全 文 ：HPLC法测定蛤蚧定喘胶囊中苦杏仁苷的含量
邹节明 1 ,袁伟恩 2 ,蒋治良 2* ,王力生 1 ,潘宏程 2
( 1. 桂林三金药业股份有限公司 ,广西 桂林　 541004; 2. 广西师范大学 资源与环境学系 ,广西 桂林　 541004)
　　蛤蚧定喘胶囊是三金集团桂林中药制药厂在传
统产品蛤蚧定喘丸的基础上经过改革而研制的新制
剂 ,主要是由蛤蚧、鳖甲、紫菀等中药组成。 具有平
喘、祛痰、止咳、抗炎、免疫、抑菌和抗过敏等作用。临
床用于治疗肺肾两虚、痰热咳嗽气喘具有良好的疗
效 [1 ]。苦杏仁苷是紫苑的主要有效成分之一 ,它的含
量是评价蛤蚧定喘胶囊质量的一项重要指标。 苦杏
仁苷含量测定已有二阶导数光谱法、 2, 4-二硝基苯
肼法、紫外吸收光谱法、薄层扫描法、化学发光淬灭
法、气相色谱 ( GC)法、顶空 GC微量氰化物法等报
道 [2～ 7 ]。 本实验建立了一个操作简便、快速 ,结果准
确可靠的测定蛤蚧定喘胶囊中苦杏仁苷含量的
HPLC方法。
1　仪器与试剂
LC— 10ATV P高效液相色谱仪及色谱工作站
(日本岛津公司 ) ; UV— 1901双光束紫外可见分光
光度计 (北京普析通用仪器有限公司 ) ; SK3200H型
超声清洗机 (上海科导超声仪器有限公司 ) ; BS—
110S型电子天平 ( Sartorius) ; RF— 52C型旋转蒸发
器 (上海亚荣生化仪器厂 )。
　　甲醇 (色谱纯 ,上海化学试剂公司 ) ;苦杏仁苷对
照品 (中国药品生物制品检定所 , 批号: 820-
200002)。蛤蚧定喘胶囊由广西桂林三金制药股份有
限公司提供 ;亚沸水 (自制 )。
2　方法与结果
2. 1　检测波长的选择:以甲醇配制一定浓度的苦杏
仁苷溶液 ,用紫外分光光度计扫描。苦杏仁苷在 215
nm处出现最大吸收。由于甲醇在 206 nm处仍有较
强吸收 ,为了减小流动相的紫外吸收对测定结果的
影响 ,确定检测波长为 215 nm。
2. 2　色谱条件: 色谱柱: Shim-Pack V P-ODS ( 150
mm× 4. 6 mm , 5μm) (日本岛津 ) ;流动相:甲醇-水
( 87∶ 13) ;检测波长: 215 nm;流速: 1. 2 mL /min;温
度: 25℃。色谱图见图 1。在选定的色谱条件下 ,苦
杏仁苷对照品在 0. 965 min处有一很好的色谱峰 ;
蛤蚧定喘胶囊中的苦杏仁苷的保留时间为 0. 965
min,可与样品中其他组份分开 , 5 min可完成一次
测定。
* -苦杏仁苷
* -amygdalin
图 1　苦杏仁苷对照品 (A)和蛤蚧定喘
胶囊 (B)的 HPLC图谱
Fig. 1　 HPLC chromatograms of amygdalin
reference substance (A) and Gej ie
Dingchuan Capsule (B)
2. 3　工作曲线制备: 精密称取苦杏仁苷对照品
20. 0 mg ,以甲醇定容至 100. 0 mL,得 0. 2 mg /mL
的对照品溶液。 准确吸取 0. 1, 0. 2, 0. 3, 0. 4, 0. 5
mL,再定容到 10 m L量瓶中 ,吸取系列对照品溶液
各 20μL,分别注入液相色谱仪 ,测定。 以浓度为横
坐标 ,峰面积为纵坐标 ,结果苦杏仁苷在 2. 00～
32. 68 mg /L与峰面积呈良好线性关系 ,回归方程为
Y= 1. 62× 104X+ 2. 04, r= 0. 998。
2. 4　供试品溶液制备:准确称蛤蚧定喘胶囊内容物
2. 05 mg ,用甲醇 20 mL超声提取 45 min。提取液经
0. 45μm滤膜滤过。滤液高速 ( 10 000 r /min)离心 5
min。 准确移取上层清液 2 mL,用甲醇配成 10 mL
溶液 , 0. 45μm滤膜滤过 ,即得。
2. 5　检出限测定:苦杏仁苷对照溶液浓度为 2. 00
μg /mL时 ,目标峰高为基线噪音的 3倍 ,得最低检
出限为 2. 00 mg /m L。
·45·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 35卷第 1期 2004年 1月
