全 文 ：复方扶芳藤合剂 ‹°≤指纹图谱共有模式的建立
及其在制剂质量控制中的应用
覃洁萍 t3 o刘 进 u o叶 勇 t o李 芸 v o谭建宁 t
kt1广西中医学院 o广西 南宁 xvssst~ u1广西师范学院 o广西 南宁 xvssst~
v1广西中医学院 附属制药厂 o广西 南宁 xvssuvl
≈摘要   目的 }建立复方扶芳藤合剂的 ‹ °≤指纹图谱共有模式 o为该制剂的质量控制提供新的方法 ∀方法 }
采用 ‹ °≤分析方法 o选择 ts批合格样品的 ‹ °≤指纹图谱 o进行峰位校正 o使谱峰匹配 o建立复方扶芳藤合剂对
照用 ‹ °≤指纹图谱共有模式 ∀结果 }该指纹图谱共有模式可以较好地区分合格与不合格产品 ∀结论 }‹ °≤指纹
图谱质量控制方法为复方扶芳藤合剂的质量控制提供了更全面的信息 ∀
≈关键词   复方扶芳藤合剂 ~高效液相色谱 ~指纹图谱 ~质量控制
≈中图分类号  • u{w1t ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukussyltz2twuu2sw
≈收稿日期   ussx2s|2tu
≈基金项目   广西自然科学基金资助项目 k桂科自 swwzszyl
≈通讯作者   3 覃洁萍 o ר¯} kszztl vtvzswvo ∞2°¤¬¯} ¦«¬2
±¤´ ­³yv{sƒ ¼¤«²²q¦²°q¦±
复方扶芳藤合剂是由红参 !黄芪 !扶芳藤等补益
中药经提取 !精制而成的口服液制剂 o具有益气补
血 o健脾养心等功效 ≈t  o系国家中药保护品种 !国家
基本药物 o现行质量标准中除有 ׏≤鉴别外 o只有
一个薄层色谱扫描的含量测定项目 o用于测定制剂
中黄芪甲苷的含量 ≈t  ∀为更有效地控制该制剂的
内在质量 o作者按照国家关于 /中药注射剂指纹图
谱研究的技术要求 k暂行 l的通知 0的要求 o应用国
家药典委员会 /中药色谱指纹图谱相似度评价系
统 0软件 o建立了复方扶芳藤合剂指纹图谱共有模
式 o并以该指纹图谱共有模式为标准 o对 us批产品
进行了检验 ∀实验结果证明 o该法简便 !可靠 !重复
性好 o可以较好地辨认合格与不合格产品 ∀
1 仪器与试药
„ª¬¯¨ ±·ttss高效液相色谱仪 k在线真空脱气
机 !高压四元梯度泵 !标准自动进样器 o智能化柱温
箱 !可变波长紫外检测器 o二极管阵列紫外检测
器 lo„ª¬¯¨ ±·ttss ¶¨µ¬¨¶色谱工作站 ∀超纯水系统
k ¬¯¯¬³²µ¨l~Šty p • 型离心沉淀机 k北京医用离
心机厂 l∀
红参 为 五 加 科 植 物 人 参 Παναξ γινσενγ
≤1„1 ¼¨1的栽培品 k习称 /园参 l经蒸制后的干燥
根 ~黄芪为豆科植物蒙古黄芪 Αστραγαλυσ µ εµ βρανα2
χευσkƒ¬¶¦«1l …ª¨ 1 √¤µ1 µ ονγηολιχυσ k…ª¨ 1l ‹¶¬¤²
的干燥根 ~扶芳藤为卫矛科植物扶芳藤 Ευονψµ υσ
φορτυνειk×∏µ¦½1l‹¤±§2 ¤½½1的干燥茎 !叶 o均由广
西中医学院制药厂提供 o并经南宁药品检验所莫可
丰主任药师鉴定 ∀复方扶芳藤合剂各批号成品为广
西中医学院制药厂提供 ∀人参皂苷 • ªt k供含量测
定用 o批号 szsv2ussuutl由中国药品生物制品检定
所提供 ∀
2 方法与结果
211 色谱条件及色谱适用性试验 日本岛津 ¶«¬°2
³¤¦® ≤≤ p ’⁄≥色谱柱 ky1s °° ≅ txs °°ox Λ°l~
流动相 „乙腈 2… s1sxh磷酸水溶液 o洗脱方式见表
t~柱温 ux ε ~检测波长 usv ±°~分析时间 ys °¬±~
流速 t1s °# °¬±pt ~供试品溶液与对照品溶液各
进样 ts ˏ~理论塔板数以人参皂苷 • ª¯峰计不少于
tx sss∀
表 t 梯度洗脱方式
τr°¬± „ rh …rh τr°¬± „ rh …rh
s ts |s vs ws ys
x us {s wx xs xs
ts ux zx xs xs xs
us vs zs ys ¶·²³
212 供试品溶液的制备 精密量取复方扶芳藤合
