全 文 ：品溶液,加入绿原酸对照品约 24. 6 ng ,按 2. 2项下
方法操作, 进样 5
L 测定, 结果平均回收率为
99. 7% , RSD为 1. 12% ( n= 5)。
2. 8　样品含量测定: 按 2. 2项下方法操作, 结果见
表 1。
表 1　复方利咽宁口服液中绿原酸含量 ( n= 5)
Table 1　Content of chlorogenic acid in Compound
Liyanning Oral Liquid ( n= 5)
批　号 绿原酸含量/ ( ng·mL- 1) RSD/ %
20010124 0. 312 2. 01
20010312 0. 326 1. 76
20010425 0. 341 0. 87
20010608 0. 309 1. 26
20010821 0. 324 0. 97
2. 9　长期稳定性考察:采用留样室温观察法。取批
号为 20010425的复方利咽宁口服液,置室温下保存
0, 3, 6, 9, 12, 15, 18个月, 分别取样测定,结果和 pH
值测定结果见表 2。
表 2　稳定性测定结果 ( n= 5)
Table 2　Result of stability ( n= 5)
时间/月 绿原酸含量/ ( ng·mL- 1) pH
0 0. 342 5. 63
3 0. 340 5. 67
6 0. 336 5. 73
9 0. 331 5. 65
12 0. 330 5. 74
15 0. 327 5. 69
18 0. 314 5. 69
3　讨论
　　在实验中,采用甲醇-醋酸-水、甲醇-乙腈-醋酸-
水不同比例分离,但效果不佳, 以乙腈-1%醋酸( 9∶
91)做流动相,分离效果很好。
　　复方利咽宁口服液在室温条件下存放 1. 5年,
绿原酸含量有所下降,但仍在质量控制标准内,故可
以认为复方利咽宁口服液在 1. 5年内性质基本符合
质量要求。
分光光度法测定茶多酚注射剂中茶多酚的含量
杨美燕,李　楠* ,邢国秀,郭永学,宫为民

(大连理工大学化工学院,辽宁 大连　116012)
　　茶多酚( tea polyphenols)是茶叶中含有的多酚
类物质的总称,因其分子结构中含有较多的还原性
酚羟基而具有很强的清除体内自由基的功能。将茶
多酚研制成静脉注射剂,在抢救心脑危重病症方面
有重要意义。茶多酚含量测定方法有多种, 如酒石酸
亚铁分光光度法[ 1]。采用 Al3+作为络合离子的分光
光度法针对注射剂进行分析,目前国内尚未见报道。
本实验采用的方法基于注射剂中的茶多酚和
Al( NO 3 ) 3发生亚硝酰化络合, 络合产物在碱性条件
下显橙红色, 在一定浓度范围内,吸光度和茶多酚浓
度呈线性关系,从而可以进行定量测定。
1　仪器与试剂
722光栅分光光度计(上海第三分析仪器厂) ;
儿茶素对照品(供含量测定用,中国药品生物制品检
定所提供, 批号: 877-20001) ; 茶多酚注射剂由本课
题组自制,为高纯度茶多酚经助溶剂助溶而成的澄
清透明溶液, 标示量为 25 mg / mL; 水为去离子水,
试剂均为分析纯。
2　实验方法
2. 1　儿茶素对照品溶液的制备: 取儿茶素对照品
21. 0 mg ,用少量无水乙醇溶解并稀释至 50 mL, 得
0. 42 mg / mL 儿茶素对照品溶液,备用。
2. 2　供试品溶液的制备:取 0. 25 mL 注射剂,置于
25 mL 量瓶中,加水至刻度, 备用。
2. 3　测定:移取供试品溶液 1 mL 置 10 mL 量瓶
中,先加适量 5% NaNO2 溶液, 摇匀,放置 6 m in, 加
适量 10% A l( NO3 ) 3 溶液, 摇匀,放置 6 min, 加适
量 4% NaOH 溶液,用水稀释至刻度,摇匀。在一定
波长处,以水为参比测定吸光度。
3　实验结果
3. 1　分析条件的选择
3. 1. 1　吸收波长的选择:以水为参比, 在 400～700
nm 波长内测量络合物的吸光度, 作络合物吸收曲
线。结果在 470～490 nm 波长吸光度变化平缓, 波
·528· 中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 35 卷第 5 期 2004年 5月

