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超声提取-HPLC法测定冬凌草中冬凌草甲素



全 文 :中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第12期2005年12月· 823·
超声提取一HPLC法测定冬凌草中冬凌草甲素
袁珂1,吕洁丽2,贾 安2
(1.浙江林学院食品与药学院,浙江临安311300;2.河南中医学院药学院,河南郑州450003)
冬凌草RabdosiarubescensH msl.为一传统草
药,俗称抗癌植物,在我国具有丰富的野生资源。该
植物主要生长在我国黄河流域及其以南广大地区。
冬凌草中的二萜类成分冬凌草甲素具有很强的抗肿
瘤活性口1“。对于冬凌草甲素的测定方法,传统方法
往往采用TLC法[4o及HPLC法”]。由于索氏提取是
一种连续热回流提取方法,不仅提取时间较长,而且
药液长时间处于被加热状态,有效成分容易受到破
坏,测出的冬凌草甲素的质量分数偏低,且提出的药
液色重,因此测定前还必须进行脱色除杂,给测定工
作带来很多不便。超声提取技术已被用于多种植物
的提取,具有提取快速、提取率高、节省溶剂和时间,
能避免高温对有效成分的影响等优点。本实验采用
超声技术快速提取冬凌草中的冬凌草甲素,并通过
HPLC法测定冬凌草甲素,发现采用该法能克服传
统提取方法的许多不足,并能保证冬凌草甲素的高
提取率。
1仪器和材料
Agilent1100型高效液相色谱仪(美国安捷伦
公司);自动进样器iHPll00化学工作站;TP300超
声波提取器(北京天鹏电子新技术有限公司),
R201B旋转蒸发仪(上海申胜生物技术有限公司);
MettlerAE240微量分析天平。
冬凌草叶于2003年10月购自河南省济源市药
材公司,由河南中医学院药学院陈随清教授鉴定为
唇形科香茶菜属植物冬凌草R.rubescensH m l的
全草。冬凌草甲素对照品自制,质量分数为
99.22%。色谱纯甲醇,双蒸水,其他试剂均为分析
纯。
2方法与结果
2.1色谱条件:色谱柱为C。。ODS柱;流动相为甲
醇一水(55;45);柱温25℃;检测波长242nm。
2.2供试品溶液的制备:分别精密称取冬凌草叶粗
粉10g,准确加入80%乙醇60mL,称定质量,置超
声波提取器中,超声提取2次,每次30mill,取出放
冷后,称定质量,然后加80%乙醇补足减失的质量,
收稿日期:2005—02—21
抽滤,吸取1m1.提取液用甲醇定容至25mL量瓶
中,即得。
2.3标准曲线的绘制:精密称定冬凌草甲素对照品
10:00mg,加甲醇定容至25mL量瓶中,摇匀,配成
质量浓度为400/Lg/mL的对照品溶液。分别进样
0.2、0.4、1-0、2.0、3·0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0v-L,
记录峰面积。结果冬凌草甲素进样量在0.08~1.32
pg,峰面积与冬凌草甲素进样量呈良好线性关系,
回归方程为Y一1464.41036X+30.61838,r=
0.99997。
2.4稳定性试验:精密吸取冬凌草供试品溶液,每
隔2h进样测定1次,重复测定5次,记录冬凌草甲
素的峰面积,计算其质量分数,结果RSD为
1.64%。
2.5精密度试验:取冬凌草供试品溶液进样5次,
每次进样10止,测定峰面积值,计算其RSD为
1.86%。
2.6重现性试验:精密称取冬凌草叶5份,按供试
品溶液的制备项下方法进行,分别吸取上述溶液10
pL进样分析,测定峰面积,计算其质量分数,得其
RSD为1.95%。
2.7回收率试验:精密吸取2.06rng/mL冬凌草甲
素对照品溶液2.00mL5份,分别精密加入其中冬
凌草甲素质量分数为x的冬凌草叶5g,按供试品
溶液的制备方法处理并测定,结果冬凌草甲素的平
均回收率为98.37%,RSD为1.86%。
2.8样品测定:吸取供试品溶液10pI。进样,记录
峰面积,计算样品中冬凌草甲素的质量分数。共选取
3批,每批称取4份,结果冬凌草甲素的质量分数分
别为0.7612%、0.7587%、0.7429%,RSD分别为
I.03%、1.66%、1.89%。色谱图见图1。
3讨论
3.1 通过试验证明,超声提取后提取液色浅,不用
脱色除杂即可直接进行测定,对测定基本无干扰,且
测定结果比索氏提取法高出12.3%。
(下转第1858页)
万方数据
·1858· 中草药ChineseTradi6.onala dHerbalDrugs第36卷第12期2005年12月
肠道毒素等作用,对胃肠道出血、保护胃肠道功能有
较好的疗效。
严重胸腹多发伤患者术后早期保护并恢复胃肠
道功能,早期胃肠内营养,可以有效保护胃肠黏膜屏
障,减轻炎症反应。防治肠源性感染,提高机体免疫
力o],促进早日康复。本观察两组病人均为急诊手
术,未进行充分术前准备,应用大黄的治疗组,胃黏
膜出血率及肠麻痹率分别低于对照组,而胃肠功能
恢复有效率均高于对照组。本观察采用早期、少量、
限速,定时滴注大黄制剂,配合胃肠减压、限制胃肠
腔压力增高,解决了中药早期不易应用和对口服中
药味道不耐受的问题,避免了因未恢复胃肠道功能,
而进行肠内营养引起的恶心、呕吐,吸人性肺炎等并
发症。缩短胃肠减压时间,恢复胃肠功能,提前进食,
降低病人的痛苦及住院时间和费用。
大黄是传统中药,胃肠道是其主要效应器官。其
药理机制是促进胃肠蠕动,保护胃肠黏膜,防治应激
性胃肠黏膜病变和中毒性肠麻痹,改善胃肠黏膜血
流灌注,促进胃肠黏膜细胞消化、分泌和吸收功能,
恢复、提高对胃肠营养的耐受,并且不良反应少,可
早期应用于严重胸腹多发伤术后,提高治愈率,减少
并发症的发生,降低病人的痛苦及住院时间和费用。
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(上接第1823页)
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成分的破坏,为一种简便、快速、高效的提取方法。
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万方数据
超声提取-HPLC法测定冬凌草中冬凌草甲素
作者: 袁珂, 吕洁丽, 贾安
作者单位: 袁珂(浙江林学院食品与药学院,浙江,临安,311300), 吕洁丽,贾安(河南中医学院药学院
,河南,郑州,450003)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2005,36(12)

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