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Novel 11-deoxylglycyrrhetinic acid-30-acylam idederivatives

新型11-脱氧甘草次酸-30-酰胺衍生物的研究



全 文 :6168 (1H , d, J = 210 H z, H 26) , 4152 (1H , d, J = 1218
H z, H 27a) , 4134 (1H , d, J = 1218 H z, H 27b ) , 3168
( 3H , s, M eO 25) , 4175 (1H , d, J = 712 H z, H 21′) ,
4156 (2H , dd, J = 116, 1112 H z, H 26a′) , 4120 (2H ,
dd, J = 610, 1112 H z, H 26b′) , 5112 (1H , d, J = 214
H z, H 21″) ; 13C2NM R (100 M H z, acetone2d6) ∆: 15611
(C21 ) , 12311 (C22 ) , 12619 (C23 ) , 10619 (C24 ) ,
15819 (C25) , 10216 (C26) , 5811 (C27) , 5612 (M eO 2
5) , 10415 (C21′) , 7416 (C22′) , 7813 (C23′) , 7113 (C2
4′) , 7711 (C25′) , 6519 (C26′) , 11112 (C21″) , 7716 (C2
2″) , 8015 (C23″) , 7510 (C24″) , 6516 (C25″)。苷元的
1H 2NM R和13C2NM R 数据与化合物Ì 的基本一致。
由此可鉴定化合物Í 为 22羟甲基252甲氧基苯基2O 2Β2D 2呋喃芹糖基2(1→6) 2O 2Β2D 2吡喃葡萄糖苷, 经
查阅文献确认为一新化合物。化学结构式见图 1。
致谢: 在实验中给予帮助的郑尚珍教授 (西北师
范大学生命科学学院) 和进行植物鉴定的廉永善教
授 (西北师范大学生命科学学院)以及代测核磁和质
谱的有机国家重点实验室的未启秀老师和分析测试
中心的赵凡智老师。
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t ion of two sw eet o leanane2type triterpene o ligoglyco sides, a2
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新型 11-脱氧甘草次酸-30-酰胺衍生物的研究
汤立达1, 3, 王建武13 , 雍建平2, 张士俊3, 刘利军2, 王玉丽3, 吴 楠3, 徐为人3Ξ
(11 山东大学化学与化工学院, 山东 济南 250100; 21 宁夏大学化学学院, 宁夏 银川 750021;
31 天津药物研究院, 天津 300193)
摘 要: 目的 合成新型的 112脱氧甘草次酸衍生物, 寻找抗炎活性高的药物。方法 用甘草次酸还原制得 112脱氧
甘草次酸, 再和 R 取代的苯基异 唑衍生物偶联, 合成了一系列新型 112脱氧甘草次酸2302酰胺衍生物, 用 IR、
1H 2NM R、13C2NM R、M S 等分析方法进行结构确证, 以苯甲酸引起的小鼠耳肿模型和醋酸引起的小鼠腹膜炎模型
评价了抗炎活性。结果  IR、1H 2NM R、13C2NM R、M S 等数据表明这些化合物结构正确。其中É、Ë、Í 和Ï 化合物
具有明显的抗炎活性, 某些甘草次酸2302酰胺衍生物差异有统计学意义。结论 合成的系列新化合物结构正确, 具
有明显的抗炎活性。
关键词: 112脱氧甘草次酸; 酰胺衍生物; 合成; 抗炎活性
中图分类号: R 28411   文献标识码: A    文章编号: 0253 2670 (2006) 01 0020 06
Novel 11-deoxylglycyrrhetin ic ac id-30-acylam ide der iva tives
TAN G L i2da1, 3, W AN G J ian2w u1, YON G J ian2p ing2, ZHAN G Sh i2jun3,
L IU L i2jun2, W AN G Yu2li3, W U N an3, XU W ei2ren3
(11 Schoo l of Chem istry and Chem ical Enginnering, Shandong U niversity, J inan 250100, Ch ina; 21 Schoo l of Chem istry,
N inx ia U niversity, Y inchuan 750021, Ch ina; 31 T ian jin Inst itu te of Pharm aceu tical R esearch, T ian jin 300193, Ch ina)
·02· 中草药 Ch inese T radit ional and H erbal D rugs 第 37 卷第 1 期 2006 年 1 月
