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Analysis of volatile oil of Valeriana officinalis and influence factors of its oil content

缬草挥发油成分分析及其含量影响因素探讨



全 文 :缬草挥发油成分分析及其含量影响因素探讨
薛存宽,蒋 鹏,沈 凯, 李 颖,曾 玲
(华中科技大学同济医学院老年医学研究所,湖北 武汉 430077)
摘 要: 目的 研究缬草挥发油的成分、有效组份及油含量的影响因素。方法 采集川、陕、鄂、湘各地不同海拔、土
质、生长期, 野生与栽培、鲜与干药材, 以挥发油测定器测定挥发油含量; GC-MS 联用及纯品叠加 GC 分析成分鉴
定; 溶剂提取分离纯萜烯与萜烯含氧衍生物; 86Rb 摄入示踪法和体外试验考察缬草挥发油及其不同组份的增进心、
肾营养血流和胃平滑肌解痉作用。结果 缬草药材含油量为 0. 2%~2. 1%。挥发油中共检出 46 种成分,其中单萜
类有莰烯等 6 种, 占 38. 75% ; 倍半萜类有 -石竹烯等 11 种, 占 5. 27% ;单萜、倍半萜含氧衍生物龙脑醋酸酯、缬草
烷酮等 27种, 占 54. 25%。含氧衍生物具有明显地增进心、肾组织微循环灌流及胃平滑肌解痉作用。结论 高海拔、
肥沃砂质土壤生长的、秋后采集的鲜缬草含油量最高; 油中主要的活性组份为单萜、倍半萜含氧衍生物。
关键词: 缬草;挥发油; 成分分析
中图分类号: R284. 1   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2003) 09 0779 03
Analysis of volatile oil of Valeriana off icinalis and influence factors of its oil content
XUE Cun-kuan, JIANG Peng , SHEN Kai, LI Ying, ZENG Ling
( Institute o f Ger iat rics, T ong ji M edical College, Huazhong Univer sity of Science and Technolog y , Wuhan 430077, China)
Abstract: Object To study the chemical const ituents, main act ive components of volat ile oil of Vale-
riana of f icinalis L. and its inf luence factors of the o il content . Methods The content of vo latile oil of w ild
or cultiv ated, moist o r dry V . of f cinalis collected f rom dif ferent altitudes, soils , and g row th periods in
Sichuan, Shaanx i, Hubei and Hunan Pr ovinces w as determined by volat ile oil detecto r. T he components
w er e ident if ied by GC-MS and GC combined w ith pur e sample. Terpenes and their ox o-der iv at ives were
ext racted and iso lated by solvents. T he ef fects of vo latile oil and its dif ferent components of V . of f icinalis
on improving the nutritions of heart and kindney blood flow and promot ing spasmolysis o f stomach smooth
muscle w er e obser ved by 86Rb iso topic tr acer determinat ion and ex ternal exper iments. Results T he oil
content of V . of f icinali s was 0. 2%- 2. 1% . Fr om the volat ile o il 46 chemical components, w hich included
six types of compound like camphene of mono terpenes ( 38. 7%) , 11 types o f compound like -caryophy-
hene of sesquiterpenes ( 5. 27% ) , and 27 types o f ox o-der iv at ives o f mono terpenes and sesquiterpenes com-
pound like bor nyl acetate and valeranone ( 54. 25% ) etc . w ere ident if ied. T he oxo-der iv atives have signifi-
cant effects on improving perfusion of cardiac and renal t issue m icrocirculat ion and promot ing spasmolysis
of stomach smooth muscle. Conclusion The o il content of fr esh V . of f icinal is g row ing in high alt itudes
and fert ile sandy soil and collected af ter autumn is the highest of al l. The main act ive components of the
volat ile oil are oxo-derivat ives of mono terpenes and sesquiterpenes.
Key words : Valer iana of f icinalis L. ; vo latile o il ; analysis o f components
  缬草的基原植物为败酱科缬草属植物缬草 Va-
leriana of f icinalis L.
