全 文 ：胞发生癌变时 ,胆固醇与磷脂的克分子数比值增加 ,
膜流动性降低 ,如肝癌细胞。同时 ,也有人认为晚期
和老年肿瘤患者机体的免疫反应性降低 ,可能与细
胞膜中胆固醇含量的改变有关。 Roozemond等也发
现 ,效应细胞或靶细胞膜流动性的改变 ,都会抑制
NK细胞介导的细胞毒作用。 因此细胞膜中胆固醇
含量的改变而引起细胞膜流动性的改变 ,进而改变
正常细胞的功能及机体免疫力 ,从而促发细胞癌变。
本实验表明海藻多糖可以使肿瘤细胞膜流动性恢复
正常 ,进而恢复其正常细胞功能和机体免疫力而达
到抗肿瘤作用。海藻多糖恢复细胞膜流动性的作用
很可能与海藻多糖中的有效成分对胆固醇的改变有
关。 这有待于进一步的工作来证实。
参考文献:
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[ 5 ]　林克椿 ,聂松青 ,薄惠卿 . 用荧光探针 DPH研究腹水癌细胞
膜脂流动性 [ J] .生物化学与生物物理进展 , 1981, 6: 32.
当归醇沉物及其中性组份体外对巨噬细胞
分泌 TNF-α和 IL-1的影响
奚瑾磊 ,彭仁 ,王智勇
(武汉大学医学院 药理教研室 ,湖北 武汉　 430071)
摘　要: 目的　观察当归醇沉物 ( ESA)及其中性组分 ( ESA-1) 体外对小鼠腹腔巨噬细胞分泌 TNF-α、 IL-1的影
响。 方法　 L929细胞株细胞毒法测 TNF-α; L929细胞增殖法测 IL-1。 结果　 ESA、 ESA-1与小鼠腹腔巨噬细胞
( MΥ)共同培养可显著增强其 TNF-α、 IL-1的分泌。 在 5～ 20μg /mL浓度范围 , ESA的这种作用呈剂量依赖性 ;
ESA-1虽有明显的作用 ,但未表现出剂量依赖。 结论　当归醇沉物及其中性组分体外可增强小鼠腹腔巨噬细胞分
泌 TN F-α、 IL-1。
关键词: 当归醇沉物 ;巨噬细胞 ; TN F-α; IL-1
中图分类号: R285. 5　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 05 0437 03
Effects of ethanol sediments from tuber of Angelica s inensis and its litmusless
component on secreting TNF-αand IL-1 of macrophages in vitro
X I Jin-lei , PENG Ren-xiu, W ANG Zhi-yong
( Depa r tment o f Pha rmacolog y , Medical Co lleg e of Wuhan Univ ersity, Wuhan Hubei 430071, China )
Abstract: Object　 To investigate the ef fects of ethanol sediments obtained from the tuber o f Angelica
sinensis ( Oliv ) . Diels ( ESA) and its litmusless component ( ESA-1) on the secretion of TN F-αand IL-1 by
mice peri toneal macrophages in vitro. Methods　 L929 cell line cytotoxici ty w as used fo r the assay o f TN F-
α. The prolifera tion of L929 cell line w as used fo r the assay o f IL-1. Results　 The secretion o f TN F-αand
IL-1 by mice peri toneal macrophages which w ere co-cul tured wi th ESA or ESA-1 in vi tro can be signifi-
cant ly promo ted. At the concentrations in range of 5～ 20μg /mL, there is a do se-dependence in the action
o f ESA, w hi le there is not the simila r ef fect of ESA-1, even though i t show ed the marked ef fect. Conclu-
sion　 ESA and ESA-1 can enhance the secreting TN F-αand IL-1 o f mice peri tonea l macrophages in vitro.
