全 文 ：·538· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第4期2007年4月
妥；增大改性剂用量能提高莪术醇，但改性剂用量的
增加会导致改性剂回收任务的加重。
静态萃取时间对萃取率有一定的影响，理论上
增加静态萃取时间，有利于CO：溶剂扩散到固体颗
粒内部，可以适当提高莪术醇的萃取率，但这种萃取
率的提高是有限的，因此选择为20min；萃取温度对
萃取结果是不显著的，随着温度的提高，莪术醇萃取
率有微小提高，考虑到能耗等原因，取35～40℃
为宜。
根据响应曲面模型求出最优组合，并综合响应
曲面分析图分析，得到综合的最优组合为X，一20，
X2—40，X3—90，X4—24，X5—0．70，X6—20。
3．3验证试验：取200g粉碎过筛的莪术粉，按优
化后的条件进行萃取试验，制备3批样品，测定莪术
醇的量，其平均值为0．6029mg／g，响应模型预测
的相对误差为0．8％。
4讨论
优化后的萃取工艺为：萃取温度40℃、萃取压
力20MPa、动态萃取120min、改性剂用量24mL、
改性剂体积分数70％、静态萃取时间20min。
通过响应曲面分析，得到高精度和高显著性的
响应模型，而且模型中因素之间的交互作用极为显
著。利用响应模型对实验结果进行预测，其绝对误差
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HPLC法测定半枝莲及其制剂热炎宁胶囊中野黄芩苷
高晓霞，原红霞，赵云丽，刘 涛，于治国+
(沈阳药科大学药学院，辽宁沈阳 110016)
热炎宁胶囊由蒲公英、虎杖、败酱和半枝莲4味
药材经提取加工制备而成，具有抗菌消炎、清热解毒
的功效，临床上用于咽喉肿痛、急性咽炎、风热感冒、
发热等症n]。目前对于热炎宁胶囊的质量控制方法
仅限于薄层扫描法对大黄素的测定口]。由于野黄芩
苷(scutellarin)为半枝莲抗菌消炎的主要活性成分
之一[2~4]，本研究实现了制剂中野黄芩苷的测定。另
外，由于作为原料的中药材受地域、气候、采收季节
等方面的因素影响较大，为使质量标准更加完善，因
此同时作为内控指标对半枝莲药材也进行了测定，
建立了一种简便、快捷、专属、可靠的方法，优化了
《中国药典>>2005年版一部中半枝莲中野黄芩苷的
测定方法。
1仪器与试药
高效液相色谱仪(岛津LC～10AT叩Shimazu
液相色谱仪，7725型手动进样器，岛津SPD一
10Avp紫外检测器和ANASTAR色谱工作站)；
DL一180型超声波发生器(浙江省象山县石浦海天
电子仪器厂)；BSllOS型万分之一天平。
野黄芩苷对照品(批号0756—200110)购自中国
药品生物制品检定所；半枝莲药材(江西01、02、03
批)、热炎宁胶囊(规格：0．5g／粒，批号为040907、
050302、050401)均购自沈阳成大方圆药品连锁店，
其中药材经沈阳药科大学生药教研室孙启时教授鉴
定；乙腈为色谱纯，甲醇、乙醇与冰醋酸为分析纯，水
为实验室自制重蒸水。
收稿日期：2006—11-22
作者简介：高晓霞(198l一)，女，山西省平遥县人，在读博士研究生，2002年7月毕业于山西医科大学，2006年7月获得沈阳药科大学理
学硕士学位，主要从事中药质量标准及药动学研究。Tel：(024)23986295E—mail：gaoxiaoxia6218@163．corn
*通汛作者于治国
万方数据
中革菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第4期2007年4月·539·
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱：DikmaC18柱(250mm×
4．6mm，5弘m)，流动相：乙腈一水一冰醋酸(19：76。
5)；体积流量：1．0mL／min；检测波长：335nm；柱
温：30。c。在上述条件下，野黄芩苷色谱峰与供试品
溶液中其他组分色谱峰达到了基线分离，在上述色
谱条件下。阴性试验结果表明，阴性对照无干扰(图
1)，证明此分离条件可行。其中野黄芩苷保留时间约
为10．0min；与前后相邻峰间分离度均大于1．5，理
论塔板数以野黄芩苷计不低于3000。
A B
——。————————_jL——一——。，————．，，j＼_———，几
矿——了一 l石一 l； 20i ； 】o 15 20
t／min
1一野黄芩苷
1-scutellarin
图1野黄芩苷对照品(A)、半枝莲药材(B)、缺半枝莲
的阴性(C)与热炎宁胶囊(D)的HPLC色谱图
Fig．1HPLCChromatogramasofscutellarin(A)，S．
baraata(B)，negativesamplewithoutS·
