全 文 ：发现 ,裂解温度、裂解时间是实验获得成功的关键 ,
不同的药材 ,要求不同的裂解温度与时间。
3. 4　选用裂解色谱测定中药材指纹图谱时 ,最好结
合气质联用 ,对所测定的药材所含的组分有所了解 ,
这样对采用裂解色谱指纹图谱判断药材的质量会更
全面。
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臭冷杉的组织学研究
巴雪青 1, 2 ,王　威 2 ,师海波 2 ,历锡亮 1 ,曾宪录 1
( 1. 东北师范大学遗传与细胞研究所 ,吉林 长春　 130024;　 2. 吉林省中医中药研究院 ,吉林 长春　 130021)
摘　要:目的　通过对臭冷杉的叶和小枝进行组织学研究 ,为正确用药提供鉴定依据。方法　扫描电镜观察 Jeffr ey
液处理后的叶表皮内表面及干燥小枝木材 ;光镜观察幼茎的横切、叶的横切及小枝木材的徒手切。结果　发现臭冷
杉叶气孔下陷 ,副卫细胞 4个。下皮层细胞只有上、下表皮的中段有一层分布。内皮层无凯氏加厚 ;叶肉叶树脂道 2
个 ,中生 ;维管束 2。木材中无树脂道 ;木射线完全由薄壁细胞组成 ,细胞端壁和水平壁具节状加厚 ;交叉场纹孔松
木型。 结论　以上结果可作为臭冷杉药材的鉴别依据。
关键词: 臭冷杉 ;扫描电镜观察 ;组织学研究
中图分类号: R282. 710. 3　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 01 0073 04
Study on histological anatomy of Abies nephrolepis
BA Xue-qing
1, 2
, WANG Wei
2
, SHI Hai-bo
2
, L I Xi-liang
1
, ZEN G Xian-lu
1
( 1. Institute o f Genetics and Cy tolog y , Nor theast Normal Univ er sity , Changchun 130024, China;　 2. Academy
of T raditional Chinese M edicine and Mater a Medica of Jilin Prov ince, Changchun 130021, China )
Abstract: Object　 Identification basis fo r the proper employment of Abies nephrolepis ( T rautv . )
Maxim. were provided by the histological anatomy study o f the lea f and the young stem of A. nephrolepis.
Methods　 The int ra-surface of the leaves epidermis and the dried wood of the twig w ere observ ed by the
scanning elect ron microscope; the cro ss sections o f the leaf and the young stem and cro ss-radial-tangent
sections of the w ood w ere observ ed by the optical microscope. Results　 The stoma was sunk under the
four subsidiary cells w hich surround around the stoma. The hypodermis w as only dist ributed under the
middle parts of the uppper and low er epidermis. Caspa rian thickening w as no t found on the endoder-
mis. There w ere tw o mesial resin canals and tw o bundles, and there w ere no t normal resin canals in the
w ood. The xylem ray w as completely composed wi th pa renchyma cells, w hose end w alls and level w alls
have nodal thickening. The cross-field pi t ting w as pinoid. Conclusion　 The above resul ts can be used as
basis for the identification of the herbal medicine A. nephrolepis.
Key words: Abies nephrolepis ( T rautv. ) Maxim. ; scanning-elect ron-micro scope observa tion; histo-
logical anatomy
·73·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 1期 2003年 1月
收稿日期: 2002-03-25作者简介:巴雪青 ( 1968— ) ,女 ,吉林长春人 ,助理研究员 ,东北师范大学生物系植物学硕士 , 1993年硕士毕业后在吉林省中医中药研究院工作至今 , 2001年开始在东北师范大学遗传与细胞研究所攻读博士学位。
　　臭冷杉 Abies nephrolepis ( T rautv . ) Maxim.
