全 文 ：十草蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第9期2007年9PJ·1359·
通过抑制I娼的降解，从而影响了NF-KB的激活，
阻碍了iNOSmRNA的转录，最终导致iNOS蛋白
表达减少。为了进一步证实上述QGS通过影响
NF一出的活化而发挥作用的假设，又观察了肺组织
中Cox一2的表达情况。Cox一2在急性肺损伤发病
过程中起到很重要的作用，它可以促进前列腺素
(PG8)的合成，PGs会促使白细胞趋化、血小板聚
集、肺微血管收缩，从而导致肺微血管内皮细胞和肺
泡上皮细胞损伤[9]。与iNOS相同，COX一2的表达
也需要NF一出激活来调节。Westernblotting结果
显示，模型组cOx一2蛋白表达明显高于对照组，预
先给予QGS可以显著降低COx一2的表达量。这种
趋势与iNOs的表达完全一致，这也从另一角度证实
了对QGs发挥作用的机制的假设。通过体外实验，
还证实了QGS对体外纯化20S蛋白酶体活性有很
强的抑制作用(结果未显示)。由于体内动物试验有
别于体外试验，会受到药物代谢、个体差异等因素的
影响，因此，为了进一步探讨QGs的抗炎机制是否
与蛋白酶体有关，还将在细胞水平进行深入研究。
综上所述，QGS作为一个结构有别于其他m【I酮
类化台物的分子，具有较好的抑制急性肺损伤的作
用，其具体机制可能是QGS通过抑制NF-JcB信号
转导通路，限制了iNOS，COX一2等炎性因子的表
达，从而最终减少了NO的产生，发挥出了一定程
度的抗氧化作用。
‘
Refere眦es：
[1]TadeuszL，RyszardC，TeresaC，cta／．Newxanthone
derivatives∞potentanti-l flammatorygen s[J]．Medicina
(Kaunas)．2005，41(1)f54-58．
[2]CottigliaF，c阳uL．Topicalanti-inflammatoryctivityof
flⅡvonoidsandamwxanthonefromSantolinainsalarlsD]．
ZNaturforsch，2005．60(I-2)I63—6 ．
E2]KahdiF，EdC，KarimT．Acuterespiratorydistreaa
syndrome[J]．AmFarophyslciaa，2003，67t315-322·
[4]GnoAH，LiJ。LinWH，打d．Xanthorlederivativesfrom
medicinalpl nts协盯f妇miletnsls[J]，ChinTrad矗Herb
Drugs(中草药)，2003。54(2)：107—109．
[5]YangY，QiuHB，ZhouSx。甜a／．Roleofnuclearf ct盯-
kappaBctivationinmicewithacutelunginjuryinducedby
lipopolysaccharide[J]．ChinJCritCarlMeal(中国急救医
学)，2003．23(2)，65—65．
[6]WulfD．Freeradicalsinthephysiologicalcontrolofeell
function口]．PbsiolRev，2002，82：47—95．
ET]TanzH，YuLH，WeiHL．“以．Protectiveactionof
ulinutainagainstlipopolysaccharides—inducedacutBlu g
iniuryinmiceandtherelationofit tOiNOSandc—Jun
expressions[J]．A,ct2zPharm8in(药学学报)-2006，41(7)1
03640．
r8]TohlllY， KoichiA， d a1． GarcinoueBreduces
prostaglandlnEzreleasendNF-xB-madiatedtranscriptionn
C5ratbgliomacells[J]．NeurLett，2006-394：206—210．
[9]WangJS．ChenzT．Changesofcyclooxygenaseisoenzyme
andeffectsofmeloxicamnaCut@lunginjuryinducedby
lipopolysaccharide口]．ChinJCritCareMed(中国急啦医
学)，2001，21(3)；125-127．
芦荟大黄素对大鼠巨噬细胞[Ca2+]-和释放TNF—o(的影响
陈立君，孙文武，胡芬，王新宇，刘慧君，杨文修
(南开大学生物物理系南开大学生物活性材料教育部重点实验室，天津300071)
摘要：目的研究芦荟大黄素对正常的和细菌脂多糖(LPS)刺激的大鼠腹腔巨噬细胞(PM中)释放肿瘤坏死因
子一a(TNF-a)和细胞内自由Ca抖浓度([ca抖]．)的影响。方法应用MTT法检测TNF—n量和细胞钙离子成像
系统检铡单细胞内[Ca2十]。的动态变化。结果芦荟大黄襄可剂量依赖性活化正常PMT释放TNF—a，伺时诱发正
常pM+[Ca2+]．呈波动式变化，[ca2+]．升高来源于胞外钙内流和胞内钙池释放钙。芦荟大黄素对LPS刺激PM甲升