baraata(C)，andRey ningCapsula(D)
2．2溶液的制备
2．2．1 对照品溶液的制备：取野黄芩苷对照品
23．2mg，精密称定，置100mL量瓶中，加甲醇溶解
并稀释至刻度，摇匀。精密量取5．0mL，置于10mL
量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
2．2．2制剂供试品溶液的制备：取热炎宁胶囊内容
物，研匀，取约0．5g，精密称定，置50mL圆底烧瓶
中，精密加入70％甲醇溶液25mL，称定质量，水浴
回流30min，放冷，称定质量，用70％甲醇溶液补足
损失质量，摇匀，0．45弘m滤膜滤过，即得。
2．2．3药材供试品溶液的制备：取半枝莲药材适
量，研碎，精密称取药材细粉约0．5g置50mL圆底
烧瓶中，精密加入70％甲醇溶液25mL，称定质量，
水浴回流30rain，放冷，称重，用70％甲醇溶液补足
损失质量，摇匀。取10mL置50mL量瓶中，加
70％甲醇稀释至刻度摇匀，滤过，即得。
2．2．4阴性对照溶液的制备：取除半枝莲以外的3
味药材，照《中国药典：})2005年版一部热炎宁颗粒项
下制法制备阴性样品。取阴性样品适量，精密称定，
按制剂供试品溶液的制备方法操作，即得。
2．3 线性关系考察：精密称取野黄芩苷对照品23．2
mg，置100mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，
摇匀，作为对照品储备液。精密吸取对照品储备液
0．3、0．6、1．5、3．0、4．5、6．0mL，分别置10mL量瓶
中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别取10弘L进样，按
上述色谱条件测定。以野黄芩苷的质量浓度为横坐
标，峰面积为纵坐标，计算回归方程为Y一841773
x一16084，r=0．9998。结果表明野黄芩苷在
6．96～139．2}￡g／mL与峰面积呈良好的线性关系。
2．4精密度试验：取同一对照品溶液，连续进样6
次，测定野黄芩苷峰面积值，其RSD为0．8％。
2．5重现性试验：取同一批(批号050302)热炎宁
胶囊样品，制备6份制剂供试品溶液，进样，测定，结
果野黄芩苷的质量分数为1．88rag／粒，RSD为
1．4％；取同一批(批号02)半枝莲药材样品，平行制
备6份药材供试品溶液，进样，测定，结果野黄芩苷
的质量分数为8．36mg／g，RSD为I．4％。
2．6稳定性试验：取热炎宁胶囊供试品溶液，分别
于0、2、4、6、8、12、24h进样，测定，计算得野黄芩苷
质量分数为1．88rag／粒，RSD为1．4％；取半枝莲
药材供试品溶液分别于0、2、4、6、8、12、24h进样，
测定，计算得野黄芩苷质量分数为8．35mg／g，RSD
为2．O％。
2．7 回收率试验：称取批号为050302的热炎宁胶
囊内容称约0．25g，分别精密加入0．116mg／mL野
黄芩苷对照品溶液2．0、4．0、6．0mL，制备制剂供试
品溶液，测定，结果平均加样回收率为100．1％，
RSD为1．6％(一9)；称取批号为02的半枝莲药材
约0．25g，分别精密加入0．116mg／mL野黄芩苷对
照品溶液9．0、18．0、27．0mL，制备药材供试品溶
液，测定，结果平均加样回收率为99．9％，RSD为
1．8％(咒=9)。
2．8样品测定：分别取药材和制剂供试品溶液及相
应的对照品溶液各lopL，注入液相色谱仪，依照上
述色谱条件测定峰面积，按标准曲线法计算野黄芩
苷，结果见表1。
3讨论
3．1 样品提取条件的考察：《中国药典))2005年版
一部对于半枝莲药材的野黄芩苷测定采用索氏提
取，但操作烦琐、费时。为使野黄芩苷提取更加完全，
本研究对提取方法(超声和回流)和溶媒(甲醇、95％
万方数据
·540· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第4期2007年4月
表1热炎宁胶囊、半枝莲药材中野黄芩苷的
测定结果(n--5)
Table1 ScuteilarininReyanningCapsula
andS．baraata(n一5)
热炎宁胶囊 野黄芩苷／RSD／半枝莲野黄芩苷／RSD／
批号(mg·粒_1)％ 批号(mg·91)％
040907 1．88 0．2 01 8，33 0．2
050302 1．90 0．3 02 8．43 0．4
050401 1．91 0．4 03 8．35 0．8
乙醇、70％甲醇、70％乙醇、50％甲醇、50％乙醇、
30％甲醇、30％乙醇和水)进行了考察。由于野黄芩
苷在甲醇中的溶解性较好，结果制剂与药材中均以
70％甲醇回流30min提取最完全。
3．2检测波长的选择：选择了野黄芩苷对照品的最
