengineering，ZhejiangSci-TechUn versity，Hangzhou310018，China；
2．HangzhouVocationala dTechnicalCol eger Hangzhou310018，China)，
Abstract：ObjectiveTheDNAfingerprintsofcultivatedPinelliaternatacollectedfromdifferent
geographicreg onsweregeneratedbyusingAFLPmarkerstofindthefeasibilitynanalyzingtheirgenetic
diversity，relationship，andgermplasmidentification．MethodsTheDNAp lymorphismof51cultivated
EermplasmofP．ternatacollectedfrom17 differenthabitatsndfourcultivarsof．P．pedatisecta
(outgroup)weredetectedbyAFLPmolecularmarkers．ResultsTheDNAfingerprintsof51individuals
ofP．ternatawereobviouslydistinguishedbyeightpairsofhighpolymorphicandefficientprimer
combinationsscreenedfrom64primercombinations．ThephylogeneticclusteringresultsrevealedthatalL
thetestedcultivarswerefullydifferentiated，andindividualsfromMesamer gionsweremainlyclustered
together．Moreover，cultivarsf omEast—China，includingZhejiaandJiangsuProvinces，displayedclear
geneticd stinctionfromtherregions．TheclusteringresultswerestronglysupportedbyBootstrapest．
ConclusionAFLPMarkerscanbepotentiallyusedinanalyzingofgeneticd versity，relationship，and
germplasmidentificationofth smedicinalpl nt，andthegermplasmfromregionsfEast—China，including
ZhejiangandJiangsuProvinces，displaystherelativeseparategeneticcharactersfromotherregions．
Keywords：Pinelliat rnata(Thunb．)Breit；amplifiedfragmentlengthpolymorphism(AFLP)；
DNAfingerprint；germplasmid ntification
半夏尸i稽g级应ternata(Thunb．)Breit．为天南
星科半夏属植物，以块茎入药，临床应用非常广泛。
半夏不同栽培之间表型差异较大，目前有关种质鉴
别、遗传背景及亲缘关系的研究资料较少[1]。半夏野
生变家种主要为当地野生资源就地采集人工种植，
各地之间相互引种频繁，资源混杂，不利于当地品种
保护。
在半夏种质鉴别上，前人已有显微鉴别D]、同工
酶分析E引、PCR—RFLP[41及AFLP标记E53等方法的
报道。AFLP(amplifiedfragm ntlengthpoly-
morphism)是一种检测DNA多态性高、重复性好
的分子标记技术，近年来被广泛应用于种质鉴定及
遗传差异分析上oJ]。本研究运用荧光标记引物的
AFLP技术构建半夏不同栽培品的DNA指纹图
谱，探索应用该技术在半夏种质资源鉴定和亲缘关
系研究中的可行性。
1材料与方法
1．1试材：为了对尽可能宽的遗传变异和地理范围
内的半夏栽培品进行遗传分析，本研究从2004年5
月到2005年10月实地收集了我国半夏主要种植地
的11省17个地区的51份个体，每个地区的个体数
目为3～7个不等，见表1。为避免取到同一母株的后
代克隆，本研究中同一地区中不同个体之闻的平均距
离至少在5m以上，植株块茎及珠芽保存备用。
1，2 DNA提取：在CTAB法的基础上略作改
进叫。针对半夏多糖类物质量高的特点，取嫩叶放于
4℃冰箱黑暗中放置1d，以消耗淀粉和多糖；提取
液中添加2％PVP和0．1％p巯基乙醇去除多酚
类物质。0．8％琼脂糖电泳检测DNA纯度与完整
性(图1)。
‘
衷l供试材料及来诹
Table1 Sourcesofmaterialstested
