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1-PE　 2-NE　 3-E　 4-NPE　 5-ME　 6-内标
1-PE　 2-NE　 3-E　 4-NPE　 5-ME　 6-Propanolol ( i. s. )
图 1　对照品 (Ⅰ )和供试品溶液 A , B,C电泳图
Fig. 1　 Electropherograms of ref erence substances (Ⅰ ) and sample solutions A, B, C
黄碱中一种或两种生物碱含量 ,而同时分离分析多
种麻黄碱类生物碱的方法主要是 HPLC法 [2, 3 ]和
CE法 [ 4] ,但前者分离效率低且分析时间较长 ,前处
理步骤繁琐 ; CE法均采用水溶液系统 ,需加入多种
添加剂 ,有些添加剂昂贵且不易得 ,而且添加剂的加
入使分离体系复杂 ,可能会影响样品检测和分离重
现性。 本文所采用的 NACE法体系简单 ,分离效率
高 ,适用于药材中麻黄碱类生物碱的含量测定。
3. 2　测定条件的选择:通过对有机溶剂的种类和比
例 ,醋酸铵溶液的浓度等条件的摸索 ,确定了最佳分
离条件 [5 ]。
3. 3　提取条件的选择:总生物碱的溶剂提取方法中
可用的溶剂有水 -有机溶剂、酸水 -有机溶剂、醇-有
机溶剂、碱-有机溶剂等 ,根据麻黄碱自身特点 ,现多
采用前两种溶剂 [6 ] ,即先用水或酸水提取后 ,再经过
乙醚及氯仿的萃取才能得到。实验结果表明 ,以主成
分伪麻黄碱的提取率为标准 ,以 1% HCl溶液为溶
剂 ,中药麻黄的浸提效果最好 ,本实验中比较了未萃
取液 ( A)和萃取液 ( C)的各组份含量情况 ,两者差异
没有显著性。由于毛细管电泳自身的优势 ,如分析高
效、快速、简便 ,柱不易受污染等 ,中药提取液不经萃
取去除杂质即可直接进行 CE分析 ,简化操作步骤 ,
使测定回收率提高。
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杜仲中活性成分的分布及其累积动态变化规律的研究
戚向阳 1 ,陈维军 2 ,张声华 1
( 1. 华中农业大学 食品科学系 ,湖北 武汉　 430070;　 2. 中国化工宁波进出口公司 ,浙江 宁波　 315000)
摘　要: 目的　研究产地、生长季节及采后处理方式对杜仲皮、叶中 5种主要生物活性成分含量的影响。 方法　利
·1129·中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 12期 2003年 12月
收稿日期: 2003-03-25基金项目:湖北省重点攻关课题 ( 952P0506)作者简介:戚向阳 ( 1968- ) ,女 ,湖北枣阳 ,副教授 ,博士 ,主要从事天然产物化学与保健功能的研究。 　 Tel: ( 027) 87282111　
E-mai l: qxiangyang@ mai l. hzau. edu. cn
用 HPLC法测定杜仲皮、叶中 5种主要生物活性成分的含量。结果　不同产地的杜仲皮、叶其生物活性成分含量相
差悬殊 ,且同一产地的杜仲皮、叶中各种主要生物活性成分的含量没有一定相关性 ,并不随其他成分含量的增加而
增加。 杜仲中生物活性成分含量随季节变化而变化 ,杜仲皮、叶的最佳采收季节分别为 4, 5和 7月 ,且采收后的杜
仲皮、叶应及时处理使酶失活 ,避免自然干燥过程中胞内酶分解活性成分。 此外 ,杜仲皮和叶中生物活性的含量差
异很大 ,但有一定的互补性。 结论　产地、生长季节及采后处理方式对杜仲皮、叶中 5种主要生物活性成分含量的
影响很大 ,且不能简单的以叶代皮。
关键词: 杜仲 ;活性成分 ;分布 ;动态变化
中图分类号: R282. 6　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 12 1129 05
Studies on distribution and accumulative dynamic variation of bioactive
components inEucommia ulmoides
QI Xiang-yang1 , CHEN Wei-jun2 , ZHANG Sheng-hua1
( 1. Depar tment of Food Science, Huazhong Ag ricultura l Univ ersity, Wuhan 430070, China;
2. Sinoch em Ningbo Impo rt. & Expor t. Co rpo ration, N ingbo 315000, China)
