全 文 ：2. 3　血脂的抗菌谱:见表 2。 两种提取物的抗真菌
活性也一致。
表 2　血脂和天然血竭提取物的抗菌谱
Table 2　Antibiotic spectrum of resin and Dragon s blood
试验菌 抑菌圈 (直径 ) /mm血脂 天然血竭
金黄色葡萄球菌 12. 0 15. 0
大肠杆菌 - -
黄曲霉 - -
烟曲霉 - -
黑曲霉 - -
微曲青霉 15. 0 13. 0
串珠镰孢霉 9568D 12. 0 13. 0
三隔镰孢霉 11. 5 11. 5
粉红头孢霉 15. 0 12. 0
土生交链孢霉 - -
土色侧孢霉 - -
枝孢嗜果疮 18. 0 21. 0
出芽短梗霉 11. 0 11. 0
3　讨论
　　实验初步证明 9568D镰孢霉作用于无生物活
性的剑叶龙血树材质可促成血脂的形成和积累 ,该
血脂与天然剑叶龙血树血竭无本质差异。 经灭活处
理的龙血树材质无疑已丧失了对微生物侵染的防御
反应能力 (产生植物防卫素 ) ,故在 9568D镰孢菌接
种部位产生的血脂显然不是植物防卫素血脂 ,但它
与天然植物防卫素血竭的组成和抗菌谱却极为相
似。在对 9568D镰孢霉的形态观察中发现其小分生
孢子仅见诸于龙血树茎杆材料诱导培养基 ,这说明
该菌在一定程度上对剑叶龙血树具适应性。 由于内
生真菌生存在一个竞争的环境中 ,它们可能通过与
宿主的共进化或基因转移 ,模拟宿主的化学环境 ,生
产和耐受宿主的某些代谢产物 ,从而保证自己的竞
争优势。
References:
[1 ]　 Cai X T, Xu Z F. A s tudy on the resou rce of Chin ese
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ence Press, 1997.
HPLC法测定望春花蕾中望春花黄酮醇苷Ⅰ 的含量
于宗渊 1 ,孙中矾 2 ,苏本正 1 ,刘　青 1
( 1. 山东省中医药研究院 ,山东 济南　 250014; 2. 山东大学化学与化工学院 ,山东 济南　 250012)
　　中药辛夷主治各种急、慢性 ,过敏性鼻炎和鼻窦
炎。《中华人民共和国药典》 2000年版一部规定辛夷
为木兰科植物望春花 Magnolia biondii Pamp.、玉
兰 M. denudata Desr.和武当玉兰 M. sprengeri
Pamp.的干燥花蕾。其中望春花蕾为辛夷的主流品
种。其含有望春花黄酮醇苷Ⅰ等化学成分 [1 ] ,但其含
量测定方法至今未见报道。本实验建立了 HPLC法
测定辛夷主流品种望春花蕾中望春花黄酮醇苷Ⅰ含
量的方法 ,并用该法测定了 11批望春花蕾样品中望
春花黄酮醇苷Ⅰ 的含量 ,为评价和控制辛夷药材的
内在质量提供参考。
1　实验材料
Waters高效液相色谱仪: 600泵 , 7725i定量进
样阀 ,进样环体积为 10μL, 996二极管阵列检测器 ,
Mil lennium
32色谱工作站 ;甲醇为色谱纯 ,水为超纯
水 ,其他试剂均为分析纯 ;望春花黄酮醇苷Ⅰ 对照品
系自望春花蕾中提取并经色谱法分离纯化制得 ,经
测定其 UV , IR, 1 H-NMR, 13 C-NM R和 MS等波谱
数据进行了结构鉴定 ,并经高效液相色谱归一化法
测定其纯度为 99. 61% ; 11批望春花蕾样品分别购
自河南郑州、陕西西安、河北安国和山东等地 (表
1) ,经山东省中医药研究院钟方晓副研究员鉴定 ,均
为木兰科植物望春花 Magnol ia biondi i Pamp.的干
燥花蕾。
·574· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 35卷第 5期 2004年 5月
收稿日期: 2003-07-15作者简介:于宗渊 ( 1964— ) ,男 ,山东莱西人 ,副研究员 ,医学硕士 , 1984年毕业于山东医学院药学系 ,主要从事中药化学成分及质量控制方法等方面的研究工作。 Tel: ( 0531) 2968470-3018　 Fax: ( 0531) 2968473　 E-mail: yu zys@ sohu. com
2　方法与结果
2. 1　色谱条件: 色谱柱为 μBondapak C18 ( 300
mm× 3. 9 mm , 10μm) ;柱温为 25℃ ;流动相为甲
醇 -水-磷酸 ( 60∶ 40∶ 0. 2) ;流速 1. 0 m L /min;检测
波长 315 nm。理论板数按望春花黄酮醇苷Ⅰ峰计算