’-_●___●●__^____-__●_-_-____________●●_●。-_1________-_。-。。。。__________。。。-‘’●_●____●___。。。。。。-_____-。。。。一
采样埴点个体数目 编号 种质来灏 袤蛩特征
山西备终 7 el-C?奉璃藏培种中同叶长t宽=7，1—8t1(桃叶形)
山东荷择 7 C84：14奉地栽培种中同叶长，冀=7t1—8t1(桃叶形)
甘肃天承 4 C154；18奉建蔻培种中同时长；竟=7t1～8tl(桃叶形)
河南谁滨 3 C19-C21本地栽培种中问叶长；宽=10t 1～15t1(柳叶形)
江苏丰县 4 C22-C25奉蟪栽培种中问叶长t竟=1t 1～3t 1(类椭圜形)
浙江宁渡 4 C26-C29本地栽培种中同叶长t竟=1，1—3t 1(类椭圆形)
I目llllNO4 C30-C33奉鸪裁培种中|可叶长，寅=IO，l一15，1(柳叶形)
贵JII长一 5 C34-C38奉蟪栽培种中间叶长·竟=10，1～15：I(柳叶形)
鞠南素麓 5 C39-FA3奉逡薤堵拜中侮叶长；竟=l：l～5t1(桃峙形)
溺北武汉 4 C44-C47本地栽培种中问叶长，宽=101—15：1(柳叶形)
北京4 CA8-C51本地栽培种中问叶长z宽=7；i一8tI(桃叶形)
图1半夏基因组DNA电泳检测结果
Fig．1EleetrophoresisofgenomieDNAinP．ternata
1．3 酶切与连接：20肛L反应体系为1．5弘L10×
T4DNALigasebuffer，1．1“L0．5mol／LNaCl，
0．55gL1mg／LBSA，1／aLMseI adaptor，1pL
EcoRl adaptor，1UMseI，3UEcoRI，3UT4
DNALigase，200ngDNA，5肛LddH20，混匀后
万方数据
·1886· 中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第12期2007年12月
16℃过夜。EcoRI接头序列：5-CTCG一以鉴别的材料占供试材料总数的百分率。
TAGACTGCGTACC一37，3-CATCTGACGCAT一2 结果与分析
GGTTAA一57；MseI接头序列：5-GACGATG—
AGTCCTGAG一3’，3-TACTCAGGACTCAT一57。
1．4 AFLP预扩增反应：反应体系及步骤参考
AppliedBiosystemsAFLPl、Mplantmappingkit
(PE，UK)说明书，预扩增采用含1个碱基(+1)的
扩增引物。EcoRI和MseI的预扩增引物分别为：
57一GACTGCGTACCAATTCA一37和57一GATG —
GTCCTGAGTAAC一3’。
1．5 AFLP选择性扩增反应：采用E+3／M+3引
物组合进行选择性扩增。为了筛选出适合半夏的高
多态性扩增引物组合，以64引物组合进行初步筛
选，其中12对多态性位点丰富的引物组合用于随后
的分析。预扩增产物用TE¨(pH8．o)稀释25倍后
作为选择性扩增反应的模板，采用梯度PCR法进
行如下循环，参数作了相应优化：94℃预变性2
min；第1轮：94℃、30S，66℃、30S，72℃、120S；第
2～11轮：每循环一轮退火温度递减1℃，扩增10
轮；第12～32轮：94℃、30S，56℃、30S，72℃、120
S；60℃延伸30min；4℃保存。
1．6毛细管电泳分析：进样体系：1弘LPCR产物，
0．5“LGeneScan500[Rox](ABI，UK)，8．5弘L
Hi—DiFormamide(ABI，UK)，充分混合后于95℃
变性5min，迅速置于冰上，立即进样ABIPRISM
3100遗传分析仪。电泳参数作了相应优化：Run
Temperature：50℃，PreRunVoltage：12200V，
InjectionVoltage：2000V，InjectionT me：10S，
RunVoltage：12200V，DataDelayTime：
1200S。
1．7数据收集与分析：采用GeneMapperVersion
3．7收集电泳谱带，电泳图谱上50～600bp间清晰
可见、荧光信号大于100cfu且可重复出现的条带
记为有效带。样品中同一位置上出现的条带记为
“1”，没有出现则记为“o”，以Peakmatcher软件加
以统计生成“0、1”组成的原始数据矩阵。以TFPGA
软件计算不同地区半夏品种群体内的多态性位点百
分率、平均期望杂合度(胁)和Shannon指数
(H0)。运用PAUP。4．08b软件基于Nei&Li
(1973)遗传相似性系数进行Neighbor—Joining聚
类分析。Nei＆Li遗传相似性系数，GS玎一2a／(2a+
b+c)，GS玎表示i和．『的相似性，fl表示i和歹所共
有的条带数，b表示i中出现但歹中缺失的条带数，C
表示歹中出现但i中缺失的条带数。鉴别效率指可
2．1半夏种质AFLP选择性扩增引物筛选：选取
来源地不同、形态差异较大的C2、C16、C28、C35号
半夏栽培品为代表，采用E+3／M+3引物组合方
式，对64对引物组合进行初步筛选，结果引物组合
E—ACC／M—CTG、E—ACA／M—CTA、E—ACG／M—