Abstract: Object　 To study the effects of dist ricts, seasona l v ariations and treatments in past-harv est
on the fiv e main bioactiv e components in the barks and leaves of Eucommia ulmoides Oliv . Methods　 The
contents of th em in the bark and leaves of E. ulmoides were determined by RP-HPLC. Results　 The con-
tents of (+ ) -pino resinol di-O-β -D-g lucopy ranoside ( PG) , (+ )-sy ringaresinol di-O-β-D-g lucopy ranoside
( SG) , cho rgenic acid ( CGA) , g enipo side ( GP) , geniposidic acid ( GA) among the sample o f E. ulmoides
f rom di fferent g rowing dist ricts w ere obv ious di fference. Besides, the amount of dif ferent bioactiv e compo-
nents in the same sample had no co rrelation. Seasonal va riation and dif ferent past-harv est t rea tments had
g rea t influence on the bioactiv e component in E. ulmoide. Based on the monthly v ariation o f thei r main
bioactiv e component , the sui table seasons fo r harv est of the ba rks and leaves of E. ulmoides a re April,
May and July respectiv ely, and int racellula r enzymes in the f resh barks and leaves co llected should be inac-
tiv ated imedia tely befo re drying to avoid lossing the bioactiv e components. In addition, betw een the barks
and leaves o f E. ulmoides , the major bio activ e component had g rea t dif ferences, but had complementarity.
Conclusion　 The districts, seasonal va riatons and past-ha rv est t reatments have g rea t effects on the con-
tents of fiv e main bioactiv e components in the barks and leaves o f E. ulmooides, and the barks couldn t be
replaced by the leaves simply.
Key words: Eucommia ulmoides Oliv . ; bioactiv e components; distribution; dynamic variation
　　杜仲 Eucommia ulmoides Oliv . 系杜仲科杜仲
属植物 ,为我国特有的经济树种。其主要化学成分为
木脂素类 ( lignans)、环烯醚萜类 ( iridoids)、苯丙素
类 ( phenylpropanoids)、多糖、黄酮等化合物 [1, 2 ] ,具
有消炎抑菌、镇静止痛、利尿、补肾降压、增强免疫功
能及抗癌、抗疲老、抗衰老、减肥等诸多功效 [2～ 4 ]。其
中 ,松脂醇二葡萄糖苷 [ (+ ) -pinoresinol di O-β -D-
g lucopyranoside, PG]、丁香脂醇二葡萄糖苷 [ (+ ) -
sy ringaresinol di O-β -D-glucopy rano side, SG ]、绿