大紫外吸收波长335nm，检测灵敏度高、专属性强。
3．3流动相系统的选择：分别用甲醇一水、甲醇一水一
冰醋酸、甲醇一水一冰醋酸一四氢呋喃、乙腈一水、乙腈一
水一冰醋酸以不同比例进行考察，结果表明乙腈一水一
冰醋酸这一流动相系统色谱峰峰形好，柱效高，可达
到理想的分离度。
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微乳薄层色谱法鉴别甘草的研究
崔淑芬1”，林焕冰3，FrankS．C．Lee4，王小如2“
(1．深圳职业技术学院应用生物技术系，广东深圳 518055；2．厦门大学化学化工学院现代分析科学教育部重点实验室，
福建厦门 361005；3．南方医科大学药理学教研室，广东广州510515；4．国家海洋局第一海洋研究所
青岛现代分析技术及中药标准化重点实验室，山东青岛266061)
甘草为重要的常用中药，素有“国老”之称，具止
咳化痰、解毒清热、缓急止痛及调和诸药等作用，俗
称“十方九草”，在临床上有大量的应用。《中国药
典92005年版收录的甘草药材有3种：乌拉尔甘草
GlycyrrhizauralensisFisch．、胀果甘草G．inflata
Bat．和光果甘草G．glabraL．不同种类的甘草成
分有一定的区别[1]，而采用现有的药典方法并不能
区分不同种类的甘草[2]。微乳薄层色谱是近几年发
展的薄层色谱新方法[3~5]，处于方法的初创阶段。笔
者所在的课题组对微乳薄层色谱进行了系统的理论
和应用研究，本实验研究微乳薄层色谱应用于3种
甘草药材的鉴别。
1仪器与材料
GAMAGLinomat5半自动点样仪，CAMAG
ReproStar3薄层色谱数码成像系统；聚酰胺薄膜
(浙江台州四青生化材料厂)；GrantXBl4超声波
清洗机；滤膜(美国MilliporCorporation，孔径
0．45um)。
表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)为分析纯
(Bio．Basic．Inc．)。正丁醇、甲酸、正庚烷和甲醇皆
为分析纯，国产试剂。水为超纯水。对照品甘草苷
(质量分数为96．4％)由厦门大学傅博强博士制备，
甘草查耳酮甲(质量分数为99．1％)由厦门大学王
巧娥博士制备。
甘草药材由中国亿利资源集团公司提供，由中国
医学科学院药用植物研究所林寿全教授鉴定品种。
2方法与结果
2．1供试品溶液的制备：将甘草生药适当粉碎后过
60目筛。精密称取甘草药材粉末0．4g，加入50％甲
醇溶液40mL，冷浸10h后超声提取30min，离心。
上清液挥干，加2mL甲醇定容，过0．45|um滤膜，
滤液作为供试品溶液和2．0mg／mL的甘草苷对照
品溶液和2．0mg／mL的甘草苷对照品溶液。
2．2 对照品溶液的配制：以甲醇为溶剂，配制2．0
mg／mL的甘草查耳酮甲对照品溶液。
2．3微乳展开剂的配制：笔者对甘草的微乳展开剂
收稿日期：2006—08—08
基金项目：国家自然科学基金重点项目(20235020)
作者简介：崔淑芬(1969一)，女，辽宁抚顺人，副教授，博士，主要从事中草药及海洋药物研究。
Tel：(0755)26731146E—mail：shufencui@163．corn
万方数据
HPLC法测定半枝莲及其制剂热炎宁胶囊中野黄芩苷
作者： 高晓霞， 原红霞， 赵云丽， 刘涛， 于治国
作者单位： 沈阳药科大学药学院,辽宁,沈阳,110016
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(4)
被引用次数： 2次

参考文献(4条)
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ZHAO Huai-qing HPLC法同时测定丹灯通脑胶囊中野黄芩苷和丹酚酸B的含量[期刊论文]-沈阳药科大学学报
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9. 张艺.王祥培 薄层扫描法测定甘露饮中黄芩苷的含量[期刊论文]-中国现代应用药学2002,19(1)
10. 饶伟源.兰保强.李茂.覃潇.RAO Wei-yuan.LAN Bao-qiang.LI Mao.QIN Xiao HPLC法测定芷鹅鼻炎颗粒中野黄
芩苷的含量[期刊论文]-中医药导报2009,15(3)

引证文献(2条)
1.饶伟源.兰保强.李茂.覃潇 HPLC法测定芷鹅鼻炎颗粒中野黄芩苷的含量[期刊论文]-中医药导报 2009(3)
2.胡静.鞠忠良.满亮 HPLC法测定茵山莲颗粒中野黄芩苷的含量[期刊论文]-中国药事 2009(9)


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