剂样品 ux °o用氯仿振摇萃取 u次 o每次 vs °o弃
去氯仿层 o剩余液体用水饱和的正丁醇分别振摇萃
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第 vt卷第 tz期
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Χηινα ϑουρναλοφΧηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vtoŒ¶¶∏¨ tz
≥ ³¨·¨°¥¨ µoussy
取 x次 kvsousousousous °lo合并正丁醇液 o再用
氨试液洗涤 u次 o第 t次用 tss °o第 u次用 {s
°o弃去氨水层 o减压回收正丁醇 o残渣用甲醇溶解
并定容到 u °o离心 o即得 ∀
213 对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷 • ªt
对照品 ts °ªo置 ux °量瓶中 o加甲醇溶解并稀释
至刻度 o摇匀 o即得 ∀
214 精密度试验 取同一份供试品溶液 ts ˏo连
续进样 y次 o考察色谱峰保留时间的一致性 o结果各
共有峰 kt ∗ ut号峰 l保留时间的 • ≥⁄均小于
s1xh o相对峰面积的 • ≥⁄均小于 t1{h o说明仪器
精密度很好 o符合指纹图谱的技术要求 ∀
215 稳定性试验 取同一供试品溶液 ts ˏo分别
在 souoyotuotwouw «进样测定 o检测色谱图 o直观
观察各指纹图谱的全貌无明显变化 o经计算各共有
峰 kt ∗ ut号峰 l相对保留时间的 • ≥⁄为 s1suh ∗
s1sxh o相对峰面积的 • ≥⁄为 s1tyh ∗ t1zh ∀相
似度计算结果 o各指纹图谱与其所得共有模式图谱
的相似度分别为 s1||xos1||zos1||zos1||wos1|||o
s1||{∀以上结果表明 o供试品溶液常温下在 s ∗ uw
«可保持稳定 o符合指纹图谱的技术要求 ∀
216 重复性试验 取同一批复方扶芳藤合剂 o分
别按供试品溶液制备方法制备 y个供试品溶液 o并
分别测定其色谱图 o结果各共有峰 kt ∗ ut号峰 l的
相对保留时间 • ≥⁄ s1suh ∗ s1v{h o相对峰面积
• ≥⁄ s1tuh ∗ u1uh o符合指纹图谱要求 k• ≥⁄ [
vh l∀将测定结果进行指纹图谱相似度计算 o结果
各指纹图谱与其所得共有模式图谱的相似度分别为
s1|{xos1|{zos1||zos1|{wos1|{yos1||{o说明本方
法重复性较好 ∀
217 复方扶芳藤合剂 ‹°≤图谱稳定性研究 为
了考察复方扶芳藤合剂 ‹°≤指纹图谱的稳定性 o
选择 t个批号的复方扶芳藤合剂产品 o分别于 sovo
yotuot{月分别测定其 ‹°≤指纹图谱 o结果主要
共有峰 kt ∗ tz号峰 l的相对峰面积并无明显变化 o
其 • ≥⁄s1wuh ∗ u1{h ~经图谱相似度计算 o得各指
纹图谱与其所得共有模式图谱的相似度分别为
s1|x{os1|zwos1||xos1|x{os1||tos1||t~将 voyo
tuot{月测得的图谱与 s月测得的图谱进行比较 o
相似度分别为 s1|v|os1|xyos1|z{os1|vuo说明复
方扶芳藤合剂产品的 ‹°≤指纹图谱在 t{个月内
可保持稳定 ∀
218 复方扶芳藤合剂 !原料药材及对照品的 ‹°≤
图谱测定 分别取复方扶芳藤合剂的原料药材红
参 !黄芪 !扶芳藤 o参照复方扶芳藤合剂生产工艺提
取 o然后取各处方量药材的提取液及复方扶芳藤合
剂样品按供试品溶液制备方法制备供试液 o将制得
的各供试液 !对照品溶液在上述色谱条件下测定 o得
对照品及各药材和复方扶芳藤合剂样品的色谱图如
下 o见图 tou∀
图 t 人参皂苷 • ªt ‹ °≤图
图 u 复方扶芳藤合剂及药材 ‹ °≤图谱
t1合剂 ~u1扶芳藤 ~v1黄芪 ~w1红参
219 复方扶芳藤合剂 ‹°≤图谱共有模式的测定
选择 ts批合格的复方扶芳藤合剂产品 o按供试品