高口ca抖]．和释放TNF-a的影响有较复杂的剂量依赖性特征，即芦荟大黄索低浓度时对[ca抖]．升高有明确的抑
制作用}其对TNF-a释放的抑制呈随浓度增高而减弱的趋势。大黄酸可增强芦荟太黄素对LPS升高[ca抖]I的抑
制作用。结论芦荟大黄索对PM9[Ca2+]l和释放TNF-a表现出双向调节作用t其对[Ca2+]．动力学的调制与其调
节PM9释放TNF·n问有明确的对应性。
关链词：芦荟大黄索I巨噬细胞；脂多糖，细胞内自由ca抖浓度([ca抖]．)I肿瘤坏死因子一d(TNF—a)
中圈分类号：R285，5 文献标识码；A 文章编号：0253—2670(2007)09—1359—06
鐾鍪是翟：凳鬻等!：＆。重点攻羹项目cMoDs发病机理及中西医结合治疗的深^研究》资助(983113411)
作者筒介5襞音寻显孑氟j盎；山东E-青ma岛il人：10岔参急瑞毒尝誊譬苎学和细胞信号转导研究。
万方数据
中革菊Chtne*eTraditionalandHerbalD11II≯第37密蕈9期2007年9月
Effectofaloe-emodinon[-Ca2+]IandTNF-aproductioninperitonealmacrophagesofrats
CHENLi-jun，SUNWen—wu，HUFen，WANGXin—yu，LIUHui—jun，YANGWen—xiu
(DepartmentofBiophysics，KeyLaboratoryofBioactiveMat rialsofEducationM nistry，
NankaiUn versity。Tianjin300071，Chi∞)
Abstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectsofaloe—emodinnfreecalciumconcentration
([ca2+]i)dynamicsandtu ornecrosisfactor(TNF—a)productioninn rmalndllpopolysaccharide
(LPS)一stimulatedperi onealmacrophages(PM币)ofrats．MethodsT a sayTNF—nandtodetect
cytosolic[ca2+]iinsinglecellbyMTTandimageanalysissy tem．ResultsAloe—emodinincreasedTNF—
nproductionbyactivatingofnormalPM9inadose—dependentmanner．Furthermore，aloe-emodincansed
lea2+]loscillationinn rmalPMcp，themedicinei duced[ca“]iincrease，includingca ciumnfluxfrom
extracellularmediumandcalciumreleasefromintracellularcalciumstore．Aloe-emodinshowedcomplex
effectsinadose—dependentman eronLPS—stimulatedPM9．At10wconcentration。aloe-emodincould
attenuatethe ransientncreasein[Ca”]．inducedbyLPS．Theinhibitionofaloe--emodinonTNF—a
productioninducedbyLPSdecreasedwitht econcentrationincreasing．Rheincouldenhancethinhibition
ofaloe—emodinn creasein[Ca”]。inducedbyLPS．ConclusionAloe—emodinhasbidirectional
characteristicsofregulationonTNF—aproductionand[Ca”]iinPM∞．Andtheregulationofaloe—emodin
On[Ca”]，obviouslycorrespondstOtheregulationonTNF一“prodictionnPM9．
Keywords：aloe—emodin；macrophagesI 1ipopolysaccharide(LPS)，fr ecalciumconcentration
([ca抖t)}tumornecrosisfactor(TNF—a)
大承气汤是传统中医药学中通里攻下法的代表
方剂，临床治疗多种炎症和早期多脏器功能不全综
台征(MODS)有明确和显著疗效。研究表明大承气
汤对腹腔巨噬细胞(PM9)活性有双向调节作用；
可轻度活化正常的PM牛释放少量肿瘤坏死因子一a
(TNF—a)，又对脂多糖(LPS)刺激的PM甲失控释
放TNF—a有显著的抑制作用口】。大承气汤的主药大
黄在临床上有抗炎、抑菌、保肝等多种疗效。大黄对
PMcp活性亦有双向调节作用，即大黄可诱发正常
PMT升高细胞内自由ca”浓度([ca”]i)和轻度
释放TNF—o，同时又可显著抑制LPS刺激的PM牛
