全 文 ：sis for Common Chinese Herbal Medicine (常用中草药高效液
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强力枇杷露的质量标准研究
朱长福 ,同利琪 ,由会玲 ,丁　宁
(河北医科大学 ,河北 石家庄　 050091)
　　强力枇杷露属《中华人民共和国卫生部标准》中
药成方制剂二册收载品种 ,标准中仅有两项试管反
应鉴别 ,无法控制成药质量。该处方由百部、枇杷叶、
罂粟壳、薄荷脑等 7味中药组成。本实验对罂粟壳、
薄荷脑、百部采用 TLC法鉴别 ,并对罂粟壳中吗啡
采用 HPLC法进行了含量测定。
　　吗啡的含量测定方法报道较多 ,有气相色谱
法 [1, 2 ]、高效液相色谱法 [3～ 5 ]等。高效液相色谱法选
择性强、结果准确。因此 ,本实验采用高效液相色谱
法测定吗啡的含量。
1　仪器与试药
美国 Waters高效液相色谱仪 ,包括 515泵 ,
2478双通道 UV检测器 , 717自动进样系统 , Mil-
lennium
32色谱工作站。UV 2100分光光度计 (日本岛
津 )。 KQ— 250DE型医用数控超声波清洗器 (上海
昆山 ) ;甲醇为色谱纯 ,其他试剂均为分析纯 ;吗啡对
照品 (供含量测定用 ,批号 1201-200016)、薄荷脑对
照品 (供含量测定用 ,批号 0728-20005)和百部对照
药材 ,均由中国药品生物制品检定所提供 ;强力枇杷
露 (自制 )。
2　薄层鉴别
2. 1　薄荷脑:取本品 40 mL置分液漏斗中 ,加石油
醚 ( 30℃～ 60℃ ) 40 mL,振摇提取 ,分取石油醚液 ,
自然挥干 ,残渣加乙醇 1 mL使溶解 ,作为供试品溶
液。缺薄荷脑阴性对照供试液同法制备。 另取薄荷
脑对照品 ,加乙醇制成 1 mg /mL的对照品溶液。分
别吸取供试品溶液、阴性对照溶液各 10μL,对照品
溶液 5μL,点于同一硅胶 G薄层板上 ,以石油醚 ( 30
℃～ 60℃ )-醋酸乙酯 ( 5∶ 1)为展开剂 ,展开 ,取出 ,
晾干 ,喷以 4%香草醛乙醇 -浓硫酸 ( 100∶ 6)溶液 ,
加热至斑点显色清晰 ,见图 1-A。
2. 2　罂粟壳:取本品 40 mL,置分液漏斗中 ,加水
20 mL,加氨试液调至 pH 11～ 13,用氯仿 40 mL振
摇提取 ,分取氯仿液 ,蒸干 ,残渣加乙醇 1 mL使溶
解 ,作为供试品溶液。缺罂粟壳对照供试液同法制
备。 另取吗啡对照品 ,加乙醇 -0. 1 mol /L盐酸 ( 1∶
1)溶解 ,制成 0. 02 mg /mL的溶液 ,作为对照品溶
液。分别吸取供试液、阴性对照液、对照品溶液各 10
μL,点于同一硅胶 G薄层板上 ,以甲苯 -丙酮 -乙醇-
浓氨水 ( 20∶ 20∶ 3∶ 1)为展开剂 ,展开 ,取出晾干 ,
喷以碘化铋钾试液。 见图 1-B。
2. 3　百部: 取本品 30 mL,加正丁醇 30 mL萃取 ,
正丁醇液蒸干 ,残渣加甲醇 1 mL溶解 ,作为供试品
溶液。缺百部阴性对照供试液同法制备。另取百部
对照药材粉 2 g ,加正丁醇 30 mL浸泡过夜 ,滤过 ,
正丁醇液蒸干 ,残渣加甲醇 1 mL溶解 ,作为对照药
材溶液。 分别吸取上述溶液各 5μL,点于同一高效
硅胶 G薄层板上 ,以甲苯-丙酮 -乙醇 -氨水 ( 20∶
20∶ 3∶ 1)为展开剂 ,展开 ,取出晾干 ,喷以改良碘化
铋钾试液。见图 1-C。
3　吗啡的含量测定
3. 1　色谱条件与系统适应性试验:用十八烷基
硅烷键合硅胶为填充剂 ;流动相 A: 醋酸-醋酸钠缓
冲溶液 ( 0. 1 mol /L醋酸钠溶液用冰醋酸调 pH
4. 3) ,流动相 B:甲醇 , 0～ 25 min, A-B( 15∶ 1) , 25～
40 min, A-B( 80∶ 20) , 40～ 55 min, A-B( 15∶ 40)。
检测波长为 286 nm。理论板数按吗啡峰计算 ,应不
低于 2 500。
·1003·中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 11期 2003年 11月
收稿日期: 2003-02-12基金项目:石家庄市科技攻关基金 ( 0330611)作者简介:朱长福 ( 1955— ) ,男 ,天津人 ,高级工程师 , 1981年毕业于北京中医学院中药系 ,分配到石家庄乐仁堂药厂任技术厂长 , 1992年调入卫生部机关事务服务中心 ,任华卫实业总公司总经理助理 , 1995年应聘任河北医科大学中医学院药植鉴定教研室主任 ,从事中药资源利用方面研究及中药新药开发研究工作。
1-样品　 2-吗啡　 3-缺罂粟壳阴性对照　 4-冰片　 5-缺冰片阴
性对照　 6-缺百部阴性对照　 7-百部对照药材　 8-直立百部　
9-蔓生百部　 10-对叶百部
1-sample　 2-morphine　 3-sam ple w ithou t Perica rpium Pa-
paveris　 4-bo rn eol　 5-sample w ithou t Borneolum Syntheticum
　 6-sam ple w i thou t Rad ix Stemonae　 7-Radix Stemone　 8-S .