原酸 ( chlorog enic acid, CGA)、京尼平苷 ( genipo-
side, GP)及京尼平苷酸 ( g enipo sidic acid, GA)为杜
仲中重要的生物活性成分 [1～ 3, 5 ]。目前 ,随着杜仲的
药理作用和保健功能逐步被人们所认识 ,在国外尤
其是日本开发出多种含杜仲提取物的功能性食品、
化妆品、药品和饲料等 [5 ]。 而我国作为杜仲的主产
地 ,有十分丰富的杜仲资源 ,栽培面积达 1. 6× 105
hm
2 [2 ] ,但关于杜仲的研究还多局限于育苗、造林等
传统领域 ,在制药、保健品开发尤其是杜仲活性成分
分析等基础领域的研究还较薄弱。因此 ,为充分合理
地开发杜仲资源 ,本实验应用 HPLC法分析了产
地、生长季节及采后处理方式对杜仲皮、叶中主要活
性成分的影响 ,这一研究尚未见有关文献报道。
1　材料与方法
1. 1　材料:杜仲皮、叶均采自湖北省郧县、通城及武
汉 ,经湖北中医学院陈绪伦教授鉴定为杜仲树皮
和叶。
1. 2　主要仪器与试剂: Shimadzu SCL- 6A高压液
相色谱仪 ;松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂醇二葡萄糖
·1130· 中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 12期 2003年 12月
苷、京尼平苷、京尼平苷酸均由 Takehi Deyama
Ph. D赠送 ;绿原酸由德国进口 ;甲醇、冰醋酸均为
分析纯。
1. 3　实验方法
1. 3. 1　杜仲皮、叶中松脂醇二葡萄糖苷及丁香脂醇
二葡萄糖苷含量的测定:样品处理:准确称取适量样
品粉末 ,置于索氏提取器中 ,加 60 mL氯仿回流 6
h,挥去氯仿 ,再置于索氏提取器中用 60 m L甲醇回
流 6 h ,将甲醇溶液浓缩至一定体积 ,用甲醇定容至
25 m L, 0. 45μm微孔滤膜滤过后进行 HPLC分析。
色谱条件: 色谱柱 YWA - C18 ( 10μm, 4. 6
mm× 250 mm);流动相: 28%甲醇水溶液 ;柱温:室
温 ;流速: 1. 0 mL /min;紫外检测器 0. 04 AU FS;检
测波长 232 nm;进样量 5μL。根据标样的保留时间
进行定性 ,按峰面积计算各组份含量。
1. 3. 2　杜仲中京尼平苷、京尼平苷酸及绿原酸含量
分析:样品处理:准确称取一定量样品粉末 ,用 10倍
量的水于 40℃温度下提取 5次 ,每次 30 min。将水
提取液真空浓缩至一定体积后 ,用水定容至 25 mL,
经过 0. 45μm微孔滤过后进行 HPLC分析。
色谱条件: 色谱柱 YWA - C18 ( 10μm, 4. 6
mm× 250 mm);流动相:甲醇 -水 -冰醋酸 ( 19∶ 81∶
1) ; 柱温: 室温 ; 流速: 1. 0 m L /min;紫外检测器
0. 04 AU FS;检测波长 240 nm;进样量 5μL。根据标
样的保留时间进行定性 ,按峰面积计算各组份含量。
2　结果与分析
2. 1　不同产地杜仲中主要成分的含量分析:产地的
气候、经纬度、海拔、地质、土壤、树龄及树种等诸多
因素都可能影响杜仲的质量和其生物活性成分的含
量。对来自湖北不同地区的杜仲原料进行了分析 ,结
果见表 1。
表 1　不同产地杜仲中生物活性成分含量
Table 1　 Bioactive component inE . ulmoides
of dif ferent growing districts
产地 含量 / ( mg· g
- 1)
　 PG 　 SG 　 GA 　 CGA 　 GP
郧西杜仲皮 1. 431 0. 56 2. 687 　 0. 217 0. 073 6
郧西杜仲叶 - - 0. 449 10. 026 　 -
通城杜仲皮 1. 078 0. 944 3. 429 0. 317 0. 236
通城杜仲叶 - 0. 310 1. 240 9. 753 　 -
武汉杜仲皮 3. 673 0. 446 2. 471 0. 177 1. 881
武汉杜仲叶 - 0. 247 2. 414 10. 505 　 -
　　杜仲皮、叶均为室温下阴干 ,“ - ”表示未检出
Barks and leav es of E . ulmoid es both dried at room tempera-
tu re, “ - ” sh ow s not to b e determined
由表 1可看出 ,不同产地的杜仲皮、叶其生物活