CAA、E—ACT／M—CTA、E—AGC／M—CAT、E—AGG／
M—CAA、E—AGG／M—CAT、E—AGG／M—CTA扩增
的电泳图谱不仅谱带清晰且多态性丰富，用于下一
步分析。
2．2半夏不同栽培品的AFLP扩增产物多态性：
用筛选出的上述8对引物组合进一步对55份样品
(含4份掌叶半夏)进行AFLP分析，结果显示扩增
出的DNA条带主要分布于50～600bp，平均每个
地区样品扩增出205．3条多态性条带，每对引物扩
增出51．2条总带和25．7条多态性条带，地区内的
平均多态性位点百分率为50．2％。同时，不同引物
组合扩增出的总条带数和多态性条带数差异较大。
E—ACG／M—CAA共扩增出86条带，其中多态性条
带37条，多态性位点百分率高达43％，是所有引物
对中最高的。E—AGG／M—CAT扩增了62条带，多
态性条带仅有14条，多态性位点百分率只有
22．6％，是所有引物对中最低的(表2)。
表2不同地区的半夏栽培品之问的遗传多样性水平
Table2 Geneticd versitylevelofeuitivarsof
P．tern甜afromdifferentgions
⋯． 多态性多态性位点平均期望 遗传 Shannon
地区
条带数 百分率／％ 杂合度 相似性 指数
山西 207 50,6 0．107 0．821 0．028
山东 212 51．8 0．106 0．824 0．031
甘肃 198 48．4 0．108 0．831 0．023
河南 209 51．1 0．122 0．767 0．047
江苏 187 45．7 0．131 0．788 0．044
浙江 191 46．7 0．141 0．750 0．056
四川 218 53·3 0·156 0·761 0·050
贵州 213 52．1 0．147 0．759 0．057
湖南 211 51．6 0．133 0。766 0．055
潮北 210 51．3 0．116 0．846 0．021
河北 202 49．4 0．107 0．837 0．030
平均 205．3 50．2 0。124 0．796 0．042
不同地区的半夏栽培品之间的遗传多样性差异
不大，四川阆中地区栽培半夏遗传多样性水平最高，
多态性位点百分率为53．3％；江苏丰县地区最低，
为45．7％。对不同地区的半夏栽培品扩增AFLP条
带统计分析显示(表2)：各栽培品种群体之间的平
均期望杂合度(矶)为0．124，遗传相似性(GS)
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第12期2007年12月
0．796，Shannon指数(日0)为0．042，显示半夏的
遗传多样性主要存在于不同地区栽培品之间。
2．3 51份半夏栽培品的系统聚类分析：根据Nei
＆Li(1973)遗传相似性系数构建Neighbor—
joining系统聚类图(图2)。从聚类图上可以看出掌
叶半夏与半夏的DNA差异明显，掌叶半夏和半夏
分别聚为一个独立的分支。以遗传相似性0．65为
界，51份半夏并分成I、n两个细分支，分支
Bootstrap支持率(BV)为100％，表明该分支下各
个体的聚类关系比较稳定。 ，
r_—___·_1一_--—__—--r_——-—__-_r—-_·_-·—1_-·__●—-1——·-—，
O．60 O．70 0．76 0．82 0．88 0．94 1．00
Nei＆LiC0e氆cient
图2对Sl份半夏和4份掌叶半夏样品(外群)基于Nel&Li(1973)遗传系数构建的Neighbor—Joining树圈。
分支节点上数值裹示Bootstrap位(>son显示)，I复1000次接样分析
Fig．2Neighbor—Joiningdendrogramof51cultlvarsofP．ternataand4cultivarsofP．pedatiseeta(outgroup)
basedontheNei&Li(1973)geneticcoefficient．Bootstrapconfidencev lues叭showedinclusters
with1000replicates(onlyover50％areshowed)
第1分支，共包括42份样品，是最大的分支，主
要由除浙江宁波、江苏丰县外的其他地区半夏栽培
品组成。在遗传相似性为0．88处，该分支又可进一
步细分为噩、Ⅳ、V和Ⅵ4个小分支(主分支BV一
73％)。其中，第m分支主要由山西新绛、山东菏泽、
甘肃天水等地区的16份半夏栽培品构成。从聚类图
上可以看出来自于同一地区的半夏栽培品之间的遗
传相似性较高，聚为一类，该分支支持率较高(BV=
97％)，表明该分支下所有种质之间的聚类关系比较
稳定。第Ⅳ分支含18份个体，主要由中部及中西部
地区的河南淮滨、湖南常德、贵州长顺及湖北武汉等
地区的半夏栽培品组成，以及山东菏泽的C8、甘肃
天水的C18和浙江宁波的C28，该分支支持率较高
(BV-=99％)。第V小分支由四川阆中地区的2份栽
培品及贵州长顺的1份栽培品构成。第Ⅵ分支则由