在长白山区又称臭松。分布于中国东北、华北 ,朝鲜 ,
日本 ,西伯利亚。叶、树皮入药 ,民间用树皮和小枝煎
煮后 ,冲洗 ,可治疗腰腿疼 [1 ]。 现代药理研究表明臭
冷杉精油具有较强的抗炎作用 [1 ]。 吉林省中医中药
研究院从臭冷杉新鲜小枝中提取的臭冷杉精油已申
报二类中药新药。 有关臭冷杉显微鉴定的报道不多
见 [2 ] ,为保证用药基源的准确 ,本实验对臭冷杉进行
了较为详细的组织学研究 ,为准确合理用药提供
依据。
1　材料和方法
1. 1　材料: 臭冷杉 2～ 3年生小枝 , 2001年春采于
长春市杨家屯苗圃 ,经吉林省中医中药研究院严仲
铠教授鉴定。
1. 2　方法:石蜡切片法 ,即通过常规石蜡切片番红 -
亮绿对染后制成叶及小枝幼茎横切面的永久封片 ;
Jef f rey离析法: 10%硝酸与 10%铬酸等量混溶制成
Jef f rey离析液。取叶放入离析液 , 35℃ 温箱中消
化 2～ 3 d。消化后的叶 ,剖开表皮 ,除净表皮内组
织 ,干燥后内面向上镀膜 ,扫描电镜观察 ;徒手切片
法:枝的木材部分通过徒手切片获得木材的横、径、
弦 3个方面的切片 ,借以观察木材的主要特征 ;木材
的电镜观察: 枝的木材干燥后 ,扫描电镜下观察其
横、径、弦 3个切面。
2　观察结果
2. 1　叶的结构:叶的横切面:呈扁椭圆形 ,常近轴面
微凹 ,远轴面微凸。外周是一层近方形、排列整齐的
表皮细胞 ,壁厚 ,有发达的角质层。表皮的近轴面无
气孔分布 ,气孔集中分布于远轴面相对于维管束两
侧的位置 ,形成肉眼可见的两条白色气孔带 ,这与其
他松科植物叶表气孔线在近、远轴面均有分布不
同 [3 ]。气孔下陷 ,副卫细胞覆于保卫细胞之上 ,表皮
内的下皮层细胞在该种中没有连续形成完整的环
层 ,而只在相对于维管束上、下方的表皮下 ,各有一
段 (约 10～ 15个 ,近轴面较少 ,远轴面较多 )较表
皮细胞大的厚壁细胞。叶肉组织略有分化 ,近轴面叶
肉细胞呈长椭圆形 ,长轴垂直于表面排列 , 1～ 2
层 ,较紧密 ,而远轴面的叶肉细胞则呈球形 ,排列较
松散 ,胞间隙大。包埋于叶肉组织中的是位于中央的
维管束区域及其两侧的树脂道。 维管束区域的最外
周是大型椭圆形细胞组成的内皮层 ,薄壁 ,无凯氏加
厚。内皮层是两个维管束和其周围的转输组织。维
管束由近轴面的木质部和远轴面的韧皮部组成 ,其
外侧靠近内皮层的位置处 ,各有一团细胞质浓密的
蛋白质细胞。 树脂道位于维管束区域外侧两翼 , 2
个 ,中生 ,内腔直径 70μm左右 ,树脂道壁由两层细
胞组成 ,细胞扁方形 ,内层的泌脂细胞约 13～ 17
个 ,原生质稠密 ,着色较深 ,外层细胞较内层细胞略
大 ,色略浅 (图 1-1)。
叶表皮内表面的扫描电镜观察: 长方形的表皮
细胞覆于整个表面大部分面积 ,相邻的表皮细胞壁
呈波纹状相嵌 ,细胞壁布满圆形纹孔 ,气孔集中分布
形成两条气孔带。气孔器包括 2个肾形的保卫细胞
和 4个覆于其上的副卫细胞 ,其中两个肾形 ,平行
位于保卫细胞之上 ,另两个近于小正方形 ,位于气孔
器的前后两端 (图 2-1)。
2. 2　小枝的显微结构:幼茎的横切:表皮残存 ,为一
层排列整齐的细胞 ,细胞的径向壁和外切向壁角质
加厚。表皮内有 4～ 5层残存的皮层细胞 ,薄壁。再
内为着色较深的周皮 ,周皮内保留有较厚的皮层 ,这
里含有丰富的树脂道 ,数目多 ,腔隙大 , 1个 2～ 3年
生的小枝皮层中可分布树脂道 10～ 15个。每个树
脂道由 1～ 2层细胞围成腔壁 ,内层的泌脂细胞着
色较深 ,细胞质浓密 ,约 13～ 17个细胞。 在新鲜材
料的徒手切片上可见树脂道腔内有近无色或浅黄绿
色的油滴 ,而且靠近外周的皮层细胞中也存在着大
量的浅绿色油滴。皮层内方是排列整齐的韧皮部 ,再
内是 2～ 4层的扁形细胞组成的形成层区。次生木
质部可见明显的年轮 ,晚材带明显 ;内方残存的初生
木质部管胞呈多角形 ;中央是大型薄壁细胞组成的
髓 (图 1-2)。
次生木质部显微特征:管胞:早材管胞横切面观
呈正方形 ,管腔较大 ,壁较晚材为薄 ,径向宽 12～ 20
μm, 壁厚 1. 2～ 1. 5μm。晚材管胞逐渐呈切向长方
形 ,壁明显加厚 ,最后几列管胞的径向宽 6. 0～ 8. 4
μm,壁厚 1. 8～ 2. 2μm。早材管胞径向壁有较多的
具缘纹孔 ,内口圆形 , 1列 (图 2-2)。晚材管胞上具
缘纹孔极少 ,内口透镜形。
木薄壁细胞:缺如 ;正常纵向树脂道和横向树脂
道在木材中均未见。
木射线:单例 ,由 2～ 9个细胞组成 ,高为 45～
180μm,完全由射线薄壁细胞组成 ,无射线管胞 (图
1-3, 4)。水平壁和端壁因单纹孔的存在而呈节状加
厚 (图 2-3,图 1-4)。交叉场纹孔松木型 , 1～ 4个单
纹孔 (图 2-4)。
3　讨论
化学方面的研究表明 ,臭冷杉小枝中挥发油的
