全 文 ：表 3　迷迭香总二萜酚对小鼠各组织 GSH-Px含量的影响 (x± s , n= 8) U /L
Table 3　 Ef fect of TPD on GSH-Px level of dif ferent tissues in mice (x± s , n= 8) U /L
组　别 　剂量 / ( mg· kg- 1 ) 血　清 肝 股四头肌 脑 心
不给药不运动 　　　 - 　　 34. 8± 12. 0 　　 174. 6± 19. 0 　　 84. 7± 17. 0 　 　 36. 6± 7. 0 　　 50. 5± 15. 0
不给药运动 　　　 - 24. 8± 7. 7△△ 153. 3± 20. 4△ 69. 0± 14. 8△ 37. 5± 8. 9 36. 0± 13. 7△
总二萜酚 　　　 100 26. 3± 11. 7 160. 2± 20. 9 72. 9± 27. 0 40. 1± 7. 8 42. 9± 14. 8*
250 34. 0± 8. 0* 170. 1± 25. 7* 79. 4± 14. 8* 40. 6± 9. 5 49. 5± 13. 4* *
500 36. 6± 10. 4* 181. 0± 31. 4* 86. 7± 24. 1* 41. 8± 12. 1 51. 4± 18. 4* *
维生素 E 30 33. 3± 11. 3 176. 9± 29. 8* 84. 4± 16. 7* 39. 3± 8. 1 45. 8± 12. 4*
　　　与不给药运动组相比: * P < 0. 05　* * P < 0. 01; 与不给药不运动组相比: △ P < 0. 05　△△ P < 0. 01
　　　* P < 0. 05　* * P < 0. 01 vs exercis e group wi th out giving d rug; △ P < 0. 05　△△ P < 0. 01 vs non-exercis e group wi th out giving drug
量效关系 ,即在除脑外的器官组织内 ,随着给药剂量的
增加 , M DA含量降低 , SOD和 GSH-Px活力增加。
3　讨论
　　实验中 ,运动与不运动的阴性对照组相比 ,脂质
过氧化加强 ,造成 MDA含量显著增加 ,抗氧化酶活
力下降。表明运动会产生氧化性损伤 ,表现在脂质过
氧化增加 ,同时抗氧化酶活力下降 ,这说明体内为对
抗过氧化而使抗氧化酶被不同程度的消耗 ,因而表
现为酶活力相对下降。 另外也有人认为可能是由于
氧压过高 ,抑制了体内抗氧化酶的活性 [6 ]。
迷迭香总二萜酚对运动引起的氧化性损伤表现
出良好的抑制效果 ,并在不同剂量组间呈现出一定
的量效关系 ,说明迷迭香总二萜酚具有良好的抗氧
化活性。脑内各指标无论运动与否还是给药与否 ,变
化均不显著 ,这可能是由于血脑屏障之故 ,但也有人
认为脑内存在着另一套更为有效的抗氧化系统 [7 ]。
本实验结果表明 ,迷迭香提取物具有良好的体
内抗氧化作用 ,其中的二萜酚类化合物很可能是其
抗氧化作用的物质基础。
致谢:医学实验班专题生赵楠同学曾对部分工
作给予过帮助。
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前列腺素系统异常在关木通所致慢性肾脏损害发生中的作用
叶志斌 ,许　静 ,李　珍 ,陆国才⒇
(上海长海医院 肾内科 ,上海　 200433)
摘　要:目的　探讨关木通引起的慢性肾脏损害是否与前列腺素系统异常有关。方法　实验组正常大鼠每天 ig 10
g /kg关木通 ,对照组 ig相同量自来水 , 8周后观察肾脏病理、血肌酐 ( SCr) 和尿素氮 ( BUN )、尿蛋白定量 ,并测定
尿、血浆以及肾组织 6-keto-PGF1α和 TXB2含量。结果　实验组大鼠出现蛋白尿、 SCr和 BUN升高以及肾小管细胞
变性、肾间质纤维化等异常 ,其尿、血浆和肾组织中 6-keto-PGF1α /TXB2比值均显著下降。结论　前列腺素系统异常
在关木通引起的慢性肾脏损害的发生过程中起重要作用。
关键词: 关木通 ;慢性肾衰竭 ; 6-ke to-PGF1α; TXB2
中图分类号: R285. 53　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 02 0149 04
·149·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 2期 2003年 2月