性成分含量相差悬殊。就所分析的材料而言 ,杜仲叶
中 SG的含量 ,以通城产地的最高 ,为 0. 310 mg /g。
而 GA的含量以武汉产的杜仲叶最高 ,达 2. 414
mg /g ,郧杜仲叶中 GA的含量最低 ,仅为 0. 449
mg /g ,且未检出丁香脂醇二葡萄糖苷。 3个产地的
杜仲叶其绿原酸的含量则相差不大。不同产地的杜
仲皮 ,含 PG、 GP最丰富的为武汉产地的 ,分别为
3. 673, 1. 881 mg /g ,但其丁香脂醇二葡萄糖苷的含
量最低 ,仅为 0. 446 mg /g。通城杜仲皮中 SG、 GP及
CGA的含量均高于其他产地。由此可知 ,武汉和通
城产地的杜仲皮、叶的质量要比郧县产地高。据文献
报道 ,郧县因出产的杜仲皮厚 ,杜仲胶丰富而被认为
是杜仲的主要栽培区 ,其生产的杜仲称为杜仲道地
药材 [7 ]。 而上述的研究结果表明 ,郧西产地的杜仲
皮、叶其生物活性成分并不很高 ,而且同一产地的杜
仲皮、叶中主要生物活性成分的含量没有一定的相
关性 ,并不随其他成分含量的增加而增加 ,因此 ,仅
从外观判断杜仲的质量及主要栽培区是缺乏科学依
据的 ,应针对杜仲的不同疗效和杜仲中生物活性成
分的药理作用、含量来确定杜仲最适发展区域及筛
选培育优良品种。许多文献报道 ,杜仲皮与叶的化学
成分和药理作用相符 ,可以以叶代皮 [2 , 6] ,而表 1的
结果表明 ,对于杜仲中 PG, SG, GP, GA和 CGA 5
种生物活性成分 ,杜仲皮、叶的含量相差很大 ,但有
一定的互补性 ,杜仲叶中未检出 PG及 GP,且其 SG
和 GA的含量均远远低于同产地的杜仲皮 ,但杜仲
叶中 CGA的含量却很丰富 ,为同产地杜仲皮中绿
原酸含量的 30. 77～ 59. 33倍。因此 ,不能单纯的以
叶代皮 ,而应根据杜仲皮、叶中生物活性成分含量的
差异 ,将杜仲皮、叶提取物以一定比例配伍制备杜仲
保健品或药品 ,以充分发挥杜仲的保健作用。
2. 2　生长季节及采后处理方式对杜仲中生物活性
成分的影响:杜仲中生物活性成分含量受生长季节
的影响很大。本实验对采自武汉华中农业大学校园
内有 20多年树龄的杜仲树皮及同一树枝上杜仲叶
进行分析 ,比较了不同采收季节及采后处理方式对
其主要生物活性成分含量的影响 ,结果见图 1。
结果表明 ,采后处理方式对杜仲皮、叶中生物活
性成分含量的影响很大。 干燥前经过蒸汽处理的杜
仲皮、叶其主要活性成分的含量比自然干燥的高 ,其
中 ,杜仲皮、叶中属环烯醚萜类的 GA和 GP的含量
变化最显著 ,其次为杜仲叶中的 CGA,再次为杜仲
皮中 PG和 SG。 这是由于杜仲皮、叶中含有可分解
生物活性成分的胞内酶 ,采后的树皮或树叶在自然
·1131·中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 12期 2003年 12月
Ⅰ -杜仲皮中 PG含量
的变化
Ⅰ -Variation of PG in
　 bark of E. ulmoides
Ⅱ -杜仲皮中 SG含量
的变化
Ⅱ -Variation of SG in
　 bark of E. u lmoides
Ⅲ -杜仲皮中 GA含量
的变化
Ⅲ -Variation of GA in
　 bark of E. u lmoides
Ⅳ -杜仲皮中 GP含量
的变化
Ⅳ -Variation of GP in
　 bark of E. ulmoides
Ⅴ -杜仲叶中 CGA含
量的变化
Ⅴ -V ariation of CGA
in leaf of E . ulmoides
Ⅵ -杜仲叶中 GA含
量的变化
Ⅵ -Variat ion of GA in
　 leaf of E . ulmoides
- -原料采收后于室温下阴干　　 -□ -采收后的原料先用蒸汽处理 15 min,再置室温下阴干
- -h arv es ting material dired at room tem perature　 -□ -harvesting material t reated by s team for 15 min b efore drying at room temperatu re
图 1　采收季节及采后处理方式对杜仲中主要生物活性成分含量的影响
Fig. 1　 Ef fects of harvest seasonal variation and diff erent past-harvest treatments on bioactive component in E . ulmoides
干燥过程中胞内酶会使生物活性成分发生分解 ,当
新鲜树皮或树叶干燥前用蒸汽处理后 ,可使酶失活 ,