来自北京地区的3份种质构成，从聚类图上可以看
出，这3份栽培品相互之间未能区分开，但与主分支
I下其他地区的栽培品之间的遗传相似性仅为
0．72，表明其遗传变异较大。
第Ⅱ分支主要是浙江、江苏的8份半夏栽培品
构成(BV=100％)，以及来自河南淮滨的C21样品
和湖南常德的C40。图2所示，来自浙江宁波的
C22、C23、C25样品两两之问未能完全区分，电泳图
谱也十分接近，表明宁波地区的半夏栽培品之间的
遗传背景十分相似。其次，来自浙江和江苏半夏的遗
传相似性高达0．94，表明江浙地区半夏亲缘关系较
近。而在遗传相似性为0．75处，分支Ⅱ与分支I区
分开，这表明江浙地区的半夏栽培品遗传基础与其
他地区存在明显差异。
从聚类分析结果来看，同一地区的半夏栽培品
之间表现出相对密切的亲缘关系，不同地区的栽培
品之间遗传差异明显，表明了我国各地区的半夏栽
万方数据
中草芮 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第12期2007年12月
培品之间的亲缘关系呈现一定的地区相关性。浙江、
江苏等华东地区的半夏栽培品与其他地区差异明
显，遗传特性相对独立。
2．4 AFLP指纹图谱的鉴别效率：供试的51份半
夏样品中，引物组合E—ACG／M—CAA和E—AGC／
M—CAT均可以完全区分所有样品，E—AGG—M—
CAA可以区分5l份材料中的49份，E—AGG／M-
CAT和E—ACT／M—CTA可区分其中的48份，E—
AGG／M—CTA和E—ACC／M—CTG可区分其中的
46份，E—AGG／M—CTG可区分其中的42份。表明
这8对引物组合用于半夏的栽培品的鉴别效率非常
高。图3为引物组合E—ACG／M—CAA对山西新绛、
山东菏泽、甘肃天水、浙江宁波及四川阆中地区半夏
栽培品的扩增图谱，可见AFLP分子标记用于半夏
种质鉴别非常有效，能获得丰富的遗传多态性位点。
3讨论
-i_|iI⋯“-止Ⅲ“-一l“U。张一起
．i．hk。h．』_趣LL⋯ii。l|．tml⋯。+l。▲荷泽世
山止． “。；⋯l l_liJl。㈨。m．一卜!n—h
宁波
l b。k山▲立li。山i¨。Lm，．1|．一⋯．．。。L一-l。l 6iL
。 阆中
JL ．1 lJIILd．址hlIi脚心^{-】11．一⋯卜． l。t ． ．1
圈3引物组合E-ACG／M-CAA对山西新绛、山东菏泽、甘肃天水、浙江宁波及四川阆中地区半夏栽培品的毛细管
电泳圈谱(箭头所示为差异性谱带位鳖)7
Fig．3ElectrophoretlepatternsofregionaleultivarsofP．ternatafromXinjiang，Shanxi，Heze，Shandong，
Tianshui,Gansa，Nlngbo，Zhejiang，andLan8：zhong，SichuanbyprimercombinationofE-ACG／
M—CAA(specificbandsweredenotedbyarrows)
传统的AFLP分析流程复杂、重复性不高。本及数据分析方法的差异，二者缺乏可比性。许多研究
研究采用荧光标记引物AFLP方法，分析流程快表明，栽培品相比野生品具有更为相似的遗传基础，
速、重复性好和结果分析自动化，不同栽培品种特异 这已在大豆[9]、萝卜[1们等许多物种上得到了证实。
性谱带检出率高。 为了检验系统树的可靠性，本研究对构建的系
半夏染色体中存在严重的复合、多倍现象且伴 统树进行了Bootstrap分析(重复1000次抽样)，
有整倍性和非整倍性的变化，不同生境下半夏表型 得出最优系统树，因此，所得聚类分析结果相对严
差异较大。因此，推断半夏的基因型应较为丰富，而 谨、准确。由系统聚类分析图可知，我国的半夏栽培
本研究结果显示半夏种内遗传多态性为50．2％，相 品之问的亲缘关系呈现一定的地域相关性，相同地
比前人研究而言偏低。杜娟等对我国不同地区的10 区的栽培品大多表现出相近的亲缘关系，聚为同一
份野生半夏进行AFLP分析，得出多态性位点百分分支。而C8、C18、C21、C40等4份半夏栽培品在聚
率为82．1％，且发现不同地区的半夏种质遗传关系 类图上的位置关系并未与其采集地区一一对应而聚
的远近与其总生物碱的量差异趋势一致‘引。考虑到 为同一个分支下，推测可能是这几个样品出现了混
本研究中半夏全为栽培品，且栽培历史至少在10年 杂所致，具体原因有待迸一步考证。
以上，同时由于二者所选引物组合不同、种质来源地 而江浙地区的半夏栽培品与其他地区的栽培品
万方数据
中草蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第12期2007年12月·1889·
存在明显的遗传独立特性，可能与种质表型相关。本
研究中浙江和江苏地区的半夏大多植株较矮，叶形
宽，类椭圆形，中间叶片的长宽比在1：1～3：1，与
其他地区栽培品差异明显(表1)。本课题组已有关
于不同叶形的半夏在栽培习性、有效成分的量及光
合效率上存在差异的报道[1¨，而不同表型的半夏与
其DNA指纹、药效的相关性有待进一步研究。