Key words: ethanol sediments f rom the tuber o f Angel ica sinensis (Oliv. ) Diels ( ESA) ; macrophages;
TN F-α; IL-1
·437·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 5期
收稿日期: 2001-09-04作者简介:奚瑾磊 ( 1975-) ,男 ,湖北浠水县人 ,助教 ,生化药理专业硕士 ,现工作于武汉科技大学医学院药理教研室 ,研究方向为生化药理、中药药理。 Tel: ( 027) 86875504　 E-mai l: f rank 922@ yeah. net
　　当归醇沉物 [ethanol sediments f rom tuber of
Angelica sinensis ( Oliv . ) Diels, ESA ]是临床医院
制剂当归注射液制备过程中水煮醇沉后废弃的部
分。我们在研究中发现 ESA具有促进淋巴细胞增
殖的效应 [1 ] ,对卡介苗加脂多糖所致小鼠免疫性肝
损伤有明显的保护作用 [2 ]。与此同时 ,我们亦曾观察
到将 ESA继续分离得到的中性组分 ( ESA-1)可以
明显增强小鼠单核吞噬细胞功能。本研究通过体外
试验来进一步观察了 ESA、 ESA-1对细胞因子
TN F-α和 IL-1分泌的影响 ,以求更全面地认识
ESA的免疫作用。
1　材料
1. 1　药品与试剂: 当归醇沉物 ( ESA)为易溶于水
的深棕色粉末 ,含糖量为 65. 5% ,主要含 D-半乳糖
和 D-阿拉伯糖 ;当归醇沉物中性组分 ( ESA-1)为
易溶于水的棕灰色粉末 ,含糖量为 72. 14% ,主要含
D-阿拉伯糖和 α-葡萄糖醛酸 ,本实验室制备 [1 ]。
MT T、放线菌素-D、脂多糖 ( Lipopolysaccharide,
LPS)为 Sigma产品。 RPM I-1640培养基购自 Gib-
co公司。
1. 2　 L929细胞株: 购自武汉大学生物标本典藏
中心。
1. 3　动物:昆明种雄性小鼠 , 8周龄 ,体重 18～ 22
g ,武汉大学医学实验动物中心提供。
1. 4　仪器: CO2培养箱 (美国 Fo rma公司 ) ; DG-
3022A型酶联比色仪 (国营华东电子管厂 )。
2　方法和结果
小鼠摘眼球放血 ,颈椎脱臼处死。 ip RPM I-
1640,无菌条件下取腹腔巨噬细胞 ( MΥ) 悬液 ,
1 000 r /min离心 10 min后收集细胞 , RPM I-1640
调细胞浓度为 2× 106 /mL,加入 24孔板中 ,每孔 1
m L。 5% CO2、 37℃ 下孵育 2 h后 ,洗掉非贴壁细
胞 ,加入 RPM I-1640完全培养基及 ESA、 ESA-1
(终浓度均为 5, 10, 20μg /mL)各 0. 5 mL,继续孵
育。于 16, 48 h吸取上清液 , - 80℃ 保存 ,分别供检
测 TN F-α、 IL-1用。 TN F-α测定用 L929细胞株细
胞毒法 [3, 4 ] ,检测结果以 A570值表示 ,吸光度值越小 ,
表明待测上清液中 TN F-α含量越高 ,对 L929细胞
的杀伤作用越强。结果见表 1。 IL-1测定用 L929细
胞增殖法 [4 ] ,检测结果亦以 A570值表示 ,吸光度值越
大 ,则表明待测上清液中 IL-1含量越高 ,促进 L929
细胞增殖的作用越强。 结果见表 2。
ESA、 ESA-1有显著增强 TN F-α分泌的作用。
在 5～ 20μg /m L浓度范围 , ESA增强腹腔 MΥ分
表 1　 ESA、 ESA-1体外对小鼠腹腔 MΥ分泌
TNF-α的影响 ( x± s , n= 3)
组　别 剂量 (μg /m L) A 570
RPM I-1640 - 0. 193± 0. 006
ESA 5 0. 138± 0. 012* *
10 0. 117± 0. 011* *
20 0. 088± 0. 008* *
ESA-1 5 0. 116± 0. 005* *
10 0. 119± 0. 012* *
20 0. 079± 0. 009* *
　　与 RPM I-1640比较: * * P < 0. 01
表 2　 ESA、 ESA-1体外对小鼠腹腔 MΥ分泌
IL-1的影响 (x± s, n= 3)
组　别 剂量 (μg /m L) A 570
RPM I-1640 - 0. 154± 0. 005
LPS 10 0. 298± 0. 019* *
ESA 5 0. 196± 0. 015* *
10 0. 232± 0. 022* *
20 0. 312± 0. 013* *
ESA-1 5 0. 192± 0. 013* *
10 0. 202± 0. 016* *
20 0. 216± 0. 019* *
　　与 RPM I-1640比较: * * P < 0. 01
泌 TN F-α的作用随浓度增大而增强 ,并表现出剂
量依赖关系 (r= - 0. 995 2) , 20μg /mL时对 L929
细胞的杀伤率达到 54. 4% 。 ESA-1在 5和 10μg /
mL时促进 TN F-α分泌的作用相近 ,而 20μg /mL
时对 L929细胞的杀伤率可达到 59. 1%。
ESA、 ESA-1同时具有显著促进腹腔 MΥ分泌
IL-1的功能。在 5～ 20μg /m L浓度范围 , ESA增强
IL-1分泌的作用有明显的剂量依赖 (r= 0. 999 7) ;
而在 ESA-1的各剂量组之间 ,这种增强作用无显著
差异。
3　讨论
当归的免疫药理作用 ,最终是要通过作用于各
种免疫效应细胞 ,诱生各种细胞因子 ,并参与机体的
神经、体液及免疫调节作用来实现的 [5 ]。 我们曾证
明: ESA能单独或协同 ConA /LPS发挥促进小鼠
脾脏及胸腺 T、 B淋巴细胞增殖的作用 ,尚可对抗氢
化泼尼松 ( HP)对 ConA诱导的脾脏及胸腺 T淋
巴细胞的增殖反应的抑制作用 [1 ]。 ESA及其分离组
分能提高补体 C3含量 ,显著增强小鼠单核巨噬细
胞功能。 TN F-α和 IL-1作为活化的巨噬细胞所分
泌的细胞因子 ,在机体免疫监视、抗原呈递、免疫调
节中均有重要作用 [6 ]。 而本实验结果表明 ESA、
ESA-1可以显著增强腹腔 MΥ分泌 TN F-α和 IL-1
的功能。因此我们认为激活巨噬细胞 ,促进细胞因子
分泌来调节机体免疫功能可能是 ESA、 ESA-1免疫
·438· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 5期
活性的一个重要方面。
与此同时 ,我们在实验中亦曾观察到 ESA、
ESA-1体内用药无直接促进腹腔 MΥ分泌 TN F-α
的功能 ,但在给药剂量为 250 mg /kg时 ,均可使腹
腔 MΥ在 LPS刺激下分泌 TN F-α的功能得到显
著增强。这种正常腹腔 MΥ无影响 ,而对活化的腹
腔 MΥ分泌细胞因子的功能具有增强作用的具体
机制有待进一步实验来阐明。
参考文献:
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[6 ]　龙振洲 .医学免疫学 [M ] .北京:人民卫生出版社 , 1998.
