全 文 ：几种滇产金丝桃属植物金丝桃素的含量测定
赵
晶1,贺建昌1,高
玮1,代
波2, 吴孟岚2

( 1
成都军区昆明总医院, 云南 昆明
650032
2
贵阳医学院 药学系, 贵州 贵阳
550000)


金丝桃属 Hypericum L. 植物的主要成分金丝
桃素具有抗病毒 (包括 HIV )、抗肿瘤和抗抑郁作
用[ 1]。临床除用于抗抑郁、调节中枢神经外, 还是
一种有前途的内源性光敏剂。可用于肿瘤的光化学
诊断与治疗,并具有显著的抑制人体免疫缺陷病毒
(H IV)及其他一些反转录病毒作用, 国外有研究用
于爱滋病的治疗[ 2]。本实验采用 HPLC 对云南的 5
种金丝桃属植物中的金丝桃素进行含量测定, 为云
南金丝桃属植物新资源的开发利用提供理论依据。
1
材料与方法
1
1
仪器: Beckman System Gold 高效液相色谱仪、
166紫外检测仪( System Gold Programmable Detector
Module 166) , 20
L 进样器( System Organizer)、二元梯
度泵( Beckman 110B Solvent Delivery Module)。
1
2
原植物样品:遍地金 H . w ightianum Wall. ex
Wight et Arn
、地耳草 H . j aponicum Thunb. ex
M urray、扬子小连翘 H . f aberi Keller、云南小连翘
H . pet iolulatum subsp. yunnanense ( Franch. ) N.
Robson、短柄小连翘 H . p etiolulatum Hook. f. et
T homs. ex Dyer采自云南东部和西部山区。
1
3
试剂:金丝桃素(购自德国 Sigma公司) ,甲醇、乙
腈为色谱纯,乙醇、乙酸乙酯、石油醚、乙酸为分析纯。
1
4
标准液配制: 将对照品金丝桃素 1 mg 置 50
mL 容量瓶中, 定容, 配成金丝桃素为 0. 01 mg/ mL
的贮备液备用。
1
5
样品液制备:遍地金、地耳草、扬子小连翘、云南
小连翘、短柄小连翘全草干燥粉碎,分别称取 200 g,
用10倍量 70%乙醇渗漉提取。提取液浓缩至小体
积,与硅胶粉混合、阴干、研细、过筛( 140目)制得提取
物的干燥硅胶粉,每克硅胶粉分别相当于干燥原植物
遍地金 1. 979 g,扬子小连翘 2. 861 g, 云南小连翘 3.
099 g,短柄小连翘 2. 516 g,地耳草 3. 227 g。分别称
取以上含植物提取物的硅胶粉 10 g, 均匀、紧密地装
在已填有 50 g 硅胶H( 200~ 260目)的减压柱内。用
石油醚-乙酸乙酯( 3
1) 200 mL 将其大部分杂质洗出,
再用乙酸乙酯约 600 mL将其含金丝桃素的活性部位
洗下,收集乙酸乙酯洗脱液,回收溶剂, 用甲醇溶解,
溶液转入100 mL 容量瓶中定容备用。
1
6
色谱条件: 色谱柱为 HYPERSIL ODS ( 250
mm
4. 6 mm , 10
m) ; 流动相: 甲醇-乙腈-乙酸=
50
50
0. 5; 流速: 0. 6 mL/ min; 检测波长: 590 nm;
柱温: 25
。
1
7
标准曲线:精密吸取 0. 004 8 mg/ mL金丝桃素标准
贮备液 0. 00, 1. 00, 2. 00, 4. 00, 8. 00 mL,分别置于10 mL
容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀。各取 20
L进样,
按1. 6色谱条件测定,得回归方程Y= 0.590 75X+ 0. 235
653, r= 0.999 7。由此可知在 0. 000 48~ 0. 003 84 mg/
mL 具有良好的线性关系。
1
8
精密度与重复性实验:准确吸取 20
L 标准溶
液( 0. 4
g / mL) ,于上述色谱条件下连续进样 5次,
测得峰面积的 RSD 为 1. 8%。取遍地金植物粉末
0. 5 g,按样品制备方法制备 5份样品溶液, 按 2. 1
测定金丝桃素含量, RSD 为 2. 4%。
1
9
回收率实验:精密称取遍地金样品0. 5 g, 加入
10
g / mL 金丝桃素对照品溶液 1. 0 mL, 其余操作
同样品制备及测定, 测得金丝桃素平均回收率
95. 8% , RSD 为 2. 7%( n = 5)。
1
10
稳定性试验:依法制备供试样品溶液,连续取
样5份,间隔 1. 5 h进样,测定样品峰面积积分值分别
为 0. 144 6, 0. 143 9, 0. 150 8, 0. 144 4, RSD 为 2. 00%
( n= 5)。表明样品溶液至少在 6 h内稳定。
2
结果
2
1
将供试样品液稀释( 1
10) ,以微孔滤膜过滤
后于 590 nm 处进行 HPLC 分析, 所要测定的金丝
桃素与其他杂质分离均较好, 无干扰。见图 1-
~