[Ca”1升高和TNF—a失控释放o’3]。大黄中游离型
单蒽醌类的大黄素、大黄酸、芦荟大黄素、大黄素甲
醚有多种生物活性[4]。研究表明大黄酸对LPS刺激
的PM9[Ca”]。升高和失控释放TNF—o有很强的
抑制作用“】，大黄素和大黄素甲醚轻度活化PM节，
并可不同程度地抑制LPS刺激的PM中[Ca”]；升高
和TNF—n失控释放口“]。为进一步全面了解大黄单
葱醌类提取物各组分调节PM9活性特征的异同，
本实验研究了芦荟大黄素对正常和LPS刺激的
PMq0的单细胞[ca”]j的动态变化和释放TNF—a
的作用特征。
1材料与方法
1．1实验动物：健康Wistar大鼠，体重200g左
右，购自军事医学科学院卫生学环境医学研究所。
1．2药物与试剂：RPMI一1640培养基、胎牛血清
(FBS)、LPS(取自Escherichiacoil0111；B4)、噻唑
蓝(MTT)、Fura一2／AM、HEPES(N一2。hydroxyet
hylpipe—razine—N’一2一ethanesulfonicacid)、rhTNF—
a、放线菌素D购白Sigma公司；芦荟大黄素、大黄
素、大黄酸(纯度均为98％)购自天津药物研究院I
其他试剂为国产分析纯。无钙培养液：无钙的培养基
中加入5mmol／LEGTA，充分络合培养基中的自
由Ca“。
1．3太鼠PM9的制备：向健康Wistar大鼠ip20
mLHank
7
S液，开腹吸出灌洗液。1500r／min离心
10min，弃上清，用RPMI一1640(10％FBS)培养基
混悬后，穆人样品池贴壁培养4h(5％CO。，37℃)。
弃培养基，以去除未贴壁细胞，再加人新鲜RPMI一
1640(10％FBs)培养基，温育12h待用。
1．4药物处理和TNF—a量的检测：在PM甲培养
液(正常培养液；培养基中自由钙离子浓度
([Ca”]。)为1．25mmol／L}无钙培养液：[Ca“]。
为0mmol／L]中分别加人不同浓度LPS和芦荟大
黄素，总反应体积1mL／孔。8h后取上清，并取未
加药的PMq0上清液为对照。用对TNF敏感的小鼠
成纤维细胞系L929为靶细胞，将上清液加入指数
增生期的L929细胞培养液，用MTT法测A。。根
据标准曲线计算TNF—a量，对照样品的TNF一口量
作为基础值口]。
1。5单细胞[Ca“]i的检测：以Fura一2做Ca”荧
光指示剂。在PM?培养皿中加人含Fura—Z／AM2
万方数据
中革番ch如鳓TraditionalandHerbalm．u祭第37尝第9期200／年9月
pmol／L的m—HBSS藏，在黑暗，室温条件下负载
50min}吸去上清，用m—HBSS(10％FBS)液洗涤
3次，于每个样品槽中加入1mLm—HBSS液(10％
FBS)。用单细胞钙离子成像分析系统检测PMrp
[ca”]i变化。由CCD(型号：480TVLColour
DigitalCCD)实时拍摄细胞内荧光强度动态变化，
并用Matefluor分析软件(美国通用公司)进行实
时采集和分析。用不同浓度的实验药液对细胞进行
灌流(流速：1mL／min)，测定单细胞在激发光分别
为340Bm和380nm条件下的胞内发射光的强度
F340和F380(两者的发射波长均为510rim)的动
态变化，用其比值(F340／F380)表征[ca”]I。
1．6数据处理：TNF-a释放量检测的实验结果均
为相同条件下3次实验，每次5个培养孔数据的
至士s表示，组间差异显著性用双侧t检测判别。检
测单细胞[Ca”]．的实验中，每个实验条件均做3次
取自不同动物的细胞检测，每次检测10个左右细
胞。为显示单细胞内[Ca”]．的实时动态变化，在10
个以上有相似结果的细胞中选取一例作为代表性结
果示于图中，[Ca”]．的基础值标准化为1．0，其变
化用基础值的倍数表示。
2结果
2．1 芦荟大黄素活化正常PM9释放TNF—a的
量一效关系：制备好的PM中样本中，在正常培养液
和无钙培养液条件下分别加入不同浓度芦荟大黄素
(1×lo～、1×lO一、1x10～tool／L)，另设不加芦荟
大黄素的对照组。检铡细胞温育8h后上清中的
TNF—a释放置。由图l可见，与正常细胞比较，正常
培养液条件下加入I×101nmol／L芦荟大黄紊，开
始呈现促进PMT释放TNF—a的作用；随芦荟大黄
素浓度升高，促TNF—a释放作用增强，1×10“
mol／L芦荟大黄素使TNF—a释放量为基础值的
19．6倍。在无钙培养液条件下加人不同浓度芦荟大
黄素产生的TFN—a的量一效关系与正常培养液的相
似，但量值明显降低，1x10“mol／L芦荟大黄素对
应的TNF-a量为基础值的16．3倍。
2．2芦荟大黄紊影响LPS刺激PM牛释放TNF—a
的量一效关系：制备好的PMT样本中，在正常培养
液条件下加入1pg／mLLPS和1×lO一、1×10一、
1×10-5tool／L芦荟大黄素，检测温育8h后上清
液中的TNF-a量。由图2可见，芦荟大黄素对LPS
刺激PM9释放TNF—a的抑制效应随浓度增加而
衰减，1x10-7mol／L芦荟大黄素抑制了TNF-a释
放量的54．6％。
}
冒
弓
：
星
正常培养涟 无钙培养液
0 1X104I×100l× —5 l×104l×1041×10-s