References：
[1]HuQ，TapS S．Thelatestprogressof tudyand
developmentonPi elliaternata[J]．JSouthwestUnivSci
Technol(西南科技大学学报)，2005，20(1)：63—68．
[2]Li．Micromorphologiealcharact risticsndenzymeanaly-
sisofsomeChinesePinelliaandtheirtaxonomicsig—nificance
[J]．ActaBotYannan(云南植物研究)，1999，21(4)：442～
448．
[33GuoQS，ShenWB，LiuL，eta1．Analysisoncharacteristic
zymogramphenotypesofeasteraseanduperoxided smutase
fromthelaminasinpopulationsofPi elliaternata(Thunb。)
Breit[J]．JPlantResEnviron(植物资源与环境学报)，
2001，10(2)：42—46．
[43LiuYP，CaoH，WangXT．Applicationofgenetechnology
inqualitycontrolofChinesedrugs(I)--Identificationof
PineUiaternataspeciesfromYuncheng，Shandongusi g
DNAsequencing[J]．ChinJPharmAnal(药物分析杂志)，
2001，21(6)：423—426．
[53DuJ，MaXJ，LiXD，eta1．AFLPFingerprintingof
Pinelliaternatanditsapplication[J]．ChinaJChinMater
IVied(中国中药杂志)，2006，31(1)：30～33．
E6]VosP，HogersR，ZabeauM，eta1．AFLP：anewtechnique
forDNA-、fingerprinting[J]．NuclAcidsrRes，1995，21：
4407—4414．
ET]HongtrakulV，HuestisG，KnappS J，eta1．Amplified
fragmentlengthpolymorphismsasatoolforDNAfinger～
printingsunflowergermplasm：geneticdivers tyamong
oilseedinbredlines[J]．TheorApplGenet，1997，95：400—
407．
[83DoyleJJ，DoyleJ L．IsolationofplantDNAfromfresh
tissue[J]．Focus，1990，12：13—15。
[9]TianQz，GaiYJ，YuDY，eta1．AFLPFingerprint
analysisofG．sojaandG．maxinChina口]．SciAgHcSin
(中国农业科学)，2001，34(5)：465—468．
Eao]KongQS，LiXX，XiangCP，eta1．Phylogeneticanalysis
ofcultivatedRadish(RaphanussativusL。)germplasmwith
AFLPEJ]．SciAgricSin(中国农业科学)，2005，38(5)：
1017—1023．
[11]ChenJS．MolecularDiagnoseonPlantVirusofAraceaeand
PinelliaternataRelatedR search(天南星科植物病毒的分子
诊断和半夏研究)EM]．Hangzhou：ZhejiangUnivers ty
Press，2006．
玉郎伞与水罗伞的生药学比较研究
戴斌1，丘翠嫦1，戴向东2，杨东爱1
(1。广西民族医药研究所，广西南宁530001；2．广西食品药品检验所，广西南宁530021)
摘 要：目的 比较广西壮、瑶医常用药材玉郎伞Millettiapulchravar．1axior与易混品种水罗伞(干花豆)
Fordiac口耐班Dm的生药鉴别特征。方法宏观(植物形态、药性性状)、微观(显微组织)及光谱、色谱技术分析方
法。结果 玉郎伞与水罗伞除紫外吸收光谱较相似外，其植物形态、药材性状、显微组织及薄层色谱均有各自的鉴
别特征。结论研究结果为该类药材的鉴定、质量标准的制定和进一步开发利用提供了科学依据。
关键词：玉郎伞；疏叶崖豆；水罗伞；生药鉴定
中图分类号：R282．7 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2007)12—1889—04
Comparatives udyollphamacognosticsbetweenrootofMillettiapulchra
var．1axiorandFordiacauliflora
DAIBinl，QUICui—chan91，DAIXiang—don92，YANGDong-ail
