全 文 ：·848· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第6期2007年6月
表1
Table1
复方抗病毒喷雾剂中3个成分的测定结果(n一3)
DeterminationofthreecomponentsinCompound
Anti—virusSpray(一一3)
的上呼吸道感染的治疗，贯叶连翘提取物中的金丝
桃素已被确证具有显著的抗禽流感病毒功效。笔者
在抗病毒中药初步筛选中发现莪术油和贯叶连翘提
取物具有较理想的抗病毒作用，二者合用抗病毒效
力有加强的趋势。通过不同浓度的处方筛选，确定了
二者配伍的最佳剂量，再辅以其他清热解毒类的中
药组合成一种新的抗病毒喷雾剂。
对莪术油及其制剂的定量分析已有很多报
道[1’2]。《中国药典>>2005年版一部莪术油项下采用
栊牛儿酮作为指标成分进行质量控制，但莪术油的
抗病毒药效成分主要为莪术油，而且在实验中发现
样品外观颜色变化时测得的栊牛儿酮的量变化不
大，但莪术醇的量变化较为明显。如果单用拢牛儿酮
对样品进行质量控制难以有效控制产品的质量。因
此在复方喷雾剂的质量控制上对二者均进行了定量
分析，结果较为理想。
贯叶连翘提取物中金丝桃素是最具生物活性的
物质，但量甚微，给定量检测带来了一定的难度。目
前其定量测定方法有分光光度法、薄层扫描法和
HPLC一荧光检测法等‘3’4]。本实验建立的HPLC一可
见光检测法采用常规二极管检测器，简单快捷，具有
一定的优势。
References：
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HPLC法测定三拗汤不同煎液中苦杏仁苷
杨 种1’4，梁光义1’”，周静宜1，徐必学1，柴立3
(1．贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室，贵州贵阳550002；2．贵阳中医学院，贵州贵阳550002；
3．贵州宏宇药业有限公司，贵州贵阳 550002；4．贵阳医学院，贵州贵阳550004)
三拗汤原名还魂汤，出自张仲景《金匮要略》，由
麻黄、杏仁、甘草3味中药组成，宣肺解表，主治感冒
风邪，鼻塞声重，语音不出，咳嗽胸闷[1]。分煎法与合
煎法制备对中药复方汤剂有效成分和药理作用的影
响一直是中医药理论和临床实践中值得探讨的课题，
特别是近年来单味中药精制颗粒逐渐在临床上推广
应用，更引起对这一课题研究的兴趣。本实验比较了
三拗汤用合煎法与分煎法制得的汤剂中苦杏仁苷的差
异，以探索中药复方汤剂不同制法对其有效成分溶出
量的影响，对单味中药精制颗粒应用于临床提供依据。
1仪器、药材与试剂
美国惠普HPll00型高效液相色谱仪，DAD检
测器，HPll00／WIND3D化学工作站，EYELA
FDU一1100冷冻干燥机。
草麻黄EphedrasinicaStapf(河北)、杏仁
PrunusarmeniacaL．(贵州)、甘草Glycyrrhiza
uralensisFiseh．(内蒙古)药材饮片经贵阳中医学院
何顺志教授鉴定。
苦杏仁苷对照品(批号820—200002，中国药品生
物制品检定所)；甲醇、乙腈(色谱纯)；水(重蒸水)。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱：HypersilC。色谱柱(250
mm×4．6mm，5肛m)(大连依利特科学仪器有限公
司)；流动相：甲醇一乙腈一水(16：4：80)；体积流
收稿日期：2006—08—08
基金项目：国家自然科学基金项目(30460154)
作者简介：杨耕(1976一)，男，四川人，讲师，硕士，主要从事中药及复方化学成分研究及新药研制。
*通讯作者梁光义Tel：(0851)5652109E—mail：guangyi—liang@21en．com
万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第6期2007年6月·849·
量：0．6mL／min；柱温：30℃；检测波长：208nm。色 谱图见图l。
A B
t／min
l一苦杏仁苷
1-amygdaioside
图1 苦杏仁苷对照品(A)、苦杏仁(B)、阴性对照(c)、合煎液样品(D)和分煎液样品(E)的HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsfamygdaiosiderefer ncesubstance(A)，P．armeniaca(B)，negatives mple(C)，