溶液制备方法制备供试品溶液 o并测定其色谱图 ∀
从测得的 ts批样品 ‹°≤色谱图的整体性出发 o并
与原料药材的图谱进行对比 o进行峰位校正 o使谱峰
匹配 o从中找出确能构成其指纹特征的色谱峰 ~结果
确定 ut个峰作为特征峰 o组成复方扶芳藤合剂指纹
图谱共有模式 o见图 v∀根据 ts批样品的平均值 o
以保留时间与人参皂苷 • ªt峰一致的 y号峰作为参
照峰 o标定了 ut个共有指纹峰的相对保留时间 o结
果各共有指纹峰相对保留时间 • ≥⁄在 s1sth ∗
s1vwh ~经计算各色谱图中共有峰总面积占所有色
谱峰面积的百分比在 {xh ∗ |xh ∀
图 v 复方扶芳藤合剂 ‹ °≤指纹图谱
在复方扶芳藤合剂指纹图谱的 ut个特征峰中 o
经对照试验 y号峰的保留时间及紫外光谱与人参
皂苷 • ªt对照品一致 o作为参照峰 ∀另经对照品实
#vuwt#
第 vt卷第 tz期
ussy年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφΧηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vtoŒ¶¶∏¨ tz
≥ ³¨·¨°¥¨ µoussy
验 o对比其保留时间与紫外光谱 o确定 ty号峰为黄
芪的有效成分黄芪甲苷 o而 w号峰和 z号峰分别为
复方扶芳藤合剂中的辅料香兰素和苯甲酸钠 ∀此
外 o通过与药材的图谱进行对比 o可知 yotuotvotwo
tx和 tz号峰分别为红参的特征峰 ~{o|otsott和
ty号峰分别为黄芪的特征峰 ~而 u号峰和 v号峰主
要为扶芳藤的特征峰 ~t号峰为扶芳藤和黄芪的共
有特征峰 ∀ x号峰在 v个药材的图谱中均未出现 o
可能为复方扶芳藤合剂生产过程中产生的新成分 ∀
2110 复方扶芳藤合剂 ‹°≤图谱共有模式在产品
质量分析中应用 为了考察测得的指纹图谱共有模
式的分辨能力 o测定了 us批不同质量的复方扶芳藤
合剂产品的 ‹°≤指纹图谱 o然后以上述建立的
‹°≤指纹图谱共有模式为对照图谱 o分别计算测
得各指纹图谱的相似度 ∀结果见表 u∀
表 u us批不同质量的复方扶芳藤合剂产品相似度
‘²q 相似度 ‘²q 相似度
t sq|uz tt sq|xt
u sq|vz tu sq{t|
v sq|{| tv sqxyz
w sq|z| tw sqz{w
x sq|zt tx sq{t|
y sq|tx ty sq{ws
z sq|{x tz sqvtz
{ sq|x{ t{ sq{st
| sq|{| t| sqz{u
ts sq|uu us sq|ww
上述各批号产品中 o标号为 t ∗ tsottous的产
品为由广西中医学院制药厂提供 !按正常投料并经
检验合格的不同批次产品 ~ tuoty号产品为苯甲酸
钠减半量投料的不合格产品 ~tvotz号产品为黄芪
减半量投料的不合格产品 ~twot|号产品为扶芳藤
减半量投料的不合格产品 ~而 txot{号产品为红参
减半量投料的不合格产品 ∀上述实验结果表明 o所
建立的复方扶芳藤合剂 ‹°≤指纹图谱共有模式可
较好地区分合格与不合格产品 o具有较好的分辨识
别能力 ∀
3 讨论
指纹图谱应用于中药及制剂分析已有较多报
道 ≈u2x  ∀本研究表明 }在药材产地 o采收 o加工方法等
相对固定的前提条件下 o利用 ‹°≤指纹图谱来控
制中成药复方扶芳藤合剂的质量优劣是切实可行
的 o它比现行质量标准要更全面 !客观 o该法为复方
扶芳藤合剂的质量控制提供了更全面的信息 ∀
本实验中供试品溶液的制备方法主要是根据该
制剂主要由红参 !黄芪 !扶芳藤为原料制成 o主要有
效成分为皂苷类成分而拟订的 ∀故先用氯仿振摇去
除亲脂性成分 o然后再用水饱和的正丁醇试液提取
制备供试液 ∀正丁醇提取液用氨试液处理是为了去
除酸性色素 ∀
本实验建立的复方扶芳藤合剂指纹图谱共有模
式中扶芳藤药材的特点体现得不多 o此为不足之处 o
今后尚需在这一方面进行进一步的研究 ∀
≈参考文献  
≈t  中国药典 ≈≥ q一部 q ussx}xvsq
