全 文 ：中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第12期2007年12月·1853·
量新的活性氧基团，促发脂质过氧化的链式反应，损
伤肝脏中的各种细胞，是肝损伤的主要作用机制之
一。而且，脂质过氧化的最终产物MDA具有很强的
细胞毒性，能够干扰正常的细胞周期和活性蛋白的
表达‘6‘。
血中ALT水平是衡量肝损伤程度的临床指
标。实验表明火棘果实提取物能够显著降低拘束应
激所致小鼠血浆ALT水平的升高，说明其能有效
减缓拘束负荷引起的肝损伤作用。体内抗氧化能力
实验证明，火棘果实提取物能够提高拘束负荷小鼠
血浆抗氧化能力指数。同时显著降低血浆及肝脏中
MDA水平，减少机体脂质过氧化损伤。相反，对血
浆和肝组织匀浆中的VC水平则有明显的提高作
用。火棘果实提取物对VC水平的影响说明，其作为
外源性抗氧化剂对机体内的抗氧化物起到保护作
用，减少机体过氧化损伤程度。
火棘果实中富含黄酮类成分，其中含芦丁和金
丝桃苷的量较大。对火棘果实提取物以及芦丁和金
丝桃苷的体外抗氧化能力测定结果也说明，三者均
能明显延缓荧光物质被活性氧自由基淬灭的速度，
表现出与VC相类似的抗氧化效果。本实验结果证
明火棘通过自身清除自由基，抗氧化的作用，有效防
止应激状态下活性氧引起的过氧化损伤，从而改善
了应激性肝损伤的发生。
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羟基红花黄色素A对实验性心肌梗死大鼠的保护作用及机制
王天，傅风华，韩冰，朱梅，李桂生，刘 珂
(烟台大学药学院药理教研室，山东烟台 264005)
摘要：目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对大鼠缺血心肌的保护作用及其作用机制。方法通过结扎大鼠
左冠状动脉前降支造成急性心肌缺血模型，观察HSYA对大鼠心肌梗死面积(MIS)，血清中肌酸激酶同工酶
(CK—MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、6-酮一前列腺素F。。(6一Keto—PGFl。)、血栓烷
B：(TXBz)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的影响。结果与模型组比较，HSYA明显减小急性心肌梗死大鼠MIS，显著
提高血清NOS活性，明显增加N0及6-Keto—PGF，。的量，显著降低血清CK—MB、LDH、TXB：及AngⅡ水平。结论
HSYA对急性缺血心肌具有保护作用，其机制与HSYA调节NO、6-Keto—PGF。。、TXB。和AngI的水平，从而增加
心肌供血供氧，减轻心肌细胞损伤、凋亡有关。
关键词：羟基红花黄色素A(HSYA)；心肌梗死；血栓烷B：(TXB2)；血管紧张素Ⅱ(AngI)
中图分类号：R286．2 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2007)12一1853—04
ProtectionandmechanismsofhydroxysaffloryellowA nexperimental
myocardialinfarctioninrats
WANGTian，FUFeng—hua，HANBing，ZHUMei，LIGui～sheng，LIUKe
(DepartmentofPharmacology，SchoolofPharmacy，YantaiUniversity，Yantai264005，China)
Keywords：hydroxysaffloryellowA(HSYA)；myocardialinfarction；TXBz；AngⅡ
收稿日期：2007—04—20
基金项目：烟台大学青年基金资助项目(YX05210)
作者简介：王天(1974一)，男，内蒙古人，讲师，硕士，主要从事心血管药理学研究。
Tel：(0535)6706030—8022E—mail：bluewt@sohu．eom
万方数据
·1854· 中草蔼 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第12期2007年12月
红花CarthamustinctoriusL．为活血化瘀药，
可活血通经、化瘀止痛，临床主要以水煎液入药，常
用于冠心病、脑血栓等血液循环障碍性疾病的治疗。
红花黄色素为红花的水提取物，包括羟基红花黄色
素A(HSYA)和羟基红花黄色素B等成分，而