⒇收稿日期: 2002-05-13基金项目:国家自然科学基金资助 ( 39900193)作者简介:叶志斌 ( 1965— ) ,男 ,安徽人 ,博士 ,副教授 ,主要研究中药肾毒性和急性肾衰发病机制。
* 全军临床药理中心
Abnormal prostaglandin production in pathogenesis of chronic
renal failure induced by cane of Aristolochia manshuriens is
YE Zhi-bin, XU Jing , LI Zhen, LU Guo-cai
( Depa rtment o f Nephrolog y , Shanghai Changhai Hospital, Shanghai 200433, China )
Abstract: Object　 To understand i f abno rmal prostag landin production is involv ed in the pathogenesis
o f chronic renal failure induced by the cane o f Aristolochia manshuriensis Kom. Methods　 Rats in experi-
menta l g roup w ere giv en 10 g /kg of the cane o f A. manshuriensis everyday for eight weeks. The control
g roup w as giv en the same amount of tap w ater. At the 8th week, kidney patholo gy , renal function, serum
creatinine ( SCr) , blood urea nit rog en ( BUN ) and urinary pro tein excretion w ere recorded. The content of
6-keto-PGF1α and TXB2 in the urine, plasma and renal co rtex tissues w ere determined. Results　 The uri-
nary protein excretion, SCr and BUN had been significantly increased in ra t experimental g roup. Micro-
scopic examina tion o f the kidney revealed focal degeneration and necro sis of tubular epi thelial cell s and
slight intersi ti tial fibrosis. The ratio o f 6-keto-PGF1α / TXB2 was ma rkedly decreased in the urine, plasma
as w ell a s renal cortex ti ssues. Conclusion　 Abno rmal prostag landin production is an impo rtant pathogenic
facto r in the pathogenesis o f chronic renal fai lure induced by the cane of A. manshuriensis
Key words: the cane o f Aristolochia manshuriensis Kom. ; chronic renal fai lure; 6-keto-PGF1α; TXB2
　　短期内大剂量应用关木通可致急性肾功能衰
竭 ,而长期小剂量服用关木通或含有关木通的复方
制剂可引起慢性肾脏损害 [1～ 5 ]。关木通肾脏毒性的
机制还不清楚 ,现有资料显示 ,在大剂量关木通所引
起的急性肾衰竭的发生过程中 ,关木通成分对肾小
管上皮细胞的直接毒性是导致肾脏损害的主要原因
之一 ,但对于是否存在其他重要发病机制 ,目前还缺
乏有关研究。由于关木通引起慢性肾脏病变 ,其肾脏
病理上均可见较明显的血管病变 ,故我们推测一些
与血管病变有关的可引起血流动力学异常的血管活
性物质在本病的发病过程中可能也起重要作用。本