收稿日期: 2003-08-12基金项目:广西自然科学基金资助项目 ( 014403)作者简介:邹节明 ( 1943— ) ,男 ,教授 ,博士生导师 ,长期从事中药制剂创新研究与产业开发。
* 通讯作者　 E-mai l: zljiang@ gl. gx. cninfo. net
2. 6　精密度试验: 取 0. 2 mg /mL的苦杏仁苷对照
品溶液 ,重复进样 5次 ,测定峰面积 ,计算得其 RSD
为 0. 85% 。
2. 7　稳定性试验:取苦杏仁苷对照品溶液放置 3 d,
测定 ,结果对苦杏仁苷含量无影响。
2. 8　重现性试验: 对同一批样品分别称取 5份 ,按
照供试品溶液制备方法操作 ,测定 ,计算得苦杏仁苷
的平均含量为 138. 1 mg /g , RSD为 0. 85% 。
2. 9　回收率试验: 精密移取蛤蚧定喘胶囊溶液
1. 0, 1. 0, 2. 0, 3. 0, 3. 0 mL于 10 mL量瓶中 ,分别
加入苦杏仁苷对照品溶液 0. 5, 0. 5, 1. 0, 1. 0, 2. 0
m L,按供试品溶液制备方法操作 ,测定 ,结果平均回
收率为 101. 5% , RSD为 0. 85% (n= 5)。
2. 10　样品中苦杏仁苷含量测定:采用外标法。取蛤
蚧定喘胶囊溶液 10μL测定 ,把峰面积值代入工作
曲线方程 ,求出苦杏仁苷浓度 ,计算 ,结果见表 1。
表 1　蛤蚧定喘胶囊中苦杏仁苷的含量测定结果 (n= 5)
Table 1　 Amygdalin in Ge jie Dingchuan Capsule (n= 5)
批号 苦杏仁苷 / ( mg· g- 1) RSD /%
1 137. 2 0. 88
2 141. 3 0. 86
3 140. 7 0. 91
4 130. 5 0. 80
5 130. 8 0. 77
3　讨论
　　糖类物质的分离大多采用氨基柱 ,以乙腈-水作
为流动相进行。但氨基柱使用寿命短 ,加之乙腈价格
较为昂贵 ,很难应用于工业生产过程的例行检测。本
实验在反相 C18柱上以甲醇 -水体系作为流动相对苦
杏仁苷进行分析 ,建立了蛤蚧定喘胶囊中苦杏仁苷
的高效液相色谱分析法 ,准确、简单、快速、灵敏度
高 ,分析成本低 ,可以作为蛤蚧定喘胶囊中苦杏仁苷
含量测定的方法。
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不同干燥条件对银杏叶中活性成分含量的影响
何　 ,何照范 ,张迪清
(贵州大学 ,贵州 贵阳　 550025)
　　银杏 Ginkgo biloba L.属裸子植物 ,是我国特有
的古老树种之一。 我国银杏叶产量约占世界总量的
70%。银杏黄酮、银杏萜内酯是银杏叶中主要活性成
分。银杏黄酮具有相当强的抗氧化作用 ,能清除生物
体内过剩的自由基 ,阻止体内脂质过氧化 ;银杏萜内
酯是一种血小板活化因子 ( PAT )拮抗剂 ,对脑血
栓、心肌梗死有很好的治疗作用。因此 ,银杏叶被认
为是治疗心脑血管疾病的首选天然药物 [ 2]。
银杏酸是银杏叶主要有毒成分之一 ,具有较强
的不良作用 ,它与致过敏、致突变有关。目前 ,国际上
对银杏提取物及其制剂中银杏酸含量有严格的要
求 ,必须控制在 5 mg /kg以下。 白果酸是银杏酸的
主要组份之一。 因此 ,通过对不同干燥方法的研究 ,
测定不同干燥条件下银杏叶中白果酯、银杏黄酮、萜
内酯含量 ,从中选择一个既能有效的降低银杏酸中
白果酸含量 ,减少其不良作用 ,又能很好地保持银杏
叶中黄酮、萜内酯药用成分的最佳干燥条件 ,为获得
高质量的银杏叶原料 ,生产出高标准的银杏叶提取
物、银杏制剂 ;同时为我国银杏叶和银杏叶提取物的
出口提供高质量产品有着重要意义。
1　材料与仪器
银杏经贵州大学园艺系史继孔教授鉴定 ,产自
·46· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 35卷第 1期 2004年 1月
收稿日期: 2003-06-20基金项目:贵州大学校基金资助课题