HSYA为红花黄色素的主要成分[1]。HSYA具有抑
制血栓形成、抗血小板聚集作用，且对谷氨酸盐和大
脑中动脉栓塞引起的脑细胞损伤具有保护作用[2’3]。
本实验通过结扎大鼠左冠状动脉前降支造成急性心
肌缺血模型，观察了HSYA对缺血心肌的保护作用
并对其作用机制进行了探讨。
1材料
1．1实验动物：Wistar大鼠，雄性，体重250～300
g，由山东绿叶天然药物研究开发有限公司实验动物
中心提供，合格证号：200106005。
1．2药品与试剂：HSYA(质量分数98％)，山东省
天然药物工程技术研究中心提供；注射用丹参，哈药
集团中药二厂，批号031203；肌酸激酶同工酶(CK—
MB)试剂盒，乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒，一氧化氮
合酶(NOS)试剂盒，N0_试剂盒，均购自南京建成
生物工程公司；6一酮一前列腺素F，。(6一Keto—PGF，。)、
血栓烷B：(TXB：)放射免疫分析试剂盒，北京东亚
放免技术研究所；血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)放射免疫
分析试剂盒，北京福瑞生物工程公司。
1．3 仪器：Bio—RADModell550Microplate
Reader酶标仪，Bio—TEK公司；TDL一40B台式
离心机，上海安亭科学仪器厂FMJ全自动放射免
疫7一记数仪，上海计量局实验工厂。
2方法
2．1分组、造模、给药：雄性Wistar大鼠60只，随
机分成6组，每组10只。分别为假手术组(NS1
mL／100g)、模型组(NS1mL／100g)、丹参组(36
mg／kg)、HSYA低、中、高剂量(5、10、20mg／kg)
组。乌拉坦(1000mg／kg)ip麻醉大鼠，仰位固定
于手术台上，胸部75％乙醇消毒，沿胸骨柄至剑突
切开皮肤，长约2～3cm。剪开皮下组织，向左分开
肌肉，于第4、5肋间隙打开胸腔，挤出心脏，在动脉
圆锥与左心耳之间冠状静脉处结扎左冠状动脉，将
心脏推回胸腔，挤压排出胸腔气体，缝合胸腔，假手
术组仅置缝线而不结扎左冠状动脉[4]。术后尾静脉
iv相应药物，给药24h后乌拉坦(1000mg／kg)ip
麻醉大鼠，腹主动脉插管取血，离心(3000r／min)
10rain，取血清，测定以下指标：按试剂盒操作说明
测定血清中CK—MB和LDH水平；按试剂盒操作
说明测定血清NoS活性及No水平。放免法测定
血清6-Keto—PGFt。、TXB：和AngⅡ水平。取血后立
即打开大鼠胸腔，剪取心脏后用生理盐水洗净心脏
内积血，去掉心房组织及脂肪，称质量，将心室肌横
切4片，浸入0．1％NBT磷酸缓冲液中，置37℃
恒温水浴中15rain，待染色完全后取出，正常心肌
组织染色，缺血心肌组织不染色。切下缺血心肌称质
量，计算心肌梗死面积(MIS)。
MIS=缺血心肌／心室×100％
2．2统计学分析：实验数据以xrks表示，组闯比较
采用t检验进行统计分析。
3结果
3．1 HSYA对MIS、．血清CK—MB和LDH水平
的影响：与模型组比较，HSYA各组均能显著减
小MIS(P<0．05、0．01)，明显抑制血清CK—
MB和LDH水平的升高(P<0，05、0．01)。结果
见表1。
表1 HSYA对急性心肌梗死大鼠MIS、血清CK—MB
和LDH水平的影响(；士$，珂一10)
Table1 EffectofHSYAonMIS，levelsofCK-MB
andLDHinserumofacutemyocardial
infarctionrats(；士s，n；10)
组男{f jlitf／(mg·kg一1)MIS／％CK—MB／(U，L-1)LDH／(U·L-1)
与假手术组比较：”4P
3．2 HSYA对心肌缺血大鼠血清NOS和No的
影响：与假手术组比较，模型组血清中NOS的活性
和NO水平无明显变化(P>0．05)；与模型组比
较，HSYA各剂量组NOS活性均显著增高(P<
0．05、o．01)，No水平显著增加(尸<0．05、0．01)。
结果见表2。
3．3 HSYA对心肌缺血大鼠血清6一Keto—PGFl。、
TXB：和AngⅡ的影响：与假手术组比较，模型组血
清中6-Keto—PGFl。水平明显降低(P<0．01)，
TXB2和AngⅡ水平显著升高(P<0．05、0．01)；与
模型组比较，HSYA各剂量组6一Keto—PGF。。水平明
显增加(尸
万方数据