含量很高 [4 ] ,而从组织学的研究来看 ,叶中树脂道仅
·74· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 1期 2003年 1月
1-叶横切　 2-幼茎横切　 3-小枝木材的切向切　 4-小枝木材
(早材 )的切向切　 a-下皮层 ,只在上下表皮中段下分布　 b-内
皮层 ,无凯氏加厚　 c-树脂道 ,叶中只有 2个 ,小枝皮层中有 10
～ 15个　 d-维管束 ,叶中为两个　 e-表皮　 f-周皮　 g-韧皮部　
h-木质部　 i-木射线 ,完全由射线薄壁细胞组成 , 2～ 9个细胞 ,
高 45～ 180μm　 j-具缘纹孔的切向观　 k-木射线薄壁细胞端壁
的纹孔 ,径向即为节状加厚
1-cros s s ection of leaf　 2-cros s s ection of young stem　 3-tan-
gen tial sect ion of twig s w ood　 4-tangential s ection of tw ig s
w ood ( early w ood )　 a-hypodermis , only dis t ributed under th e
middle part s of u pper and low er epidermis　 b-end od ermis , no
Casparian thickening found　 c-resin canal, only 2 in leaf and
10-15 in cortex of young stem　 d-bundle, 2 in leaf　 e-epidermis
f-perid erm　 g-phloemh-x ylem　 i-x ylem ray, completely com-
posed w ith parench yma cell s, 45-180μm high , 2-9 cel ls　 j-tan-
gen tial appearnce of bordered pi ts on radial section of early w ood
k-pi ts on end w al l of xylem-ray parench ym a cel l, obs erved f rom
radial s ection as nodal thickening
图 1　臭冷杉药材的光镜观察
Fig. 1　Micro property of medicinal herb A. nephrolepis
under optical microscope
两个 ,且小枝木材中又无正常树脂道分布 ,而不象松
属 Pinus L. 那样在叶和木材中有丰富的树脂
道 [3, 5 ] ,相反臭冷杉的皮层中含有多数的树脂道 ,且
随着树龄的不断增加 ,周皮向内“侵入”的速度很慢 ,
即使二三十年的老树 ,仍保留着相当厚度的皮层和
树脂道 ,可见臭冷杉小枝挥发油主要来自皮层。本实
验也为新鲜小枝作为臭冷杉精油提取的药用部位提
供了依据。
对于叶的内皮层是否存在凯氏加厚问题 ,本实
验结论与姚碧君等的结论相符 [5 ] ,而与郑太坤等的
结论有出入 [2 ]。
关于交叉场纹孔类型的问题 ,在这里通过光镜
和电镜的观察可以清晰准确地判断纹孔为单纹孔 ,
而杉木型和柏木型纹孔都是具缘纹孔。所以这里我
们将臭冷杉小枝木材的交叉场纹孔类型定为松木
型。这是不同于文献上杉木型或柏木型的记载 [6 ]。但
1-叶表皮内表面示气孔的四个副卫细胞　 2-小枝木材 (早材 )
径向面示单列大型具缘纹孔　 3-小枝木材径向面示木射线薄壁
细胞端壁及水平壁的节状加厚　 4-小枝木材径向面示松木型交
叉场纹孔 (图片中部 )
1-int ra-surface of leav es epidermis: 4 subsidiary cel ls sur round-
ing around stoma　 2-tangen tial section of tw ig s wood ( early
w ood): th ere are single colum n of macrotype bordered pi ts　 3-
radial section of tw ig s w ood: nodal thickening of end w al l and
level wall of x ylem ray　 4-radial s ection of twig s w ood: pinoid
cross-field pit ting
图 2　臭冷杉药材的扫描电镜观察
Fig. 2　Micro property of medicinal herb A.nephrolepis
under scanning electron microscope.