Ξ 收稿日期: 2005207218
作者简介: 汤立达 (1963- ) , 男, 福建人, 山东大学博士生, 天津药物研究院研究员, 主要从事新药的研究和评价工作。3 通讯作者 王建武 E2m ail: jww ang@ sdu1edu1cn
Abstract: Objective To syn thesize the novel derivat ives of 112deoxyl g lycyrrhet in ic acid w ith h igh
an t i2inf lamm ato ry act ivit ies1 M ethods  112D eoxylg lycyrrhet in ic acid w as ob ta ined by deox id izing gly2
cyrrhet in ic acid w ith Zn (H g) öHC l, and then a series of 112deoxylg lycyrrhet in ic acid 30 acylam ide deriva2
t ives w ere syn thesized by coup ling w ith R 2A r2isoxazo le2m ethylam ine1 A nd the syn thesized compounds
w ere confirm ed by the m ethods of IR , 1H 2NM R , 13C2NM R , and M S1 Tw o models w ere u sed to evaluate
the p relim inary an t i2inf lamm ato ry act ivity of the compounds1 Results T he structu res of a ll the new com 2
pound w ere iden t if ied by the spectra of IR , 1H 2NM R , 13C2NM R , and M S1 T he compound 1, 3, 5 and 7
w ere p roven to have a sign if ican t an t i2inf lamm ato ry act ivity1 Conclusion Som e 302acylam ide derivat ives
of g lycyrrhet in ic acid have sign if ican t an t i2inf lamm ato ry act ivit ies1
Key words: 112deoxylg lycyrrhet in ic acid; acylam ide derivat ives; syn thesis; an t i2inf lamm ato ry
  豆科植物甘草是一种传统中药, 具有抗炎[1 ]、抗
溃疡[2 ]、抗肿瘤、抗艾滋病毒等功效, 现代医学研究
表明甘草药理作用的主要有效成分是甘草酸、甘草
次酸及其衍生物[3 ] , 但临床上应用常伴有假醛固酮
增多症, 表现为患者长期服用后出现水肿、湿疹等现
象。Sho ji 等研究表明当甘草次酸 11 位羰基被还原
后, 上述副作用消失[4 ]。取代异 唑杂环是一类具有
广泛生物活性的分子结构。药物分子中引入异 唑
杂环, 可以改变药物分子与受体结合的性质。据此,
笔者以甘草次酸作为起始物, 还原制得 112脱氧甘
草次酸。首次将异 唑杂环入引 112脱氧甘草次酸,
合成了一系列新型的含有异 唑杂环的 112脱氧甘
草 次 酸2302酰 胺 衍 生 物。 通 过 IR、1H 2NM R、
13C2NM R、M S 等分析方法确定了结构。初步的活性
实验表明, 此类化合物均具有较高的抗炎活性。
1 材料
111 仪器: X- 4 数字显示显微熔点测定仪 (北京泰
克仪器有限公司生产, 温度未经校正) , 1H 2NM R、
13C2NM R 均为B ruker A vance Dpx 400 (TM S 为内
标) , 红外仪 Sh im adzu FT IR 28400S (日本岛津制作
所生产) , 质谱为 ZAB1SPEC 型质谱仪 (FAB 源上
测定)。电子天平: 北京赛德利斯仪器系统有限公司
产品。岛津UV 分光光度仪。
112 试剂: 甘草次酸 (购于山东曙光植物制品有限
公司) , N , N ′2二环己基碳二酰亚胺 (DCC )、12羟基
苯并三氮唑 (HOB t)均购于上海化学试剂站, 试剂匀
为分析纯, 二氯甲烷 (DCM ) 或四氢呋喃 (TH F) 使用
时严格无水处理。
113 动物: 健康 ICR 种小鼠, 雌雄各半, 体重 18~
20 g, 由北京维通利华实验动物技术有限公司提供,
北京市实验动物质量合格证编号 0050625。健康昆
明种小鼠, 雌雄兼用, 体重 18~ 20 g, 由中国医学科
学院试验动物研究所繁育场提供, 北京市实验动物
质量合格证编号 SCXK 京 2004- 0001。
2 方法
211 112脱氧甘草次酸的合成: 按文献方法[5 ]制备,
冰醋酸重结晶得无色针状晶体, 即为 112脱氧甘草
次酸。合成路线见图 1。
212 112脱氧甘草次酸2302酰胺衍生物合成的一般