研究建立关木通慢性肾脏损害模型 ,观察前列腺素
系统异常在本病发生中的作用。
1　材料与方法
1. 1　实验动物: 雌性 Wistar大鼠 ,购自第二军医大
学实验动物中心 ,体重 150～ 200 g。
1. 2　关木通水煎剂制备:关木通采自吉林省长白山
地区 ,由我院临床药理中心王忠壮教授鉴定为马兜
铃属植物东北马兜铃 Aristolonchia manchuriensis
Kom的藤茎。取关木通生药 1 000 g ,加 20 L自来
水浸泡 30 min后 ,加热至沸腾 ,煎煮 1 h,倾出药
液 ,残渣加入 5 L水继续煎煮 1 h,合并两次药液 ,
过滤、浓缩后制成 500 mL水煎剂 ( 2 g生药 /mL) ,
4℃ 保存 ,使用前加热至 37℃。
1. 3　分组: 随机分为 2组 ,各组 10只。实验组每天
ig关木通 10 g /kg体重 ,共 8周 ,对照组每天 ig与
实验组相等剂量的自来水。 实验期间所有大鼠自由
饮食。于实验结束时取内眦静脉血、 24 h尿液和肾组
织以测定 6-keto-PGF1α和 TXB2 , SCr和 BUN以及
尿蛋白定量 ,并取肾组织进行一般组织形态学检查。
1. 4　指标测定方法: PGI2 ( 6-keto-PGF1α) 和 TX A2
( TXB2 )测定:采用放射免疫分析法 ,药盒由苏州医
学院血栓室提供 ,操作方法按说明书。 SCr和 BUN
测定用 Beckman全自动生化分析仪 ;尿蛋白定量测
定用考马斯亮蓝法。肾组织用 4% 多聚甲醛磷酸缓
冲液固定 ,常规石蜡包埋、切片 ,行 HE及 PAS染
色 ,普通光镜下观察间质纤维化和肾小球系膜硬化
程度。肾间质纤维化程度和肾小管上皮细胞变性坏
死按病变性质进行半定量积分 ,分为 0～ 3级: 0表
示无病变 ,+ 表示病变呈小灶性分布 ,+ + 表示病变
呈散在性片状分布 ,+ + + 表示病变呈弥漫性分布 ,
肾小球系膜硬化程度亦以+ ～ + + + 表示。
1. 5　统计学处理: 计量数据以 x± s表示 ,组间差异
采用 t检验 ,半定量数据比较采用 Riddit分析。
2　结果
2. 1　 SCr, BUN和尿蛋白改变: 实验组大鼠 SCr,
BUN和尿蛋白显著增加 ,提示有慢性肾脏损害 ,见
表 1。
表 1　饲喂关木通 8周大鼠 SCr, BUN和尿蛋白的改变
Table 1　 Changes of SCr, BUN and urinary protein of rats
treated with Guanmutong for eight weeks
组别 n BUN
/( mm ol· L- 1)
SCr
/(μmol· L- 1)
24 h尿蛋白
/mg
实验 10 8. 7± 1. 1△ 75. 2± 5. 3△ 26. 1± 6. 7△
对照 10 4. 4± 0. 2 38. 2± 2. 9 5. 7± 1. 1
　　与对照组相比: △ P < 0. 01
　　△ P < 0. 01 vs con t rol g rou p
·150· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 2期 2003年 2月
2. 2　肾脏形态学改变:实验组肾间质轻度水肿 ,有
少量淋巴细胞浸润 ,散在灶性肾小管上皮细胞空泡
变性、胞浆脱落 ,偶见小坏死灶 ,肾小球系膜区偶见
轻度增生和硬化 ,肾间质呈轻度纤维化 ,肾间质小血
管未见明显改变 ,见表 2。
表 2　饲喂关木通 8周大鼠肾脏组织形态学检查
Table 2　 Renal histomorphology examination of rats
treated with Guanmutong for eight weeks
组别 n 肾间质纤维化
- + + + + + +
小管细胞空泡变性、坏死
- + + + + + +
系膜硬化
- + + + + + +
实验 10 5 5 0 0 0 1 6 3△△ 6 4 0 0
对照 10 9 1 0 0 7 3 0 0 9 1 0 0
　　与对照组相比: △ P < 0. 05　△△ P < 0. 01
　　△ P < 0. 05　△△ P < 0. 01 vs cont rol group
2. 3　血浆 6-keto-PGF1α和 TXB2: 实验组血浆
6-keto-PGF1α无明显改变 ,但 TXB2显著升高 , 6-ke-
to-PGF1α /TXB2显著下降 ,见表 3。
