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RP-HPLC法测定菝葜中白藜芦醇和四羟基■



全 文 :中革荡cMn∞eTraditionalandHerbalDrugs第38卷第11期2007年11月·1731·
RP—HPLC法测定菝葜中白藜芦醇和四羟基芪
。干国平,江维,于伟,刘焱文‘
(湖北中医学院 中药资源与中药复方省部共建教育部重点实验室,湖北武汉430061)
菝葜为百合科植物菝葜SmilaxchinaL.的根
茎,具有祛风利湿、解毒散瘀之功效。中医临床常用
来治疗妇科炎症和肿瘤。菝葜中主要含有黄酮类、蘸
类、皂苷类、鞣质等成分,其中芪类成分主要为白藜
芦醇(I)、3,5,27 47一四羟基芪(I)及其苷,为抗肿
瘤的有效成分。为了保证菝葜药材的质量,本课题组
对我国13个省区作了现场实地调查,采集标本和实
验样品[1],并采用RP—HPLC法对所采集的27个菝
葜样品中有效成分I和I的量进行测定,为其质量
控制提供有效的检测方法,从而为评价不同产地菝
葜植物品质提供科学依据。
1仪器与试药
仪器:Agilentll00高效液相色谱仪(美国安捷
伦);ASl0200A超声处理器(天津奥特赛恩斯仪器
有限公司)。
对照品:I由中国药品生物制品检定所提供,I
由湖北中医学院中药资源与中药化学省级重点实验
室提供,质量分数99.1oA;水为重蒸馏水,其他试剂
均为分析纯。
材料:27个不同产地菝葜及其近缘种药材,均
由湖北中医学院中药资源与中药化学省级重点实验
室采集,湖北中医学院鉴定教研室鉴定。
2方法与结果
2.1 色谱条件与系统适用性试验:色谱柱Kro—
masilCl8柱(250mm×4.6mm,5pm),流动相:乙
腈一水(20:80),检测波长303nm,体积流量1.0
mL/min,温度:25℃,进样量10pL。理论板数按I
峰计算不低于2000。色谱图见图1。
2.2供试品溶液的制备:取菝葜药材细粉约0.5g,
精密称定,置于50mL量瓶中,加甲醇适量,超声处
理(250W,20kHz)30rain,放冷,加甲醇定容至刻
度,摇匀,滤过,精密吸取续滤液25mL,蒸干.残渣
加甲醇溶解并定容至5mL量瓶中,摇匀,即得。
2.3对照品溶液制备:分别取对照品I、I各适量,
精密称定,加甲醇制成I、1分别为12、10pg/mL
t/衄“
1⋯25 2’t4L四羟基蔑2一白藜芦醇
1-3·5·27·47一tetrahydroxystilbene2-resv ratrol
图1样品(A)和对照品(B)的HPLC围谱
Fig.1HPLCChromatogramofsample(A)
andreferencesubstanees(B)
的混合溶液,即得。
2.4线性关系考察:取对照品混合溶液(I34.2
pg/mL、l30.4Pg/mL)0.5、1.0、2.0、4.0、8.0mL,
加甲醇稀释至10mL,分别进样测定。以峰面积值
(A)为纵坐标,以对照品的质量浓度(c)为横坐标,
绘制标准曲线,计算,I的线性回归方程:A=
444.706C一0.021,r一0.9998,n一6;I的线性回
归方程:A一189.49C一0.175,r=0.9997,n一6。结
果表明,I在1.71~27.26pg/mL,I在1.52~
z4.32gg/mL,峰面积与各自的质量浓度具有良好
的线性关系。 ,
2.5精密度试验:取同一质量浓度的供试品溶液,
重复进样6次,每次10pL,测定峰面积值。结果I
峰面积RSD一0.81%;I峰面积RSD=0.93%。表
明仪器精密度良好。
2.6稳定性试验:取同一供试品溶液,于0、1、2、4、
6h进样测定,结果I的峰面积RSD一1.06%;I的
峰面积RsD=1.18%。表明供试品溶液在6h内基
本稳定。
2.7重现性试验:取同一批药材6份,照供试品溶液
制备方法处理,测定。结果:l与I总量的平均值为
1-18mg/g,RSD为1.27%,表明方法重现性良好。
收稿日期:2007—02—02
尊翥蕞器窑二弓穗芏65T—e’l男t(0’2副7)教88授92’0研83究4方向为中药质量控制研究·Tq“027M1287995E。毗“lg蛆2“。9@8i咂“。m
万方数据
·1732· 中草蒋ChineseTraditionalandllerlMtlDrugs第38卷第11期2007年11月
2.8 回收率试验:取已测定量的药材细粉,分别取
6份,每份约0.25g,精密称定,置于50mL量瓶中,
各精密加入混合对照品溶液20mL(含I12.2
pg/mL、I3.3ttg/mL)及甲醇适量,按供试品溶液
制备方法处理,测定。结果I的平均加样回收率为
99.4%,RSD一1.42%iI的平均加样回收率为
98.2%,RSD=2.11%。表明试验方法准确。
2.9样品测定:取27个不同产地菝葜及其近缘种