过程[6 ]: 将 015 mmo l 112脱氧甘草次酸和 0155
mmo l 12羟基苯并三氮唑 (HOB t) 溶解在 8 mL 二氯
甲烷和 2 mL DM F 的混合溶液中, 室温搅拌 10
m in, 然后冰浴搅拌, 将 0155 mmo l DCC 溶解在 6
mL 二氯甲烷中, 滴加入上述体系中, 冰浴搅拌 30
m in 后, 将 0175 mmo l 的 52氨甲基232(R 2基2苯基)
异 唑溶解在 6 mL 二氯甲烷中, 滴入体系中, 冰浴
搅拌反应 2 h 后, 自然升至室温, 继续反应, TL C 指
示反应终点。反应结束后, 滤掉生成的沉淀 (DCU ) ,
图 1 11-脱氧甘草次酸的合成路线
F ig11 Syn thesis of 11-deoxylglycyrrhetin ic ac id
·12·中草药 Ch inese T radit ional and H erbal D rugs 第 37 卷第 1 期 2006 年 1 月
母液用 10 mL 二氯甲烷稀释后, 分别用 5% 的碳酸
氢钠溶液 (3×10 mL )、H 2O (10 mL ) , 5% 的柠檬酸
洗涤 (2×10 mL )、H 2O (10 mL ) 洗涤, 无水硫酸钠干
燥, 柱分离, 醋酸乙酯2石油醚 (60~ 90 ℃) 1∶5~
1∶2梯度洗脱, 即得目标产物。合成路线见图 2。
2 1 3 二甲苯致耳肿模型: 健康 ICR 小鼠 , 1 8~
图 2 11-脱氧甘草次酸-30-酰胺衍生物的合成方法
F ig12 Syn thesis of 30-acylam ide der ivatives of 11-deoxylglycyrrhetin ic ac id
22 g, 雌雄兼用, 按体重随机分组, 每组 8~ 10 只。分
别为模型组、阳性药组和不同结构 112脱氧甘草次
酸衍生物 40 m gökg 组。用于活性试验的样品, 试验
时以 1% CM CN a 配制成质量浓度 2 m gömL , 给药
容量为 014 mL ö20g 体重, 相当于 40 m gökg。模型
对照组给予等容量的常水对照。根据体重 ig 给药,
给药 30 m in 后向小鼠右耳滴加 50 ΛL 二甲苯溶液,
30 m in 后脱颈椎处死, 迅速剪下小鼠双耳, 用直径
016 cm 的打孔器取下相同部位的耳片, 称质量。同
一小鼠的肿胀耳与正常耳的质量差值作为肿胀的指
标。把同批实验的模型组的平均肿胀度定为 100% ,
计算各给药组的相对肿胀指数 (sw elling index) , 结
果用 t 检验进行生物统计学处理。
214 小鼠腹膜炎模型: 健康昆明种小鼠, 18~ 22 g,
雌雄兼用, 按体重随机分为 9 组, 每组 8~ 10 只。分
别为模型组、不同 112脱氧甘草次酸衍生物 40 m gö
kg 组。用于活性试验的样品, 试验时以 1% CM CN a
配制成 2 m gömL 质量浓度, 给药容量为 014 mL ö
20 g体重, 相当于 40 m gökg。模型对照组给予等容
量的常水对照。根据体重 ig 给药, 给药 40 m in 后尾
iv 1% 伊文思兰 011 mL ö10 g 体重, 随即 ip 016% 醋
酸 012 mL ö只, 20 m in 后动物脱颈椎处死, 用 2 mL
生理盐水洗涤腹腔 3 次, 合并洗涤液, 用生理盐水定
量稀释至 6 mL 后离心, 上清液在 590 nm 测定吸光
度。吸光度直接作为炎性渗出的指标, 把同批实验的
模型组的平均吸光度定为 100% , 计算各给药组的
相对渗出指数 ( index of perm eab ility) , 结果用 t 检
验进行生物统计学处理。
3 结果
311 化合物的结构数据
31111 112脱氧甘草次酸: 产率 80186% , mp 329~
331 ℃。 1H 2NM R (400 M H z, CDC l3, TM S) ∆: 0166
( 3H , s) , 0167 (3H , s) , 0185 (3H , s) , 0188 (3H , s) ,
0193 ( 2H , m ) , 1101 ( 3H , m ) , 1105 ( 3H , s ) , 1135
( 5H , m ) , 1155 (8H , m ) , 1185 ( 8H , m ) , 3101 ( 1H ,
m ) , 5115 (1H , s)。 13C2NM R (100 M H z, CDC l3 ) ∆:
181108 (2C = O ) , 145123, 125108, 68125 ( C3 ) ,
64159, 56187, 47138, 45132, 45122, 43185, 43152,
42151, 39182, 38125, 36125, 33172, 32183, 32122,
28179, 28137, 27197, 27172, 25130, 24175, 19189,
18178, 16187, 15178, 15141。 IR ΜKB rm ax cm - 1: 3 438184
(2OH ) , 2 950189, 2 929167, 2 867195, 1 704196