≈u  谢培山 q中药色谱指纹图谱鉴别的概念 !属性 !技术与应用
≈  q中国中药杂志 q usstouyktsl}yxvq
≈v  王 晃 o李梦龙 o覃洁萍 o等 q建立中药指纹图谱保证中药产
品质量 ≈ q成都中医药大学学报 oussuouxkvl}wvq
≈w  任德全 q中药指纹图谱质控技术的意义与作用 ≈ q中药材 o
usstouwkwl}uvxq
≈x  侯小平 o何新新 o苏薇薇 q中药指纹图谱质量控制技术 ≈ q
中药材 ousstokxl}vzsq
Αππλιχατιον οφ ΗΠΛΧ φινγερπριντ ιν θυαλιτψ χοντρολοφ
Φυφανγτενγ χοµ βινατιον φορµ υλα
±Œ‘¬¨2³¬±ªt oŒ˜ ¬±u o≠ ∞ ≠ ²±ªt oŒ≠∏±v o ׄ‘¬¤±2‘¬±ªt
(t. Γυανγξι ΤραδιτιοναλΧηινεσε ΜεδιχαλΧολλεγε, Ναννινγ xvssst, Χηινα;
u. Γυανγξι Νορµ αλΧολλεγε, Ναννινγ xvssst, Χηινα;
v. Πηαρµ αχευτιχαλΦαχτορψ οφ Γυανγξι ΤραδιτιοναλΧηινεσε ΜεδιχαλΧολλεγε, Ναννινγ xvssuv, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶¨·¤¥¯¬¶«·«¨ ¦«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦°²§¨ ²©‹°≤ ©¬±ª¨ µ³µ¬±·²©ƒ∏©¤±ª·¨±ª¦²°¥¬±¤·¬²± ©²µ°∏¯¤©²µ·«¨ ∏´¤¯2
¬·¼ ¦²±·µ²¯ ²©·«¬¶° §¨¬¦¬± q¨ Μετηοδ : ts ¥¤·¦«¦¨µ·¬©¬¨§³µ²§∏¦·¶º µ¨¨ ¶¨¯¨ ¦·¨§·² ¶¨·¤¥¯¬¶«·«¨ ¦«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦°²§¨ ²©‹°≤ ©¬±ª¨ µ³µ¬±·
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第 vt卷第 tz期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφΧηινεσε Ματερια Μεδιχα
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²©ƒ∏©¤±ª·¨±ª¦²°¥¬±¤·¬²± ©²µ°∏¯¤¥¼ ¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¬¦³¤·¨µ± °¤·¦«¬±ª¤±§µ¨·¨±·¬²± ·¬°¨¦²µµ¨¦·¬²±qΡ εσυλτ: ׫¬¶¦«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦°²§¨
²©‹°≤ ©¬±ª¨ µ³µ¬±·¦¤± ¦¯ ¤¨µ¯¼ §¬©©¨µ¨±·¬¤·¨·«¨ ¨¯¬ª¬¥¯¨ƒ∏©¤±ª·¨±ª³µ²§∏¦·¶©µ²° ·«¨ ∏± ∏´¤¯¬©¬¨§³µ²§∏¦·¶q Χονχλυσιον: ׫¬¶° ·¨«²§
¦¤± ³µ²√¬§¨ ·«²µ²∏ª«¬±©²µ°¤·¬²± ©²µ·«¨ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯ ²©ƒ∏©¤±ª·¨±ª¦²°¥¬±¤·¬²± ©²µ°∏¯¤q
[ Κεψ ωορδσ] ƒ∏©¤±ªƒ∏©¤±ª·¨±ª¦²°¥¬±¤·¬²± ©²µ°∏¤¯~ ‹ °≤~ ©¬±ª¨ µ³µ¬±·~ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯
≈责任编辑 鲍 雷  
枳实饮片中 v类化学成分含量测定
刘振丽 t3 o宋志前 t o张 玲 t o李林福 t o王跃生 u