芦荟大黄蠢C／(tool·L4)
与0mot／L比较：。P<0．05
。p<0．05埘0real／L
圈l芦善大黄素对正常PM中释放TNF—a的影响
(j士j，n毫15)
Fig．1Effectsofaloe-emodiaOBTNF-aproduction
innormalPM口(，士f，^一15)
_|3000
d 2∞0
Z
1 000
0
门n
基础值 !兰-!：：!兰!!：!兰!!：
芦荟大黄襄C／(mot·L一1l
LPS(1u8·mL“)
与LPS‘1gg／mL)比较：。P<0·05
。P圈2芦善大黄素对LPS刺激PM9释放TNF-a的影响
(_士，，H=IS)
Fig．2Effectsofaloe-emodinOZtTNF-aproduction
inLPS-sfimulatedPM9(；土i．目=lS)
z．3芦荟大黄素影响正常PM∞单细胞[Ca2+]．的
动力学特征：在正常培养液([ca”]o=1．25mmol／
L)条件下，将已负载Fura一2的PM妒分别加入lx
10。(A)、1×10“(B)、1×lO-5(c)tool／L芦荟大
黄素；无钙培养液条件下，在已负载Fura一2的PM9
中加入1×10“tool／L芦荟大黄素(D)，以不加药
的PM牛为对照(E)，图3是检测的代表性结果。在
胞外有钙条件下，不同浓度芦荟大黄素均诱发正常
PM9[Ca”]．动力学呈波动式变化。加药后首先引
发较高幅值的双蜂，后期出现[Ca2+]。较宽时程的升
万方数据
中革蒋Chin髓eTraditionalandHerbalDrugs第37卷第9期2007年9月
高相；随芦荟大黄素浓度增高，[Ca”]。峰值升高，时
程加宽。1×10-5mol／L芦荟大黄素对应的第一个
峰值为基础值的2．0倍，且在加药后300s出现明
显的[Ca”]．持续性升高现象。如图3E所示，胞外
无钙条件下1×10“mol／L芦荟大黄素诱发PM中
[Ca“1呈单峰状升高，与图3B比较有显著差别，
I-Ca“]。增加明显减弱。可见芦荟大黄素诱发的
[Ca”]I升高既包含胞内Ca”释放又包含胞外Ca”
内流。
2．4芦荟大黄素影响LPS升高PM9[Ca“1的动
力学特征：正常培养液条件下，在已负载Fura一2的
22
1．8
i
屯I』
已
1 0
z2
—1t8
苎¨
1．0
PMf培养液中，加入1}tg／mLLPS(A)；分别加入
1pg／mLLPS和1×10一7、l×lO一‘、1×10—5mol／L
芦荟大黄素(B、C、D)。检测PM9单细胞ECa“]。随
时问的变化，结果见图4。可见，胞外有钙条件下芦
荟大黄对LPS刺激PM9的影响有较复杂的剂量
依赖性特征：与单独1×10r’、1X101mol／L芦荟
大黄素(图3A、B)或1pg／mLLPS(图4A)升高
[Ca”]。的作用比较，同时加入芦荟大黄素和LPS
明显抑制了Eca2+]，升高}而1×IO“mol／L芦荟大
黄素与1#g／mLLPS的共同作用则呈现复杂的
[Ca”]。升高动力学特征。
2卫
l 8
’l且
1．0
22
1．8
i
‘14
岂
Im
0 1002003 400500 0 100200300400500 0 100200300400500
，／a
A～C-1×10—7、1X10一，1×10—5mol／L芦荟大黄采([ca。+1=1．25retool／L)D-对照值E一1×10一‘mol／L芦荟大黄素([ca2+1；0)
A—c-1×10’，1×】o—e，and】×】0-5tool／Laloe—exnodin([c82+玉；】．25retool／L)D-control
E一1×10一{mol／La oe—emodin([ca抖]。毒o)
圈3芦荟大黄素诱发正常PM币单细胞[ca2+]-变化动力学(加药时间t=0s)
Fig．3DynamicsofnormalPM9[c矿+1changeinducedbyaloe—emadin(addingdrugtime：p0s)
22
，；J8
‰
旦l4
I．O
O l∞200瑚400500
t／0
A—LPSlHg／mLB-LPSI旭／mL+芦鏊太黄素IXl0叫mol／L
D-LPS1vg／mL+芦荟大黄素1X10_5mol／L
A—LPS1Fg／mLB-LPS1#g／mL+aloe—emodin1×10—7mollL
D-LP$lPg／mL+aloe-emodin1×10—5mol／L
22
1．8
1．4
10
0 100200300400500
C-LPS1 Pg／mL+芦荟大黄童1X10～6rnol／L
C—LPS1 ug／mL+aloe-emodJn1×10一‘mol／L
田4芦蔷丈黄素对LPS诱发的PM甲单细胞[c8抖]t动力学的影响(加药时间f=0s)
Fig．4Effectofalone—emodinondy amiesinLPS—inducedsinglePM9[c扭2+]l(addingdrugt me：t：Os)
2．5大黄素和大黄酸对芦荟大黄素抑制LPS升高强了芦荟太黄素抑制LPS刺激的[Ca2+]．升高。
PM9[Ca”]。的影响：在已负载Fura一2的PM审培3讨论
养液中，分别加人(A)l$zg／mLLPS+1×10“本研究结果证明：对正常PMcp，芦荟大黄素可