不低于 3 000。望春花黄酮醇苷Ⅰ 对照品溶液和望春
花蕾样品溶液的色谱图见图 1。
图 1　望春花黄酮醇苷Ⅰ 对照品 ( A)和望春花蕾
样品 (B)的 HPLC图谱
Fig. 1　 HPLC chromatograms of biondnoidⅠ (A)
and f lower buds of M . biondii (B)
2. 2　对照品溶液的制备:精密称取于 60℃减压干
燥至恒重的望春花黄酮醇苷Ⅰ 对照品适量 ,加甲醇
制成浓度为 0. 5 mg /mL的溶液 ,即得。
2. 3　供试品溶液的制备: 取望春花蕾样品粉末约
1. 0 g ,精密称定 ,置圆底烧瓶中 ,准确加入 100 mL
甲醇 ,称定质量 ,回流提取 30 min,冷却至室温 ,称
定质量 ,用甲醇补足减失的质量 ,摇匀 ,提取液用
0. 5μm微孔滤膜滤过 ,即得。
2. 4　标准曲线及线性范围: 精密吸取对照品溶液
0, 2, 4, 6, 8, 10 mL,分别置 10 mL量瓶中 ,加甲醇稀
释至刻度 ,摇匀。 按上述色谱条件 ,分别进样测定望
春花黄酮醇苷Ⅰ的峰面积。 以对照品进样量为横坐
标 ,峰面积为纵坐标 ,绘制标准曲线 ,得回归方程为:
A= 3 206 950 C- 94 335, r= 0. 999 9,线性范围:
0～ 5μg。
2. 5　精密度试验: 取同一份样品溶液 ,在上述色谱
条件下 ,重复进样 6次 ,测定望春花黄酮醇苷Ⅰ 峰面
积 , RSD为 1. 03% 。
2. 6　稳定性试验: 取同一份样品溶液 ,分别于室温
条件下放置 0, 1, 2, 4, 8, 12 h进行测定 ,结果望春花
黄酮醇苷Ⅰ 峰面积的 RSD为 1. 12% ,表明样品溶
液在 12 h内稳定。
2. 7　重现性试验:取同一批望春花蕾样品 6份 ,按
“供试品溶液制备”项下方法操作 ,制得 6份样品溶
液 ,测定并计算各份样品溶液中望春花黄酮醇苷Ⅰ
的含量 ,平均值为 0. 24% , RSD为 1. 73%。
2. 8　回收率试验:取上述已知含量的望春花蕾样品
粉末 6份 ,每份约 0. 5 g ,精密称定 ,分别精密加入定
量的望春花黄酮醇苷Ⅰ对照品 ,按“供试品溶液的制
备”项下方法制备供试品溶液 ,测定望春花黄酮醇苷
Ⅰ 的含量 ,计算回收率。 结果平均回收率为
99. 96% , RSD为 1. 85%。
2. 9　样品的测定:用上述方法测定了 11批望春花
蕾样品中望春花黄酮醇苷Ⅰ的含量 ,结果见表 1。
表 1　 11批望春花蕾样品中望春花
黄酮醇苷Ⅰ 的含量测定结果
Table 1　 Determination of biondnoidⅠ of 11
sample f lower buds of M. biondii
编号 样品来源 望春花黄酮醇苷Ⅰ 含量 /%
1 河南郑州药材公司 0. 24
2 陕西西安药材公司 0. 21
3 河北安国药材市场 0. 17
4 山东济南建联药店 0. 18
5 山东青岛药材公司 0. 15
6 山东烟台药材公司 0. 16
7 山东济宁药材公司 0. 16
8 山东德州药材公司 0. 22
9 山东泰安药材公司 0. 23
10 山东临沂药材公司 0. 16
11 山东潍坊药材公司 0. 31
3　讨论
3. 1　从方法学考察的各项结果可见 ,本法重现性
好 ,准确性高 ,可用于中药辛夷主流品种望春花蕾的
质量评价。
3. 2　从 11批样品的含量测定结果可见 ,不同来源
的望春花蕾样品中望春花黄酮醇苷Ⅰ的含量有一定
的差别。 望春花黄酮醇苷Ⅰ的含量与望春花蕾样品
产地、采收时间以及加工方法等之间的关系有待于
进一步研究。
　　致谢:山东中医药大学中药学院 2003届实习学
生王新科参加本实验工作。
Reference:
[1 ]　 Chen Y Y, Wang B, Cao C Y, et al . Study on th e h ydrophilic
componen ts of Magnol ia biond ii Pam p. [ J ]. Acta Pharm Sin
(药学学报 ) , 1994, 29( 7): 506-510.
　青藏高原红景天提取物　
兰州汇元生物技术研究所
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·575·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 35卷第 5期 2004年 5月