。
2
2
金丝桃素含量测定:结果如表 1。
3
讨论
3
1
流动相选择:为了得到较好的分离效果,本实
验采用甲醇、乙腈、乙酸的混合液作为流动相, 并对

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中草药
Chinese T raditional and Herbal Drugs
第 34 卷第 5 期 2003年 5月

收稿日期: 2002-07- 23基金项目:云南省自然科学基金资助项目( 1998C108M)作者简介:赵
晶( 1952- ) ,女,云南昆明人,副主任药师,理学博士,主要从事医院药学工作。Tel: (0871) 5344730
表 1
5种植物中金丝桃素含量
Table 1
Hypericin in five plants of Hypericum L

原植物 金丝桃素含量/ ( mg
100g- 1)
云南小连翘 9. 741
地耳草 6. 250
短柄小连翘 9. 265
扬子小连翘 4. 465
遍地金 2. 745
其配比作了系列比较。发现当流动相配比为甲醇-乙腈-
乙酸= 50
50
0. 5时, 样品中金丝桃素与其他物质
分离效果良好,保留时间为 2. 92 min(图 1-
)。
3
2
由于诸多客观因素的影响,仅靠保留时间定性还不
够可靠。为了准确鉴定未知峰,先采用薄层分析法与标
准品对照, 5种植物提取物均出现与金丝桃素标准品Rf
相同,在254 nm紫外光下呈现红色荧光的斑点(图 2)。

-金丝桃素标准品
-地耳草
-遍地金
-云南小连翘
-扬子小连翘
-短柄小连翘

-hypercin standard
-H . japonicum
-H . w ightianum
-H . pet iolulatum subsp. yunnanence

-H . faberi
-H . petiolulatum
图 1
HPLC图谱
Fig
1
HPLC chromatogram
1-标准品
2-云南小连翘
3-短柄小连翘
4-扬子小连翘
5-地耳草
6-遍地金
1-standard
2-H. petiolulatum subsp. yunnanence
3-H. petiomlatun
4-H. f aberi
5-H . japonicum
6-H . wightianum
图 2
金丝桃素标准品与 5 种植物提取物的 TLC
Fig
2
TLC spectrum of five plants of Hypericum L

3
3
金丝桃属植物中金丝桃素的分布主要是贯叶
连翘 H . perf oratum [ 3]。国内有研究者发现地耳
草、扬子小连翘中含有金丝桃素,本研究首次发现遍
地金、云南小连翘、短柄小连翘及生长于云南的地耳
草和扬子小连翘中含有金丝桃素,并测定了其含量。
References:
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Pan Y H, Guo B L. The out line of the studies on nat ive Hyper-
icum plants [ J]
J Chin Med Mater (中药材) , 1993, 16( 3 ) :
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[ 2]
Pan Y H , Guo B L, Peng Y
T he outlook of the resource an du-
tilizat ion on nat ive Hyperi cum plants [ J]
J Chin Med Mater
(中药材) , 1993, 16( 3) : 14-18

[ 3]
Informat ion Center of Chinese Herbal Medicine. State Pha-rme-
ceut ical Administ rat ion of China
Hand book of A cti v e Con-
sti tuen ts in Phytomedicine (植物药有效成分手册 ) , Beijing:
People
s Medical Publishing House, 1986

粉萆 和绵萆 中薯蓣皂苷元的含量测定
莫可丰

(南宁市药品检验所, 广西 南宁
530001)


粉萆 和绵萆 均为
中华人民共和国药典

2000年版收载品种[ 1]。粉萆 为薯蓣科植物粉背
薯蓣 Dioscor ea hypoglauca Palibin 的干燥根茎,具有
利湿去浊,祛风除痹之功效;用于膏淋、白浊、白带过
多、风湿痹痛、关节不利、腰膝疼痛。绵萆 为薯蓣
科植物绵萆 D . sep temloba Thunb. 的干燥根茎,
具有利湿去浊,祛风通痹之功效, 用于淋病白浊、白
带过多、湿热疮痛、腰膝痹痛。二者均为秋冬两季采

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中草药
Chinese T raditional and Herbal Drugs
第 34 卷第 5 期 2003年 5月

收稿日期: 2002-07- 24作者简介:莫可丰( 1963- ) ,女,广西南宁市人,副主任药师, 1983年毕业于广西中医学院药学系中药专业,主要从事药品检验分析工作,研究方向为药品质量标准及制定。Tel: ( 0771) 3132340