sessili folia　 9-S . japonica　 10-S. tuberosa
图 1　罂粟壳 (A)、冰片 (B)和百部 (C)的 TCL色谱图
Fig. 1　 TLC chromatograms of Pericarpium Papaveris
( A ) , Borneolum Syntheticum ( B) and Radix
Stemonae (C)
3. 2　测定波长的选择:吸取吗啡对照品溶液适量 ,
用流动相稀释至适宜的浓度 ,以流动相为空白 ,于紫
外分光光度计上在 200～ 500 nm扫描吸收光谱 ,吗
啡分别在 ( 286± 1) nm和 ( 236± 1) nm处有最大吸
收 ,与文献记载基本一致 ,故本方法选择 286 nm为
测定波长。
3. 3　阴性试验: 取缺罂粟壳强力枇杷露试样 ,按样
品测定项下方法操作 ,制得阴性对照溶液。吸取 20
μL注入液相色谱仪 ,结果在吗啡峰对应的保留时间
处无干扰杂质峰。 色谱图见图 2。
3. 4　线性关系考察:精密称取吗啡对照品 ( 60℃五
氧化二磷减压干燥 10 h ) 20 mg,置 100 mL量瓶
中 ,加乙醇 10 m L, 0. 1 mol /L盐酸 10 mL使溶解 ,
加水稀释至刻度 ,摇匀 ,即得对照品贮备液 (含吗啡
0. 2 mg /mL)。精密吸取吗啡对照品贮备液 5 mL,置
50 mL量瓶中 ,加水稀释至刻度 ,摇匀 ,即得吗啡对
照品溶液 ( 20μm /mL)。 分别精密吸取吗啡对照品
溶液 5, 15, 40μL,吗啡对照品贮备液 10, 25, 50μL
注入液相色谱仪 ,各进样两针 ,测定吗啡峰面积值。
以进样量为横坐标 ,峰面积值为纵坐标作图 ,得一直
线 , 其 回归 方程: Y = 230 419X - 5 459, r=
0. 999 98。线性范围: 0. 10～ 10. 00μg。
3. 5　精密度试验: 取供试品溶液 ( 020601) ,重复 5
次 ,依法测定吗啡峰面积 , 计算得其 RSD为
0. 91% 。
3. 6　稳定性试验:取供试品溶液 ( 020601) ,分别于
0, 12, 24, 36 h时依法测定吗啡峰面积 ,结果其 RSD
为 0. 61% 。表明供试品溶液稳定。
* -吗啡
* -m orph ine
图 2　吗啡对照品 ( A)、强力枇杷露 (B)
和阴性对照 ( C)的 HPLC色谱图
Fig. 2　 HPLC chromatograms of morphine ref erence
substance ( A) , Qiangli Pipa Syrup ( B ) and
negative sample (C)
3. 7　重现性试验: 取同一批号样品 ( 020601) ,平行
测定 5份 ,结果吗啡平均含量为 28. 1μg /mL, RSD
为 1. 11%。
3. 8　加样回收试验: 精密吸取供试品 ( 020601) 100
mL,精密加水 60 mL,摇匀。精密吸取 20 mL,置分
液漏斗中 ,精密加入吗啡对照品溶液 5 mL( 69. 641
μg /mL) ,按样品测定项下方法操作 ,测定。结果平均
回收率为 103. 4% , RSD为 1. 54% (n= 6)。
3. 9　样品测定:精密量取本品 25 mL,置分液漏斗
中 ,加 1 mol /L氢氧化钠溶液 1 mL,氨 -氯化铵缓冲
液 ( 1 mol /L氯化铵溶液用浓氨溶液调 pH 9. 5) 5
mL和乙醇 5 mL,摇匀 ,用氯仿 -乙醇 ( 2∶ 1)混合溶
液萃取 4次 ,每次 35～ 40 mL,合并萃取液 ,加无水
碳酸钠 1 g脱水至萃取液澄清 ,倾取上清液 ,用氯
仿-乙醇 ( 2∶ 1)混合溶液洗涤容器及碳酸钠残渣 2～
3次 ,每次 2～ 3 mL,洗液与萃取液合并 ,减压回收
溶剂。残渣用 0. 1 mol /L盐酸 -乙醇 ( 8∶ 2)溶液 9. 5
mL分 4次溶解并依次转移至 10 mL量瓶中 ,加水
稀释至刻度 ,摇匀。 以 0. 45μm微孔滤膜滤过 ,即
