全 文 ：中单115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第1期2007年1月·41·
高效液相色谱一电喷雾质谱联用分析红参与五昧子配伍机制
张宪臣1’2，张 旭1，陈 光3，刘志强¨，刘淑莹1
(1．中国科学院长春应用化学研究所，吉林长春130022；2．中山市出入境检验检疫局，广东中山528400；
3．吉林农业大学生物技术学院，吉林长春130118)
摘 要：目的 研究红参与五味子配伍过程中人参皂苷类化合物的变化机制。方法 采用高效液相色谱一电喷雾质
谱联用技术对红参与五味子5种配伍比例水煎液中人参皂苷的变化进行了研究。结果 在五味子量较少的条件
下，红参与五味子水煎液中人参皂苷Rg。、Re、Rb。、Rc、Rb：、Rd发生水解。随着五味子量的增加，人参皂苷Ro的量
发生减少，而人参微量次级皂苷Fz的量显著增加。结论红参与五味子配伍后产生的特殊药效可能与两者配伍过
程中人参皂苷Fz的量显著增加有关。
关键词：红参；五味子；人参皂苷；高效液相色谱一电喷雾质谱
中圈分类号：R286．02 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2007)01—0041—03
．AnalysisofcompatibilitymechanismofRadixGinsengRubra
withFructusSchisandraeChinensisbyHPLC—ESI—MS
ZHANGXian—chenl”，ZHANGXul，CHENuan93，LIUZhi～qian91，LIUShu-yin91
(1．ChangchunInstituteofAppliedChemistry，ChineseAcad myofSciences，Changchun130022，China；
2．ZhongshanEntry-ExitInspectionandQuarantineBur au，Zhongshan528400，China；
3．CollegeofBiotechnology，JilinAgricultureU iv rsity，Changchun130118，China)
Abstract：ObjectiveTos udythereationmechanismofginsenosidesincompatibilityofRadix
GinsengRubrawithFructusSchisandraeChin nsis．MethodsFivedifferentcompounddecoctionsofRadix
GinsengRubrawithFructusSchisandraeChinensiswereanalyzedbyHPLC—ESI—MS．ResultsGinsenoside
R91，Re，Rbl，Rc，Rb2，andRdinwaterdecoctionofRadixGinsengRubrawithFructusSchisandrae
Chinensiswerehydrolyzedata littlecontentofFructusSchisandraeChinensisadded．Withtheincreasing
contentofFructusSchisandraeChin nsis，thecont ntofginsenosideRodecreasedbuthecontentof
ginsenosideF2 ncreasedsignificantly．ConclusionTheobviousncreasingofginsenosideF2couldbe
responsibleforthespecialeffectofcompatibilityofRadixGinsengRubrawithFructusSchisandrae
Chinensis．
Keywords：RadixGinsengRubra；FructusSchisandraeChin nsis；ginsenoside；highperformance
liquidchromatography—electrosprayionizationmass ectrometry(HPLC—ESI—MS)
红参是鲜人参PanaxginsengC．A．Meyer的
干燥根及根茎经蒸制加工而成，有滋补强壮之功效，
同人参相比其药效比较缓和。人参皂苷为红参中主
要的有效成分。五味子是木兰科五味子Schisandra
chinensis(Turcz．)Baill．的果实，具有补气、肺，养
心、肝之功效。传统的中医理论多把红参与五味子配
伍使用。二者合用对心神不安，惊悸失眠、健忘均有
作用[1]。目前文献多从药理方面对二者配伍机制进
行研究[2]。高效液相色谱一电喷雾质谱联用技术
(HPLC—ESI—MS)是近年来发展起来的天然产物有