mixeddecoction(D)，andsepar teddecoctions(E)
2．2溶液的制备
对照品溶液的制备：精密称取苦杏仁苷对照品，
用甲醇溶解，制成0．216mg／mL的溶液，备用。
合煎液供试品溶液的制备(传统煎煮法)：称取
药材饮片，麻黄9．0g、杏仁9．0g、甘草3．0g，加8
倍量的水浸泡1h，煎煮保持微沸1h，倒出煎液；药
渣再加6倍量的水煎煮1h，合并两次煎液，冷冻干
燥成干粉。称取0．2g干粉，置25mL量瓶中，加甲
醇适量，超声提取30min，超声后加甲醇至刻度，摇
匀，取1mL置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，
4000r／rain离心5rain，过0．45弘m滤膜，滤液即为
合煎液供试品溶液。
分煎液供试品溶液的制备(煎煮方法由贵州宏
宇药业提供)：称取上述量的各药材，杏仁和甘草依
上法分别加水煎煮2次，制备各药材的煎液，冷冻
干燥成千粉；麻黄加10倍量的水浸泡1h，煎煮保
持微沸40min，倒出煎液；药渣再加6倍量的水煎
煮40min，合并两次煎液，冷冻干燥成干粉。将各药
材干粉混合均匀，称取0．2g，同上法制得分煎液供
试品溶液。
阴性对照溶液的制备：分别按上法制备不含杏
仁的合煎液、分煎液的阴性对照溶液。
2．3线性关系的考察：精密吸取苦杏仁苷对照品溶
液适量，共5份，分别置于10mL量瓶中，加入甲醇
至刻度，使质量浓度分别为21．60、43．20、64．80、
86．40、108．00mg／L。精密吸取5肛L注入色谱仪，
测定峰面积。以峰面积积分值对进样量进行线性回
归，得回归方程A一1849．43283C+9．211，r一
0．99950，结果表明苦杏仁苷在0．108～0．540弘g
与峰面积呈良好的线性关系。
2．4精密度试验：精密吸取苦杏仁苷对照品溶液5
弘L，连续进样5次，测定相应峰面积，计算得其
RSD为1．10％。
2．5稳定性试验：吸取同一批三拗汤供试品溶液，
分别于0、2、4、6、8h进样5pL，测定苦杏仁苷峰面
积，计算得其在合煎液的RSD为2．08％，分煎液的
RSD为2．77％。表明供试品溶液在8h内稳定。
2．6重现性试验：分别取同一样品干粉各5份，制备
各供试品溶液，进样测定，计算得苦杏仁苷的平均质
量分数为：合煎液12．845mg／mL，RSD为0．648％，
分煎液13．749mg／mL，RSD为1．016％。
2．7 回收率试验：精密称取合煎液样品干粉9份，
各约0．100g(其中含有苦杏仁苷约6．4rag)，分别
加入4．659、5．474、6．717mg苦杏仁苷对照品，置
25mL量瓶中，制备供试品溶液，进样测定，结果平
均回收率为100．o％，RSD为1．4％(咒一9)。
2．8样品测定：取3批三拗汤样品制备供试品溶
液，依法进样，测定，按外标法计算，结果见表1。用
不同方法制备的相同药材三拗汤的汤剂中，苦杏仁
苷的量合煎液小于分煎液。
表1三拗汤中苦杏仁苷的测定结果(以一3)
Table1 Determinationof mygdaioside
inSan7aoDecoction(弹一3)
3讨论
采用HPLC法测定中药复方制剂中的苦杏仁
苛，文献报道可用多种不同组成的流动相系统[2’3]，
本实验选择HypersilC8色谱柱(250mm×4．6
mm，5牡m)，以甲醇一乙腈一水(16：4：80)为流动
相，苦杏仁苷在11～12min出峰，并与杂质峰能达
c
L—
万方数据
·850· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第6期2007年6月
到基线分离。
苦杏仁苷的量合煎液小于分煎液可能是由于在
煎煮过程中苦杏仁苷发生了水解，合煎比分煎更能
促进苦杏仁苷的水解。
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金莲花中总黄酮提取工艺的研究
苏志伟1，田 鹤”，马英丽2，苏连杰2一
(1．哈尔滨同一堂药业有限公司，黑龙江哈尔滨150025；2．黑龙江中医药大学，黑龙江哈尔滨150040)
金莲花TrolliuschinensisBunge系毛茛科多年
生草本植物，别名旱地莲、金芙蓉、旱金莲、金疙瘩
等，分布于山西、河北、陕西、四川、云南、内蒙和东北
等省区。金莲花以花入药，有清热解毒、抗菌消炎作
用，民间用以治疗扁桃体炎，急性中耳炎、急性结膜