mol／L芦荟大黄索+1×10“mol／L大黄紊；(B)剂量依赖性地使其适度活化，增加TNF—a释放量；
1,ug／mLLPS+1×101mol／L芦荟大黄素+同时诱发单细胞[Ca2+]t升高呈波动式的变化亦随
1×10-5mol／L大黄酸。图5是检测的各一例代表性浓度增加而增强，表明芦荟大黄素参与大黄适度活
结果。与图4C中芦荟大黄素单独作用比较，图5A中化巨噬细胞的作用。与胞外有钙时比较，正常PM中
同时加人大黄素后减弱了芦荟大黄素抑制LPS升高 胞外无钙时相同浓度芦荟太黄素产生的TNF—n量
[Caz+]，的作用。相反，图5B中同时加入大黄酸后加明显减少l相应的[Ca2+]t升高亦显著降低。以上结
蝗
万方数据
中年焉ChineseTraditionalandHerbalDrugs第”卷第9期2007年9月
22
1 8
l 4
1 0
0 l呻200300400500600
t／s
A-LPS1Vg／mL+芦荟大黄素1×10_‘mol／L+大黄素
1×10—5moi／LB-LVS1耀／mL+芦荟大黄窜
1×10—6mol／L十大黄酸1×10—5mol／L
A-LPSt119／mL+aloe—err．odin1×10—6mol／L+emodin
1×10～5mol／LB-LPS1≈／mL+aloe—enmdin
1×10—6mol／L+rhein1XlO-Smol／L
围5大黄素和大黄馥对芦荟大黄幕抑制LPs升膏PM中
【ca。+]I的影响(加药时间t=Os)
F培5Effectofaloe·emodinplusemodlnwaloe—emodin
plusrhetuOnLPS-IndacedsinglePMf[Ca“1
(addingdrugtime：t=Os)
果表明，芦荟大黄素诱发正常PMv[Ca2+]i升高包
括胞内钙释放和胞外钙内流，并且芦荟大黄素诱发
正常PMv的[Ca”]．升高是调节TNF—a释放的重
要环节。当PM9受LPS(1pg／mL)刺激失控性释
放TNF—a时，低浓度芦荟大黄素(1×i01tool／L)
抑制PMcp释放TNF—a量的54．6％，但随浓度增
加，抑制作用减弱。相应的1×10”mol／L芦荟大黄
素显著降低了1／，g／mLPS升高PM9的[Ca”]i
峰值，其抑制作用亦随浓度增加而减弱。通过比较芦
荟大黄素对正常的和LPS刺激的PM中的作用特
征，可以看出；一方面，芦荟太黄素对LPS刺激
PMv失控释放TNF—n和升高[Ca“]i有抑制作用；
但另一方面，芦荟大黄素单独对PM甲作用时介导
的[Ca”]t升高和TNF—n释放随浓度增加而增强。
芦荟大黄索本身活化PM妒的这种效应将抵消其对
LPS的抑制作用，且这种抵消效应将随芦荟大黄素
浓度增加而增强，所以，两种效应迭加的结果会导致
芦荟大黄素抑制LPS的效应随浓度增加而降低。其
具体机制还有待进一步深入研究。综合本实验的研
究结果表明：芦荟大黄索在一定浓度范围对PM节
释放TNF—a有双向调节作用，并且与对[ca”]，变
化的调节之间有明确的对应性。
大黄对大鼠PMv释放TNF-a和升高[Ca”]i
表现为双向调节作用，其单蒽醌组分中大黄素和大
黄素甲醚亦呈现出对PM甲的双向调节作用，而大
黄酸只呈现对LPS的显著抑制作用。与大黄素和大
黄素甲醚的双向调节作用比较04朋，本实验结果表
明，芦荟大黄具有更强的活化正常PMf的作用，而
对LPS刺激PMv的抑制效应则较弱。本实验还研
究了芦荟大黄素分别与大黄索和大黄酸的组合药物
对LPS刺激PM牛升高[Ca”]．的影响：与单独芦荟
大黄索的作用比较，加人大黄素减弱了芦荟大黄素
的抑制作用，而加人大黄酸则增强了其抑制作用，提
示单蒽醌类不同单体的组合产生不同的效应。大黄
及其一些单蒽醌组分既可活化免疫细胞，增强其免
疫反应能力，又能抑制LPS刺激免疫细胞失控释放
炎性介质引发的多种病理反应，这是该类药物的重
要特点和优势。在医学临床应用研究中。可根据对实
际病情的判断，考虑不同单蒽醌组分的各自特点单
独用药或组合用药。
， 本实验得到的芦荟大黄素抑制LPS刺激的
PMv升高[Ca”t和释放TNF一“间的密切相关性。
表明对[Ca”]．升高的抑制是抑制TNF—a释放的关
键环节。关于LPS诱发胞内Ca2+释放相关的上游
和下游信号传导通路，研究报道指出：LPS作用于
TLR。受体后活化酪氨酸激酶(PTK)，进而激活磷
脂酶C(PLC7)，水解PIP：升高胞浆In和DAG水
平．触发内质网释放Ca“并激活PKC同工酶，从而
介导MEKK同工酶的活化并调控IgB激酶
(IKKs)的磷酸化，导致NF—tcB活化并参与TNF一口
等多种细胞因子的表达“““。提示，芦荟大黄素可
能通过抑制信号通路上游的PTK活性而降低胞内
Ca2+释放。为了适应不同的病症和治疗的需要，开
发新型的中药提取物单体及其组合药物，有必要对
大黄多种有效成分及其不同组合药物的作用途径和
机制进行系统深入的研究。
References：
[1]YangWx，LiuM，WangH．时aLInhibitoryr leof
DaehengqiDeeoctionOne dotoxinst mulatedsecretionof