效成分定性定量分析的强有力的工具。其既具备了
高效分离性能又具备强大的结构解析能力，能够快
速地同时对混合物成分进行定性和定量分析[3～73。
本实验以人参皂苷类化合物为研究对象，采用
HPLC—ESI—MS方法，在负离子条件下对红参与五
味子配伍导致红参中皂苷类化合物的变化进行了深
入研究[2~5]。
1仪器与试药
美国Waters600LC高效液相色谱系统，
ALLtech2000型ELSD检测器，Agilent1100Series
自动进样器：FinniganMAT公司LCQTM离子阱多
级串联质谱仪，配有ESI源及LCQl．2数据处理系
收稿日期：2006—06—16
基金项目：国家自然科学基金资助项目(20173057)；中国科学院知识创新工程重要方向项目(KGCX2一SW一213—06)；吉林省科学技术厅
科技发展计划项目(20011109)I长春市科学技术局科技计划项目(2004233)
*通讯作者刘志强E—mail：liuzq@ciac．j1．ca
万方数据
·42· 中革芮ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第1期2007年1月
统；MODEL一900型酸度仪(上海理达仪器厂)。
红参是五加科植物人参P．ginsengC．A．
Mey．根的炮制品，购自吉林抚松参场，人参皂苷
Rg，和Re总量不少于0．25％，粉碎过100目筛；五
味子为木兰科植物五味子S．chinensis(Tu卜CZ．)
Baill．的干燥成熟果实．，产自内蒙古，五味子乙素的
量不少于0．125oA，捣碎过40目筛；均经长春中医
药大学王淑敏教授鉴定。乙腈为色谱纯(美国Fisher
公司)，水为超纯水(18．2MQ·cm)，其他试剂均为
分析纯，人参皂苷Rg。、Re、Rb。、Re、Rb2、Rd、Ro、F。
对照品质量分数均在95％以上，由吉林大学药学院
提供。
2方法与结果
2．1 红参单煎液的制备：精密称取红参5g，加100
mL水浸泡30rain，回流提取两次，每次2h，上清液
在3000r／min的条件下离心10min，合并离心后
的上清液，浓缩至t00mL，加95％乙醇使浓缩液含
乙醇达到80％，静置过夜，滤过，滤液浓缩，定容至
15mL量瓶中，即得。
2．2红参与五味子共煎液的制备：精密称取红参5
g，分别加入不同配伍剂量(2、4、8、11、15g)的五味
子，加100mL水浸泡30min，同2．1项下方法操
作，即得。
2．3色谱条件：DiamonsilTMC，。不锈钢色谱柱(150
mm×4．6mm，5pm)；检测器条件设为Temp：
90℃Gasflow：2．1L；Gain：1；Impactor：Off，进样
量：10．0弘L；流动相：乙腈一0．2％醋酸水溶液线性梯
度洗脱：o～2min(25：75)，3～50min(50：50)；体
积流量：o．5mL／min；柱温：35℃。理论塔板数以人
参皂苷Rb，计，应不低于100 0。
2．4质谱条件：喷雾电压4．3kV，金属毛细管温度
260oC，金属毛细管电压为一20V，鞘气为N。，其压
力为680kPa，辅助气体为He，其压力为100kPa。
分析条件采用负离子模式，扫描范围为：m／z200--
1 500。
2．5红参单煎液的HPLC—ESI—MS分析结果：未加
入五味子的红参单煎液的色谱图见图1。通过液质
联机鉴定人参皂苷峰。以峰6为例，m／z955离子是
峰6所代表的人参皂苷的准分子离子EM—H3一，可
以初步推测它的相对分子质量为956，进行ESI—
MS2研究，见图2。可以观察到m／2793的碎片离子
峰，对应伽屈955离子丢失一分子六碳糖基。人参中
只有齐墩果酸型人参皂苷Ro与以上数据相符，用
对照品相对照可以确定峰6是人参皂苷Ro。用相同
的方法通过液质联机分析各峰相对应的人参皂苷，
结果见表1。结果显示，峰1表示两种人参皂苷，相
对分子质量分别为800、946，通过源内CID产生的
碎片离子分析，两种皂苷均产生了m／z475的碎片
离子，因此初步判断这两种人参皂苷为人参三醇型
皂苷。通过液相色谱化合物的保留时间和相对分子
质量可证实这两种皂苷为人参皂苷Rg。、Re。
2．6红参与五味子配伍的HPLC—ESI—MS分析结
果：红参单独煎煮和加入五味子共同煎煮，水溶液的
pH值有明显的变化，见表2。结果表明，随着五味子
t|rain
图l红参单煎液的LC—ELSD色谱图
Fig．1LC—ELSDChromatogramofRadixGinsengRubra
singledecoction
7934
睁。圳：剧
矧 q
775．4
3990．．6；．33。．。
400600
图2
Fig．2
8001 000 1 2001 4001600l 800
m／z
色谱峰6的ESI—MS2质谱图
ESI—MS2pectrumofpeak6
