全 文 ：为 Y= 36 903. 9X+ 5 392. 5, r= 0. 999 8。结果表明
氧化苦参碱在 0. 584～ 2. 922μg之间点样量与峰面
积积分值线性关系良好。
3. 4　稳定性试验:取氧化苦参碱对照品溶液与样品
溶液各 4μL,交叉点于同一块薄层板上 ,展开、显色
后 ,分别于 0, 30, 60, 90, 120 min进行扫描测定 ,测
定的对照品峰面积 RSD为 0. 73% ( n= 5) ;样品峰
面积 RSD为 1. 91% (n= 5)。结果表明在 2 h内 ,对
照品及样品基本稳定。
3. 5　同板精密度试验:分别吸取 5个相同浓度的对
照品与样品溶液分别点于同一硅胶 G薄层板上 ,按
上述条件展开 ,显色 ,扫描测定。 结果对照品斑点峰
面积值的 RSD= 2. 17% ,样品斑点峰面积值的
RSD= 1. 72% 。
3. 6　异板精密度试验:在不同薄层板上交叉点氧化
苦参碱对照品溶液 ( 2μL与 4μL)与供试品溶液 ( 4
μL)数点 ,按上述条件展开 ,显色 ,扫描测定 ,计算含
量 ,测定了 5块板上的同一样品的含量 ,其平均值为
0. 070 6 mg /mL, RSD为 0. 579%。
3. 7　重现性试验: 取同一批样品 5份 ,按拟定条件
测 定 , 其 平均 值 为 0. 161 5 mg /mL, RSD 为
2. 61% 。说明方法的重现性良好。
3. 8　回收率试验: 采用加样回收试验 , 5次测定的
平均回收率为 99. 90% , RSD为 2. 64% 。
3. 9　样品含量测定:分别精密吸取上述对照品溶液
2, 4μL,供试品溶液 2～ 4μL,交叉点于同一以羧甲
基纤维素钠为粘合剂的硅胶 G薄层板上 ,依法测定
5批样品 ,测定结果见表 1。
表 1　女洗宝洗液的含量测定结果
批　号 氧化苦参碱含量 ( mg /m L)
200316 0. 161 5
200314 0. 142 7
200315 0. 266 5
200308 0. 155 1
200306 0. 247 8
4　讨论
4. 1　对女洗宝洗液中生物碱的提取 ,曾先进行碱化 ,
再用有机溶剂萃取 ,发现乳化现象严重 ,回收率不好。
经过各种试验尝试 ,采用了将样品蒸发近干 ,残留物
未变干硬时 ,迅速用盐酸-甲醇 ( 1∶ 100)溶液少量多
次 ,边搅拌研磨 ,边将溶解部分倾取出来的办法。
4. 2　对样品与对照品扫描图谱一致 ,均在 510 nm
处有最大吸收 ,单波长及双波长锯齿扫描图一致 ,背
景均无干扰 ,为了节约时间 ,提高效率 ,采用了单波
长锯齿扫描。
4. 3　本研究中采用碱性展开剂 ,排除了非生物碱成
分的干扰 ,方法简单快捷 ,重现性好 ,精密度高 ,为液
体制剂中生物碱测定的一种理想方法。
参考文献:
[1 ]　郑虎占 ,董泽宏 ,余　靖 . 中药现代研究与应用 (第三卷 ) [M ].
北京:学苑出版社 , 1998.
[2 ]　中国药典 [ S] . 2000年版 .一部 .