TNF-ainrrmcrophage口]．ChinJSurg1月2egratedTrad矗
WestMed【中国中西医结合外科杂志)，2001，7(6)t390-
392．
[2]WangH，DongzY，YuY，甜“．Effectsofemodin∞
increslscin[ca”]iandTNF-aproductioninratperitioneai
maerophges[J]．ActaBiol,hysSin(生物物理学撮)，2002，
18<3)：345—349．
[3]YangWx，LiuM，WangH，da1．Theinhibitionof
rhubarb眦[Ca抖]i托dTNF-areleaseinIipopolysaeeharide-
stimulatedmaeropbagea[J]．ChinJIntegrTrad tChinWest
Med(中国中西医结合杂志)．2002t22(Suppl)：216—219．
【4]BaoEQResearchonprogressofChinesemedicinerhubarb
[J]，Anhu／MedpierreJ(安鼍医药)·2003，7(4)t818-
319，
[sJYa昭Wx，LixD。LiuBH，耐耐．Theinhibitionofrhain
万方数据
中革焉ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第9期2007年9月
∞increasein[c一+1andTNF·areleasein[ipopotyu-
echaride—stimulatedmscrophages[J]．AcmNan知ziun扣’
NatSei<南开大学学报j自然科学版)．2003·6(3)t1-5．
[53LiuHJ．HuF，SunWW．酣“．Effectsofphyscionon
CCa=+3．andTNF-=productioninrBtperitonealmacrophages
口]．ChinTraditHerbDrugs(中草药)，2006，37(SuppDl
283—287．
口]KiemerAK．HartungT，VollmarM．CGMP-mediated
inhibitionofTNF_dproductionbytheatridnstriureticp p-
tideinmurinemacrophagesE13．JhmH，I甜．2000·165=
175—181．
[53MoaiehMMtHurminghakeGW．Activationofsecond
messengerpathwayinalveolarm crophsgesbyeodotoxin
口]．跏Res州rJ．2002，20l210-222．
[9]HaydenMS。Gh∞hs，SignaliagtoNF-v．B[J]。cl∞目锄，
2004，18i2195—2224．
E10]ShenJ，SakaidaI，UehideK．LeptinenhancesTNF-Mpha
productionviap38andJNKMAPKinLPS-stimulated
Kupfferc ils[J]．LifeSei，2005，77(13)I1502—1515．
[113FeskeStGihnaneJ．DolmetschR，矗耐．Gener gulation
mediatedbycalciumsignalsinTlymphccytes[J]，Ⅳ讲
Immun甜．2001．2(4)I316—324．
E123ZhouxY．YangWx．LiJY．caz+andproteink aseC-
dependentsignalingpgthwayfornuclearl ctor-Bactivation，
ioduelblanitri-oxidesynthaseexpression，andttmaornecrosis
factor—productioninlipopolysacchaxide—stimulatedgatperito-
healmacrophages[J]．JB／e／Chem，2006，281(42)I31337-
3134^
赤芍总苷对HepA肝癌小鼠肿瘤细胞凋亡的影响
许志玉1，陈志伟2，王继峰1，沈丽霞1，梁欣韫1，牛建昭”
(1．北京中医药大学细胞生化实验室，北京100029}2．齐齐哈尔医学院组胚教研室，黑龙江齐齐哈尔161042)
摘要：目的撵讨赤芍总苷对HepA肝癌小鼠肿瘤生长及肿瘤细胞凋亡的影响厦其机制。方法60只健康昆明
小鼠t随机分5组，分别为模型组，环磷酰胺(100mg，kg)组，赤芍总苷(240、120mg／kg)组·环磷酰胺(100rag／
kg)+赤芍总苷(240mg／kg)组。复制小鼠HepA肝癌皮下移植模型后，第2天ig给药，连续给药7d，第8夭处
死，取肿瘤组织．计算抑瘤率，流式细胞仪检测肿瘤细胞搠亡串和分析细胞周期，以及免疫组化法检测凋亡相关蛋
白Eel一2和Bax的表达。结累赤芍总苷高、低剂量明显抑制HepA肝癌小鼠肿瘤的生长}肿瘤细胞捐亡指数增
加}抑制肿瘤细胞Go／G。期比例。向S期细胞转化t凋亡率增高，下调肿瘤细胞中Eel-2蛋白的表达，同时明显提高
肿瘤细胞中Bax蛋白的表达。结论赤芍总昔对HepA肝癌小鼠肿瘤生长有明显抑制作用，并诱导肿瘤细胞捅亡，