(2COOH ) , 1 384179, 1 365151 (齐墩果烷型五环三
萜骨架 A 区的两特征峰) , 1 325101, 1 282157,
1 261136 (齐墩果烷型五环三萜骨架 B 区的三特
征峰)。
31112 化合物É : N [ (32对氟苯基2异 唑252基) 甲
基 ]2112脱氧甘草次酰胺, 收率 48186% , mp 254~
·22· 中草药 Ch inese T radit ional and H erbal D rugs 第 37 卷第 1 期 2006 年 1 月
·32·中草药 Ch inese T radit ional and H erbal D rugs 第 37 卷第 1 期 2006 年 1 月
2 855142, 1 655177 (2C = O ) , 1 512109 (2C = N 2) ,
1 469. 86, 1 441169, 768156 ( A r ) , 1 380194,
1 361165 (A 区的两特征峰) , 1 325197, 1 233139,
1 187110 (B 区的三特征峰)。 FAB 2M S m öz : fo r
C 40H 56N 2O 3, ca lcd: 61319 (M + 1 ) , found: 61316
(M + 1)。
312 抗炎活性
31211 二甲苯致耳肿模型: 试验结果表明, 动物的
右耳滴加了二甲苯后出现明显水肿, 证明了模型可
靠性; 给予不同结构的 112脱氧甘草次酸衍生物后,
能够明显抑制二甲苯引起的小鼠耳水肿, 见表 1, 部
分化合物的抑制率高于氢化可的松, 表明化合物具
有较强的抗急性组织炎性肿胀的作用。
31212 小鼠腹膜炎模型: 见表 1。动物注射醋酸模
拟炎症引起的腹腔毛细血管通透性增加, 使染料渗
出增加, 经口给予不同结构的 112脱氧甘草次酸衍
生物后, 许多化合物能明显降低血管的通透性, 使染
料渗出减少, 表明具有较强的抗炎作用, 部分药物对
渗出的抑制率高于阳性药氢化可的松。
表 1 11-脱氧甘草次酸酰胺衍生物的抗炎活性测试结果
Table 1 An ti- inf lammatory activ ity of der ivatives
of 11-deoxylglycyrrhetin ic ac id
组别 剂量ö(m g·kg- 1) 肿胀指数ö% 通透性指数ö%
模型 - 10010±2714 10010±4819
氢化可的松 40 5517±46193 5411±31153É 40 5119±30183 3 4518±11143 3Ê 40 7015±2419 6415±6910Ë 40 5518±31163 4116±18173 3Ì 40 8616±4811 7411±2114Í 40 6511±38113 4811±42113Î 40 8513±5719 10019±8711Ï 40 4511±22153 3 5513±23153
  与模型组相比: 3 P < 0105 3 3 P < 0101
  vs model group 3 P < 0105 3 3 P < 0101
4 讨论
本文首次将具有生物活性的异 唑杂环引入
112脱氧甘草次酸, 合成了一系列新型的 112脱氧甘
草次酸酰胺衍生物, 结合甘草次酸的构效关系及前
人的研究, 预计这类化合物具有更强的生物活性和
低的副作用, 为新药的筛选提供了新的侯选化合物,
具有一定的实用意义。
所合成的化合物经过 IR、1H 2NM R、13C2NM R、
M S 等确定了结构。 (1) 从 IR 数据可看出, 在3 440
左右出现2N H 2的吸收峰, 在3 100~ 3 400出现2OH
的吸收峰, 1 645左右出现2C = O 的吸收峰, 1 600,
1 454, 780 左右出现苯环特征吸收峰, 1 527左右出
现2C = N 2的特征峰以及齐墩果烷型五环三萜骨架
A 区 的 两 特 征 吸 收 峰 ( 1 392~ 1 379, 1 370~
1 355)、B 区 的 三 特 征 吸 收 峰 ( 1 330~ 1 315,
1 306~ 1 299, 1 269~ 1 250)。(2) 在13C2NM R 数据
中, 化合物均在 175 左右出现 30 位羰基碳的特征
峰, 76 左右出现C3 的特征峰。(3)质谱分析中, 所有
的化合物均出现M + 1 峰, 是由于羰基的影响使酰
胺上的氮很容易结合一个质子。
在甘草次酸和异 唑衍生物的偶联反应中, 溶
剂必须进行严格的无水处理。
从活性数据可以看出, 该类化合物具有较高的
抗炎活性, 其药理特性有待于进一步研究。
·42· 中草药 Ch inese T radit ional and H erbal D rugs 第 37 卷第 1 期 2006 年 1 月
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藏药川西小黄菊中黄酮类成分的分离与结构鉴定
杨爱梅1, 刘 霞1, 鲁润华2, 师彦平13 Ξ
(11 中国科学院研究生院、中国科学院兰州化学物理研究所、甘肃省天然药物重点实验室, 甘肃 兰州 730000;
21 中国科学院成都生物研究所, 四川 成都 610041)