RP-HPLC法测定五子衍宗丸中五味子甲素、五味子乙素含量
郭怡飚 ,胡晓炜 ,倪美文
(杭州市药品检验所 ,浙江 杭州　 310014)
　　五子衍宗丸为常用中成药 ,是《中华人民共和国
药典》 2000年版一部的收载品种 ,由车前子、枸杞
子、菟丝子、覆盆子、五味子组成 ,具有补肾益精的功
效。五味子为方中重要药味 ,其中五味子甲素、五味
子乙素为重要有效成分。药典仅确定了五味子甲素
的 TLC定性鉴别方法 ,而定量分析方法未见报道。
本文以五味子甲素、五味子乙素为指标成分 ,建立了
五子衍宗丸中五味子甲素、五味子乙素的 HPLC测
定法 ,为该中成药的质量控制提供了评价方法。
1　仪器与材料
Agilent 1100高效液相色谱仪 , U PPER色谱工
作站 ,五味子甲素、五味子乙素对照品由中国药品生
物制品检定所提供 ,乙腈为色谱纯 ,水为重蒸水 ,正
己烷、醋酸为分析纯 ,五子衍宗丸由杭州胡庆余堂制
药厂提供。
2　方法与结果
2. 1　实验色谱条 件: 色谱柱: Hypersi l C18柱
( 4. 6 mm× 200 mm , 5μm) ,柱温: 室温 ( 15℃ ) ,流
·317·　中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　 2002年第 33卷第 4期
收稿日期: 2001-06-11
动相:乙腈 -水 -醋酸 ( 70∶ 50∶ 0. 1) ,流速: 1. 0 mL /
min,检测波长: 254 nm,五味子甲素、五味子乙素、
五子衍宗丸样品及阴性对照样品的色谱图见图 1。
进样量均为 20μL。
1-五味子甲素　 2-五味子乙素
A-样品　 B-阴性　 C-对照品
图 1　五子衍宗丸的 HPLC图谱
2. 2　标准曲线的制备: 精密称取五味子甲素
2. 33 mg ,加甲醇定容至 25 mL,得对照品贮备液。精
密吸取此溶液 0. 5, 1. 0, 2. 0, 2. 5, 5. 0 m L置于
10 m L量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀即得。 精密
称取五味子乙素 2. 85 mg ,加甲醇定容至 50 mL,得
对照品贮备液。精密吸取此溶液 0. 2, 0. 4, 1. 0, 2. 0,
5. 0 mL置于置于 10 mL量瓶中 ,加甲醇稀释到刻
度 ,摇匀即得。
以对照品浓度 (C , μg /mL)对峰面积值 ( A )作
图 ,五味子甲素回归方程为 A= - 11 071. 52+
21 140. 15C , r = 0. 999 9, 线 性范 围 为 4. 66～
46. 6μg /mL。五 味 子 乙 素 回 归 方 程 为 A =
3 863. 88+ 18 406. 94C , r = 0. 999 9,线性范围为
1. 14～ 57. 0μg /mL,结果表明五味子甲素、五味子
乙素均呈良好线性。
2. 3　样品测定:精密称取五子衍宗丸粉末 (过 50目
筛 )约 5 g,加正己烷 100 mL索氏提取 6 h,取正己烷
液 ,蒸干 ,加甲醇溶解 ,定容于 10 mL量瓶中 ,摇匀 ,过
0. 45μm微孔滤膜后 ,进样 ,测定。 测定结果见表 1。
表 1　五子衍宗丸中五味子甲素、五味子乙素的含量 (n= 5)
批　号 五味子甲素含量 (μg /6g) R SD (% )
五味子甲素
含量 (μg /6g) R SD (% )
20001219 221. 07 1. 49 16. 36 1. 85
20001221 272. 15 1. 90 20. 04 1. 58
20001223 253. 19 2. 21 17. 50 1. 95
2. 4　精密度考察: 取同一浓度对照品连续 5次进
样 ,以峰面积计算 ,五味子甲素 RSD为 1. 38% ,五
味子乙素 RSD为 1. 49%。
2. 5　稳定性考察: 取同一样品 ,每隔 2 h进样 1次 ,
结果样品中五味子甲素 RSD为 1. 09% ,五味子乙
素 RSD为 2. 12% 。 取同一样品 ,每隔一天进样 1
次 ,结果样品中五味子甲素 RSD为 2. 53% ,五味子
乙素 RSD为 2. 93% (n= 3)。
2. 6　重现性考察:取同一批号五子衍宗丸各 5份 ,
按样品测定项下测定 ,五味子甲素 RSD为 1. 49% ,
五味子乙素 RSD为 1. 85% 。
2. 7　加样回收率的考察:精密称取已知含量的五子
衍宗丸粉末 5份 ,分别加入五味子甲素和五味子乙
素适量 ,按样品测定项下测定 ,测得五味子甲素平均
回收率为 98. 78% , RSD为 1. 05% ;五味子乙素平
均回收率为 101. 10% , RSD为 3. 84% 。
3　讨论
3. 1　高效液相色谱法同时测定两种有效成分 ,五味
子甲素保留时间约为 17 min,五味子乙素保留时间
约为 24 min,分离度良好。
3. 2　经阴性对照实验证明 ,在五味子甲素和五味子
乙素相应位置上无峰出现 ,空白样品无干扰。
3. 3　本品为复方制剂 ,实验对样品的提取溶剂进行
了考察 ,经 HPLC验证 ,正己烷提取效果较氯仿好。
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