全 文 ：中革蒋 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第4期2007年4月·613·
的萌发，这与文献嘲报道石斛种胚萌发的结果相似。
2，4一D对种子萌发基本起抑制作用。其他生长物质
以及各种生长物质的不同配伍对花叶开唇兰种子萌
发的影响有待研究。
致谢：本实验得到了贵州师范大学生物技术与
工程学院的乙引教授和陈庆富教授在实验场地方面
给予的帮助。
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淫羊藿属9种淫羊藿叶中朝藿定C和淫羊藿苷量的考察
谢娟平，，王忠东2，孙文基p
(1．西北大学陕西省生物医药重点实验室，陕西西安710069；2．洛阳陆生天然植物研究所，河南洛阳471000)
淫羊藿属E；pimediumL．药用植物，在我国有
29种，产于川陕者14种[1|，具有多方面的药理活
性。《中国药典》作为淫羊藿药材的有5种，分别为淫
羊藿、朝鲜淫羊藿、箭叶淫羊藿、巫山淫羊藿和柔毛
淫羊藿凹]，笔者在进行淫羊藿成分系统分离研究的
基础上，对采集的川陕豫产9种习惯入药的淫羊藿
品种[3。，将其叶中的主要成分朝藿定C和淫羊藿苷
的量进行了考察，结果表明大部分品种朝藿定C量
大于淫羊藿苷。
1仪器、试剂及样品
1．1仪器：美国Beckman高效液相色谱仪，125型
泵，168型PDA检测器，32Karat色谱工作站：
HAMILTON微量进样品(HAMILTON公司)；微
孔滤膜圣一13mm，4．5弘m(天津市色谱科学技术
公司)；YCQ一300型超声波清洗器(上海凯波超声
设备有限公司)。
1．2-试剂：乙腈为色谱纯，水为双蒸水并经0．45
弘m水系滤膜滤过。
1．3 对照品：均为自行分离精制，并经UV、IR、
FAB—MS、1HNMR、13CNMR鉴定结构，HPLC检
测，面积归一化法计算质量分数，均大于98％。
1．4药材：各品种淫羊藿样品均由洛阳陆生天然植
物研究所王忠东提供并鉴定。见表1。
2方法与结果
2．1 色谱条件与系统适用性实验：色谱柱：
BECKMANCoULTER—C18柱(250mm×4．6
mm，10ttm)；流动相：乙腈一水，梯度洗脱(乙腈：0
rain、20％，5rain、30％，10rain、50％，35rain、
50％)，柱温：室温；灵敏度0．02AUFS；体积流量：1
mL／min；检测波长270nm；理论塔板数以朝藿定C
计为17616(1号峰)、以淫羊藿苷计为18496(2
号峰)。在本实验条件下，各对照品及样品的色谱图
见图1。
2．2供试晶溶液的制备：取各品种淫羊藿的干燥
叶，60℃下烘3h，取烘干品，粉碎，过40目筛，取
约0．3g，精密称定，置50mL具塞锥形瓶中，加入
70％乙醇30mL，称质量，超声提取1h，称质量并
补足减失质量，滤过，弃去初滤液，取续滤液用微孔
滤膜(4．5“m)滤过，作为供试品溶液。
2．3对照晶溶液的制备：精密称取朝藿定C6．02
mg，淫羊藿苷5．35mg，分别用甲醇溶解并定容于5
mL量瓶中，各取0．1、0．3、0．5、0．7、0．9、1．0mL于
10mL量瓶中，混合，加甲醇稀释至刻度，摇匀作为
混合对照品溶液。
2．4标准曲线及线性范围的考察：精密吸取上述各
混合对照品溶液进样20弘L，按色谱条件测定峰面
积，以峰面积为纵坐标(y)，以对照品进样量(ptg)
为横坐标(X)，绘制标准曲线，朝藿定C和淫羊藿
收稿日期：2006—06—17
作者简介：谢娟平(1972一)，女，陕西宝鸡人，工程师，现为西北大学生命科学院2004级硕士研究生，专业方向为中药有效成分分离分析
与制备。Tel：13319266304E—mail；xjp7312052@153。com
*通讯作者孙文基Tel：(029)88304569
万方数据
·614· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第4期2007年4月
0 5 101520253035
l
2 2