摘 要: 目的 对匹菊属藏药川西小黄菊 Py reth rum ta tsienense 中黄酮类活性成分进行分离纯化和结构鉴定。方法
利用普通硅胶柱色谱和制备薄层色谱等方法进行分离、纯化, 并经超导核磁共振 (NM R )、高分辨质谱 (HR 2ES I2
M S)等现代波谱技术鉴定其结构。结果 从川西小黄菊的 95% 乙醇提取物中获得 7 个黄酮类的化合物, 其结构被
确定为: 洋芹素 (É )、芫花素 (Ê )、木犀草素 (Ë )、苜蓿素 (Ì )、4′2甲氧基2苜蓿素 (Í )、木犀草素272O 2Β2D 2葡萄糖苷
(Î )、苜蓿素24′2O 2(Β2愈创木基甘油基) 272O 2Β2D 2葡萄糖苷 (Ï )。结论 化合物É~ Ï 为首次从该植物中获得, 大
量黄酮类成分很可能为川西小黄菊的主要活性成分。
关键词: 菊科; 匹菊属; 川西小黄菊; 黄酮类
中图分类号: R 28411   文献标识码: A    文章编号: 0253 2670 (2006) 01 0025 03
Isola tion and structura l eluc ida tion of f lavono id from Pyreth rum ta ts ienense
YAN G A i2m ei1, L IU X ia1, LU R un2hua2, SH I Yan2p ing1
(11 Key L abo rato ry fo r N aturalM edicine of Gansu P rovince, L anzhou Institu te of Chem ical Physics, Ch inese
A cadem y of Sciences, L anzhou 730000, Ch ina; 21 Chengdu Institu te of B io logy,
Ch inese A cadem y of Sciences, Chengdu 610041, Ch ina)
Abstract: Objective To iso la te and iden t ify the flavoneids from the w ho le p lan t of P h reth rum ta t2
sienense w h ich has been u sed as tranditonal herbal m edicine in the trea tm en t of som e diseases1 M ethods 
T he flavono ids w ere iso la ted by co lum n ch rom atography and their st ructu res w ere elucidated th rough spec2
t ro scop ic analysis (NM R ) 1 Results Seven flavono ids w ere iso la ted and iden t if ied as ap ingen in (É ) ,
genkw an in (Ê ) , lu teo lin (Ë ) , t ricin (Ì ) , 4′2m ethoxyctricin (Í ) , lu teo lin272O 2Β2D 2gluco sides (Î ) ,
and tricin24′2O 2(Β2guaiacylg lyceryl) 272O 2Β2D 2gluco sides (Ï ) 1 Conclusion A ll these compounds are ob2
ta ined from P 1 ta tsienense fo r the first t im e and the flavono ids shou ld be the impo rtan t b ioact ive con2
st ituen ts in P. ta tsienense1
Key words: Compo sitae; Py reth rum Zinn. ; Py reth rum totsienense; f lavono id
  藏药川西小黄菊 Py reth rum ta tsienense (Bu r.
et F ranch. ) L ing ex Sh ih 系菊科匹菊属植物, 生长
于海拔3 500~ 5 200 m 的高山草甸、灌丛、杜鹃灌丛
或山坡砾石地, 在我国分布于青海西南部、四川西南
部及西北部、云南西北部及西藏东部。川西小黄菊在
藏药中作为上品的阿恰塞俊入药, 性味苦、寒, 治头
痛、头伤、跌打损伤、湿热、疮疡, 伤口流黄水、黄水
疮、肝炎等症[1, 2 ]。有关川西小黄菊化学成分的研究,
·52·中草药 Ch inese T radit ional and H erbal D rugs 第 37 卷第 1 期 2006 年 1 月
Ξ 收稿日期: 2005203228
基金项目: 中国科学院“知识创新工程”重要方向性项目——藏药资源标准化研究
作者简介: 杨爱梅 (1976- ) , 女, 中国科学院兰州化学物理研究所博士研究生, 主要从事天然药物化学方面的研究工作。3 通讯作者 师彦平 T el: (0931) 4968208 E2m ail: sh iyp@ lzb1ac1cn