表 3　饲喂关木通 8周血浆 6-keto-PGF1α和 TXB2改变
Table 3　Changes of plasma 6-keto-PGF1α and TXB2 of rats
t reated with Guanmutong for e ight weeks
组别 n 6-k eto-PGF1α
/( pg· mL- 1 )
TXB2
( pg· mL- 1)
6-keto-PGF1α /
TXB2
实验 10 87± 12 　 967± 67△ 0. 09± 0. 02△
对照 10 95± 11 　 175± 35 0. 54± 0. 08
　　与对照组相比: △ P < 0. 01
　　△ P < 0. 01 vs cont rol group
2. 4　尿液 6-keto-PGF1α和 TXB2改变:实验组尿液
6-keto-PGF1α和 TX B2均显著升高 ,尿液 6-keto-
PGF1α /TXB2显著下降 ,见表 4。
表 4　饲喂关木通 8周大鼠尿 6-keto-PGF1α和 TXB2改变
Table 4　Urinary excretion of 6-keto-PGF1α and TXB2
of rats treated with Guanmutong for eight weeks
组别 n 6-k eto-PGF1α
/ ( ng· mL- 1 )
TXB2
/ ( ng· mL- 1 )
6-keto-PGF1α /
TXB2
实验组 10 　 46± 8△ 　 92± 13△ 0. 50± 0. 11△
对照组 10 　 28± 9 　 27± 7 1. 03± 0. 21
　　与对照组相比: △ P < 0. 01
　　△ P < 0. 01 vs cont rol group
2. 5　肾皮质 6-keto-PGF1α和 TX B2改变:肾皮质 6-
keto-PGF1α略升高 ,但无显著意义 , TXB2则显著升
高 ,见表 5。
3　讨论
　　关木通属马兜铃属植物 ,其中所含的马兜铃酸
具有肾脏毒性。有关关木通慢性肾脏毒性作用的动
物实验很少 ,对于关木通肾脏毒性的机制更缺乏研
究。关木通引起的慢性肾脏损害主要累及肾小管和
肾间质 ,提示其主要通过对肾小管上皮细胞的直接
表 5　饲喂关木通 8周大鼠肾皮质 6-keto-PGF1α和 TXB2改变
Table 5　Renal cortical content of 6-keto-PGF1α and TXB2
of rats treated with Guanmutong for eight weeks
组别 n 6-keto-PGF1α
/( pg· mg- 1 )
TXB2
/ ( pg· mg- 1)
6-k eto-PGF1α /
TXB2
实验 10 　 97± 14 105± 21△ 0. 93± 0. 18△
对照 10 　 82± 12 47± 9 1. 74± 0. 36
　　与对照组相比: △ P < 0. 01
　　△ P < 0. 01 vs con t rol g rou p
毒性或影响肾间质血液供应而导致肾脏受损 [6, 7 ]。在
关木通引起急性肾衰竭的动物实验中观察到大剂量
关木通可导致急性肾小管坏死 ,但这些研究中关木
通的用量很大 ,因此不能据此就认为对肾小管上皮
细胞的直接毒性作用就是其引起慢性肾损害的主要
原因。本研究给予大鼠 10 g /kg关木通 8周 ,虽然这
些大鼠肾功能已经明显受损 ,但肾脏病理改变并不
严重 ,仅表现为肾小管上皮水肿、变性和细胞散在的
很少的小坏死灶 ,不能很好解释肾功能衰竭的发生 ,
提示还有其他机制参与肾功能衰竭的发生。 PGI2 /
TX A2值是决定肾血流量和肾功能的关键因素之一 ,
此系统异常在肾缺血及多种肾毒性物质等引起的肾
损伤中起重要作用。 PGI2和 TXA2的分子均不稳定 ,
但通过测定其代谢产物 6-keto-PGF1α和 TXB2可准
确了解其各自的含量。本研究发现 ,关木通慢性肾中
毒大鼠血液、尿液和肾组织中 6-keto-PGF1α( PGI2 )
与 TXB2 ( TX A2 )的比值显著下降 ,提示前列腺素系
统失衡与关木通的慢性肾损害的发生有关。 关木通
引起肾组织和血液中前列腺素异常的机制可能与其
对血管内皮细胞的毒性有关 [6, 8～ 10 ]。
本研究表明 ,关木通所致肾损害的发病机制可
能远不仅限于其对肾小管上皮细胞的直接毒性作
用 ,前列腺素系统或其它影响肾脏血流量的血管活
性因子 ,可能也起非常重要的作用。进一步研究关木
