全 文 ：H iguch i 方程拟合线性关系良好, 可见药物的扩散
机制起着主导作用。
313　电镜扫描结果可见溶出前微丸表面结构致密,
而在溶出试验后, 原来致密的结构变得疏松且出现
了许多溶蚀性孔道。同时实际观察发现体外释放 12
h 的微丸虽然保持完整的骨架结构, 但表面形态却
因溶蚀而变得不规则, 这从另一方面证实了微丸不
仅以药物扩散为主要释放机制, 且兼有 SA 的骨架
溶蚀作用。
314　在研究中发现以 SA 为溶蚀性骨架材料的缓
释微丸释药过程主要受扩散行为的影响, H iguch i
方程拟合线性关系良好, 这与文献[6 ]报道的药物加
蜡质或其他难溶性基质制成的骨架微丸, 药物的释
放主要是外表面的磨蚀2分散2溶出过程, 其释药方
式通常符合H iguch i 方程相吻合。
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RP-HPLC 法测定五味子及维肝福泰片中
五味子甲素和五味子乙素的含量
杜英峰, 袁志芳, 张兰桐3 , 王海荣Ξ
(河北医科大学药学院 药物分析教研室, 河北 石家庄　050017)
　　五味子的化学成分绝大多数属于木脂素类衍生
物, 其中生物活性研究较多的是对肝脏有作用的成
分, 如五味子甲素和五味子乙素。维肝福泰片系由五
味子、人参、树香多糖、乌鸡浸膏经加工而成的复方
片剂, 收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》中,
具有滋补肝肾, 益气养阴等作用, 主要用于慢性乙型
肝炎、迁延性肝炎、肝硬化以及各种化学毒物引起的
肝损伤。本实验采用R P2H PL C 法同时对五味子药
材和制剂维肝福泰片中这两种成分进行了测定, 建
立含量测定方法, 为药材和制剂的质量控制提供了
实验依据。
1　仪器与试药
W aters 高效液相色谱仪 (美国) : 510 泵, 2487
紫外检测器; 浙江大学色谱工作站; TCQ —250 超声
波清洗器 (北京医疗设备二厂)。
　　五味子甲素和五味子乙素对照品 (中国药品生
物制品检定所, 批号分别为 07642200006 和 7652 200104) ; 乙腈 (色谱纯, 美国迪马公司) ; 其他试剂均为分析纯。五味子购于石家庄市药材公司, 经河北医科大学药学院聂凤 教授鉴定为木兰科植物五味子S ch isand ra ch inensis (T u rcz. ) Baill. 的干燥成熟果实; 维肝福泰片由吉林省洮南恒和药业有限公司生产。2　方法与结果211　色谱条件: 色谱柱: 迪马公司D iamon silTM C 18分析柱 (250 mm ×416 mm , 5 Λm ) ; 流动相: 乙腈2水2冰醋酸 (70∶30∶011) ; 流速: 110 mL öm in; 检测波长: 254 nm ; 灵敏度: 015 AU FS。212　提取条件的确定: 选用 75% 乙醇、氯仿、正己烷、甲醇超声, 正己烷回流, 索氏提取五味子药材和维肝福泰片, 结果甲醇超声提取率最高。将五味子药材和维肝福泰片加入一定量的甲醇进行超声提取,比较不同时间对提取率的影响。结果用甲醇超声 20m in 即可将五味子甲素和五味子乙素提取完全, 并且
·915·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 5 期 2004 年 5 月
Ξ 收稿日期: 2003207204
作者简介: 杜英峰 (1977—) , 女, 河北邯郸人, 硕士研究生, 从事药品质量标准研究。3 通讯作者　T el: (0311) 6265625　Fax: (0311) 6052053　E2m ail: zhanglan tong@ 263. net
甲醇提取方法简便, 故选用甲醇超声 20 m in 提取。
213　供试品溶液的制备: 取五味子约 012 g, 精密称
定, 置 50 mL 具塞三角瓶中, 精密加入甲醇 25 mL ,
称定质量, 超声处理 20 m in, 补足损失量的甲醇, 摇
匀。滤过, 弃去初滤液, 取续滤液 1 mL , 置 10 mL 量
瓶中, 加甲醇稀释至刻度, 摇匀, 用 0145 Λm 微孔滤
膜滤过, 即得药材供试品溶液。
　　取维肝福泰片 20 片, 除去薄膜衣, 精密称定, 研
细, 取细粉约 014 g, 精密称定, 置 50 mL 具塞三角
