全 文 ：中草焉ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第9期2006年9月
量瓶中，加正己烷稀释至刻度，摇匀，精密量取1肛L
进样测定，按外标法计算，色谱图见图1，结果见
表1。
0 5 10 15 0 5 10 15
t{rain
l一桉油精2一樟脑3一龙脑4一醋酸龙脑醑
1-eucalyptol2-camphor3-borneol4-bornylacetate
图1混合对照品(A)和菊花挥发油(B)的气相色谱图
Fig．1GCChromatogramsfmixedreferencesub—
stance(A)andC．m rifoliumvolatileoil(B)
3讨论
菊花挥发油的成分复杂，传统填充柱对各成分
间不能完全分离，分别采用毛细管柱DB一1、DB一5，
表1菊花挥发油中桉油精、樟脑、龙脑和
醋酸龙脑蘸的测定结果
Table1 Determinationofeucalyptol，camphor，borneol，
andbornylacetateinC．morifoliumvolatileoil
Z004102531．Z8i5．64 18．Z39．1Z 60．9630．48 52．87Z6．44
2005092435．8421．50 22．7513．65 65．8739．52 56．4833．89
2005101036．1221．67 23．4114．05 67．2440．34 26．8716．12
以及不同程序升温进行测定，结果以毛细管柱DB一1
和程序升温条件分离效果好，但由于成分复杂，无法
插入内标物，只好以外标法定量。
References：
Eli ChangXQ，DingLX．ManualofAnalysisofActive
ComponentinChineseNateriaMedica(中药活性成分分析手
册)[M]．Beijing：XueyuanPress，2002．
Ez]WangCX． Reviewof thechemicalonstituentsin
ChrysanthemummorifoliumEJ]．JChinMedMater(中药材)，
2004，27(3)：224．
HPLC—ELSD法测定复方扶芳藤合剂中黄芪甲苷
吴玉强1，罗 轶2
(1．广西中医学院制药厂，广西南宁530023；2．广西壮族自治区食品药品检验所，广西南宁530021)
复方扶芳藤合剂由扶芳藤、黄芪、红参等组成，
具有益气补血，健脾养心之功效。用于气血不足，心
脾丽虚，症见气短胸闷，少气懒言等症。其质量标准
采用的是薄层扫描法。为了有效地控制该产品的质
量，本实验以黄芪甲苷为质量指标，采用HPLC—
ELSD法进行检测并制定本品的质控标准。
1仪器与试药
美国Waters2695高效液相色谱仪，
Alltech2000ELSD检测器，MILLI—QLabo超纯水
处理器。黄芪甲苷对照品由中国药品生物制品检定
所提供，批号0781—200111。乙腈为色谱纯，水为高
纯水，其他试剂均为分析纯。复方扶芳藤合剂及缺黄
芪阴性样品均由广西中医药学院制药厂提供。
2方法与结果
2．1色谱条件：色谱柱KromasilC18柱(250mm×
4．6mm，5弘m)，流动相：乙腈一水(33：67)；体积流
量：0．8mL／min；柱温：35℃，进样量：20弘L；ELSD
参数：漂移管温度109℃，气体流量2．8L／min。在
以上色谱条件下，黄芪甲苷峰保留时间约为20
min，见图1。
2．2供试品溶液的制备：取装量项下的本品，混匀，
精密量取15mL，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，
第一次用30mL轻轻振摇，其余每次用25mL用力
振摇，合并正丁醇提取液，用1％氢氧化钠溶液洗涤
2次，每次25mL，弃去1％氢氧化钠溶液，再用正丁
醇饱和的水洗涤3次，每次25mL，正丁醇液浓缩至
干，残渣用甲醇溶解并转移至5mL量瓶中，加甲醇
至刻度，摇匀，即得。
2．3对照品溶液的制备：精密称取经五氧化二磷减
压干燥24h的黄芪甲苷对照品10mg，置50mL量
瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1
mL中含黄芪甲苷200p-g)；再精密量取上述黄芪甲
收稿日期：2005—1i-01
作者简介：吴玉强(1970一)，男，广西南宁人，广西中医学院制药厂药研所所长，工程师，从事药品生产、教学、科研工作。
Fax：(0771)5855189E—mail：wyqiang@tom．corn
万方数据
·1354· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第9期2006年9月
^ 垒 ．厶
0 5 10 15 20 25
t／min
*一黄芪甲苷
*-astragalosideVl
圈1黄芪甲苷对照品(A)、复方扶芳藤合剂(B)
和缺黄苠的阴性样品(C)的HPLC圈
Fig．1HPLCChromatogramsofastragalosideIVrefer—
encesubstance(A)，CompoundFufangte g
Mistura(B)，andnegativesample(C)