通对血管内皮细胞的损伤是否完全由马兜铃酸本身
所致 ,将对进一步明确哪些中草药可能具有肾毒性
或哪些成分可影响关木通的肾毒性的大小具有重要
意义。
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板蓝根有效部位对脂多糖致小鼠血清中 TNFα和 NO的影响
刘云海 ,林剑国 ,雷　婷⒇
(华中科技大学同济医学院附属同济医院 药学部 ,湖北 武汉　 430030)
摘　要: 目的　探讨板蓝根有效部位小鼠体内对脂多糖刺激产生 TN Fα和 NO的影响。方法　从板蓝根中提取分离
出有效部位并配制成 2% , 1% , 0. 5% 三种浓度的样品液 ;将用卡介苗致敏的小鼠随机分为 5组 ,实验组分别 ig
2% , 1% , 0. 5% 样品液各 0. 4 mL ,对照组和模型组给予相同量生理氯化钠溶液 ; 0. 5 h 后 ,实验和模型组分别尾 iv
脂多糖 800 ng /20 g , 9 h后眼眶取血 ,制备血清 ,用 ELISA法测 TN Fα,用 Griess法测 NO浓度。结果　板蓝根有
效部位高、中、低 3种样品液对脂多糖刺激小鼠释放 TN Fα和 NO均有抑制作用 ,抑制率分别为 83. 59% , 67. 92% ,
21. 61% ,对 NO抑制率分别为 98. 66% , 70. 77% , 20. 33%。 结论　板蓝根有效部位对脂多糖刺激小鼠体内释放
TN Fα和 NO有抑制作用 ,且有剂量依赖性。
关键词: 板蓝根有效部位 ;内毒素 ;肿瘤坏死因子 ( TNFα) ;一氧化氮 ( NO )
中图分类号: R285. 5　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 02 0152 03
Effect of active part from Radix Isatidis on content of TNFα
and NO induced by LPS in mice serum
LIU Yun-hai, LIN Jian-guo , LEI Ting
( Depa rtment o f Pharmacy, Tong ji Hospital o f Tong ji Medical Co lleg e, Hua zhong Univ ersity
o f Science and Tech no lo gy , Wuhan 430030, China )
　　Key words: activ e pa rt f rom Radix Isatidis; endotoxin; TN Fα; NO
　　细菌内毒素 ( endotoxin, ET)是革兰阴性菌细
胞外膜中的脂多糖 ( lipopo saccha ride, LPS)成分 ,
可刺激机体防御系统过度释放炎性因子——肿瘤坏
死因子 ( TN Fα) 及一氧化氮 ( NO )等 ,引起发热、
弥漫性血管内凝血 ( DIC)、多器官功能衰竭 ,以至死
亡。近年来的研究发现 ,β -内酰胺类抗生素可导致体
内 ET增加 [1 ] ,铜绿假单胞菌败血症的病死率仍高
达 80%～ 90% [2 ] ,并不因没有使用足量的敏感抗菌
药 ,而是因至今没有理想的抗内毒素药物。 板蓝根
( BLG)抗内毒素作用已有报道 [3～ 5] ,为了寻找 BLG
抗 ET活性物质 ,我们将其分成不同极性部位 ,用体
内外多种实验方法筛选出抗 ET活性最强的有效部
位 [6 ] ,本研究探讨该部位在小鼠体内对 LPS刺激释
放 TN Fα和 NO的影响。
1　材料与仪器
1. 1　板蓝根有效部位样品液制备:板蓝根 (产于河
北省邢台县 ,经邢台市药材公司鉴定为十字花科植
物菘蓝 Isatis indigotica fo rt的干燥根 ) 粉碎成细
粉 ,用 95% 乙醇浸泡后按常规方法渗漉提取 ,减压
浓缩至无醇味 ;用石油醚反复萃取至除尽石油醚部
·152· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 2期 2003年 2月
⒇收稿日期: 2002-08-02基金项目:国家自然科学基金资助项目 ( 39870872) ;卫生部科学研究基金资助项目 ( 98-2-110)作者简介:刘云海 ( 1942— ) ,男 ,江苏如东人 ,主任药师 , 1965年毕业于中国药科大学药学专业 ,多年来一直从事医院药学工作。
E-mai l: yh liu@ tjh. t jmu. ed u. cn