文献的描述是对成年干材而言 ,而我们没有对臭冷
杉的成年干材做过观察。所以 ,这里所描述的小枝显
微结构特征 ,仅作为原药材的鉴定依据 ,并不代表成
年材的特征。
结合臭冷杉叶和小枝皮部、木部结构特征如叶
的气孔集中分布成两条气孔带 ,气孔下陷 ;叶中内皮
层细胞薄壁 ,无凯氏加厚 ;维管束 2; 树脂道 2,中
生。 小枝茎中皮层发达 ,树脂道丰富 ;木部无正常纵
横树脂道 ;木射线薄壁细胞壁具节状加厚 ;交叉场纹
孔松木型 , 1～ 4个单纹孔等 ,可为鉴定提供依据。
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肉桂及其混伪品的 HSGC-MS的实验比较研究
张海霞 ,陈建伟 ,吴志平
(南京中医药大学 ,江苏 南京 210029)
摘　要: 目的　比较肉桂及其混伪品的顶空气相指纹图谱 ,以此鉴别肉桂药材的真伪。 方法　采用顶空气相色谱 -
质谱 ( HSGC-M S) 计算机联用技术 ,分别测定肉桂、桂皮、柴桂的指纹图谱并加以比较。 结果　肉桂的顶空气相指
纹图谱与混伪品桂皮、柴桂有明显区别 ,其指纹特征峰位于 10. 60, 15. 60 min处 ,主要成分为桂皮醛。 结论　此方
法能有效地鉴别肉桂及其混伪品 ,具有快速、准确、操作简单 ,不需对样品进行提取分离 ,可直接进行测定的特点。
关键词: 肉桂 ;柴桂 ;桂皮醛 ;顶空气相色谱 -质谱
中图分类号: R282. 710. 3　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 01 0076 02
Comparative experiments in bark of Cinnamomum cass ia and
its adulterants by HSGC-MS
ZHANG Hai-x ia, CHEN Jian-w ei , WU Zhi-ping
( Nanjing Univ er sity o f TCM , Nanjing 210029, China )
Key words: bark of Cinnamomum cassia Presl; C. japonicum Sied. ; C . tamala ( Buch-Ham. ) Nees et
Eberm. ; cinnamaldehyde; HSGC-M S.
　　肉桂为常用中药之一 ,是樟科植物肉桂 Cin-
namomum cassia Presl的干燥树皮。具有补阳、温
肾、祛寒、通脉、止痛的功效。肉桂中挥发油的含量较
高 ,作为辛温类药材其辛香气味是判断肉桂质量优
劣的指标之一。其挥发油中含有多种化学成分 ,主要
含有桂皮醛、醋酸桂皮酯、桂皮酸等成分。 鉴于目前
市场上肉桂药材质量参差不齐 ,混伪品也较多 ,故本
实验试图通过 HSGC-M S法对肉桂及其混伪品桂
皮、柴桂进行比较研究 ,从而得出肉桂的 HSGC指
纹图谱。
1　仪器与材料
1. 1　仪器:微型高速万能试样粉碎机 ;自制简易顶
空进样器 ;美国惠普 HP6890 Series GC System-
5793 M SD色质联用仪 ,附 MSD化学工作站软件。
1. 2　材料:肉桂购自南京中西医结合门诊及南京中
医药大学门诊部 ,经南京中医药大学药学院中药鉴
定教研室王春根教授鉴定为肉桂 C. cassia Presl的
干燥树皮。 桂皮为同属植物天竺桂 C . japonicum
Sied的干燥树皮为南京市售品。柴桂为樟科植物柴
桂 C. tamala( Buch-Ham. ) Nees et Eberm. 的干燥
树皮 ,产自云南 ,由南京中医药大学药学院标本室提
供。 桂皮醛对照品 (本校中药化学实验室提供 )。
2　实验方法
2. 1　药材的处理:将样品用小型高速粉碎机在数十
秒内粉碎成一定的颗粒 ,过 60目筛。装于玻璃瓶中
保存 ,密闭备用。
2. 2　样品分析:取样品粉末约 3 cm3置 10 mL注射
用瓶中 ,加橡皮塞密封。放入 75℃ 自制顶空进样器
内。 自注射用瓶顶空部分精密抽吸 0. 5 mL顶空气
体 ,注入气相色谱-质谱联用仪。
2. 3　 HSGC-M S 条件: 色谱 柱: HP-INNOWax
( Cro sslinked Po lyethylene Glycol , 30 m× 0. 32
mm× 0. 50μm);柱头压: 13. 56 psi;柱温: 程序升
温 , 60℃ (保持 3 min)以 12℃ /min的速率上升至
100℃ (保持 1 min) ,再以 5℃ /min的速度上升至
150℃ (保持 3 min) ;进样口温度: 150℃ ;接口温
度: 250℃ ;载气: He, 4. 1 mL /min;直接进样 (不分
流 ) ;进样量: 0. 5 mL。
·76· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 1期 2003年 1月
收稿日期: 2002-03-17