药材,按供试品溶液制备方法处理,测定,按外标法
以峰面积计算。样品来源及测定结果见表1.
囊I 27十样品的来豫爰测定结果(nz3)
Table1 Orl2mandeterminationof27samples“=3)
s一*- ,t。。‰。。‰。并,,
菝羹 S,,//axc^dna 重庄倍睦 o g‘ m26 1.20
四j}|宦宴 miO 0-拿s I.J6
期南平扛 O.蚰0-280.36
期南留山00B m18 0.26
期南靖州 1.4B 仉26 1 74
扛西月亮山0.06 仉20 0.26
江西橱隶壹0.16 m“050
广西宴阳l14 m砧 1.B0
广西最肆山 0。42 啦30 仉7Z
新扛显州 0.20 m“0.44
置州永嘉县0.18 0-托0.50
安鼍天柱山 O.10 0-70 mB0
安t埴天山0.船 仉拍0.48
安量青山0.柚 m36 0.62
广东茸美014 仉22 n36
期北摩羹0.48 1.雒 z16
甜北丈腧 n04 m20 n孔
期北通麓 0 0B m14 mzz
小叶蓣羹 5咖b幽 期北秭归 1.2‘ m20 1.44
小果菝羹 S.如柑血犯鄱§吉安0.14 m12 0.26
长托菝羹5...br缸 扛西吉安0.24 m10 0-“
柬丝藉羹 S-km山)哪 青州毕节0.oB m30 仉3B
尘叶菝羹 盅∞q帆卅 崩北宜蕃0.oB ¨s m靳
女葚羹烈阚枷面械广东蓉犀0-“ 伍“t.3s
短柱自菝羹曰斗_硼删 广东崔氍02B m10 n那
华自菝羹 日fk肼口H 广西武呜032 2.42 2,7‘
3讨论
3.1《中国药典)》2005年版一部菝葜项下收载了薯
蓣皂苷元的定量测定。文献报道,I具有抗氧化和抗
肿瘤作用o】,本课愿组最近的研究表明,I亦具有显
著的抗肿瘤作用。因此,对不同产地的菝葜中有效成
分I和I进行测定研究,为综合评价不同产地菝羹
资源品质提供了科学依据。
3.2本研究表明:同一品种不同产地的菝葜中I和
I的总量存在显著差异。菝葜在我国分布较广,多生
长在海拔1000m以下的林地。对测定结果与样品
的分布特征及生态环境o。1作相关性分析发现,菝葜
中有效成分I和I的量与采集地的海拔高度有~定
关系,产于海拔较高的菝葜I和I的总量较高,如采
集于海拔在500—1000m的湖北麻城、广西宾阳、
湖南靖州、重庆涪陵、四川宜宾、安徽天柱山样品中
量较高;不同品种菝葜中有效成分的总量亦有差别i
总量在0.26%~2.74%,其中.产于广西武鸣的华
肖菝葜、广东徐闻的肖菝葜及湖北秭归的小叶菝葜
中量较高。
3.3根据药农的经验,生长5年以上的菝葜才合药
用。菝葜中蘸类成分的量是否受生态环境和生长年
限的影响,尚在进一步研究之中。
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HPLC测定生地黄中地黄苷A和D
王慧森,刘 明,李更生’
(河南省中医药研究院中药研究所,河南郑州450004)
地黄为玄参科植物地黄Rehmanniagl础inosa
Libosch.的新鲜或干燥块根,前者习称“鲜地黄”,
后者习称“生地黄”。生地黄具有清热凉血,养阴,生
津的功效。用于热病舌绛烦渴,阴虚内热。骨蒸劳热,
内热消渴,吐血,衄血,发斑发疹CO。地黄中主要活性
成分为环烯醚萜苷类,此类成分结构近似,极性普遍
较大易溶于水,热稳定性较差‘“。研究发现地黄从鲜
品加工成生地黄及熟地黄,梓醇的量降低至原来的
收藕日期:2007—02—15
基盒项目:国家中医药局青年基金项目(95Y0411/95C018)’河南省自然科学基盒项目(0511043800)
作者简介;王叠森(1968一),盘._i可南南阳人,助研.顿士,主要从事天然药物化学成分的研究和中药新药的研发.
E—mail:wIl罩.犯@yahoo.corn.cn
·通讯作者李更生Tel:(0371)66336574E-mallIIgshn@sohu.∞m
万方数据
RP-HPLC法测定菝葜中白藜芦醇和四羟基芪
作者: 干国平, 江维, 于伟, 刘焱文
作者单位: 湖北中医学院,中药资源与中药复方省部共建教育部重点实验室,湖北,武汉,430061
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2007,38(11)

参考文献(3条)
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3.Xu S Z;Wang G Z;Gan G P The study on the correlation between the habitat and the quality of the
Smilax china 2005(12)

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