瓶中, 精密加入甲醇 10 mL , 称定质量, 超声处理 20
m in。补足损失量的甲醇, 摇匀。滤过, 弃去初滤液,
取续滤液 2 mL , 置 5 mL 量瓶中, 加甲醇稀释至刻
度, 摇匀, 用 0145 Λm 微孔滤膜滤过, 即得样品供试
品溶液。
214　阴性对照溶液的制备: 按维肝福泰片的处方制 备不含五味子的阴性对照, 按 213 项下方法制备阴性对照溶液。215　对照品溶液的制备: 分别取五味子甲素和五味子乙素对照品适量, 加甲醇配制成五味子甲素 (0110m gömL ) 和五味子乙素 (0116 m gömL ) 对照品混合溶液。精密量取上述溶液 015 mL , 置 25 mL 量瓶中, 加甲醇稀释至刻度, 摇匀, 作为对照品溶液。216　系统适用性试验: 分别取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液, 注入液相色谱仪, 记录色谱图,结果见图 1。可见, 五味子甲素和五味子乙素的保留时间分别约为 19 和 26 m in, 分离度均大于 115, 对称因子分别为 1112 和 1115, 理论板数均不小于10 000, 阴性对照溶液的图谱在五味子甲素和五味子乙素出峰位置处无干扰, 即在试验条件下五味子甲素和五味子乙素与其他组份分离完全。
A 2五味子甲素和五味子乙素对照品　B2五味子药材　C2维肝福泰片　D 2阴性对照
12五味子甲素　22五味子乙素
A 2references of deoxysch izandrin and sch isandrin B B2S ch isand ra ch inensis C2W eiganfu tai T ab let D 2samp le w ithou t S ch isand ra ch inensis
12deoxysch izandrin　22sch isandrin B
图 1　HPLC 色谱图
F ig. 1　HPLC chromatogram s
217　方法学考察
21711　线性关系考察: 取五味子甲素约 1 m g 和五
味子乙素约 214 m g, 精密称定, 置 10 mL 量瓶中, 加
甲醇溶解并稀释至刻度, 摇匀, 作为对照品贮备液。
精密量取该贮备液 1 mL , 置 10 mL 量瓶中, 加甲醇
稀释至刻度, 精密吸取该溶液 2, 4, 6, 8, 10, 12 ΛL ,
按上述色谱条件依法进样, 测定峰面积。以五味子甲
素和五味子乙素相应的峰面积 (Y 1、Y 2)为纵坐标, 五
味子甲素量 (X 1)、五味子乙素量 (X 2) 为横坐标, 绘
制标准曲线。五味子甲素和五味子乙素分别在
0102～ 0112 Λg 和 01048～ 01288 Λg 与峰面积有良
好的线性关系, 五味子甲素和五味子乙素的回归方
程分别为 Y 1= 5 401+ 6152×106X 1 (r= 01999 9) 和
Y 2= 10 795+ 7188×106X 2 (r= 01999 9)。
21712　最低检测限: 在信噪比 SöN ≥3 时, 五味子 甲素和五味子乙素的最低检测限分别为 01291 和01806 ng。21713　重现性考察: 取同一维肝福泰片样品 5 份,按上述的方法分别制备供试品溶液, 注入液相色谱仪, 依法测定, 结果五味子甲素和五味子乙素峰面积积分值的R SD 分别为 0171% 和 118%。21714　精密度试验: 取维肝福泰片, 按 213 项下方法制备供试品溶液, 取该溶液, 重复进样 5 次, 测定峰面积, 五味子甲素和五味子乙素峰面积的R SD 分别为 117% 和 0187%。21715　稳定性考察: 取维肝福泰片约 014 g, 按 213项下方法制备供试品溶液, 分别于 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6,7, 8 h 进样, 测定峰面积, 结果五味子甲素和五味子乙素峰面积的 R SD 分别为 115% 和 111% , 结果显示供试品溶液在 8 h 内稳定。
·025· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 5 期 2004 年 5 月
21716　回收率测定: 分别取含量已知的维肝福泰片
细粉 5 份, 每份约 012 g (含五味子甲素和五味子乙