收稿日期: 2003-07-14基金项目:大连市 2002年科技计划资助项目( 2002B4NS044)作者简介:杨美燕( 1979—) ,女,山东滕州市人, 1999年毕业于山东轻工业学院,现为大连理工大学 2001级在读硕士,研究方向为天然生物活性物质的分离与分析。T el: ( 0411) 84701085　E-mail: ymyzi@ 163. com
* 通讯作者　Tel: ( 0411) 83683309　E-m ail : nanli@ m ail . d lpt t . ln. cn
长超过 500 nm 后,吸光度值急剧下降。为减小实验
误差和获得较高的灵敏度, 选取 490 nm 作为测定
波长。
3. 1. 2　显色剂用量的影响: 实验操作方法基本同
上,固定 5% NaNO 2溶液和 4% NaOH 溶液的体积
分别为 0. 40 mL 和 4 mL,加入 10% Al ( NO 3 ) 3溶
液的量分别为 0. 20, 0. 40, 0. 60, 0. 80, 1. 00, 1. 20
mL。结果表明,在其他条件相同的情况下, 吸光度值
随 Al ( NO 3 ) 3 溶液加入量的增加而增大, 但当
Al( NO 3 ) 3溶液的加入量大于 0. 40 mL 时, 溶液中悬
浮物出现, 影响测定, 故本 实验条件下确定
Al( NO 3 ) 3溶液的加入量为 0. 40 mL。
3. 1. 3　溶液酸碱度的影响: 实验操作方法基本同
上,固定 5% NaNO 2溶液和 10% Al( NO 3 ) 3溶液的
体积均为 0. 40 mL 和 0. 40 mL, 加入 4% NaOH 溶
液的量分别为 1. 00, 2. 00, 3. 00, 4. 00, 5. 00 mL。结
果表明, NaOH 溶液的加入量在 3. 00～4. 00 mL
时,吸光度值较大且变化平缓,故本实验条件下采用
NaOH溶液的适宜加入量为 4 mL。
3. 1. 4　显色时间的选择:由吸光度对显色时间的关
系曲线可得, 显色后溶液的吸光度值有下降趋势,在
50 min内,计算吸光度值的 RSD< 1% ,故规定测量
在 50 min 内完成。
3. 2　标准曲线的制备: 取儿茶素对照品溶液 0. 00,
0. 10, 0. 20, 0. 30, 0. 40, 0. 50, 0. 60 mL, 分别置 10
mL 量瓶中,按 3. 1项下方法进行显色反应, 以试剂
空白作参比,求得线性回归方程为 A = 32. 103 C+
0. 003 3, r = 0. 999 6, 线性范围 0. 004 2～0. 025 2
mg / mL。
3. 3　重现性试验:取一份样品, 进行 6次平行测定,
结果吸光度值的 RSD为 0. 91%。
3. 4　回收率试验:采用加样回收法。在茶多酚量为
0. 059 mg 的样品溶液中加入儿茶素对照品 0. 119 6
(n= 3)、0. 138 0 ( n= 4)和 0. 156 4 mg ( n= 3) , 按
3. 2项下的方法进行。结果平均回收率为 99. 95% ,
RSD为 0. 93% ( n= 10)。
3. 5　样品分析:取 3个批号的注射剂, 分别制备供
试品溶液,依法测定吸光度值,代入标准曲线的回归
方程,换算成以儿茶素计的样品中茶多酚含量。结果
见表 1。
表 1　茶多酚注射剂中茶多酚的含量测定结果 ( n= 6)
Table 1　Content of tea polyphenols in Tea
Polyphenols Injection ( n= 6)
批　号 茶多酚/ (m g·mL- 1)
020805 13. 7
030308 11. 0
991223 2. 4
4　讨论
　　实验过程中发现,加入 NaOH 溶液一方面是为
了调节 pH, 使茶多酚和 Al3+ 的络合物在碱性条件
下进一步醌式化,产物显橙红色。另一方面, 为使络
合反应进行完全, 还应加入适当过量的 Al3+ , 因为
Al
3+具有两性离子的特征, 其碱性条件下水解产物
Al( OH) 3易干扰测定, 为解决此问题,溶液中还应
保持适当过量 OH- ,使过量的 Al3+ 以无色透明的
[ Al( OH) 4 ]
-存在。
　　NaNO 2存在下用 Al3+ 作为络合离子在碱性条
件下显色的方法目前主要用于以芦丁为代表的黄酮
类物质的含量测定。本法产物最终形成五元螯环结
构,是邻二酚羟基的专属性反应。茶多酚的主体及主
要生理活性成分儿茶素类的 6种单体均具有邻二位
酚羟基,所以,用此法定量专属性好。而且,和基于酚
羟基还原性的高锰酸钾滴定法[ 2]相比,本方法具有
更高的选择性。
References:
[1]　GB 8317-87 [ S] . 1992.
[2]　Yu T . Natural T P w ith great developed futur e [ J] . Guang xi
L ight I nd (广西轻工业) , 1996 ( 3) : 6-11.
HPLC法测定复方五味子软胶囊中五味子甲素的含量
陈光龙

(深圳市宝发区人民医院,广东 深圳　518101)
　　复方五味子软胶囊是由五味子、远志、柏子仁等
经超临界流体萃取制成的制剂。主要药味五味子具
有上敛肺气、下滋肾阴兼有补肾宁心之功效, 对中枢
神经系统有双向调节作用,与远志、柏子仁等味药配
·529·中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 35 卷第 5 期 2004年 5月

收稿日期: 2003-10-12