[ 1]。有关缬草挥发油成分的报
道不尽相同[ 2, 3] ,对缬草药材中挥发油含量的影响因
素研究则甚少。我们在承担“缬草二类新药研制”和
“缬草驯化栽培和基地建设”的项目研究中对国产缬
草药材挥发油中主要化学成分、含量的影响因素及
其主要活性部分进行了研究。
1 药材
1. 1 秋后采集自川东、陕南、鄂西北、神农架、鄂西
南、湘西的野生缬草。
1. 2 分别于开花前、秋后采集同一地方的野生与人
工栽培缬草。
·779·中草药 Chinese T raditional and Herbal D rug s 第 34 卷第 9 期 2003年 9月
 收稿日期: 2002-11-16基金项目:国家攻关项目( 96-901-01-66) ;湖北省攻关项目( 941-P2105)
1. 3 秋后收获同地域(神农架林区)不同海拔; 同地
域、同海拔不同土质的人工栽培缬草, 比较其亩产、
油含量及品质。
1. 4 秋后采集同地的缬草,测量鲜品及晾藏 2年干
品的挥发油含量及品质。
2 提取、分离与鉴定
2. 1 挥发油含量测定:药材以挥发油测定器进行提
取、测定含量。鄂西、川东、陕南、湘西成熟期的野生
鲜缬草含油量基本相近;高海拔、肥沃沙质土壤栽培
的缬草产量及含油量明显高于低海拔、粘土;成熟期
(秋后)含油量大大高于生长营养期;鲜缬草含油量
远高于储存 2年后的干缬草, 储存的缬草干粉含油
量更低,见表 1。
表 1 缬草药材挥发油含量测定
Table 1 Determination of volatile oil in V. of f icinalis
产 地 海拔/m 土质 品种 野生或栽培 成熟期
含油率
/ %
神农架  1 800 粘土 缬草 野生 秋后  1. 3
神农架  2 500 砂土 缬草 野生 秋后  2. 1
同上 药材高山室内储存二年 0. 5
神农架  2 500 砂土 缬草 栽培 开花前 0. 2
神农架  2 500 砂土 缬草 栽培 秋后  1. 9
陕南平荔 1 800 砂土 缬草 野生 秋后  1. 8
鄂西竹溪 1 200 砂土 缬草 野生 秋后  1. 6
鄂西竹溪 1 200 砂土 缬草 栽培 秋后  1. 5
四川巫溪 1 900 砂土 缬草 野生 秋后  2. 0
鄂西恩施 900 砂土 缬草 野生 秋后  1. 4
湘西大庸 1 700 砂土 缬草 野生 秋后  1. 7
2. 2 取 10 kg 产自神农架鲜缬草根和根茎, 置于
0. 1 m
3的多功能提取罐中,以高压蒸汽直接蒸馏提
取挥发油, 获得淡黄色油 128 mL, 油密度为 0. 956,
提取率 1. 22%。
2. 3 取 100 mL 蒸馏提取的挥发油,充分以 69%乙
醇溶取分离, 分别获得醇溶(单萜、倍半萜氧衍生物)
和不溶部分(单萜、倍半萜)。
2. 4 挥发油的气相色谱分析: 仪器: SP502气相色
谱仪、CDMC-2A 色谱数据处理机; 色谱条件: 色谱
柱 OV-101, 0. 3 mm×35 m 弹性石英毛细管柱;检
测器;氢焰分析器;汽化室温: 280 ℃; 柱温 70 ℃( 2
min)
4℃/ m in
85 ℃( 2 min) 2 ℃/ min 100 ℃( 1 m in)
4℃/ m in
230 ℃( 10 min) ; 载气: 氮气 0. 1 M Pa, 尾
吹 0. 05 M Pa;灵敏度 103 ,进样量: 0. 4 L。
分析结果显示:大巴山脉不同地域、同地域不同
海拔或土质、野生与栽培、不同生长期的鲜-干缬草药
材的挥发油,以及新提取的与密封避光储存 5年的油
成分大致相同,仅各种成分的相对含量稍有差异。
2. 5 神农架野生缬草挥发油的 GC-MS 联检: 仪
器: JMS-P300 型 GC-MS 联用仪。色谱条件: OV-
101, 0. 33 mm×36 m 弹性石英毛细管柱。检测器:
氢焰检测器; 柱温: 一阶程序升温, 60 ℃( 2 m in)
3 ℃/ min
220 ℃( 30 min) ; 进样器温度: 250 ℃; 分
流: 1∶10;柱前压: 882. 9 kPa,尾吹 0. 5 kg/ cm2。
质谱条件: 离化方式: EI; 离化电压: 70 eV; 离
化电流: 300 A; 分辨率: 700;离化室温度: 190 ℃;
培增电压: 1. 4 kV。
结果:共检出 46个成分,将各个峰的质谱图与
标准图谱对照,鉴定了其中 22个成分, 占挥发油成
分全量的 90. 18%, 主要成分为龙脑醋酸酯( bo rnyl
acetate C12H20O 2, 196 )、莰烯 ( camphene, C10H16 ,
136)、-蒎烯 ( -pinene, C10H16, 136 )、-蒎烯 ( -
pinene C10H 16, 136)、龙脑 ( borneol C10H18O, 154)、
葛缕醋酸酯( car vey l acetate, C12H 18O 2, 194)、缬草烷
酮 ( v aleranone, C15H 26O, 222 )、新辛酮 ( N eo-oc-