西红花苷对血管内皮细胞的保护作用研究
绪广林 ,钱之玉
(中国药科大学 药理教研室 ,江苏 南京　 210009)
摘　要: 目的　研究西红花苷对过氧化氢所致牛内皮细胞 ( BAEC) 损伤的保护作用 ,并初步探讨其可能的作用机
制。方法　利用过氧化氢刺激 BAEC,观察了西红花苷对细胞培养液内 M DA、 SOD、 LDH含量或活性的影响 ,并对
细胞进行流式细胞分析和细胞内钙测定 ,观察了该药对细胞凋亡及胞内钙的影响。 结果　西红花苷可剂量依赖性
的减少 M DA生成 ,提高 SOD活性 ,阻止 LDH的外漏 ,还能抑制过氧化氢所致细胞内钙升高 ,减少细胞凋亡百分
率。结论　西红花苷对过氧化氢所致 BAEC损伤有保护作用 ,其作用机制可能与其拮抗细胞内钙有关 ,值得在临床
上推广应用治疗心血管疾病。
关键词: 西红花苷 -1;牛内皮细胞 ;凋亡 ;细胞内钙
中图分类号: R286. 2　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 05 0439 04
Protective effect of crocin-1 on bovine aortic endothelial cells
XU Guang-lin, QIAN Zhi-yu
( Depar tment of Pharmaco lo gy , Chinese Pharmaceutical Univ er sity , Nanjing Jiang su 210009, China)
Key words: crocin-1; bovine aor tic endo thelial cel ls; apoptosis; int racellular calcium
　　番红花为鸢尾花科 ( Iridaceae)番红花属 (Cro-
cus L. )植物番红花 C. sativus L. 的干燥柱头 ,又
名藏红花、西红花。其主要活性成分为胡萝卜苷类化
合物 (西红花苷 ) ,由于它们的结构差异较小 ,化学方
面的研究如提取、分离、鉴定等很多 [1 ]。 同时因为该
类化合物有芳香味并呈现亮丽的黄色且较难消退
(保存适当 ) ,常在食品和化妆品行业用作染料 [2 ]。众
所周知 ,西红花苷类化合物一个显著特点就是其抗
氧化作用 [3 ] ,并具有抗高血压、动脉粥样硬化、脑水
肿、脊髓损伤、乳头瘤、关节炎作用 ,还能提高哺乳动
物血流氧分压。近年来还发现其有抗肿瘤 [4 ]和乙醇
所致记忆和学习障碍的作用 [5 ]。 但红花昂贵的价格
限制了它的广泛使用 ,后来从一种来源广泛的植物
里面也成功地提取了该类物质 [ 6]。不过以上研究一
般只限于整体动物研究 ,缺乏其作用机制的探讨。细
胞、分子或基因水平的报道也很少见。本实验利用自
制的原料单体对过氧化氢所致内皮细胞过氧化脂质
生成、酶活性改变及凋亡进行了研究 ,并探讨其作用
机制 ,以期为临床应用提供可靠的理论依据。
1　材料与方法
1. 1　药品与试剂:西红花苷 (西红花酸龙胆二糖基 ,
cro cin-1)由本实验室自制 (纯度> 98% , HPLC法 ) ,
·439·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 5期
收稿日期: 2001-10-18基金项目:江苏省基础研究计划 (自然科学基金 ) B J198124作者简介:绪广林 ( 1973-) ,男 ,江苏金湖人 , 1995年毕业于中国药科大学中药制药专业。 毕业后一直从事中药新产品开发及中药活性成分筛选等方面的工作。 现为中国药科大学药理学在读博士 ,研究方向为生化药理 ,并主要致力于中药心血管系统方面的研究与开发。
* 通讯作者　 Tel: 025-3271322　 E-mail: x udunlop@ 263. n et