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菊花黄酮的提取及抗氧化活性研究



全 文 :菊花黄酮的提取及抗氧化活性研究
孔 琪, 吴 春Ξ
(哈尔滨商业大学, 黑龙江 哈尔滨 150076)
  目前食品中常用的抗氧化剂有丁基羟基茴香醚
(BHA ) , 二丁基羟基甲苯 (BH T ) , 叔丁基对苯二酚
( TBHQ ) , 没食子酸丙酯 (PG) 等, 由于毒性和致癌
作用等原因, 许多国家已停止或严格限制其使用。寻
找和开发天然、无毒的天然抗氧化剂已成为人们关
心的焦点。我国植物资源丰富, 许多植物体中都含有
天然抗氧化成分。黄酮类化合物是广泛存在于植物
体内, 无不良反应, 同时还有显著的清除人体内自由
基、抗老化、抗突变、调血脂、降血压等药理保健功
能, 是一类极具开发前景的天然有机抗氧化剂[1 ]。菊
花味甘、性寒, 富含黄酮。黄酮类物质对冠心病、心绞
痛、高血压、心血管疾病有很好的疗效[2 ]。民间更以
饮用菊花水来解暑热。本实验从菊花中提取具有抗
氧化作用的黄酮类化合物, 确定了菊花黄酮的最佳
提取工艺条件, 并研究了菊花黄酮对食用油脂的抗
氧化活性, 以期为该类天然抗氧化剂的广泛应用提
供依据。
1 实验部分
111 材料与仪器: 干杭白菊购于哈尔滨市中药店;
猪油为市售新鲜板油经温火湿法炼制而得; 芦丁对
照品由中国医药 (集团) 上海化学试剂公司提供, 其
他试剂为分析纯; 水为去离子水。
  T G328B 光电分析天平 (上海天平仪器厂) ;
101—3 型恒温干燥箱 (上海仪器厂) ; R E52—98 旋
转蒸发仪 (上海亚荣生化仪器厂) ; HH—S 型恒温振
荡水浴锅 (江苏医疗仪器厂)。
112 实验方法
11211 芦丁标准曲线的绘制: 精确称取减压干燥至
恒重的芦丁 2413 m g 用 30% 乙醇溶液溶解后转移
到 100 mL 量瓶内, 加至刻度, 配成 01243 m gömL
的对照品溶液。精确吸取溶液 010、110、210、310、
410、510 mL 分别置于 25 mL 量瓶中。用 30% 乙醇
补充至 1215 mL , 加入 0156 mL 0105% N aNO 2, 摇
匀, 放置 5 m in 后, 加入 0156 mL 011% A l(NO 3) 3,
6 m in 后再加入 4 mL 1 mo löL N aOH 溶液, 混匀,
加 30% 乙醇至刻度后静置 10 m in, 以溶剂为空白参
比, 在 500 nm 波长下分别测定吸光度 (A ) , 由质量
浓度 (C ) 2吸光度 (A ) 标准工作曲线拟合得回归方
程: C = 01110 5 A + 01001 6, r= 01998 1, 线性范围
为 01009 7~ 01048 6 m gömL。
11212 菊花黄酮的含量测定: 取菊花提取物适量,
置 100 mL 量瓶中, 加乙醇至刻度。取该溶液 018
mL 置于 25 mL 量瓶中, 按照标准曲线的测定方法
测定吸光度, 在标准曲线中查找质量浓度, 计算菊花
黄酮含量。
11213 油脂抗氧化作用的测定: 采用烘箱储藏法测
定。将纯猪油及添加一定量的菊花提取物溶液的猪
油置于 65 ℃烘箱, 按照国家标准 GB ö55438285, 每
隔一定时间测定并计算其过氧化 (POV )值。即精密
称取2~ 3 g 混匀 (必要时滤过)的样品, 置于 250 mL
碘量瓶中, 加入氯仿2冰醋酸 (2∶3) 混合液 30 mL ,
使样品完全溶解。加饱和碘化钾溶液 1 mL , 加塞、摇
匀, 在暗处放置 3 m in, 加水 50 mL , 摇匀后立即用
0102 mo löL 硫代硫酸钠标准溶液滴定至淡黄色时,
加 0150% 淀粉指示剂 1 mL , 继续滴定至蓝色消失
为止。同时以空白试剂滴定为参比。
  POV = (V 1- V 2)×C×01126 9öW ×100%
其中V 1 和V 2 分别为样品和空白试剂消耗N a2S2O 3 标准溶
液的体积(mL ) ; C 为硫代硫酸钠溶液的浓度(mo löL ) ;W 为样
品质量(g) ; 01126 9 为 1 m g 硫代硫酸钠相当碘的质量数(g)。
2 结果和讨论
211 因素与水平: 在材料粉碎度以及所用溶剂一定
的条件下, 溶剂乙醇的体积分数、料液比、提取温度、
提取时间等因素都会对菊花黄酮的提取率产生影
响。本实验在单因素试验的基础上, 对影响菊花黄酮
提取效果的主要因素: 乙醇体积分数、料液比、回流
时间进行优化组合。因素水平安排见表 1。
212 正交试验结果与分析: 以菊花黄酮质量分数为
·1001·中草药 Ch inese T radit ional and H erbal D rugs 第 35 卷第 9 期 2004 年 9 月
Ξ 收稿日期: 2004201202