表1 人参皂苷的液质联机数据
Table1 DataofginsenosidesbyHPLC—ESI—MS
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第1期2007年1月·43·
量的增加，红参与五味子共煎液的pH值呈下降趋
势。与红参单独煎煮不同，加入五味子后溶液中的人
参皂苷种类减少，且有新的人参皂苷生成，见图3。
由液质联机数据可知，峰1是齐墩果酸型人参皂苷
Ro，峰2是一种新出现的皂苷。峰2化合物在
HPLC—MS一级谱中的准分子离子[M—H]为,n／z
783，MS2谱图(图4)中，产生两个碎片离子优屈
621、459。其中m／z621碎片离子是m／z783离子丢
失一个六碳糖基而产生的，m／z459碎片离子是
m／z783离子丢失两个六碳糖基而产生的，m／z459
碎片离子的生成表明峰2化合物是人参二醇型皂
苷。通过液相色谱化合物的保留时间和相对分子质
量可证实这种皂苷为人参皂苷F：。不同比例的红参
与五味子共煎液的HPLC参数见表3。
表2红参单煎．液及红参与五昧子共煎液的pH值
Table2 pHValueofRadixGinsengRubrasingledecoc—
tionandcompounddecoctionofRadixGinseng
RubrawithFructusSchisandraeChin nsis
样品pH值
红参单煎液
红参一五味子(5：2)
红参一五味子(5；4)
红参一五味子(5t 8)
红参一五味子(5：11)
红参一五味子(5：15)
5．61
4．40
4．11
3．79
3．61
3．50
f／mlN
图3红参与五昧子共煎液(5g：15g)的
HPLC—ELSD色谱图
Fig．3HPLC—ELSDChromatogramofcompound
decoctionofRadixGinsengRubrawith
FruetusSchisandraeChinensis
3讨论
五味子对红参与五味子共煎液的pH值有显著
影响，随着五味子质量的增加，共煎液的pH值呈下
降趋势，酸性逐步增强。在五味子质量较少的条件下
(红参与五味子的质量比为5：2)，人参皂苷Rg。、
Re、Rb。、Rc、Rb。、Rd全部消失，人参皂苷Ro的量
也有所减少，与此同时有少量次级人参皂苷F：出
现；随着五味子质量的进一步增加，人参皂苷Ro的
量进一步减少，而次级人参皂苷F2的量显著增加。
红参与五味子所产生的特殊药效可能与人参皂苷
F：的量显著增加有关。
6212
／oH
4593
昏一爹
7815
17835‘
400 600 800 1 0001 200I 4001 600l 800
m，+Z
图4色谱峰2的ESI—MS2质谱图
Fig．4ESI—MS2Spectrumofpeak2
表3不同比例的红参与五昧子共煎液LC—ELSD色谱参数
Table3 LC—ELSDParametersofcompounddecoctionof
RadixGinsengRubrawithFructusSchisandrae
Chinensisinvariousproportions
初步分析认为红参中的人参皂苷Rg，、Re、Rb。、
Re、Rb：、Rd的消失，可能与溶液酸性较强有关，加
入五味子后溶液的pH值呈酸性，人参皂苷在酸性
条件下易水解生成小分子的皂苷，人参皂苷F。可能
就是相对分子质量较大的二醇型皂苷的水解产物。
其他二醇型和三醇型相对分子质量较小的皂苷没有
在HPLC图谱中显现出来，可能是因为一般相对分
子质量较小的皂苷的水溶性不好，在水溶液中生成
沉淀，这些需要进一步的实验证明。
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万方数据
高效液相色谱-电喷雾质谱联用分析红参与五味子配伍机制
作者： 张宪臣， 张旭， 陈光， 刘志强， 刘淑莹， ZHANG Xian-chen， ZHANG Xu， CHEN Guang
， LIU Zhi-qiang， LIU Shu-ying
作者单位： 张宪臣,ZHANG Xian-chen(中国科学院长春应用化学研究所,吉林,长春,130022;中山市出入
境检验检疫局,广东,中山,528400)， 张旭,刘志强,刘淑莹,ZHANG Xu,LIU Zhi-qiang,LIU
Shu-ying(中国科学院长春应用化学研究所,吉林,长春,130022)， 陈光,CHEN Guang(吉林农
业大学生物技术学院,吉林,长春,130118)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(1)
被引用次数： 2次

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