中草蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第12期2007年12月·1855·
表2 HSYA对急性心肌梗死大鼠血清No水平
和NOS活性的影响(i士s，n一10)
Table2 EffectofHSYAonserumNOlevel
andNOSactivityinacutemyocardial
infarctionrats(；±s，撑一10)
组别剂量／(rag·kg一1)NOS／(U·mL一1)NO／(pmol·L一1)
与模型组比较：。P<0．05一P<0．01
‘P
TXB2和AngI水平的影响(；士s，聘一10)
Table3 EffectofHSYAOllevelsof6-Keto-PGFl。，
TXB2·andA gⅡinserumofacutemyocar—
dialinfarctionrats(xls，辟一10)
～。， 剂量／ 6-Keto—PGFl。／TXBz／AllgI／
组别(mg．kg一1)(Pg．IIlL一1)(Pg．mL一1)，(pg．‘m_L一1)· 一1) ·mL一1) ( · 一1)7(pg·一1)
与假手术组比较：4P
4P<0．054。P<0．01vsShamgroup
。P<0．05。’P<0．01vsmodelgroup
4讨论
心肌缺血缺氧使细胞膜对Ca2+的通透性增加，
胞浆Ca2+浓度增高。Ca2+增多可抑制线粒体ATP
生成而加重细胞损伤；Ca抖可激活磷脂酶而使细胞
膜磷脂分解，溶酶体膜磷脂分解后释放大量溶酶体
酶，进而导致细胞及其周围组织溶解坏死。心肌细胞
内富含代谢相关的酶，如CK—MB和LDH等，心肌
细胞损伤或坏死后，CK—MB和LDH等酶将渗透进
入血液。因此，血清中CK—MB和LDH的量与心肌
损伤和坏死的程度呈正相关[5]。本实验结果表明：
HYSA可明显减小急性心肌梗死大鼠的MIS而且
抑制血清中CK—MB和LDH水平的升高，说明
HYSA对缺血心肌具有保护作用。
血管内皮细胞能够以L一精氨酸为前体，在
NOS催化作用下生成血管内皮舒张因子No。N0
扩散至细胞内与细胞内的鸟苷酸环化酶结合，产生
多种心血管效应，如舒张血管平滑肌，清除自由基
等[6’7]。本实验结果显示HSYA可以提高心肌梗死
大鼠蛊清中的NoS活性从而增加No的量，NO通
过舒张冠状动脉增加心肌供血供氧、清除自由基而
减轻心肌细胞损伤。血管内皮细胞内的PGI。具有直
接扩张冠状动脉，解除冠状动脉痉挛作用；并抑制脂
氧化酶活性，减少白三烯生成[83；抑制白细胞的趋
化；抑制中性粒细胞溶酶体酶的释放[93；抑制超氧化
物产物的释放。因PGI：极不稳定，所以本实验通过
测定其稳定衍生物6一Keto—PGF。。来了解PGI。的量。
血小板内TXA。促进血小板聚集和血管收缩，加重
心肌缺血；TXA。能直接破坏血管内皮细胞和心肌细
胞，降低溶酶体的稳定性。TXA。不稳定，本实验测
定其稳定的代谢产物TXB：反映TXA。的量。机体在
正常状态下，PGI：和TXA。的生成维持平衡状态。但
在心肌缺血时，由于大量的白细胞趋化和聚集，产生
大量的氧自由基和脂质过氧化物而促进前列腺素代
谢，加速TXA。的生成。脂质过氧化物能够直接抑制
PGI。合成酶使PGI：生成减少。本实验结果表明
HSYA可明显增加PGI。的量，降低TXA。的量，从
而增加心肌供血、降低血小板聚集、减轻心肌细胞损
伤。心肌缺血缺氧后血浆肾素浓度升高使AngⅡ浓
度升高。AngⅡ收缩血管；促进氧自由基和活性氧的
产生[1叼；AngⅡ促进心肌细胞凋亡和心肌重构[1¨。
本实验结果显示HSYA能够降低心肌梗死大鼠血
清中AngⅡ的量，缓解血管收缩，一方面可以增加
心肌供血，另一方面可以降低外周阻力，从而减少心
肌作功，降低心肌耗氧量。另外AngⅡ生成减少，也
可以减轻心肌细胞损伤、心肌细胞凋亡及心肌重构。
本实验通过结扎大鼠冠状动脉造成急性心肌缺血模
型证明HSYA对缺血心肌具有保护作用，其机制与
HSYA调节NO、PGI。、TXA2及AngⅡ的量有关。
关于各指标间的相互关系及HSYA作用的分子机
制将进一步深入研究。
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姜黄素对肿瘤坏死因子一a所致人脐静脉内皮细胞凋亡的影响
张丽，梁中琴，顾振纶
(苏州大学医学院药理学教研室苏州大学衰老和神经疾病实验室苏州中药研究所，江苏苏州 215123)