tanone, C15H 22O, 218)。该检测结果与国内外文献报
道基本一致[ 2, 3]。见表 2。
另外, 我们还选用含量最高的7种成分的纯品(龙
脑醋酸酯、莰烯、-蒎烯、-蒎烯、龙脑、柠檬烯、-石竹
烯)分别做了 GC 成分峰叠加分析, 也得到了证实。
3 讨论
近年来关于缬草的研究相当活跃, 并基本上都
集中于缬草挥发油与缬草环烯醚萜酯类(缬草波春
valepot riates) ,研究表明有显著的平滑肌解痉、增加
冠脉流量、抗心律失常、抗肿瘤、镇静安神等作
用[ 5~10]。Hendriks 等[ 5]指出缬草的药理作用主要在
其挥发油,作用最强的化合物是一些含氧的组份。我
们同期进行的缬草挥发油、挥发油中含氧的组份及
单纯萜类组分的药效学研究结果表明: 缬草挥发油
和挥发油中含氧的组份对正常小鼠及垂体后叶素+
20%聚蔗糖静脉注射诱导缺血大鼠的心、肾组织营
养血流有明显的增进与改善作用( 86Rb 摄入+ 组织
-脉冲计数法, 以生理盐水为阴性对照、硝酸甘油为
阳性对照) ;缬草挥发油和挥发油中含氧的组份对乙
酰胆碱诱导的大鼠胃组织条痉挛有明显的解痉作用
(以生理盐水为阴性对照、以硫酸阿托品为阳性对
照) ;油中含氧组份的药理活性比总挥发油更强, 而
单纯萜类组份则未显示类似作用 (资料将另行发
表)。Wagner 等报道除了挥发油外, 缬草乙醇提取
物中的缬草波春(环烯醚萜酯)具有平滑肌解痉和增
加冠脉流量的作用, 缬草浸膏的镇静或安定作用也
·780· 中草药 Chinese T raditional and Herbal D rug s 第 34 卷第 9 期 2003年 9月
表 2 缬草挥发油 GC-MS分析鉴定结果 (相对含量 0. 1 %以上)
Table 2 GC-MS results of volatile oil in V. of f icinalis ( Relative content is over 0. 1 % )
峰号 化合物 含量/ %
  1 -侧柏烯   0. 44
2 -蒎烯 6. 50
3 莰 烯 25. 42
4 4-松油烯乙酸酯 0. 20
5 -蒎烯 4. 50
6 环葑烯 0. 15
7 - 0. 10
8 -柏木烯 0. 21
9 柠檬烯 1. 74
10 4-醋酸松油酯 0. 12
11 香苇醇 0. 16
12 龙脑 1. 26
13 4-三丁酯-邻甲酚 0. 62
14 异龙脑醋酸酯 1. 73
15 龙脑醋酸酯 32. 81
峰号 化合物 含量/ %
 16 -   0. 13
17 乙酸葛楼酯 3. 73
18 二氢乙酸葛缕酯 1. 24
19 马榄烯 0. 23
20 - 0. 78
21 - 0. 82
22 -石竹烯 1. 04
23 -绿叶烯 0. 42
24 - 1. 01
25 -古芸香烯 0. 83
26 - 0. 43
27 - 0. 23
28 - 0. 21
29 - 0. 48
30 - 0. 21
峰号 化合物 含量/ %
 31 -   1. 02
32 - 0. 55
33 - 0. 44
34 - 1. 09
35 - 0. 14
36 - 0. 27
37 - 0. 22
38 缬草烷酮 1. 52
39 - 0. 37
40 新辛酮 5. 45
41 - 0. 20
42 - 0. 23
43 - 0. 35
45 - 0. 10
46 - 0. 21
    “- ”未知成分
  “- ”unknow n compon ents
是主要依赖于缬草波春[ 6]。缬草挥发油与环烯醚萜
酯具有相似的药理作用。英、日最新版药典的缬草药
材标准中都增添了挥发油含量的最低限量, 德国药
典还收载有“缬草油”。上述事实表明国内外医药界
对缬草挥发油药用价值的重视。缬草挥发油除药用
外,还是常用的食品、烟草香精。
  文献报道的缬草挥发油含量差异极大( 0. 2%~
8% ) [ 3]。我国缬草资源十分丰富。本资料显示, 大巴
山脉缬草挥发油含量比较高; 各地缬草的挥发油成
分基本一致; 栽培缬草的挥发油含量及成分与野生
的相似, 但受土质、海拔影响甚大, 以海拔1 500~
3 000 m、富有腐殖质的砂质土壤栽培、冬播次年秋
后收获的产量及含油量最高; 生长二年或多年的植
株并不能提高产量与品质,其前一年的须根多数已
枯萎或坏死; 缬草干燥储存过程中将丢失大部分挥
发油, 其干药材得率及含油量约为鲜品的 25%。因
此,仅以缬草生药计量是难以保证其有效成分的足
量摄入。理想的缬草制剂宜以鲜品为原料, 以其挥发
油及缬草环烯醚萜酯含量作标准。
本研究显示,挥发油中单萜及倍半萜的含氧衍
生物约占油全量的 55%, 是挥发油中的主要活性组
份,其中有效成分尚不完全清楚。缬草挥发油中纯单
萜含量比较高、药理活性相对不太重要,具有令人难
以接受的浓烈的松节油样气味, 所以在研制缬草制
剂或缬草香精时最好将其剔除。
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