素分别约为 24, 56 Λg) , 精密称定, 分别加入五味子
甲素、五味子乙素对照品溶液, 使与 012 g 样品所含
五味子甲素和五味子乙素的量相当, 依法制备供试
品溶液, 进样测定。结果五味子甲素平均回收率为
99139% , R SD 为 0153% , 五味子乙素平均回收率为
98101% , R SD 为 115% (n= 5)。
218　样品测定: 取五味子细粉 3 份, 每份约 012 g,
精密称定, 依法制备供试品溶液, 注入液相色谱仪,
按上述色谱条件测定峰面积, 按外标法计算含量, 结
果五味子药材中含五味子甲素和五味子乙素分别为
5151 m gög 和 4148 m gög (n= 3)。
　　取维肝福泰片 3 份, 每份约 014 g, 精密称定, 依
法制备供试品溶液, 注入液相色谱仪, 按外标法计算
含量, 结果维肝福泰片含五味子甲素和五味子乙素
分别为 12013 Λgög 和 28419 Λgög (n= 3)。
3　讨论
311　五味子甲素和五味子乙素均为五味子中所含
的有效成分, 本实验建立了同时测定药材和制剂中
五味子甲素和五味子乙素含量的方法, 对控制五味
子药材和含五味子制剂的内在质量具有重要意义。
312　流动相曾选用文献报道[1 ]的甲醇2四氢呋喃2
水 (76∶4∶20)系统, 发现五味子药材和维肝福泰片
在该流动相系统下五味子甲素和五味子乙素的峰与
其他峰不能完全分开。改变上述流动相比例后, 维肝
福泰片样品中五味子甲素仍与前后其他峰不能完全
分离。改用乙腈2甲醇2水不同比例后, 效果仍不理
想。最后经过多次比例试验, 选择乙腈2水 (70∶30)
时, 五味子药材和维肝福泰片中五味子甲素和五味
子乙素与其他峰能完全分离, 当加入 011% 冰醋酸
时峰形能得到明显改善。
313　据文献报道[2 ] , 五味子甲素、五味子乙素的最
大吸收波长在 254 nm , 本实验选用 254 nm 吸收波
长为测定波长, 可排除干扰, 且灵敏度能达到定量测
定要求。
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三花龙胆和东北龙胆中龙胆苦苷的积累规律研究
江蔚新, 沈志滨, 薛宝玉Ξ
(哈尔滨商业大学药学院, 黑龙江 哈尔滨　150076)
　　三花龙胆Gen tiana trif lora Pall. 、东北龙胆G.
m anshu rica K itag. 属龙胆科, 为“泻肝火、清湿热、健
胃”的常用中药, 其主要活性成分为龙胆苦苷。本实
验通过对龙胆地上器官和地下器官中不同部位、不
同采收期的龙胆苦苷的含量测定, 探讨龙胆中有效
成分积累的规律, 同时对评价龙胆的质量和生产中
最佳采收期的确定具有一定的指导意义。
1　仪器与材料
W aters 高 效 液 相 色 谱 仪 (美 国 ) , W aters
SPD—10A 紫外检测器, 10 ΛL 进样器 (瑞典) ; R 201
旋转薄膜蒸发器 (上海申胜生物技术有限公司) ; 龙
胆苦苷对照品 (中国药品生物制品检定所, 批号:
07702200004) ; 三花龙胆和东北龙胆采自哈尔滨市 郊区, 经哈尔滨商业大学药学院沈志滨副教授鉴定;甲醇 (色谱纯)。2　方法与结果211　对照品溶液的制备: 精密称取龙胆苦苷 12150m g, 置 10 mL 量瓶中, 加甲醇溶解并稀释至刻度, 摇匀, 备用。212　供试品溶液的制备: 分别称取三花龙胆和东北龙胆的根、茎、叶、花药材粉末 (60 目, 干燥箱中干燥2 h)约 014 g, 精密称定, 置 10 mL 量瓶中, 准确加入甲醇 10 mL , 密封, 室温条件下超声提取 40 m in, 取出, 滤过, 滤液置 10 mL 量瓶中, 加甲醇至刻度, 低温、避光保存备用。213　色谱条件: 色谱柱: H ypersil C 18柱 (200 mm ×
·125·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 5 期 2004 年 5 月
Ξ 收稿日期: 2003208218
基金项目: 黑龙江省自然科学基金资助项目 (C00228) ; 黑龙江省教育厅骨干教师项目 (黑 20032812)
作者简介: 江蔚新 (1957—) , 男, 硕士, 哈尔滨商业大学药学院副教授, 研究方向为天然药物化学。