摘要：目的观察姜黄素对肿瘤坏死因子一a(TNF—a)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用。方
法建立TNF—U致HUVEC损伤模型；MTT检测细胞的存活率；光镜观察细胞形态的改变；流式细胞术检测细胞
凋亡峰；Hoechst33258染色荧光显微镜检测凋亡的细胞核；RT—PCR检测caspase一3基因的表达。结果姜黄素处
理组与TNF—n组比较其HUVEC贴壁良好；荧光显微镜下可见凋亡小体减少；流式细胞术检测凋亡峰明显降低；
caspase一3基因表达下调。结论姜黄素对TNF—a所致的HUVEC凋亡具有保护作用，该作用可能是通过下调
caspase一3的基因表达而实现的。
关键词：人脐静脉内皮细胞(HUVEC)；凋亡；TNF—a
中图分类号：R285．5 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2007)12—1856—04
EffectofcurcuminonTNF-a-inducedapoptosisfhumanumbilicalveinendothelialcells
ZHANGLi，LIANGZhong—qin，GUZhen—lun
(DepartmentofPharmacologyandLaboratoryofAgingandNervousDiseases，SchoolofMedicine，SoochowUniversity；
SuzhouInstituteofChineseMateriaMedica，Suzhou215123，China)
Keywords：humanumbilicalveinendothelialce ls(HUVEC)；apoptosis；TNF—a
脑血管疾病是危害人类健康的主要疾病之一，
具有较高的病死率和致残率。内皮细胞损伤是脑血
管疾病发生的首要环节。脑卒中、神经退行性疾病帕
金森病(Parkinson7sdisease，PD)、阿尔茨海默病
(Alzheimer
7
s disease，AD)、亨廷顿舞蹈症
(Huntington’sdisease，HD)与内皮细胞氧化损伤
有重要的关系[1’2]。血管内皮细胞是一种代谢活跃的
细胞。高血糖、缺氧、细胞内中毒、氧化修饰型低密度
脂蛋白(ox—LDL)、肿瘤坏死因子一a(TNF—Q)都可
促进内皮细胞凋亡[3~6]。内皮细胞凋亡与增殖之间
的动态平衡维持着内皮细胞数量的稳定和血管功能
的正常。然而内皮细胞凋亡过度既是内皮细胞功能
失调的始动环节，又是动脉粥样硬化及冠心病、脑卒
中发生、发展的细胞学基础[7’8]。在中枢神经系统疾
病中，细胞因子TNF—a常常起着启动和加速作用，
其增多可直接或间接地作用于神经胶质细胞、巨噬
细胞、血管内皮细胞，从而产生更多的自由基、补体、
蛋白酶等而加重脑损伤。
目前炎症和氧化应激在脑卒中及神经退行性疾
病的发生发展中起着十分重要的作用。姜黄素依靠
其良好的抗氧化和抗炎等作用，在脑保护及治疗脑
血管病方面具有良好的应用前景[9]。本研究通过
TNF—a刺激内皮细胞凋亡，观察姜黄素对内皮细胞
凋亡的影响。
1材料
姜黄素(质量分数99％，Sigma公司产品)，用
DMSO溶解，配成1mg／mL的溶液，4℃冰箱保
存。临用时，以完全培养液稀释。BX一51型荧光显
收稿日期：2007—04—25
作者简介：张丽(197l一)，女，河南省鹿邑人，硕士，讲师，研究方向为神经药理。
Tel：(0512)65880119Fax：(0512)65880406E—mail：liangzhongqin@suda．edu．cn
万方数据
羟基红花黄色素A对实验性心肌梗死大鼠的保护作用及机制
作者： 王天， 傅风华， 韩冰， 朱梅， 李桂生， 刘珂， WANG Tian， FU Feng-hua， HAN Bing
， ZHU Mei， LI Gui-sheng， LIU Ke
作者单位： 烟台大学药学院,药理教研室,山东,烟台,264005
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(12)
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Components in Shuxiong Tablet and Its Possible Formulary Rationality[期刊论文]-中草药（英文版）
2010(4)
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