基金项目: 哈尔滨市科技局基金资助项目 (2002A FXXJ030) ; 黑龙江省教育厅骨干教师资助项目 (1052G058)
作者简介: 孔 琪 (1972—) , 女 (壮族) , 广西容县人, 硕士, 讲师, 研究方向为食品与药物化学。T el: (0451) 88163761
E2m ail: Kongq@h rbcu1edu1cn
        表 1 因素水平表
Table 1 Factors and levels
水平
因  素
A 乙醇体积分数ö% B 料液比ö(g·mL - 1) C 回流时间öh
1 80 1∶15 3
2 60 1∶10 2
3 40 1∶5 1
考察指标, 对乙醇体积分数、料液比和回流时间进行
的L 9 (34)正交试验结果见表 2。可见, 醇提法从菊花
中提取黄酮化合物的最佳条件为A 2B 3C 2, 即按 1∶5
(gömL ) 的料液比, 用 60% 乙醇回流 2 h。各因素对
提取工艺影响的大小依次为: 料液比> 乙醇体积分
数> 回流时间。采用该最佳提取工艺提取菊花黄酮,
测得吸光值为 11216, 总黄酮质量分数为 8150%。
表 2 L 9 (34)试验方案及结果
Table 2 D esign and result of L 9 (34) orthogonal test
试验号 A B C 黄酮质量分数ö%
1 1 1 3 6143
2 2 1 1 6127
3 3 1 2 6114
4 1 2 2 6103
5 2 2 3 6163
6 3 2 1 7183
7 1 3 1 6192
8 2 3 2 8150
9 3 3 3 5172
K 1 19138 18184 20157
K 2 21140 20104 20167
K 3 19124 21114 18178
k1 6146 6128 6186
k2 7113 6168 6189
k3 6141 7105 6126
R 0172 0177 0163
213 菊花黄酮对猪油的抗氧化活性: 将纯猪油及添
加 0110%、0120%、0140% 菊花黄酮提取液的猪油
样品置于 65 ℃恒温烘箱中, 间隔一定时间测定, 计
算其 POV 值, 结果见表 3。可见, 菊花黄酮对猪油的
氧化具有明显的抑制作用, 且随着质量分数的增大
其抗氧化能力增强。黄酮类化合物具有多酚结构, 能
够提供活泼的氢质子, 与油脂氧化产生的自由基结
合成较稳定的产物, 从而阻断油脂的自动氧化过程。
表 3 菊花黄酮对猪油的抗氧化作用
Table 3 An tioxygen ic activ ity of chrysan themum
f lavono id for lard
试 样
POV ö%
0 d 2 d 4 d 6 d 8 d 10 d
空白猪油 01080 01091 01126 01178 01602 31975
0110% 菊花提取物 01080 01089 01097 01126 01191 01515
0120% 菊花提取物 01080 01086 01090 01120 01148 01250
0140% 菊花提取物 01080 01085 01089 01118 01145 01214
  菊花黄酮资源丰富, 安全性高, 提取工艺简单,
而且具有一定的药理作用。本实验所提取的菊花黄
酮为粗品, 若经纯化其抗氧化性能必定更强。研究和
开发菊花资源, 使其成为合成抗氧化剂的替代品是
很有意义的。
References:
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to tal flavono ids in A g rim on ia p ilosa [J ]1 Chem Ind F orest
P rod (林产化学与工业) , 2002 (3) : 622641
青叶胆滴丸的成型工艺研究
王 莘, 王 雷Ξ
(天津市长征医院, 天津 300021)
  青叶胆可用于护肝降脂, 同时对人体的免疫系
统及变态反应还具有一定的影响, 有类似于肾上腺
皮质激素类药物的药理作用。本院医师在临床治疗
中发现, 对患有瘙痒、荨麻疹及湿疹等变态反应性皮
肤病的患者, 使用其片剂治疗时可以达到一定的疗
效, 且无一般抗组胺药物的不良反应。但片剂溶出度
低, 影响其临床效果。以聚乙二醇为载体制成滴丸,
其体外溶出速度显著高于片剂, 溶出量为片剂的 4
倍, 具有溶解快、吸收好、生物利用度高等优点。因
此, 本实验对青叶胆滴丸的成型工艺进行了考察。
1 仪器与试药
ZB—1C 智能崩解仪 (天津大学精密仪器厂) ,
·2001· 中草药 Ch inese T radit ional and H erbal D rugs 第 35 卷第 9 期 2004 年 9 月
Ξ 收稿日期: 2004202203
作者简介: 王 莘 (1963—) , 女, 主管药师, 职业药师, 1985 年毕业于天津医科大学, 主要从事药物制剂的研究。 T el: (022) 27533126