从而有效地防止分解过程的发生 ,使杜仲皮、叶中主
要生物活性成分含量保持在较高的水平。
　　此外 ,由图 1还可知 ,采后处理方式对杜仲皮、
叶中生物活性成分的影响程度同季节有关。 3- 7月
份采收的杜仲皮、叶其 GP和 GA的含量受干燥方
式的影响最大 ,干燥前经过蒸汽处理比未经过蒸汽
处理的高出十倍甚至上百倍。 6- 7月份采收的杜仲
叶其绿原酸的含量受采后处理方式的影响较大 ,二
者相差 3. 91～ 3. 78倍。至于杜仲皮中 PG和 SG的
含量受采后处理方式的影响较小。以 3— 7月采收的
杜仲皮变化较显著。上述的结果表明 ,杜仲中胞内酶
的活性随季节变化而变化。据有关文献报道 [8 ] ,杜仲
形成层在 3月中旬前处于休眠状态 , 3月下旬芽绽
开时开始恢复 ,形成层开始活动 ,同时产生木质部和
韧皮部。 4月中旬到 6月中旬 ,未成熟木质部细胞层
数增多 , 7月底形成层细胞停止分裂进入因高温诱
导的第 1次被动休眠 ,同时停止产生韧皮部。 11月
底至 12月初转入低温诱导的第 2次被动休眠。而杜
仲中一些胞内酶的活性随形成层活动周期变化而变
化 , 3- 7月是形成层活动的旺盛期 ,因此 ,在此季节
采收的杜仲皮、叶其胞内酶活性较高。采收后的杜仲
皮、叶若不及时进行处理使酶失活 ,在自然干燥或贮
藏过程中 ,胞内酶就会分解其生物活性成分 ,使其含
量大大降低甚至完全损失。
根据干燥前经过蒸汽处理的杜仲皮、叶中活性
成分的含量变化 ,发现在不同季节 ,杜仲皮中 PG及
GA的含量较恒定 ,而 GP、 SG的含量变化较大 ,在
4月 , 10- 12月采收的杜仲皮其 GP的含量较高 ,杜
仲皮中 SG的含量则以 3月 , 9- 11月采收的最高 , 7
月份的最低。 至于杜仲叶中 GA的含量从 4月份的
31. 74 mg /g到 10月份的 5. 60 mg /g ,下降达 5. 67
倍 ,而 CGA以 7月份采收的杜仲叶含量最高 ,达
20. 14 mg /g , 8- 10月份采收的杜仲叶其绿原酸的
含量趋于稳定。
综上所述 ,杜仲叶的最佳采收季节为 7月。 而选
择杜仲皮的采收季节不仅要考虑其生物活性成分含
量 ,还应考虑剥皮的难易及剥皮再生的效果。据文献
报道 [9 ] ,杜仲剥皮再生的成败同剥皮季节有很大关
系 ,剥皮应选在适当高温、多湿 (> 80% )、温差小的季
节 ,常在春夏之间 ,以树液流畅 ,皮部与木质部最易分
离时剥皮最适宜。根据这一规律及杜仲皮中生物活性
成分的季节变化 ,剥皮的最佳季节为 4- 5月份。
3　结论
具有多种药理作用的杜仲皮和杜仲叶其主要生物
活性成分的含量受产地、生长季节及采后处理方式的
影响很大。本实验的研究结果对于良种选育 ,确定其最
佳生长条件 ,探讨杜仲中活性成分的时序性 ,区域性及
其累积动态变化规律以及确保杜仲提取物和杜仲药
品、保健品的质量有重要的理论意义和实际应用价值。
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半夏栽培生态学研究
何道文 1 ,黄雪菊 2
( 1. 西华师范大学 生物系 ,四川 南充　 637002;　 2. 四川大学环境学院 ,四川 成都　 610065)
摘　要: 目的　半夏栽培生态研究。方法　对半夏 Pinellia ternata不同质量的种茎进行田间栽培实验。结果　半夏
块茎收获量随种茎质量增加 ,但相对增重则随着种茎质量的增加而减少 ;子块茎、珠芽和种子数量随着块茎质量而
增加 ,半夏繁殖系数随半夏种茎质量增大而增大 ;统计表明叶柄数量、地上部分干重、珠芽总数、最大株芽质量、花
总数与种茎的质量呈极显著正相关 ;珠芽总数与叶柄数量呈极显著正相关 ;子块茎数与种茎的增重呈负相关 ,而叶
柄数也与种茎增重负相关。 结论　半夏栽培中营养生长与生殖生长、地上部分生长与地下部分生长相互制约。
关键词: 半夏 ;珠芽 ;生长特性 ;繁殖系数
中图分类号: R282. 21　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 12 1133 03
Study on ecology in cultivation of Pinell ia ternata
HE Dao-wen
1
, HU ANG Xue-ju
2
( 1. Depa rtment o f Biolog y, China West No rmal Univ e rsity , Nanchong 637002, China; 2. Colleg e
of Environment, Sichuan Unive rsity , Chengdu 610065, China )