其主要机制与调节Eel一2和Bax蛋白表达有关。
关奠词：赤芍总苷}肝癌HepA，凋亡
中圈分类号：R285．5 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2007)09—1364—04
Efleetofotalg ucosidesfromRadixPaeoniaeRubraOilapoptosis
ofhepatomacellinmice
XUHui—yul．CHENZhi—wei2，WANGJi—fen91，SHENLi—xial，LIANGXin—yunl，NIUJian—zha01
(1．LaboratoryofCellandBiochemistry，BeijingUdiversityofTraditionalChineseMedicine，Beijing100029，China·
2．DepartmentofHis oembryo，QiqihaerCollegeofM dicine·Qiqihaer161042，China)
Abstract：ObjeetiveToinvestigatetheinhibitoryeffectof hetotalg ucosidesfromRadixPaeoniae
RubraonthegrowthandapoptosisfhepatomacellsHepAanditsmechanism．MethodsKMMice(60)
inoculatedwithepatomacellswererandomlydividedintofivegroups：themodelgroup，the
cyclophoshamide(CY，100mg／kg)group，thegroupswithhigh—andlow—doses(240and120mg／kg)of
thetotalg ucosidesfromRadixPaeoniaeRubrathegroupwithcombinationofCY(100mg／kg)andhigh-
dose(240mg／kg)ofthetotalg ueosidesfromRadixPaeoniaeRubra，igadministrationw sg yentothe
miceindayZ，respectively．Theadministrationlasted7d，thenthemiceweresacrificedatday8andthe
tumortissuewasweighed．Theinhibitoryrateswerecalculatedbyweighingthetumorseparately}The
flowcytometer(FCM)wasusedtodeterminetheapoptosisratesofhepatomacells；Theexpressionlevels
ofBcl一2andBaxofthehepatomacellswereassayedbyimmunohistochemistry．ResultsThehepatoraa
收稿日期：200609—29
基盒项目r国家自然科学基金资助(305404200032}30510403202)}长江学者和创新团队发展计蜘资助(mT0413)，博士点基金赍助项
目(20050026012)·齐齐哈尔市科学技术计划重点项目
作者筒介。许惠玉(1973一)，女(朝鲜族)，讲师．2005级博士生，研究方向为中药抗肿瘤．
Tel：(010)64287538Email：czwzI_’@tom．corn
-通讯作者牛建昭TelI(010)64286716E—maillaiuiJ站@263．net
万方数据
芦荟大黄素对大鼠巨噬细胞[Ca2+]i和释放TNF-α的影响
作者： 陈立君， 孙文武， 胡芬， 王新宇， 刘慧君， 杨文修， CHEN Li-jun， SUN Wen-wu，
HU Fen， WANG Xin-yu， LIU Hui-jun， YANG Wen-xiu
作者单位： 南开大学生物物理系,南开大学生物活性材料教育部重点实验室,天津,300071
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(9)
被引用次数： 2次

参考文献(12条)
1.Yang W X;Liu M;Wang H Inhibitory role of Dachengqi Decoction on endotoxin stimulated secretion of
TNF-α in macrophage[期刊论文]-中国中西医结合外科杂志 2001(06)
2.Wang H;Dong Z Y;Yu Y Effects of emodin on increase in[Ca2+]i and TNF-α production in rat
peritioneal macrophagea[期刊论文]-生物物理学报 2002(03)
3.Yang W X;Liu M;Wang H The inhibition of rhubarb on[Ca2+]i and TNF-α release in