(1·GuangxiInstituteofNationalMedicalResearch，Nanning530001，China；2．GuangxiInstitute
ofFoodandDrugControl，Nanning530021，China)
Keywords：therootofMillettiapulchraKurzvar．1axior(Dunn)Z．Wei；MillettiapulchraKuriz
var．／axior(Dunn)Z．Wei；Fordiacaul floraHemsl．；identifieationo cruderugs
玉郎伞为豆科植物疏叶崖豆Millettiapulchra
(Dunn)Kurzvar．1axior(Dunn)Z．Wei的干燥
根‘川，始见于《广西中药志》[21，为广西壮、瑶医常用
药材，亦称小牛力、土甘草、大罗伞、土茯神及荔枝参
等。用于治疗小儿疳积、产后及病后虚弱、跌打肿痛、
骨折、风湿关节肿痛、中风偏瘫、小儿智力低下及老
收稿日期：2007—02—02
基金项目：国家自然科学基金资助；广西自然科学基金匹配项目(39860082)后续成果
作者筒介：戴斌(1938一)，男，广西恭城人，1964年毕业于北京医学院药学系，主任药师，主要从事中药、民族药生药学及质量标准研
究工作。E—mail：gehys@163．corn
万方数据
半夏栽培品遗传差异的AFLP分析
作者： 张杰， 徐涛， 张建光， 陈集双， ZHANG Jie， XU Tao， ZHANG Jian-guang， CHEN Ji-
shuang
作者单位： 张杰,ZHANG Jie(浙江理工大学生物工程研究所,浙江,杭州,310018;杭州职业技术学院,浙江
,杭州,310018)， 徐涛,张建光,陈集双,XU Tao,ZHANG Jian-guang,CHEN Ji-shuang(浙江理
工大学生物工程研究所,浙江,杭州,310018)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(12)
被引用次数： 9次

参考文献(11条)
1.Hu Q;Tao S S The latest progress of study and development on Pinellia ternata[期刊论文]-西南科技大
学学报 2005(01)
2.Li L Micromorphological characteristics and enzyme analysis of some Chinese Pinellia and their
taxonomic sig-nificance[期刊论文]-云南植物研究 1999(04)
3.Guo Q S;Shen W B;Liu L Analysis on characteristic zymogram phenotypes of easterase and superoxide
dismutase from the laminas in populations of Pinellia ternata (Thunb.)Breit[期刊论文]-植物资源与环境
学报 2001(02)
4.Liu Y P;Cao H;Wang X T Application of gene technology in quality control of Chinese drugs (Ⅰ)-
Identification of Pinellia ternata species from Yuncheng,Shandong using DNA sequencing 2001(06)
5.Du J;Ma X J;Li X D AFLP Fingerprinting of Pinellia ternata and its application[期刊论文]-中国中药
杂志 2006(01)
6.Vos P;Hogers R;Zabeau M AFLP:a new technique for DNA-fingerprinting[外文期刊] 1995
7.Hongtrakul V;Huestis G;Knapp S J Amplified fragment length polymorphisms as a tool for DNA
fingerprinting sunflower germplasm:genetic diversity among oilseed inbred lines[外文期刊] 1997
8.Doyle J J;Doyle J L Isolation of plant DNA from fresh tissue 1990(12)
9.Tian Q Z;Gai Y J;Yu D Y AFLP Fingerprint analysis of G.soja and G.max in China 2001(05)
10.Kong Q S;Li X X;Xiang C P Phylogenetic analysis of cultivated Radish (Raphanus sativus L.)