Abstract: Object　 To study the rela tionship betw een w eight o f reproduction ma teria ls and pa rameters
o f it s g row th and propagation regime. Methods　 Dif ferent w eights of Pinell ia tubers w ere used fo r asexual
reproduction ma terials in field cultiv ation. Results　 Weight o f ha rv ested tubers ( dry w eight , DW ) in-
creased w ith the w eigh t o f their reproduction tubers. However, a negativ e co rrelation was found betw een
rela tiv e w eigh t increments of harv ested tubers and the w eight of thei r reproduction tubers, and po sitiv e
cor relations existed betw een the w eigh t of reproduction tubers and quanti ties of sub-clone tubers bulbi ls,
seeds, o r propagation coef ficient. Significantly positiv e cor relations were also found betw een weight of
propagation tubers and quanti ties o f thei r petio les, aboveg round biomass, bulbils numbers, maximum
weight o f bulbils, and spathes numbers. Number o f bulbi ls posi tiv ely co rrelated with number o f petioles
signi ficant ly, and the number of sub-clone tubers and petioles cor related wi th the increment of breeding tu-
bers negativ ely. Conclusion　 The interactions betw een th e vegetativ e g row th and reproductiv e g row th,
and aboveg round g row th and underg round g row th ex ist in the field cul tiva tion of P . ternata.
Key words: Pinellia ternata ( Thunb. ) Brei t. ; bulbils; g row th pa rameters; propagation parameters
　　半夏 Pinellia ternata ( Thunb. ) Brei t. 为天南
星科多年生小草本植物 ,又名麻芋子、三叶半夏 ,以
地下茎入药 ,为常用中药之一。块茎含 β -谷甾醇及其
葡萄糖苷 (β -sitosteryl-D-g lucoside )、黑尿酸 ( ho-
mogentisic acid)及天门冬氨酸、谷氨酸、精氨酸、β -
氨基丁酸等氨基酸。 另含胆碱、原儿茶醛、微量挥发
油及微量麻黄碱 ( 0. 002% ) ,原儿茶醛为半夏辛辣刺
激性物质 [1 ]。中药用半夏主治燥湿化痰、降逆止呕、
消痞散结 ,用于痰多咳喘、痰饮眩悸、风痰眩晕、痰厥
头痛、呕吐反胃、胸脘痞闷等 ;生用外治痈肿等。
·1133·中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 12期 2003年 12月
收稿日期: 2003-03-12基金项目:四川省科技厅、教育厅资助项目作者简介:何道文 ( 1970- ) ,男 ,苗族 ,重庆彭水人 ,西华师范大学讲师 ,主要从事植物生理生态方面的教学和科研工作。
Tel: ( 0817) 2312466　 E-mai l: h edaow en@ mai l. china. com