lipopolysaccharidestimulated macrophages 2002(zk)
4.Bao E Q Research on progress of Chinese medicine rhubarb[期刊论文]-安徽医药 2003(04)
5.Yang W X;Li X D;Liu B H The inhibition of rhein on increase in[Ca2+]i and TNF-u release in
lipopolysaccharide-stimulated macrophages 2003(03)
6.Liu H J;Hu F;Sun W W Effects of physcion on[Ca2+]i and TNF-α production in rat peritoneal
macrophages 2006(zk)
7.Kiemer A K;Hartung T;Vollmar M CGMP-mediated inhibition of TNF-α production by the atrial
natriuretic peptide in murine macrophages[外文期刊] 2000
8.Monich M M;Hunninghake G W Activation of second messenger pathway in alveolar macrophages by
endotoxin[外文期刊] 2002
9.Hayden M S;Ghosh S Signaling to NF-κB[外文期刊] 2004
10.Shen J;Sakaida I;Uchida K Leptin enhances TNF-alpha production via p38 and JNK MAPK in LPS-
stimulated Kupffer cells[外文期刊] 2005(13)
11.Feske S;Giltnane J;Dolmetsch R Gene regulation mediated by calcium signals in T lymphocytes[外文
期刊] 2001(04)
12.Zhou X Y;Yang W X;Li J Y Ca2+ and protein kinase Cdependent signaling pathway for nuclear factor-
B activation,inducible nitri-oxide synthase expression,and tumor necrosis factor-production in
lipopolysaccharide-stimulated rat peritoneal macrophages[外文期刊] 2006(42)

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1. 刘慧君 蒽醌类衍生物对巨噬细胞调节作用的特征和机制[学位论文]2005
2. 林新华.黄丽英.陈伟.罗红斌.邱彬.李春艳 芦荟大黄素1.5阶微分阳极溶出伏安法测定及电化学性质研究[期刊
论文]-电化学2001,7(4)
3. 黎拒难.高朋.李湘玲.严志红.毛勋 芦荟大黄素在碳糊电极上的吸附催化伏安法研究[期刊论文]-中国科学B辑
2005,35(1)
4. 张培华.梁杰.罗少军.汤少明.肖佐环.左强.李瑾.ZHANG Pei-hua.Liang Jie.LUO Shao-jun.Tang Shao-ming.
Xiao Zuo-huan.ZUO Qiang.Li Jin 芦荟大黄素对瘢痕成纤维细胞增殖的时间-剂量依赖性效应[期刊论文]-中国临
床康复2005,9(22)
5. 胡芬.孙文武.宋志成.杨文修.HU Fen.SUN Wen-wu.SONG Zhi-cheng.YANG Wen-xiu 芦荟大黄素对Jurkat T细胞
增殖和凋亡的作用及机制[期刊论文]-中草药2008,39(2)
6. 肖丙秀.郭俊明.刘东海.张顺.刘琼.XIAO Bing-xiu.GUO Jun-ming.LIU Dong-hai.ZHANG Shun.LIU Qiong 芦荟
大黄素抑制胃癌细胞生长与细胞周期阻滞的关系[期刊论文]-中草药2008,39(5)
7. 胡敏.吴强.汤华阳.HU Min.WU Qiang.TANG Hua-yang 黄芪总苷对血吸虫虫卵抗原活化的大鼠腹腔巨噬细胞
TNFα mRNA表达及分泌的影响[期刊论文]-安徽中医学院学报2007,26(4)
8. 郭艳芬 芦荟大黄素对兔耳病理性瘢痕caspase3，9凋亡蛋白表达影响[学位论文]2008
9. 大黄素和芦荟大黄素抗脑缺血损伤作用比较[期刊论文]-河南中医学院学报2005,20(6)

引证文献(2条)
1.李臣宇.李新.刘丽军.邹洁.胡芬.李俊英 芦荟大黄素对T淋巴细胞增殖和细胞[Ca2+]i变化的影响[期刊论文]-中
草药 2008(8)
2.李月珍.刘志新.蔡克瑞.梁军 高浓度芦荟大黄素诱导胃癌细胞凋亡的作用[期刊论文]-中华肿瘤防治杂志
2010(12)


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