germplasm with AFLP[期刊论文]-中国农业科学 2005(05)
11.Chen J S 天南星科植物病毒的分子诊断和半夏研究 2006

本文读者也读过(10条)
1. 张瑾.谈献和.王康才.刘春生.张瑜 江苏不同产地半夏遗传多样性的ISSR分析[期刊论文]-南京中医药大学学报
2010,26(2)
2. 张杰.徐涛.张冬梅.杨永建.陈集双.ZHANG Jie.XU Tao.ZHANG Dong-mei.YANG Yong-jian.CHEN Ji-shuang 甘肃
省半夏种质资源遗传多样性分析[期刊论文]-兰州大学学报（医学版）2007,33(2)
3. 贾学思.王玉庆 半夏自交与杂交研究[期刊论文]-中国农学通报2010,26(7)
4. 杨俊宝.朱秀志.罗成科.李俊.魏会廷.彭正松 半夏种质资源的随机扩增多态性DNA技术分析[期刊论文]-中国中
医药信息杂志2007,14(1)
5. 付芸 湖北地区半夏遗传多样性及亲缘关系的RAPD研究[学位论文]2006
6. 严奉坤.许兴.杨亚亚.殷敏.YAN Feng-kun.XU Xing.YANG Ya-ya.YIN Min 同一品种不同产地宁夏枸杞DNA指纹图
谱特征研究[期刊论文]-时珍国医国药2007,18(10)
7. 刘波.王荔.陈疏影.杨艳琼.和世平.占燕.LIU Bo.WANG Li.CHEN Shu-yin.YANG Yan-qiong.HE Shi-ping.ZHAN
Yan 用RAPD标记分析不同居群半夏的遗传多样性[期刊论文]-云南农业大学学报2008,23(6)
8. 张君毅.郭巧生.吴丽伟.杭悦宇.ZHANG Jun-yi.GUO Qiao-sheng.WU Li-wei.HANG Yue-yu 我国不同地区半夏
rDNA序列分析[期刊论文]-中国中药杂志2006,31(21)
9. 高尚峰.GAO Shang-feng 正交试验法优选半夏的最佳栽培技术[期刊论文]-现代中药研究与实践2005,19(6)
10. 竺利波.顾万春.李斌.ZHU Li-bo.GU Wan-chun.LI Bin 花灌木种质资源及其遗传多样性研究[期刊论文]-植物
遗传资源学报2007,8(2)

引证文献(9条)
1.申浩.吴卫.侯凯.潘红梅.李敏 川半夏种茎大小对产量和质量的影响[期刊论文]-中草药 2011(4)
2.徐芳.王丽萍.陈波.姚守拙 改良SDS法快速提取赤芍干叶片DNA的研究[期刊论文]-中草药 2009(4)
3.黄庆阳.樊锐锋.常缨 香鳞毛蕨种质资源遗传多样性的AFLP分析[期刊论文]-中草药 2010(6)
4.郭静.林荣华.胡薇.陈由强.陈如凯 甘蔗双低频酶cDNA-AFLP体系的优化[期刊论文]-生物技术 2010(4)
5.罗成.刘锦.顾蔚.张琛.王喆之 华中五昧子AFLP反应体系的建立[期刊论文]-生物技术 2009(2)
6.丁伟.张立红.潘晟昊.陈集双 水半夏组培快繁体系的建立[期刊论文]-中草药 2011(3)
7.徐彦军.刘洋 苦瓜外观性状AFLP反应体系的建立及优化[期刊论文]-中国农学通报 2012(4)
8.欧立军.黄园.王俞人.谭智文 天门冬AFLP反应体系的建立及优化[期刊论文]-中国农学通报 2011(8)
9.霍锋.张泷.张娅 DNA分子标记技术在药用植物鉴别中的应用[期刊论文]-安徽农业科学 2010(8)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200712042.aspx