得。 分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各
20μL,注入液相色谱仪 ,测定。结果 3批强力枇杷露
( 011101, 011104, 020311)中吗啡含量分别为 28. 1,
34. 1, 34. 4μg /mL (n= 2)。
·1004· 中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 11期 2003年 11月
4　讨论
4. 1　由于吗啡中具酸碱两性结构 ,在色谱柱中行为
表现也相应出现特殊性 ,制剂中吗啡含量甚低。所以
样品处理条件苛刻 ,萃取用氯仿 -乙醇 ( 2∶ 1) ,用量
为每 100 m L样品 35～ 40 mL,萃取 4次 , pH值调
为 9. 5。
4. 2　《中华人民共和国药典》收载有对叶百部、直立
百部、蔓生百部 3种 ,从 T LC图中可见其所含生物
碱种类不尽相同 ,如果采用 TLC法鉴别 ,而药材来
源不同 ,会出现阴性结果。 故要采用该法 ,必须确定
药材来源 ,这样会给生产厂家带来采购上的困难 ,应
特别注意。
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小儿解热素颗粒中挥发油 β-环糊精包合工艺研究
马　莉 ,戴广训
(天津药物研究院 ,天津　 300193)
　　小儿解热素颗粒为医院应用多年的验方开发成
的中成药 ,其功用为疏风清热、表里双解。 方中因含
有薄荷、芥穗、柴胡等 ,挥发油的含量较高。挥发油是
其主要有效组份之一 ,因此如何保持挥发油在颗粒
中的含量是保证其疗效的关键。 β -环糊精 (β -CD)应
用于中药制剂是一项比较先进的工艺 [1 ] ,本实验将
其用于包合挥发油。通过颗粒剂稳定性实验 ,证明符
合颗粒剂的要求 [2 ]。
1　材料与仪器
挥发油 (自制 ) ;β -CD由陕西省佳县生物化学工
业公司生产。挥发油测定器由上海玻璃仪器厂制造。
搅拌器由威海市渤海电器厂制造。
2　方法与结果
2. 1　因素水平的确定: 选择挥发油∶β-CD、乙醇浓
度、β -CD∶水和包合时间为因素 ,因素水平见表 1。
表 1　因素水平表
Table 1　 Factors and levels
水平 因　　素
A挥发油: β-CD B乙醇浓度 /% C β-CD:水 D包合时间 /h
1 1∶ 4 40 1∶ 6 2
2 1∶ 6 60 1∶ 8 4
3 1∶ 10 95 1∶ 10 6
2. 2　试验设计及结果
2. 2. 1　测定: 按每次试验条件 ,β -CD加热水 ,加热
搅拌使溶解 ,制澄明的溶液 ,放冷至 40℃～ 50℃ ,
置于带搅拌的三口瓶中。 另取挥发油加规定浓度的
乙醇 8倍量 ,搅拌均匀。在搅拌条件下缓缓滴入 β-
CD,干燥 ( 45℃ ) ,称重。 按照《中华人民共和国药
典》 2000年版挥发油测定法 [3 ] ,称取折合含 1 mL挥
发油的包合物 ,置 250 m L圆底烧瓶中。 加入 100
mL蒸馏水及沸石 ,用挥发油测定器进行测定 ,读取
挥发油量 ,并将结果用测定回收率进行校正 ,计算含
油量。
2. 2. 2　校正: 取挥发油 10 mL,加适量 β -CD,同上
述方法进行测定 ,读取挥发油量并计算测定结果 ,其
平均回收率为 90%。
2. 2. 3　结果:以含油量为考察指标 ,进行 L9 ( 34 )正
交试验 ,结果见表 2。
　　从直观分析可知 ,各种因素最佳条件为
A3 B2 C1D3 ,挥发油 -β-CD ( 1∶ 10) , 8倍量 60%乙醇
溶解挥发油 ,β -CD用 6倍水热溶 ,包合时间为 6 h。
2. 3　验证:按挥发油包合较好的水平组合条件进行
验证 ,结果见表 3。
2. 4　包合效果试验: 通过差示热分析试验证明 ,挥
发油已被包合。
2. 5　包合物稳定性考察: 将包合物研细过筛 ,测定
含油量。将其置于 80℃的烘箱中 ,每天测定一次含
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收稿日期: 2003-03-29