炎、急性淋巴管炎等。金莲花对绿脓杆菌、痢疾杆菌、
金黄色葡萄球菌等均有明显的抑制作用。黄酮类成
分是金莲花中的抗菌、抗病毒有效部位[1]。为深入研
究其药用价值，提高其提取工艺的科学性和合理性，
本实验以总黄酮为指标，采用正交试验法优选金莲
花最佳乙醇提取工艺，为生产及制剂提供依据。
1仪器与试药
日本岛津UV一260自动扫描可见一紫外分光光
度计，AB204一N电子天平，芦丁对照品(中国药品
生物制品检定所)，亚硝酸钠、氢氧化钠、硝酸铝、乙
醇均为分析纯。
金莲花药材采自河北围场，经笔者鉴定为金莲
花T．chinensisBunge。
2方法与结果
2．1 因素和水平的确定：精称金莲花25g，用乙醇
提取，根据单因素初筛试验结果，分别确定乙醇体积
分数(A)、提取次数(B)、提取时间(C)、乙醇倍量(D)
为因素，每个因素各取3个水平，因素水平见表1。
2．2提取工艺操作：精密称取金莲花25g，用乙醇
提取，合并乙醇提取液，回收乙醇至尽，置于蒸发皿
中水浴浓缩，称定质量，置100mL量瓶中，加乙醇
至刻度，即得。
2．3金莲花提取液中总黄酮的测定
辰1因秉水平
Table1 Factorsandlevels
因 素水平——
A／％ B／次 C／h D／倍
1 50 1 1 6
2 65 2 2 8
3 80 3 3 10
2．3．1对照品溶液的制备：精密称取干燥至恒重的
芦丁对照品20mg于50mL量瓶中，加甲醇少许，
温热使溶解，放冷，加甲醇至刻度。精密量取25mL
于50mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即得。
2．3．2供试品溶液的制备：精密称取金莲花提取液
4mL，置100mL量瓶中，加60％乙醇适量，温热使
溶解，放冷，加60％乙醇至刻度，摇匀，取25mL置
50mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得，备用。
2．3．3标准曲线的制备：精密吸取芦丁对照品溶液
0．0、1．0、2．0、3．0、4．0、5．0、6．0、7．0mL，分别置于
25mL量瓶中，加适量甲醇，摇匀，先加5％NaNO：
溶液1mL，摇匀，放置6rain；加10％A1(NO。)3
1mL，摇匀，放置6rain；再加4％NaOH10mL，用
甲醇稀释至刻度，放置15rain，用第一管作空白对
照，在500nm处测定吸光度∽)。以吸光度A为纵
坐标，质量浓度(C)为横坐标，绘制标准工作曲线，
其回归方程为：C一68．50A+0．693，r一0．9999。
2．3．4精密度试验：精密吸取同一芦丁对照品溶液
1mL，处理，重复测定6次，结果总黄酮的质量分数
的RSD为0．50％。
2．3．5稳定性试验：精密吸取金莲花提取液供试品
溶液1mL，每0．5h测定1次吸光度，共测定5次，
收稿日期：2006—12—15
基金项目：黑龙江省科委攻关项目(G00C202302)；哈尔滨市科技攻关计划项目(2004AA3cS170—1)
*黑龙江中医药大学2004级硕士生
**通讯作者苏连杰Tel：(0451)88170044E—mail：jimozheren@】63．corn
万方数据
HPLC法测定三拗汤不同煎液中苦杏仁苷
作者： 杨翀， 梁光义， 周静宜， 徐必学， 柴立
作者单位： 杨翀(贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室,贵州,贵阳,550002;贵阳医学院,贵州,贵
阳,550004)， 梁光义(贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室,贵州,贵阳,550002;贵阳
中医学院,贵州,贵阳,550002)， 周静宜,徐必学(贵州省中国科学院天然产物化学重点实验
室,贵州,贵阳,550002)， 柴立(贵州宏宇药业有限公司,贵州,贵阳,550002)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(6)
被引用次数： 3次

参考文献(3条)
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3.杨启悦.龙飞.欧水平 浅谈经方三拗汤饮片炮制与临床辨证应用[期刊论文]-中草药 2011(8)


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