kt1中国中医科学院 基础理论研究所 o北京 tsszss~
u1中国中医科学院 中药研究所 o北京 tsszssl
≈摘要   目的 }测定枳实饮片中 v类成分含量 ∀方法 } ‹ °≤测定黄酮类成分橙皮苷和柚皮苷含量 !生物碱类
辛弗林含量 o药典法测定挥发油含量 ∀结果 } ts个批次的饮片中橙皮苷含量为 t1uxh ∗ ty1yh o柚皮苷含量为
sh ∗ tv1|h o相差很大 ∀其中有 v个批次的饮片中不含有柚皮苷 o而橙皮苷含量却很高 ∀柚皮苷与橙皮苷的含量
之和相差不大 o为 ts1{h ∗ ty1yh ~辛弗林含量为 s1sx{ xh ∗ s1yzyh ~挥发油含量为 s1th ∗ u1uh o差异较大 ∀
结论 }枳实饮片 v类化学成分含量差别很大 ∀
≈关键词   枳实 ~橙皮苷 ~柚皮苷 ~辛弗林 ~挥发油
≈中图分类号   • u{w1t ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukussyltz2twux2sv
≈收稿日期   ussx2sy2uz
≈基金项目   国家科技攻关计划项目 kusst…„zst„vz2yl
≈通讯作者   3 刘振丽 o ר¯} kstsl ywstwwtt2uxsvo∞2°¤¬¯}
½«¨ ± ¬¯2¯¬∏ƒ ¶¬±¤q¦²°
枳实为常用中药 o来源于芸香科植物酸橙 Χιτρυσ
αυραντιυµ 1及其栽培变种或甜橙 Χιτρυσσινενσισ’¶2
¥¨ ¦®的干燥幼果 ≈t  o具有破气消积 o化痰散痞的功
效 o主要含有挥发油 !黄酮类 !生物碱类等 ∀黄酮类
对大鼠离体肠平滑肌具有收缩作用 o主要有橙皮苷 !
新橙皮苷 !柚皮苷 ≈u  ∀生物碱是升压 !抗休克的主
要有效成分 o主要为辛弗林 !Ν2甲基酪胺 ∀挥发油对
大鼠离体肠平滑肌的收缩呈先兴奋后抑制作用 o并
有一定程度的镇痛作用和中枢抑制作用 ≈v  o同时也
是枳实 /性烈 0的主要物质基础 ≈w  ∀为评价饮片质
量 o本实验对 ts个批次的枳实饮片中橙皮苷 !柚皮
苷 !辛弗林和挥发油含量进行了测定 ∀
1 仪器与试药
‹° ttss高效液相色谱仪 kŠtvuu„脱气机 !
Štvtt„四元泵 !Štvty„恒温箱 !Štvtx… ⁄„⁄检测
器 !Štvtv„自动进样器 !‹°化学工作站 l~Š sxs{
理化干燥箱 k上海市实验仪器总厂 l∀枳实饮片为
不同饮片厂产品及市售品 ∀橙皮苷对照品 k批号
szut2ussstso含量测定用 l!柚皮苷对照品 k批号
ttszuu2ussvs|o含量测定用 l和辛弗林对照品 k批号
szuz2usstsxo含量测定用 l购自中国药品生物制品
检定所 ∀甲醇 !乙腈为色谱纯 o水为重蒸水 o其他试
剂为分析纯 ∀
2 方法与结果
211 橙皮苷 !柚皮苷含量测定
21111 色谱条件 ²¥¤¬≥…2≤t{色谱柱 kw1y °° ≅
txs °°ox Λ°lo流动相甲醇 2uh醋酸 kvsΒzsl~流速
t1s °# °¬±pt ~检测波长 u{x ±°~柱温 vs ε ∀
21112 对照品溶液的制备和线性关系的考察 分
别精密称取橙皮苷 !柚皮苷对照品 o加甲醇配制成含
量分别为 s1tos1vu °ª# °pt的对照品溶液 ∀精密
吸取等体积的 u种对照品溶液混合 o得到每 t °含
橙皮苷和柚皮苷分别为 s1sx °ª和 s1ty °ª的混合
对照品溶液 ∀分别精密吸取混合对照品溶液 to vo
xo zo | ˏo注入液相色谱仪 o按上述色谱条件测定
峰面积 o以测得的峰面积积分值为纵坐标 o进样量
kΛªl为横坐标 o绘制标准曲线 o计算回归方程 o橙皮
苷 Ψ € y1ux n t ytwΞ, ρ€ s1||| |,表明橙皮苷在
#xuwt#
第 vt卷第 tz期
ussy年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφΧηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vtoŒ¶¶∏¨ tz
≥ ³¨·¨°¥¨ µoussy