0 5 1 01520253035
l
，／mln
1一朝藿定c 2一淫羊藿苷A一对照品B一淫羊藿C一柔毛淫羊藿D一川西淫羊藿E一箭叶淫羊藿F一巫山淫羊藿
G一心叶淫羊藿 H一直距淫羊藿 1一粗毛淫羊藿 J一长蕊淫羊藿
1-epimediumC 2-icariinA—referencesubstancesB—E．brevicornuC—E．pubescensD—E．elongatumE—E．sagittatum
F—E．wushanenseG—E．parvifolliumH—E．mikinoriiI-E．ilicifoliumJ-E．dolichostemon
匿l对照品及样品的HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsfreferencesubstancesandsamples
苷的线性回归方程分别为：Y。=2×106X+27158， 表1不同品种淫羊藿的测定结果(一23)
线性范围为：0．241～2．408pg，r=0．9999；
Y2—2×106X+33204，线性范围为：0．214～2．140
pg，，．一0．9996。
2．5 精密度试验：精密吸取混合对照品溶液20
扯L，连续进样6次，测定峰面积，结果朝藿定C和淫
羊藿苷的RSD分别为0。96％、0。80％。
2．6重现性试验：取同一样品6份，制备供试品溶
液，各取20弘L进样，测定峰面积，计算得朝藿定C
和淫羊藿苷的RSD分别为1．15％、1．06％。
2．7对照品稳定性试验：精密吸取混合对照品溶液
20牲L分别于配制后的0、4、8、16、24、48h内进样，
测定峰面积，计算朝藿定C和淫羊藿苷RSD分别为
0．7％、0．5％。结果表明对照品溶液在48h内稳定。
2．8加样回收率：准确称取已定量的同一品种淫羊
藿样品5份，分别定量加入朝藿定C、淫羊藿苷对照
品溶液，待自然挥干后，按供试品溶液制备方法操
作，并按上述色谱条件测定峰面积，计算两种成分的
平均回收率分别为100．63％和100．82％，RSD分
别为0．92％和0．94％。
2．9 样品测定：取各品种淫羊藿的干燥叶，按供试品
溶液制备方法操作，每次进样20扯L，按照色谱条件
测定峰面积，以外标法计算质量分数，结果见表1。
3讨论
3．1 本实验采用梯度洗脱方法对淫羊藿川陕豫不
同品种中的朝藿定C和淫羊藿苷的量进行了测定，
色谱条件稳定，测定结果可靠。
3．2 流动相的选择：实验先后选择了甲醇一水、乙
腈一水(25：75)[4]、乙腈一水(梯度洗脱)体系，从分离
情况和出峰时间等综合分析选择乙腈一水梯度洗脱。
3．3 由表1可知，《中国药典》品种之一的巫山淫羊
藿中淫羊藿苷的量经多份样品测定远未达到《中国
药典》规定，而另一种成分朝藿定C的量却远远大
于淫羊藿苷，色谱图也有大的差别，因此，建议《中国
药典》应将巫山淫羊藿品种从淫羊藿中单列出来。
3．4川西淫羊藿、直距淫羊藿、粗毛淫羊藿、心叶淫
羊藿虽不是《中国药典》品种，但淫羊藿苷的量却高
于《中国药典》的规定。此外，除淫羊藿、柔毛淫羊藿
中的淫羊藿苷量大于朝藿定C外(图l—B、C)，川西
淫羊藿、巫山淫羊藿、箭叶淫羊藿、长蕊淫羊藿、直距
淫羊藿、心叶淫羊藿中朝藿定c的量均远远大于淫
羊藿苷(图1一D～J)，所以仅以淫羊藿一种成分作为
品种较多的淫羊藿药材定量测定的指标具有一定的
片面性。
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万方数据
淫羊藿属9种淫羊藿叶中朝藿定C和淫羊藿苷量的考察
作者： 谢娟平， 王忠东， 孙文基
作者单位： 谢娟平,孙文基(西北大学,陕西省生物医药重点实验室,陕西,西安,710069)， 王忠东(洛阳
陆生天然植物研究所,河南,洛阳,471000)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(4)
被引用次数： 3次
参考文献(4条)
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