苷对照品溶液2mL，置5mL量瓶中，加甲醇至刻
度，摇匀，即得(每1mL中含黄芪甲苷80p-g)。
2．4 线性关系考察：精密称取黄芪甲苷对照品
10．25mg，置50mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀释
至刻度，摇匀，备用。分别精密吸取以上对照品溶液
1．0、2．0、3．0、4．0、5．0mL，分别置5mL量瓶中，加
甲醇稀释至刻度，摇匀，进样20弘L，测定。以对照品
进样量(弘g)的常用对数值为横坐标，峰面积积分值
的常用对数值为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程
为y_--1．5880X+5．5450，r一0．9993；结果表明：
黄芪甲苷在进样量0．82～4．10pg时线性关系良
好。
2．5干扰试验：按处方量，取缺黄芪的阴性样品，按
供试品溶液制备项下的方法提取，测定。结果在黄芪
甲苷蜂相应的保留时间几乎无吸收峰，表明处方中
其他成分对测定无干扰(图1)。
2．6 精密度试验：对同一供试品溶液(批号
20050321)，连续测定5次，计算得黄芪甲苷峰面积
积分值的常用对数值的RSD为1．24％。
2．7 稳定性试验：对同一供试品溶液(批号
20050321)，在0、1、5、15h分别测定1次，计算得供
试品中黄芪甲苷的质量浓度为69．2vtg／mL，RSD
为0．62％。表明在15h内，被测物稳定。
2．8重现性试验：对同一供试品(批号20050321)，
平行测定5份，结果黄芪甲苷的质量浓度为69．5
tsg／mL，RSD为2．01％。
2．9 回收率试验：精密量取含黄芪甲苷69．5弘g／
mL的复方扶芳藤合剂(批号20050321，规格：15
mL／瓶)5mL，分别精密加入0．1585mg／mL黄芪
甲苷对照品溶液2mL，制备供试品溶液测定，计算
回收率。结果黄芪甲苷平均回收率为99．93％，RSD
为2．73％(以一5)。
2．10样品的测定：按上述方法，测定了本品3批样
品中黄芪甲苷的质量浓度，结果见表1。
表1复方扶芳藤合剂中黄芪甲苷测定结果(弹一3)
Table1 Deferminationof stragalosideIVinCompound
FufangtengMisturam一3)
批号 黄芪甲苷／(腿·mL-1)
20050406
20050407
20050408
3讨论
黄芪甲苷是黄芪的主要有效成分，以往测定黄
芪甲苷的方法主要有比色法、薄层扫描法和HPLC—
UV法。比色法和薄层扫描法因操作步骤多，受试验
条件的干扰较大而逐渐不被采用；HPLC—UV法因
采用紫外末端吸收检测，易受溶剂背景的影响，重现
性较差，测定中成药常有干扰。而HPLC—ELSD灵
敏度高，重现性好，故采用HPLC—ELSD测定黄芪
甲苷，结果表明该法不受其它成分的干扰，分离度
好，质量可控。
流动相选择：以乙腈一水为流动相，并结合本品
实际情况，将乙腈一水比例调整为(33：67)进行色谱
分析，结果所测成分黄芪甲苷峰形良好，且与其他成
分达到基线分离，黄芪甲苷出峰时间为19～20
min。
漂移管温度的选择：根据流动相组成和比例按
检测手册参数表计算，流动相体积流量为0．8mL／
min时的参数，以100℃为起点，气体流量2．7L／
min不变，以80btg／mL黄芪甲苷对照品溶液进样
10弘L，当升温至109℃时的基线噪音可接受，故确
定漂移管温度为109℃。
气体流量的选择：漂移管温度为109℃不变，气
体流量从2．5L／min为起点，每次升高0．1L／min，
以80pg／mL黄芪甲苷对照品溶液进样10弘L，结果
在气体流量2．8L／min时产生最大信噪比，确定气
体流量为2．8L／min。
万方数据
HPLC-ELSD法测定复方扶芳藤合剂中黄芪甲苷
作者： 吴玉强， 罗轶
作者单位： 吴玉强(广西中医学院制药厂,广西,南宁,530023)， 罗轶(广西壮族自治区食品药品检验所
,广西,南宁,530021)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(9)
被引用次数： 7次

引证文献(7条)
1.窦玉红.崔力剑.黄芸.李清 贞灵固本片中黄芪甲苷的固相萃取-高效液相色谱-蒸发光散射测定[期刊论文]-时珍
国医国药 2009(12)
2.何娟.何秀英 黄芪四物汤颗粒的质量标准研究[期刊论文]-中国中医药科技 2009(3)
3.朱虹云.徐文峥.刘帅英 HPLC-ELSD法测定补血颗粒中黄芪甲苷[期刊论文]-中草药 2009(8)
4.唐德智.莫迎 小儿健脾开胃合剂中黄芪甲苷的含量测定[期刊论文]-中国药业 2010(6)
5.李军.虞丽芳.王莉莉.李婷.陆伟根 奇丹颗粒质量标准研究[期刊论文]-中成药 2009(3)
6.罗轶 HPLC-ELSD法测定西洋参金钱龟合剂中黄芪甲苷的含量[期刊论文]-中药新药与临床药理 2007(5)
7.李代晓.吕英超.李云霞 高效液相色谱蒸发光散射检测器测定复方石韦片中黄芪甲苷含量[期刊论文]-中国实验方
剂学杂志 2010(10)


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